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生化分離工程復習題2及答案生化分離工程復習題2及答案生化分離工程復習題2及答案xxx公司生化分離工程復習題2及答案文件編號:文件日期:修訂次數(shù):第1.0次更改批準審核制定方案設計,管理制度生化分離工程復習題一、填空題1.生化分離過程主要包括四個方面:預處理、細胞分離、純化、產品加工。2.發(fā)酵液常用的固液分離方法有沉淀法和結晶法等。3.膜分離過程中所使用的膜,依據(jù)其膜特性(孔徑)不同可分為微濾膜、超濾膜、納濾膜和反滲透膜;4.離子交換分離操作中,常用的洗脫方法簡單洗脫和梯度洗脫。5.等電聚焦電泳法分離不同蛋白質的原理是依據(jù)其各種蛋白質等電點的不同。6.典型的工業(yè)過濾設備有板框壓濾機和轉筒真空過濾機。7.常用的蛋白質沉析方法有鹽析法、等電點沉淀和有機溶劑沉淀。8.離子交換樹脂由載體、活性基團和可交換離子組成。9.超臨界流體的特點是與氣體有相似的擴散性能,與液體有相似的密度。二、單選題1.供生產生物藥物的生物資源不包括(D)A.動物B.植物C.微生物D.礦物質2.下列哪個不屬于初步純化:(C)A.沉淀法B.吸附法C.親和層析D.萃取法3.HPLC是哪種色譜的簡稱(C)。A.離子交換色譜B.氣相色譜C.高效液相色譜D.凝膠色譜4.其他條件均相同時,優(yōu)先選用那種固液分離手段(B)A.離心分離B.過濾C.沉降D.超濾5.適合小量細胞破碎的方法是(C)A.高壓勻漿法B.超聲破碎法C.高速珠磨法D.高壓擠壓法6.有機溶劑沉淀法中可使用的有機溶劑為(D)A.乙酸乙酯B.正丁醇C.苯D.丙酮7.液-液萃取時常發(fā)生乳化作用,如何避免(D)A.劇烈攪拌B.低溫C.靜止D.加熱8.鹽析法與有機溶劑沉淀法比較,其優(yōu)點是(B)A.分辨率高B.變性作用小C.雜質易除D.沉淀易分離9.工業(yè)上常用的過濾介質不包括(D)A.織物介質B.堆積介質C.多孔固體介質D.真空介質10.哪一種膜孔徑最?。–)A.微濾B.超濾C.反滲透D.納米過濾11.用于蛋白質分離過程中的脫鹽和更換緩沖液的色譜是( C)A.離子交換色譜B.親和色譜C.凝膠過濾色譜D.反相色譜12.“類似物容易吸附類似物”的原則,一般極性吸附劑適宜于從何種溶劑中吸附極性物質(B)A.極性溶劑B.非極性溶劑C.水D.溶劑13.下列細胞破碎的方法中,哪個方法屬于非機械破碎法(A)A.化學法B.高壓勻漿C.超聲波破碎D.高速珠磨14.離子交換樹脂適用(A)進行溶脹A.水B.乙醇C.氫氧化鈉D.鹽酸15.使蛋白質鹽析可加入試劑(D)A.氯化鈉B.硫酸C.硝酸汞D.硫酸銨16.超臨界流體萃取法適用于提取(B)A.極性大的成分B.極性小的成分C.離子型化合物D.能氣化的成分17.最常用的干燥方法有(D)A.常壓干燥B.減壓干燥C.噴霧干燥D.以上都是18.分子篩層析指的是(C)A.吸附層析B.分配層析C.凝膠過濾D.親和層析19.為加快過濾效果通常使用(C)A.電解質B.高分子聚合物C.惰性助濾劑D.活性助濾劑20.影響電泳分離的主要因素(B)A.光照B.待分離生物大分子的性質C.濕度D.電泳時間21.發(fā)酵液的預處理方法不包括(C)A.加熱B.絮凝C.離心D.調pH22.哪種細胞破碎方法適用工業(yè)生產(A)A.高壓勻漿B.超聲波破碎C.滲透壓沖擊法D.酶解法23.液-液萃取時常發(fā)生乳化作用,如何避免(D)A.劇烈攪拌B.低溫C.靜止D.加熱24.在葡聚糖與聚乙二醇形成的雙水相體系中,目標蛋白質存在于(A)A.上相B.下相C.葡聚糖相D.以上都有可能25.使蛋白質鹽析可加入試劑(D)A.氯化鈉B.硫酸C.硝酸汞D.硫酸銨26.超濾技術常被用作(C)A.小分子物質的脫鹽和濃縮B.小分子物質的分級分離C.小分子物質的純化D.固液分離27.吸附色譜分離的依據(jù)是(A)。A.固定相對各物質的吸附力不同B.各物質分子大小不同C.各物質在流動相和固定相的分配系數(shù)不同D.各物質與專一分子的親和力不同28.人血清清蛋白的等電點為,在pH為7的溶液中將血清蛋白質溶液通電,清蛋白質分子向(A)A.正極移動B.負極移動C.不移動D.不確定。29.蛋白質分子量的測定可采用(C)方法。A.離子交換層析B.親和層析C.凝膠層析D.聚酰胺層析30.陰離子交換劑(C)。A.可交換的為陰、陽離子B.可交換的為蛋白質C.可交換的為陰離子D.可交換的為陽離子31.下面哪一種是根據(jù)酶分子專一性結合的純化方法(A)。A.親和層析B.凝膠層析C.離子交換層析D.鹽析32.下列哪項不是蛋白質的濃度測定的方法(D)。A.凱氏定氮法B.考馬斯亮藍法C.福林-酚法D.核磁共振33.物理萃取即溶質根據(jù)(B)的原理進行分離的。A.吸附B.相似相溶C.分子篩D.親和34.葡聚糖凝膠可使用那種溶劑溶脹(B)A.甲醇B.乙醇C.緩沖液D.乙酸乙酯35.疏水性相互作用層析通常在(D)的條件下進行A.酸性B.堿性C.中性D.高濃度鹽溶液36.超臨界流體萃取中,如何降低溶質的溶解度達到分離的目的(C)A.降溫B.升高壓力C.升溫D.加入夾帶劑37.HPLC是哪種色譜的簡稱(C)。A.離子交換色譜B.氣相色譜C.高效液相色譜D.凝膠色譜38.最常用的干燥方法有(D)A.常壓干燥B.減壓干燥C.噴霧干燥D.以上都是三、判斷題1.細胞破碎技術是生化分離操作中必需的步驟。(×)2.板框壓濾機可過濾所有菌體。(×)3.冷凍干燥適用于高度熱敏的生物物質。(√)4.鹽析是利用不同物質在高濃度的鹽溶液中溶解度的差異,向溶液中加入一定量的中性鹽,使原溶解的物質沉淀析出的分離技術。(√)5.要增加目的物的溶解度,往往要在目的物等電點附近進行提取。(×)6.助濾劑是一種可壓縮的多孔微粒。(×)7.通過加入某些反應劑是發(fā)酵液進行預處理的方法之一。(√)8.珠磨法中適當?shù)卦黾友心┑难b量可提高細胞破碎率。(×)9.冷凍干燥適用于高度熱敏的生物物質。(√)10.氨基酸、蛋白質、多肽、酶、核酸等兩性物質可用等電點沉析。(√)11.蛋白質為兩性電解質,改變pH可改變其荷電性質,pH﹥pI蛋白質帶正電。(×)12.層析分離是一種化學的分離方法。(×)13.層析點樣時用一根毛細管,吸取樣品溶液,在距薄層一端的起始線上點樣,樣品點直徑小于3mm。(√)14.凝膠層析會使得大分子物質后流出,小分子物質先流出。(×)15.蛋白質類的生物大分子在鹽析過程中,最好在高溫下進行,因為溫度高會增加其溶解度。(×)16.溶劑萃取中的乳化現(xiàn)象一定存在。(×)17.要增加目的物的溶解度,往往要在目的物等電點附近進行提取。(×)18.應用有機溶劑提取生化成分時,一般在較高溫度下進行。(×)19.氨基酸、蛋白質、多肽、酶、核酸等兩性物質可用等電點沉析。(√)20.色譜分離技術中固定相都是固體。(×)四、簡答題1.生化分離技術的基本涵義及內容生化分離是從生物材料、微生物的發(fā)酵液、生物反應液或動植細胞的培養(yǎng)液中分離并純化有關生化產品(如具有藥理活性作用的生物藥物等)的過程,又稱下游工程。發(fā)酵液→預處理→細胞分離→(細胞破碎→細胞碎片分離)→初步純化→高度純化→成品加工簡述生化分離過程的特點特點:1、目的產物在初始物料(發(fā)酵液)中的含量低;2、培養(yǎng)液是多組分的混合物,除少量產物外,還有大量的細胞及碎片、其他代謝物(幾百上千種)、培養(yǎng)基成分、無機鹽等;3、生化產物的穩(wěn)定性低,易變質、易失活、易變性,對溫度、pH值、重金屬離子、有機溶劑、剪切力、表面張力等非常敏感;4、對最終產品的質量要求高簡述軟水和無鹽水的制備方法①軟水的制備:利用鈉型磺酸樹脂除去水中的鈣離子和鎂離子等堿金屬后即可制得軟水。②無鹽水的制備:將原水通過氫型強酸性陽離子交換樹脂和羥型強堿或弱堿性陰離子交換樹脂的組合,經(jīng)過離子交換反應,將水中所有的陰、陽離子除去,從而制得純度很高的無鹽純水。試述柱層析的基本操作過程。答:1、裝柱:①干法裝柱②濕法裝柱注意:濕法裝柱中柱內預留一部分水,防止氣泡的產生,裝柱過程要連貫。平衡。2、加樣:①干法加樣②濕法加樣注意:加樣過程中,要防止產生飛濺,量要適中。3、洗脫:以設定好的流速加入洗脫劑,可以是單一溶劑,也可以梯度洗脫。注意:不使柱表面的溶液流干,柱上端保留一層溶液。4、收集:每隔10mL收集一試管,使用層析的手段或紫外檢測器進行實時的檢測,合并具有相同物質的流份。簡述凝膠層析有哪些用途1、脫鹽2、用于分離提純3、測定高分子物質的分子量4、高峰自溶液的濃縮簡述膜分離技術的類型微濾、納濾、超濾、反滲透、電滲析木瓜蛋白酶是一種來源廣泛的植物蛋白酶,它對蛋白質、短肽化合物、氨基酸酯以及酰胺等多類化合物的水解反應都具有良好的催化活性。被廣泛應用于肉類嫩化、啤酒澄清、明膠制造、蠶繭脫膠、皮革脫毛等工業(yè),在醫(yī)療衛(wèi)生方面用途前景更為廣闊。木瓜蛋白酶的生產以番木瓜未成熟果實的新鮮乳汁為原料,如何改進生產工藝、提高產品質量已成為當前急需解決的課題。請就木瓜蛋白酶粗品以及木
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