陜西中藥蟬蛻配方顆粒標準

蟬蛻配方顆粒ChantuiPeifangkeli【來源】本品為蟬科昆蟲黑蚱CryptotympanapustulataFabricius的若蟲羽化時脫落的皮殼經炮制并按標準湯劑的主要質量指標加工制成的配方顆粒?！局品ā咳∠s蛻飲片6000g，加水煎煮，濾過，濾液濃縮成清膏（干浸膏出膏率為2%～6%），加入輔料適量，干燥（或干燥，粉碎），再加入輔料適量，混勻，制粒，制成1000g，即得。【性狀】本品為淺灰色至灰褐色的顆粒；氣微，味淡?！捐b別】取本品1g，研細，加鹽酸10ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取蟬蛻對照藥材0.5g，加水30ml，煮沸30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣自“加鹽酸10ml”起，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（中國藥典2020年版通則0502）試驗，吸取上述兩種溶液各1μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水（4∶1∶5）的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.5%茚三酮乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點?！咎卣鲌D譜】氨基酸照高效液相色譜法（中國藥典2020年版通則0512）測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗同[含量測定]氨基酸項。參照物溶液的制備取[含量測定]氨基酸項下的對照品溶液，作為對照品參照物溶液。另取蘇氨酸對照品、酪氨酸對照品、纈氨酸對照品、L-異亮氨酸對照品適量，加0.1mol/L鹽酸溶液制成每1ml各含50μg的混合溶液，作為對照品參照物溶液。供試品溶液的制備同[含量測定]氨基酸項。精密量取上述參照物溶液和供試品溶液各5ml，分別置25ml量瓶中，各加0.1mol/L異硫氰酸苯酯（PITC）的乙腈溶液2.5ml和1mol/L三乙胺的乙腈溶液2.5ml，搖勻，室溫放置1小時后，加50%乙腈至刻度，搖勻。取10ml，加正己烷10ml，振搖，放置10分鐘，取下層溶液，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取衍生化后的參照物溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得。供試品溶液色譜中應呈現8個特征峰，且8個峰應分別與相應對照品參照物峰保留時間相對應。對照特征圖譜（氨基酸）峰1：甘氨酸；峰2：蘇氨酸；峰3：丙氨酸；峰4：脯氨酸；峰5：酪氨酸；峰6：纈氨酸峰7：L-異亮氨酸；峰8：苯丙氨酸參考色譜柱：Kromasil100-5C18；250mm×4.6mm，5μm其他照高效液相色譜法（中國藥典2020年版通則0512）測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗同[含量測定]乙酰多巴胺二聚體項。參照物溶液的制備取蟬蛻對照藥材1g，加70%甲醇50ml，加熱回流30分鐘，放冷，離心（轉速為每分鐘4000轉）5分鐘，取上清液25ml置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘渣加70%甲醇使溶解并轉移至5ml量瓶中，加70%甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為對照藥材參照物溶液。另取原兒茶酸對照品、原兒茶醛對照品、乙酰多巴胺二聚體對照品適量，加50%甲醇制成每1ml含原兒茶酸20μg、原兒茶醛10μg、乙酰多巴胺二聚體15μg的混合溶液，作為對照品參照物溶液。供試品溶液的制備同[含量測定]乙酰多巴胺二聚體項。測定法分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液各2μl，注入液相色譜儀，測定，即得。供試品溶液色譜中應呈現6個特征峰，并應與對照藥材參照物色譜中的6個特征峰保留時間相對應，其中峰1、峰2、峰3應分別與相應對照品參照物峰保留時間相對應，與乙酰多巴胺二聚體參照物相應的峰為S峰，計算各特征峰與S峰的相對保留時間，其相對保留時間應該在規(guī)定值的±10%之內，規(guī)定值為：1.09（峰4）、1.20（峰5）、1.29（峰6）。峰1：原兒茶酸；峰2：原兒茶醛；峰3（S）：乙酰多巴胺二聚體；蟬蛻配方顆粒對照特征圖譜2參考色譜柱：SBC18；2.1mm×150mm，1.8μm【檢查】應符合顆粒劑項下有關的各項規(guī)定（中國藥典2020年版通則0104）?！窘鑫铩咳”酒费屑?，取約2g，精密稱定，精密加入乙醇100ml，照醇溶性浸出物測定法（中國藥典2020年版通則2201）項下的熱浸法測定，不得少于5.0%?！竞繙y定】氨基酸照高效液相色譜法（中國藥典2020年版通則0512）測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水（4:1）為流動相A，以乙腈-0.lmol/L醋酸鈉溶液（用醋酸調節(jié)pH值至6.5）的混合溶液(7:93)為流動相B；按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫；流速為每分鐘1.0ml；柱溫為30°C；檢測波長為254nm。理論板數按丙氨酸峰計算應不低于4000。梯度洗脫表時間（分鐘）流動相A(%)流動相B(%)0~903100979~2239722~23317978323~321718838232~381830827038~453034706645~473410066047~551000對照品溶液的制備取甘氨酸對照品、丙氨酸對照品、脯氨酸對照品、苯丙氨酸對照品適量，精密稱定，加0.1mol/L鹽酸溶液制成每1ml含甘氨酸60μg、丙氨酸50μg、脯氨酸80μg、苯丙氨酸25μg的混合溶液。供試品溶液的制備取本品適量，研細，取約0.5g，精密稱定，置氨基酸水解管中，精密加入6mol/L鹽酸溶液15ml，密塞，稱定重量，150℃水解3小時，取出，放冷，再稱定重量，用6mol/L鹽酸溶液補足減失重量，混勻，濾過，精密量取10ml濾液移蒸發(fā)皿中，蒸干，殘渣加0.1mol/L鹽酸溶液溶解，轉移至25ml量瓶中，加0.1mol/L鹽酸溶液至刻度，搖勻，即得。精密量取上述對照品溶液和供試品溶液各5ml，分別置25ml量瓶中，各加0.1mol/L異硫氰酸苯酯（PITC）的乙腈溶液2.5ml、1mol/L三乙胺的乙腈溶液2.5ml，搖勻，室溫放置1小時后，加50%乙腈至刻度，搖勻。取10ml，加正己烷10ml，振搖，放置10分鐘，取下層溶液，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取衍生化后的對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每1g含甘氨酸（C2H5NO2）應為2.3mg~10.7mg、丙氨酸（C3H7NO2）應為1.5mg~9.5mg、脯氨酸（C5H9NO2）應為3.7mg~15.2mg、苯丙氨酸（C10H13NO2）應為0.8mg~4.8mg。乙酰多巴胺二聚體照高效液相色譜法（中國藥典2020年版通則0512）測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（柱長為150mm，內徑為2.1mm，粒徑為1.6~1.8μm）；以乙腈為流動相A；以0.2%甲酸溶液為流動相B，按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫；流速為每分鐘0.35ml；柱溫為35°C；檢測波長為280nm；理論板數按乙酰多巴胺二聚體峰計算應不低于5000。梯度洗脫表時間（分鐘）流動相A（%）流動相B（%）0~76→894→927~108→1192→8910~2211→1589→8522~3215→2385→8732~3523→9087→1035~389010對照品溶液的制備取乙酰多巴胺二聚體對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含30μg的溶液。供試品溶液的制備取本品適量，研細，取約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇50ml，稱定重量，超聲處理（功率300W，頻率40kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補足減失的重量，離心（轉速為每分鐘4000轉）5分鐘，取上清液25ml