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第四節(jié)動(dòng)物及植物細(xì)胞制藥動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)是指動(dòng)、植物細(xì)胞在體外條件下的存活或生長(zhǎng)。2021/7/18星期日1醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁(yè)!一、動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞產(chǎn)物及醫(yī)學(xué)應(yīng)用產(chǎn)物醫(yī)學(xué)應(yīng)用疫苗人小兒麻痹癥,狂犬,風(fēng)疹,乙肝表面抗原,皰疹或某些癌癥動(dòng)物牛病毒性腹瀉,口蹄疫,犬瘟病,豬霍亂,馬腦炎等單克隆抗體IgG,IgM,IgA等免疫調(diào)節(jié)劑干擾素,白細(xì)胞活化因子,β-細(xì)胞生長(zhǎng)因子,白細(xì)胞介素-2,血清胸腺因子,巨噬細(xì)胞毒力因子酶脲激酶,膠原酶,細(xì)胞色素P450,纖維蛋白溶酶原激活劑,胃蛋白酶,胰蛋白酶,酪氨酸脫羧酶激素絨膜促性腺激素,促紅細(xì)胞生成素,生長(zhǎng)激素,促黃體激素2021/7/18星期日2醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁(yè)!1、動(dòng)物細(xì)胞的形態(tài)成纖維細(xì)胞型上皮細(xì)胞型游走細(xì)胞型多行性細(xì)胞型懸浮型細(xì)胞2021/7/18星期日3醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁(yè)!3、培養(yǎng)基制備應(yīng)考慮的因素pH值多數(shù)細(xì)胞系在pH7.4下生長(zhǎng)很好。但上皮細(xì)胞以pH5.5合適。酚紅常用作指示劑。緩沖能力滲透壓黏度2021/7/18星期日4醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁(yè)!大規(guī)模動(dòng)物細(xì)胞貼壁培養(yǎng)最常用的支持物是微載體,其材料有聚苯乙烯、交聯(lián)葡萄糖、聚丙稀酰胺、纖維素衍生物、幾丁質(zhì)、明膠等。通常用特殊的技術(shù)制成100~200μm直徑的圓形顆粒,大多都是一次性的。支持物通過(guò)各種處理后,可改善細(xì)胞的貼壁和生長(zhǎng)性能。2021/7/18星期日5醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁(yè)!(3)培養(yǎng)溫度溫度是細(xì)胞再體外生存的基本條件之一,來(lái)源不同的動(dòng)物細(xì)胞,其最適生長(zhǎng)溫度是不相同的。溫血?jiǎng)游锛?xì)胞溫度為36.5℃,可略低一點(diǎn);鳥(niǎo)類(lèi)細(xì)胞在38.5℃時(shí)生長(zhǎng)最佳。動(dòng)物細(xì)胞對(duì)低溫的耐受力比高溫強(qiáng)。培養(yǎng)細(xì)胞在4℃下能生存數(shù)天,并能在-196℃下冷凍貯藏,
但超過(guò)正常溫度2℃,只能耐受數(shù)小時(shí),40℃以上細(xì)胞很快死亡。變溫動(dòng)物細(xì)胞有較大的溫度范圍,但應(yīng)保持在一個(gè)恒定值,且在所屬動(dòng)物的正常溫度范圍內(nèi)。溫度調(diào)節(jié)的范圍最大不超過(guò)0.5℃。2021/7/18星期日6醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁(yè)!(2)流加式培養(yǎng)(3)半連續(xù)式培養(yǎng)(4)連續(xù)式培養(yǎng)指先將一定量的培養(yǎng)液裝入反應(yīng)器,在適宜的條件下接種細(xì)胞,進(jìn)行培養(yǎng),使細(xì)胞不斷生長(zhǎng),產(chǎn)物不斷形成,而在此過(guò)程中隨著營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不斷消耗,不斷的向系統(tǒng)中補(bǔ)充新的營(yíng)養(yǎng)成分,使細(xì)胞進(jìn)一步生長(zhǎng)代謝,直到整個(gè)培養(yǎng)結(jié)束后取出產(chǎn)物。指將細(xì)胞種子和培養(yǎng)液一起加入反應(yīng)器內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng),一方面新鮮培養(yǎng)液不斷加入反應(yīng)器,另一方面又將反應(yīng)液連續(xù)不斷的取出,使反應(yīng)條件處于一種恒定狀態(tài)。在分批培養(yǎng)的基礎(chǔ)上,將分批培養(yǎng)的培養(yǎng)液部分取出,并重新補(bǔ)充加入等量的新鮮培養(yǎng)基,從而使反應(yīng)器內(nèi)培養(yǎng)液的總體積保持不變。2021/7/18星期日7醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁(yè)!動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中,易出現(xiàn)微生物的污染,導(dǎo)致培養(yǎng)失敗。因此,在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌操作規(guī)程,定期對(duì)培養(yǎng)環(huán)境進(jìn)行消毒,保證環(huán)境清潔無(wú)菌。對(duì)所用的器皿設(shè)備,根據(jù)不同材料選用合適的滅菌方法,對(duì)培養(yǎng)所用的試劑、培養(yǎng)基要除菌,除菌后的培養(yǎng)基應(yīng)作無(wú)菌檢查。將無(wú)菌技術(shù)貫穿于整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程。2021/7/18星期日8醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁(yè)!根據(jù)培養(yǎng)的植物的材料不同,分為:愈傷組織培養(yǎng)懸浮細(xì)胞培養(yǎng)器官培養(yǎng)莖尖分生組織培養(yǎng)原生質(zhì)體培養(yǎng)2021/7/18星期日9醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁(yè)!植物細(xì)胞培養(yǎng)可生產(chǎn)一些微生物所不能合成的特有代謝產(chǎn)物,如生物堿類(lèi)、色素、類(lèi)黃酮和花色苷、苯酚、皂角苷、固醇類(lèi)、萜類(lèi)、某些抗生素和生長(zhǎng)控制劑、調(diào)味品和香料等。細(xì)胞培養(yǎng)用于種苗生產(chǎn)、如蘭花等名貴花卉和谷物良種的培育可不受外界環(huán)境的影響。2021/7/18星期日10醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁(yè)!3、植物細(xì)胞培養(yǎng)流程2021/7/18星期日11醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁(yè)!C—愈傷組織S—懸浮培養(yǎng)細(xì)胞2021/7/18星期日12醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁(yè)!2、培養(yǎng)基的常用成分氨基酸維生素鹽葡萄糖有機(jī)添加劑血清2021/7/18星期日13醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁(yè)!4、細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境要求(1)支持物體外培養(yǎng)的大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞需在人工支持物上單層生長(zhǎng)。玻璃塑料制品微載體2021/7/18星期日14醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁(yè)!(2)氣體交換氧氣各種培養(yǎng)對(duì)氧的要求不同,大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)適合于大氣中的氧含量或更低些。二氧化碳2021/7/18星期日15醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁(yè)!5、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法動(dòng)物細(xì)胞無(wú)論是貼壁培養(yǎng)還是懸浮培養(yǎng),均可分為分批式、流加式、半連續(xù)式、連續(xù)式等多種培養(yǎng)方式。(1)分批式培養(yǎng)分批式培養(yǎng)是指先將細(xì)胞和培養(yǎng)液一次性裝入反應(yīng)器內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng),細(xì)胞不斷生長(zhǎng),同時(shí)產(chǎn)物也不斷形成,形成一段時(shí)間的培養(yǎng)后,終止培養(yǎng)。在分批培養(yǎng)過(guò)程中可分為延滯期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、減速期、平穩(wěn)期和衰退期等五個(gè)階段。在分批培養(yǎng)過(guò)程中能夠控制的參數(shù)只有pH值、溫度和通氣量。2021/7/18星期日16醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁(yè)!6、動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的工藝將組織切成碎片用溶解蛋白質(zhì)的酶處理得到單個(gè)細(xì)胞收集細(xì)胞并離心獲得的細(xì)胞植入營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中,使之增殖至覆蓋瓶壁表面再接種,擴(kuò)大培養(yǎng)2021/7/18星期日17醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁(yè)!二、植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)是指用無(wú)菌培養(yǎng)方法,在人工制備的培養(yǎng)基上培養(yǎng)植物的一個(gè)離體器官、組織或細(xì)胞,使其再生為完整植株。2021/7/18星期日18醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁(yè)!1、植物組織培養(yǎng)技術(shù)固體培養(yǎng)液體靜態(tài)懸浮培養(yǎng)深層大罐發(fā)酵液體連續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞固定化培養(yǎng)等2021/7/18星期日19醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁(yè)!2、植物組織培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)四季均可生產(chǎn),不受地區(qū)、季節(jié)及有害生物的影響。占地面積少,便于工廠化生產(chǎn),可對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)自動(dòng)控制和代謝過(guò)程合理調(diào)節(jié)。便于篩選高產(chǎn)細(xì)胞株。利于生物轉(zhuǎn)化,尋找新的有效藥物成分。植物細(xì)胞內(nèi)存在羥基化酶、氧化酶、還原酶、甲基化酶、酯化酶、糖基轉(zhuǎn)移酶、糖苷酶等多種酶,植物培養(yǎng)物作為一種生物反應(yīng)器轉(zhuǎn)化外源化合物,能夠產(chǎn)生原植物所沒(méi)有的,甚至是至今自然界尚未發(fā)現(xiàn)的化合物。個(gè)體差異小,生產(chǎn)周期短,設(shè)備簡(jiǎn)單,能節(jié)省人力、物力等。利用組織培養(yǎng)過(guò)程中出現(xiàn)的芽變或人工誘變,或進(jìn)行脫毒,培育新品種,提高藥用植物品質(zhì)。保存種質(zhì)資源。2021/7/18星期日20醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁(yè)!2021/7/18星期日21醫(yī)學(xué)資料4.2動(dòng)物與植物細(xì)胞制藥共22頁(yè),您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁(yè)!工業(yè)化生產(chǎn)的植物細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)物名稱(chēng)價(jià)格/(USD/kg)用途名稱(chēng)價(jià)格/(USD/kg)用途長(zhǎng)春新堿≤1000000抗腫瘤藥物紫草寧4000消炎、抗菌、染料長(zhǎng)春花堿≤3500000抗腫瘤藥物苦橙花油1125香料保加利亞玫瑰油
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