1138《生物技術(shù)制藥概論》 20年春季西南大學(xué)作業(yè)答案

西南大學(xué)網(wǎng)絡(luò)與繼續(xù)教育學(xué)院1、生物催化和化學(xué)催化相比的弱點是選擇性高安全環(huán)境友好催化高效性反應(yīng)溫度更嚴格2、下列那個不屬于基因組計劃需要繪制的圖蛋白圖轉(zhuǎn)錄圖物理圖遺傳圖3、促紅細胞生長素（EPO）基因能在大腸桿菌中表達，但卻不能用大腸桿菌的基因工程菌生產(chǎn)人的促紅細胞生長素，這是因為:大腸桿菌內(nèi)毒素與人的促紅細胞生長素特異性結(jié)合并使其滅活人的促紅細胞生長素對大腸桿菌有毒性作用人促紅細胞生長素基因在大腸桿菌中極不穩(wěn)定大腸桿菌不能使人的促紅細胞生長素糖基化4、人類第一個基因工程藥物是重組鏈激酶C、促紅細胞生成素重組人胰島素乙型肝炎疫苗5、人抗鼠抗體（HAMA）參考答案：人抗鼠抗體是指鼠源性抗體應(yīng)用于人身上而產(chǎn)生的一種人抗鼠的抗體，導(dǎo)致排斥反應(yīng)，使藥物在體內(nèi)清除速度時間.6、細胞因子參考答案：由細胞分泌的能調(diào)節(jié)生物有機體生理功能，參與細胞的增殖、分化和凋亡的小分子多肽物質(zhì)7、治療性疫苗參考答案：治療性疫苗是指在已感染病原微生物或已患有某些疾病的機體中，通過誘導(dǎo)特異性的免疫應(yīng)答，達到治療或重組技術(shù)表達的產(chǎn)品或制品。8、基因表達參考答案：基因表達是指目的基因在生物體中的轉(zhuǎn)錄、翻譯以及所有加工過程。9、生物藥物參考答案：利用生物體、生物組織或其成分，綜合應(yīng)用生物學(xué)、生物化學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、物理化學(xué)、生物技術(shù)和而成的一大類用于預(yù)防、治療和診斷疾病的制品10、SDS(十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳)參考答案：SDS是帶負電的陰離子去污劑，使用SDS時，蛋白質(zhì)樣品需經(jīng)樣品溶解液處理.樣品溶解液含B-巰基乙再與SDS結(jié)合形成帶負電的SDS—蛋白復(fù)合物，以在PAGE中按分子量大小分離。11、亞單位疫苗參考答案：不含病原體核酸，選用能誘發(fā)宿主產(chǎn)生中和抗體的微生物蛋白或表面抗原而制成的疫苗。12、包涵體參考答案：包涵體是指細菌表達的蛋白在細胞內(nèi)凝集，形成無活性的難溶性固體顆粒。13、生物技術(shù)制藥參考答案：生物技術(shù)制藥是指運用微生物學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)等的研究成果，從生物體、生物組織、細胞、體學(xué)、生物技術(shù)、藥學(xué)等科學(xué)的原理和方法進行藥物制造的技術(shù)。14、疫苗參考答案：疫苗：用于人工主動免疫的生物制品15、簡述發(fā)酵工程的基本含義參考答案：發(fā)酵工程(fermentationengineering)又稱為微生物工程，是利用微生物制造工業(yè)原料與工業(yè)產(chǎn)品并提供服16、簡述抗體藥物的研發(fā)歷史參考答案：第一階段以1890年Behring發(fā)現(xiàn)白喉抗毒素為代表，其特點是用抗原免疫動物來獲得多克隆抗體。第二階段以1975年Kohler創(chuàng)建雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體為代表。1986年，美國FDA批準了世界上第一個單抗治療性藥物一一抗CD3單抗OKT3進入市場，用于器官移植時的用達到了頂點第三階段以1994年Winter以基因工程方法制備人源化抗體為代表17、以近年來多次發(fā)生的疫苗事件為例，分析生物藥物的類型、藥物制備和質(zhì)量控制的特殊性。參考答案：簡要回顧總結(jié)某一個案例即可，如長春長生疫苗事件。此次的疫苗事件簡單說來是2018年7月15日長春長生通報。緊接著7月18日，長春長生又公告公眾：食藥監(jiān)局對其下達的處罰決定書，決定書中提及其批次為格。主要原因是疫苗生產(chǎn)記錄作假。生物藥物制備的特殊性需要特別注意原料中的有效物質(zhì)含量低導(dǎo)致的提取等制備方法的特殊性，穩(wěn)定性差等的真實性等。流通管理包括但不限于低溫冷藏和運輸管理、批簽發(fā)制度、原始證據(jù)等。18、簡述生物藥物的用途參考答案：作為治療藥物，作為預(yù)防藥物，作為診斷藥物，其他生物醫(yī)藥用品19、如何控制基因工程藥物質(zhì)量？參考答案：基因工程藥物的質(zhì)量控制要點如下。1蛋白質(zhì)含量的測定。2蛋白質(zhì)純度檢測。3蛋白質(zhì)Mr測定。4蛋白質(zhì)等分析，宿主蛋白液和酸殘留分析20、簡述單克隆抗體的制備過程。參考答案：經(jīng)篩選和克隆化的雜交瘤細胞僅能合成及分泌單一抗原表位的特異性抗體，是單克隆抗體。單抗的制作過程與骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞，篩選雜交瘤細胞，篩選能產(chǎn)生某種特異性單抗的雜交瘤細胞，雜交瘤細培養(yǎng)特異性雜交瘤細胞克隆，單抗的純化及鑒定。21、簡述生物藥物的藥理學(xué)特性參考答案：1、活性強:體內(nèi)存在的天然活性物質(zhì)。2、治療針對性強,基于生理生化機制。3、毒副作用一般較少，營反應(yīng)。22、簡述生物技術(shù)藥物的概念，并討論與化學(xué)藥物的主要區(qū)別。參考答案：生物技術(shù)藥物是指采用DNA重組技術(shù)或其他創(chuàng)新生物技術(shù)生產(chǎn)的治療、預(yù)防藥物，如細胞因子、纖溶酶原激白、受體、疫苗和單抗等蛋白質(zhì)和核酸藥物。生物技術(shù)藥物與化學(xué)藥物的主要區(qū)別包括原料來源不同、技術(shù)不同。23、根據(jù)真核基因在原核細胞中表達的特點，表達載體必須具備那些條件？參考答案：（1）能夠獨立的復(fù)制；（2）具有靈活的克隆位點和方便的篩選標記，以利于外源基因的克隆、鑒定和篩選（3）應(yīng)具有很強的啟動子，能為大腸桿菌的RAN聚合酶所識別；（4）應(yīng)具有阻遏子（5）應(yīng)具有很強的終止子（6）所產(chǎn)生的mRNA必須具有翻譯的起始信號。24、簡述發(fā)酵工程制藥的基本過程參考答案：答案：1.菌種的選育2.培養(yǎng)基的配置3滅菌4.擴大培養(yǎng)和接種5.發(fā)酵過程6.分離提純抗體的發(fā)展階段大致可分為什么？25、簡述基因工程的基本含義參考答案：又稱基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手設(shè)計的藍圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生26、基因工程在抗生素生產(chǎn)中有那些應(yīng)用？參考答案：通過基因工程明確抗生素合成基因的典型特點和克隆的方法，解析合成基因的結(jié)構(gòu)，深入了解微生物的生長為人類的健康提供更多更有效的產(chǎn)品，主要體現(xiàn)在以下幾方面：（1）提高抗生素的產(chǎn)量（2）改善抗生素的組分（3）改進抗生素的生產(chǎn)工藝；（4）產(chǎn)生雜合抗生素，提供新的藥物來源（5），用組合生物合成方法合成復(fù)雜化合物27、單克隆抗體的優(yōu)點與缺點分析參考答案：優(yōu)點：①McAb為高純度單一抗體，在氨基酸序列以及特異性方面均為一致，檢測靈敏度極高；②可以通過雜瘤細胞可以用液氮深凍法進行長期保存；④可在分子水平上解析存在于病毒表面的抗原或受體；⑤可以用不缺點：①McAb特異性太強，有時不能檢出微生物突變株；②有時不能產(chǎn)生與抗原交聯(lián)的功能；③易受pH半衰期短；④McAb制備程序復(fù)雜、工作量大。因此，可以采用常規(guī)抗體解決的問題就無須制備McAb。28、簡述生物技術(shù)在制藥領(lǐng)域的應(yīng)用。參考答案：利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)多肽/蛋白質(zhì)類藥物或疫苗；利用蛋白質(zhì)工程制造新型活性多肽/蛋白類藥物；利用細技術(shù)獲得活性藥物分子或藥物中間體；利用發(fā)酵工程提高生產(chǎn)工藝水平；現(xiàn)代生物技術(shù)在新藥研發(fā)中的作用29、蛋白質(zhì)含量測定的方法有哪些？參考答案：蛋白含量主要用于原液比活性計算和成品規(guī)格控制，測定方法主要有Folin-酚試劑法（Lowry法）、染色法HPLC法、熒光法和凱氏定氮法等，其中Lowry法和Bradford法是質(zhì)量檢定中常用方法30、簡述基因工程在傳統(tǒng)制藥行業(yè)中的可能應(yīng)用。參考答案：基因重組提高產(chǎn)量改善組分改進生產(chǎn)工藝產(chǎn)生新的品種31、質(zhì)粒參考答案：質(zhì)粒（plasmid）是染色體外能獨立自主復(fù)制并遺傳的環(huán)狀雙鏈DNA分子。單克隆抗體：由單一單克隆抗體：由單一B細胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體，稱為單克隆抗體。32、PCR參考答案：在四種脫氧核苷三磷酸（dNTP）存在下，以寡聚核苷酸為引物及單鏈DNA為模板，經(jīng)DNA聚合酶催化合成DNA上互補鏈的過程稱為聚技術(shù)。33、GLP參考答案：GLP（Goodlaboratorypracticeofdrug）藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范。指對從事實驗研究的規(guī)劃設(shè)計、執(zhí)行實施、管理監(jiān)督件提出的法規(guī)性文件。34、列舉出3種以大腸桿菌表達的生物技術(shù)藥物，并分析該類藥物的特點。參考答案：1重組人胰島素rhinsulinhumulin2重組人甲狀旁腺激素rhPTHForteo3重組人粒細胞集落刺激因子rhG－CSFNeupogen特點：遺傳背景清楚，轉(zhuǎn)化效率高，研究費用少生長快，可以短時間獲得目的蛋白目的基因表達水平高不能進行糖基化修飾35、抗體藥物參考答案：用于治療的單克隆抗體、抗體片段、基因工程改造的抗體、免疫偶聯(lián)物以及融合蛋白均可統(tǒng)稱為抗體藥物（antibody-baseddrugs）。36、簡述生物藥物的分類參考答案：1）按藥物的結(jié)構(gòu)分類：氨基酸及其衍生物類藥物；多肽和蛋白質(zhì)類藥物；酶和輔酶類藥物；核酸及其降解物細胞生長因子；生物制品類；2）按來源分類；人體組織來源；動物組織來源；植物組織來源；微生物來源；海洋生物來源；3）按生理功能和用途分類：治療藥物；預(yù)防藥物；診斷藥物；其它（生化試劑、保健品、化妝品、食品、醫(yī)37、查閱并分析你所知道的至少四種生物技術(shù)藥物（至少含重組蛋白藥物、抗體藥物、疫苗各一種等）的藥學(xué)知上市公司概況、應(yīng)用分析等）。參考答案：查閱藥品批準信息或者網(wǎng)站信息，分析每一種藥物相關(guān)資料得5分（名稱、、適應(yīng)癥、作用機理、上市公司38、系統(tǒng)分析你掌握的幾種重組陽性克隆子的篩選和鑒定方法參考答案：（1）根據(jù)重組子遺傳重組表型改變的篩選法1）利用抗生素抗性基因進行篩選2）通過a互補使菌產(chǎn)生顏色來篩選3）利用報告基因篩選克隆子（2）根據(jù)重組子結(jié)構(gòu)特征的篩選法1）瓊脂糖凝膠電泳比較重組DNA的大小2）限制性內(nèi)切酶分析3）印跡雜交方法4）PCR法（3）根據(jù)目的基因表達產(chǎn)物采用免疫化學(xué)方法篩選。39、蛋白質(zhì)含量測定的方法有哪些？參考答案：蛋白含量主要用于原液比活性計算和成品規(guī)格控制，測定方法主要有Folin-酚試劑法（Lowry法）、染色法HPLC法、熒光法和凱氏定氮法等，其中Lowry法和Bradford法是質(zhì)量檢定中常用方法.40、生物技術(shù)藥物與化學(xué)藥物的主要區(qū)別是什么？參考答案：答案：原料來源不同；技術(shù)方法不同；活性檢測不同；質(zhì)量控制標準不同。41、生物技術(shù)藥物的質(zhì)量標準研究的主要內(nèi)容是什么？參考答案：答案：研究生物技術(shù)藥物產(chǎn)品的均一性；研究建立生物技術(shù)藥物產(chǎn)品生物學(xué)活性或者免疫學(xué)活性測定方法；品或參考品；建立生物技術(shù)藥物目標產(chǎn)品生產(chǎn)相關(guān)雜質(zhì)限量分析方法和標準；在以上研究的基礎(chǔ)上制定出保證標準相一致的質(zhì)量控制標準和藥物分析方法。42、如何進行發(fā)酵工藝的控制？參考答案：答案：包括培養(yǎng)基，溶氧，pH和溫度等多參數(shù)的控制。43、單克隆抗體的優(yōu)點與缺點分析參考答案：優(yōu)點：①McAb為高純度單一抗體，在氨基酸序列以及特異性方面均為一致，檢測靈敏度極高；②可以通過交瘤細胞可以用液氮深凍法進行長期保存；④可在分子水平上解析存在于病毒表面的抗原或受體；⑤可以缺點：①McAb特異性太強，有時不能檢出微生物突變株；②有時不能產(chǎn)生與抗原交聯(lián)的功能；③易受pH半衰期短；④McAb制備程序復(fù)雜、工作量大。因此，可以采用常規(guī)抗體解決的問題就無須制備McAb。44、舉出三種當(dāng)前流行的單克隆抗體藥物名稱和適應(yīng)癥參考答案：阿達木單抗：商品名修美樂（Humira），是抗人腫瘤壞死因子（TNF）的人源化單克隆抗體，是人單克隆D2E7重CambridgeAntibodyTechnology（CAT）與美國雅培公司聯(lián)合研制，2003年1月首次在美國上市，隨后相繼在德國風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和強直性脊柱炎。利妥昔單抗：利妥昔單抗（rituximab,RTX,商品名美羅華）是1997年被批準用于治療腫瘤的抗CD20人鼠嵌合中已顯示出優(yōu)越的療效和良好的治療耐受性。隨著對B細胞及其作用機制認識的深入，利妥昔單抗的治療范圍關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、特發(fā)性血小板減少性紫癜等自身免疫性疾病。曲妥珠單抗：曲妥珠單抗（Herceptin/赫賽?。┦且环N人源化針對HER-2受體的單克隆抗體，2002年美國拮抗腫瘤細胞生長信號傳導(dǎo)從而抑制腫瘤生長、影響細胞周期、下調(diào)腫瘤細胞表面HER-2蛋白表達及減少V表達的乳腺癌。45、目的基因的制備方法有哪些？參考答案：答案：從基因組中直接分離；通過RNA合成DNA；基因的化學(xué)合成；聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）釣取。46、查閱資料綜述生物藥物阿單木單抗（修美樂）能成為連續(xù)多年世界銷售額排名第一的藥物特征和市場應(yīng)用，并提出開發(fā)抗體類藥物的觀點。參考答案：簡要描述阿單木單抗的名稱、藥物性質(zhì)、適應(yīng)癥。羅列該藥物在最近五年的市場應(yīng)用分析。對開發(fā)的抗體類藥物的啟示和前景分析。47、簡述或者圖示基因工程制藥的基本流程參考答案：基因工程藥物的生產(chǎn)涉及DNA重組技術(shù)的產(chǎn)業(yè)化設(shè)計與應(yīng)用，包括上游技術(shù)和下游技術(shù)兩大部分。上游技術(shù)與構(gòu)建(狹義基因工程)；下游技術(shù)則包括含有重組外源基因的生物細胞(基因工程菌或細胞)的大規(guī)模培品質(zhì)量控制等過程。廣義的基因工程是一個高度統(tǒng)一的整體，上游DNA重組的設(shè)計必須以簡化下游操作工藝工程藍圖的體現(xiàn)和保證，這是基因工程產(chǎn)業(yè)化的基本原則。48、簡述生物技術(shù)在制藥領(lǐng)域的應(yīng)用參考答案：利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)多肽/蛋白質(zhì)類藥物或疫苗；利用蛋白質(zhì)工程制造新型活性多肽/蛋白類藥物；利用細胞術(shù)獲得活性藥物分子或藥物中間體；利用發(fā)酵工程提高生產(chǎn)工藝水平；現(xiàn)代生物技術(shù)在新藥研發(fā)中的作用.49、簡述發(fā)酵工程制藥的基本過程參考答案：1.菌種的選育2.培養(yǎng)基的配置3滅菌4.擴大培養(yǎng)和接種5.發(fā)酵過程6.分離提純50、如何進行發(fā)酵工藝的控制？參考答案：包括培養(yǎng)基，溶氧，pH和溫度幾個方面進行控制。51、GMP參考答案：藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范，其英文名稱為goodmanufacturingpracticesfordrugs，簡稱GMP,于1962年首先由美國食品藥品管理52、比較轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)染三種不同方式基因?qū)胨拗鞯姆椒?？參考答案：轉(zhuǎn)化作用(transformation)：將攜帶某種遺傳信息的DNA引入宿主細胞，通過DNA之間同源重組作用，獲化作用。轉(zhuǎn)化是生物界客觀存在的自然現(xiàn)象。轉(zhuǎn)導(dǎo)作用(transduction):自然界中，通過噬菌體或病毒的一個細胞的過程稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction)。即通過噬菌體(病毒)顆粒感染，把DNA導(dǎo)入被感染的宿主細轉(zhuǎn)染作用是將外源DNA分子導(dǎo)入真核細胞的過程，原核生物中轉(zhuǎn)化的同義詞。53、發(fā)酵工程參考答案：發(fā)酵工程(fermentationengineering)又稱為微生物工程，是利用微生物制造工業(yè)原料與工業(yè)產(chǎn)品并提供服務(wù)的技術(shù)，是生物54、生物技術(shù)藥物參考答案：生物技術(shù)藥物(biopharmaceutics)是利用生物體、生物組織、細胞或其成分，綜合應(yīng)用生物學(xué)、生物化學(xué)與分子生物學(xué)、微生物學(xué)與造而成的一大類用于預(yù)防、診斷、治療和康復(fù)保健的制品。55、基因工程參考答案：又稱基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因(I分子，然后導(dǎo)入活細胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品。分子，然后導(dǎo)入活細胞，以改變生物原有的遺傳特性