血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查課件

血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查

北京協(xié)和醫(yī)院血液科

葛昌文血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查

北京協(xié)和醫(yī)院血液科

葛昌文1工作步驟1.登記(1)收到標(biāo)本后，登記患者姓名、性別、年齡、病歷號(hào)，并告知病人取報(bào)告的時(shí)間和日期；(2)標(biāo)本要登記化驗(yàn)號(hào)及分類號(hào)、標(biāo)本采取日期穿刺部位、標(biāo)本來源（如：病房、門診、外院）。工作步驟1.登記2２.染色(1)在玻片血膜頭部標(biāo)明姓名或編號(hào)，并將其平置于染色架上；(2)加瑞氏染液6-8滴覆蓋全部血膜，隨后加緩沖液(PH6.4)10-12滴，用洗耳球吹勻；(3)血片染色10-15min，骨髓片染15-20min(根據(jù)有核細(xì)胞的多少而定)，必要時(shí)用低倍鏡觀察染色效果；(4)手搖玻片數(shù)次，使染液渣上浮，用自來水先緩后急沖去染液，晾干待檢。3.鏡檢２.染色3外周血涂片檢查法1.復(fù)習(xí)申請(qǐng)單的臨床診斷、送檢目的和要求。2.肉眼觀察涂片血膜大小、厚薄程度、染色好壞。3.低倍鏡檢查

（1）涂片的厚薄及染色情況。（2）估計(jì)白細(xì)胞數(shù)（可大體核對(duì)WBC直接計(jì)數(shù)是否正確）。（3）了解白細(xì)胞大致分布及片尾部有無異常細(xì)胞、特大細(xì)胞及細(xì)胞團(tuán)。（4）選擇具有代表性的鏡檢區(qū)域（多介于涂片體尾之間，細(xì)胞分布均勻，互不重疊、擠壓）。外周血涂片檢查法1.復(fù)習(xí)申請(qǐng)單的臨床診斷、送檢目的和要求。4

4.油鏡檢查(1)進(jìn)行WBC分類計(jì)數(shù)：一般計(jì)數(shù)100個(gè)有核細(xì)胞(若WBC≤1.0×109/L，WBC分類計(jì)數(shù)不足100個(gè)，則注明有核細(xì)胞少見，全片分類多少個(gè)WBC；特殊情況如骨髓移植后，則注明有核細(xì)胞少，無法分類)，觀察細(xì)胞形態(tài)、比例及有無巨大或異常細(xì)胞。

4.油鏡檢查5(2)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)：計(jì)數(shù)中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞比例，注意各類細(xì)胞形態(tài)有無異常。(3)注意片尾部有無不成熟細(xì)胞或異常細(xì)胞(如中晚幼粒、有核紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、吞噬細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等)。血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查課件6

(4)紅細(xì)胞形態(tài)（群體、個(gè)體）及排列（重疊、緡錢狀）

(5)血小板數(shù)量、形態(tài)及聚集性。

(6)寄生蟲。

(4)紅細(xì)胞形態(tài)（群體、個(gè)體）及排列（重疊、緡錢狀）75.外周血涂片報(bào)告單內(nèi)容：

(1)WBC數(shù)及主要成分、各類白細(xì)胞比例及形態(tài)是否正常。

(2)有無不成熟白細(xì)胞、有核紅細(xì)胞及異常細(xì)胞情況。

(3)成熟紅細(xì)胞大小、形態(tài)、色素狀態(tài)(中心淡染、核殘余物、多嗜性RBC)及排列等情況。

(4)血小板數(shù)量、形態(tài)及聚集性。

(5)寄生蟲。

5.外周血涂片報(bào)告單內(nèi)容：

(1)WBC數(shù)及主要成8骨髓細(xì)胞形態(tài)檢查法

1.復(fù)習(xí)患者病歷資料、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果及治療情況

2.肉眼觀察

涂片在染色前均需用肉眼觀察；以確定標(biāo)本的取材、涂片是否“合格”，血膜厚薄，有無脂肪珠及“骨髓小?！?。

骨髓細(xì)胞形態(tài)檢查法

1.復(fù)習(xí)患者病歷資料、93.低倍鏡檢查

(1)取材、涂片、染色的好壞。

(2)有核細(xì)胞多少(判定增生程度)及其分布；粒與紅系

的比例及各階段比例的初步印象。

(3)尋找異常細(xì)胞如轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞等。

(4)選擇油鏡檢查區(qū)域：要求能代表此涂片細(xì)胞的基本情況，有核細(xì)胞多，分布均勻，形態(tài)舒展、清晰易辨認(rèn)。

3.低倍鏡檢查

(1)取材、涂片、染色的好壞。

(2)有核104.油鏡檢查

觀察細(xì)胞形態(tài)及進(jìn)行有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。一般油鏡觀察區(qū)域在涂片血膜的體尾交界部位，分類計(jì)數(shù)時(shí)標(biāo)本上下移動(dòng)，驗(yàn)證低倍鏡檢查所得的初步印象。通常計(jì)數(shù)200個(gè)有核細(xì)胞，特殊情況可計(jì)數(shù)400或500個(gè)有核細(xì)胞，增生低下或有核細(xì)胞甚少時(shí)，可分類計(jì)數(shù)100個(gè)有核細(xì)胞。在油鏡觀察中，通過血細(xì)胞工作站對(duì)有代表性的細(xì)胞區(qū)域采集圖象并入庫(kù)保存（見血細(xì)胞工作站操作程序）。具體內(nèi)容如下：

4.油鏡檢查

觀察細(xì)胞形態(tài)及進(jìn)行有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)11

(1)骨髓有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，以百分率(%)表示，計(jì)算各系所占百分比和粒紅比例(M/E)。

(2)粒系：計(jì)算粒系所占%及各階段比例；觀察核移向(左移、右移)及形態(tài)的改變(巨幼變、雙核、P-H畸形、胞漿顆粒多少或有無)。

(3)紅系：計(jì)算紅系所占%及各階段比例；觀察形態(tài)有無異常(巨幼變、類巨幼變及雙核、多核、核分裂等殘余物)、多嗜性紅細(xì)胞多少、成熟紅細(xì)胞形態(tài)及排列等。

(4)淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞比例及形態(tài)有無異常

(1)骨髓有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，以百分率(%)表示，計(jì)12

(5)巨核系：

外周血血小板數(shù)量正常時(shí)(100-300×109/L),一般不做巨核細(xì)胞計(jì)數(shù)；當(dāng)PLT＞500×109/L時(shí)，應(yīng)計(jì)數(shù)全片的巨核細(xì)胞數(shù)量，但無需分類；當(dāng)PLT＜100×109/L，要計(jì)數(shù)全片巨核細(xì)胞，分類50個(gè)巨核細(xì)胞(或換算成%)，并注明有無血小板生成。注意病理性巨核細(xì)胞(巨大異常巨核、亞小型、小型、微型巨核),計(jì)數(shù)100個(gè)有核細(xì)胞中的病理性小型、微型及亞小型巨核細(xì)胞的數(shù)量。注意血小板量與質(zhì)(形態(tài)、大小、聚集性等)的改變。(5)巨核系：

外周血血小板數(shù)量13

(6)非造血細(xì)胞的種類和數(shù)量：此類多在涂片尾部或邊緣處，分類計(jì)數(shù)結(jié)果可能比實(shí)際低。

(7)異常細(xì)胞：如轉(zhuǎn)移瘤細(xì)胞、高雪氏細(xì)胞、N-P細(xì)胞、惡組細(xì)胞等。

(6)非造血細(xì)胞的種類和數(shù)量：此類多在涂片尾145.骨髓涂片檢查報(bào)告單內(nèi)容：

(1)取材涂片及染色情況。

(2)骨髓增生程度及主要成分，一般用M/E表示。

(3)粒系：增生情況及所占%，各階段比例，核移向(左移、右移)形態(tài)發(fā)育與異常改變，嗜酸性及嗜堿性細(xì)胞情況。5.骨髓涂片檢查報(bào)告單內(nèi)容：

(1)取材涂片及染色情15

(4)紅系:增生情況及所占%,各階段比例，形態(tài)有無異常(如巨變、類巨幼變、分裂相、核殘余物、雙核、多核等)及成熟紅細(xì)胞形態(tài)。

(5)淋巴及單核細(xì)胞：數(shù)量和形態(tài)是否有異常。

(6)巨核系：數(shù)量、分類及形態(tài)有無異常，產(chǎn)血小板情況；血小板形態(tài)和數(shù)量。

(7)漿細(xì)胞：形態(tài)與數(shù)量，有無不成熟或病理性漿細(xì)胞。

(8)造血與非造血細(xì)胞島及非造血細(xì)胞增生情況。(4)紅系:增生情況及所占%,各階段比例，形態(tài)有無異常(16

(9)涂片中有無巨大異型及腫瘤細(xì)胞等。

(10)寄生蟲。

(11)結(jié)論:診斷、印象和建議。(9)涂片中有無巨大異型及腫瘤細(xì)胞等。

(10)寄17附錄:

1.骨髓增生程度標(biāo)準(zhǔn):增生度標(biāo)準(zhǔn)紅(無核)細(xì)胞:有核細(xì)胞增生極度活躍增生明顯活躍增生活躍增生尚活躍增生低下增生極度低下1-5:16-10:111-20:121-40:141-100:1100以上:1附錄:

1.骨髓增生程度標(biāo)準(zhǔn):增生度標(biāo)182.骨髓細(xì)胞正常值:粒

系原始0-1.0紅系原始0-0.5淋巴系原始早幼0.1-2.5早幼0-2.0幼稚0-0.6中性中幼3.18-13.2中幼3.77-13.0淋巴8.4-32.4晚幼5.22-20.2晚幼3.44-10.0其他組織0-1.0桿狀8.47-24.4巨核系原始吞噬0-0.1分葉6.12-25.0幼稚內(nèi)皮0-0.2嗜酸性早幼顆粒巨0-0.2組堿0-0.1中幼0-1.1產(chǎn)板巨組酸0-0.1晚幼0-2.1裸核巨漿0-1.2桿狀0-1.1小原成纖分葉0-3.4小幼脂肪0-0.1嗜堿性早幼小巨中幼0-0.1單核系原始晚幼0-0.1幼稚桿狀0-0.1單核0-3.0分葉0-0.32.骨髓細(xì)胞正常值:粒原始0-1.0紅原始0-0.5淋巴系193.說明:

(1)本室采用國(guó)聯(lián)M99-M型醫(yī)學(xué)圖象工作站，參閱其使用手冊(cè)。

(2)本室骨髓分類采用全骨髓計(jì)數(shù)方法(ANC)，當(dāng)紅系大于50%時(shí)，采用非紅細(xì)胞計(jì)數(shù)法(NEC)；

(3)診斷標(biāo)準(zhǔn)采用張之南主編《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》第二版，其中白血病及MDS的診斷采用FAB分型標(biāo)準(zhǔn)。3.說明:

(1)本室采用國(guó)聯(lián)M99-M型醫(yī)學(xué)圖象20

血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查

北京協(xié)和醫(yī)院血液科

葛昌文血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查

北京協(xié)和醫(yī)院血液科

葛昌文21工作步驟1.登記(1)收到標(biāo)本后，登記患者姓名、性別、年齡、病歷號(hào)，并告知病人取報(bào)告的時(shí)間和日期；(2)標(biāo)本要登記化驗(yàn)號(hào)及分類號(hào)、標(biāo)本采取日期穿刺部位、標(biāo)本來源（如：病房、門診、外院）。工作步驟1.登記22２.染色(1)在玻片血膜頭部標(biāo)明姓名或編號(hào)，并將其平置于染色架上；(2)加瑞氏染液6-8滴覆蓋全部血膜，隨后加緩沖液(PH6.4)10-12滴，用洗耳球吹勻；(3)血片染色10-15min，骨髓片染15-20min(根據(jù)有核細(xì)胞的多少而定)，必要時(shí)用低倍鏡觀察染色效果；(4)手搖玻片數(shù)次，使染液渣上浮，用自來水先緩后急沖去染液，晾干待檢。3.鏡檢２.染色23外周血涂片檢查法1.復(fù)習(xí)申請(qǐng)單的臨床診斷、送檢目的和要求。2.肉眼觀察涂片血膜大小、厚薄程度、染色好壞。3.低倍鏡檢查

（1）涂片的厚薄及染色情況。（2）估計(jì)白細(xì)胞數(shù)（可大體核對(duì)WBC直接計(jì)數(shù)是否正確）。（3）了解白細(xì)胞大致分布及片尾部有無異常細(xì)胞、特大細(xì)胞及細(xì)胞團(tuán)。（4）選擇具有代表性的鏡檢區(qū)域（多介于涂片體尾之間，細(xì)胞分布均勻，互不重疊、擠壓）。外周血涂片檢查法1.復(fù)習(xí)申請(qǐng)單的臨床診斷、送檢目的和要求。24

4.油鏡檢查(1)進(jìn)行WBC分類計(jì)數(shù)：一般計(jì)數(shù)100個(gè)有核細(xì)胞(若WBC≤1.0×109/L，WBC分類計(jì)數(shù)不足100個(gè)，則注明有核細(xì)胞少見，全片分類多少個(gè)WBC；特殊情況如骨髓移植后，則注明有核細(xì)胞少，無法分類)，觀察細(xì)胞形態(tài)、比例及有無巨大或異常細(xì)胞。

4.油鏡檢查25(2)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)：計(jì)數(shù)中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞比例，注意各類細(xì)胞形態(tài)有無異常。(3)注意片尾部有無不成熟細(xì)胞或異常細(xì)胞(如中晚幼粒、有核紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、吞噬細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等)。血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查課件26

(4)紅細(xì)胞形態(tài)（群體、個(gè)體）及排列（重疊、緡錢狀）

(5)血小板數(shù)量、形態(tài)及聚集性。

(6)寄生蟲。

(4)紅細(xì)胞形態(tài)（群體、個(gè)體）及排列（重疊、緡錢狀）275.外周血涂片報(bào)告單內(nèi)容：

(1)WBC數(shù)及主要成分、各類白細(xì)胞比例及形態(tài)是否正常。

(2)有無不成熟白細(xì)胞、有核紅細(xì)胞及異常細(xì)胞情況。

(3)成熟紅細(xì)胞大小、形態(tài)、色素狀態(tài)(中心淡染、核殘余物、多嗜性RBC)及排列等情況。

(4)血小板數(shù)量、形態(tài)及聚集性。

(5)寄生蟲。

5.外周血涂片報(bào)告單內(nèi)容：

(1)WBC數(shù)及主要成28骨髓細(xì)胞形態(tài)檢查法

1.復(fù)習(xí)患者病歷資料、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果及治療情況

2.肉眼觀察

涂片在染色前均需用肉眼觀察；以確定標(biāo)本的取材、涂片是否“合格”，血膜厚薄，有無脂肪珠及“骨髓小?！?。

骨髓細(xì)胞形態(tài)檢查法

1.復(fù)習(xí)患者病歷資料、293.低倍鏡檢查

(1)取材、涂片、染色的好壞。

(2)有核細(xì)胞多少(判定增生程度)及其分布；粒與紅系

的比例及各階段比例的初步印象。

(3)尋找異常細(xì)胞如轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞等。

(4)選擇油鏡檢查區(qū)域：要求能代表此涂片細(xì)胞的基本情況，有核細(xì)胞多，分布均勻，形態(tài)舒展、清晰易辨認(rèn)。

3.低倍鏡檢查

(1)取材、涂片、染色的好壞。

(2)有核304.油鏡檢查

觀察細(xì)胞形態(tài)及進(jìn)行有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。一般油鏡觀察區(qū)域在涂片血膜的體尾交界部位，分類計(jì)數(shù)時(shí)標(biāo)本上下移動(dòng)，驗(yàn)證低倍鏡檢查所得的初步印象。通常計(jì)數(shù)200個(gè)有核細(xì)胞，特殊情況可計(jì)數(shù)400或500個(gè)有核細(xì)胞，增生低下或有核細(xì)胞甚少時(shí)，可分類計(jì)數(shù)100個(gè)有核細(xì)胞。在油鏡觀察中，通過血細(xì)胞工作站對(duì)有代表性的細(xì)胞區(qū)域采集圖象并入庫(kù)保存（見血細(xì)胞工作站操作程序）。具體內(nèi)容如下：

4.油鏡檢查

觀察細(xì)胞形態(tài)及進(jìn)行有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)31

(1)骨髓有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，以百分率(%)表示，計(jì)算各系所占百分比和粒紅比例(M/E)。

(2)粒系：計(jì)算粒系所占%及各階段比例；觀察核移向(左移、右移)及形態(tài)的改變(巨幼變、雙核、P-H畸形、胞漿顆粒多少或有無)。

(3)紅系：計(jì)算紅系所占%及各階段比例；觀察形態(tài)有無異常(巨幼變、類巨幼變及雙核、多核、核分裂等殘余物)、多嗜性紅細(xì)胞多少、成熟紅細(xì)胞形態(tài)及排列等。

(4)淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞比例及形態(tài)有無異常

(1)骨髓有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，以百分率(%)表示，計(jì)32

(5)巨核系：

外周血血小板數(shù)量正常時(shí)(100-300×109/L),一般不做巨核細(xì)胞計(jì)數(shù)；當(dāng)PLT＞500×109/L時(shí)，應(yīng)計(jì)數(shù)全片的巨核細(xì)胞數(shù)量，但無需分類；當(dāng)PLT＜100×109/L，要計(jì)數(shù)全片巨核細(xì)胞，分類50個(gè)巨核細(xì)胞(或換算成%)，并注明有無血小板生成。注意病理性巨核細(xì)胞(巨大異常巨核、亞小型、小型、微型巨核),計(jì)數(shù)100個(gè)有核細(xì)胞中的病理性小型、微型及亞小型巨核細(xì)胞的數(shù)量。注意血小板量與質(zhì)(形態(tài)、大小、聚集性等)的改變。(5)巨核系：

外周血血小板數(shù)量33

(6)非造血細(xì)胞的種類和數(shù)量：此類多在涂片尾部或邊緣處，分類計(jì)數(shù)結(jié)果可能比實(shí)際低。

(7)異常細(xì)胞：如轉(zhuǎn)移瘤細(xì)胞、高雪氏細(xì)胞、N-P細(xì)胞、惡組細(xì)胞等。

(6)非造血細(xì)胞的種類和數(shù)量：此類多在涂片尾345.骨髓涂片檢查報(bào)告單內(nèi)容：

(1)取材涂片及染色情況。

(2)骨髓增生程度及主要成分，一般用M/E表示。

(3)粒系：增生情況及所占%，各階段比例，核移向(左移、右移)形態(tài)發(fā)育與異常改變，嗜酸性及嗜堿性細(xì)胞情況。5.骨髓涂片檢查報(bào)告單內(nèi)容：

(1)取材涂片及染色情35

(4)紅系:增生情況及所占%,各階段比例，形態(tài)有無異常(如巨變、類巨幼變、分裂相、核殘余物、雙核、多核等)及成熟紅細(xì)胞形態(tài)。

(5)淋巴及單核細(xì)胞：數(shù)量和形態(tài)是否有異常。

(6)巨核系：數(shù)量、分類及形態(tài)有無異常，產(chǎn)血小板情況；血小板形態(tài)和數(shù)量。

(7)漿細(xì)胞：形態(tài)與數(shù)量，有無不成熟或病理性漿細(xì)胞。

(8)造血與非造血細(xì)胞島及非造血細(xì)胞增生情況。(4)紅系:增生情況及所占%,各階段比例，形態(tài)有無異常(36

(9)涂片中有無巨大異型及腫瘤細(xì)胞等。

(10)寄生蟲。

(11)結(jié)論:診斷、印象和建議。(9)涂片中有無巨大異型及腫瘤細(xì)胞等。

(10)寄37附錄:

1.骨髓增生程度標(biāo)準(zhǔn):增生度標(biāo)準(zhǔn)紅(無核)細(xì)胞:有核細(xì)胞增生極度活躍增生明顯活躍增生活躍增生尚活躍增生低下增生極度低下1-5:16-10:111-20