薄層液基細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)(TCT)及臨床意義

薄層液基細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)(TCT)及臨床意義薄層液基細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)(TCT)及臨床意義薄層液基細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)(TCT)及臨床意義xxx公司薄層液基細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)(TCT)及臨床意義文件編號(hào)：文件日期：修訂次數(shù)：第1.0次更改批準(zhǔn)審核制定方案設(shè)計(jì)，管理制度薄層液基細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)(TCT)及臨床意義一，薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)（TCT技術(shù)）研究發(fā)展背景薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)技術(shù)（Thin-CytologicTestTCT），液基薄層細(xì)胞制片檢查系統(tǒng)處理技術(shù)誕生于1991年美國等國家，率先應(yīng)用于婦科細(xì)胞學(xué)檢查，國內(nèi)從2001年開始作液基細(xì)胞學(xué)篩查宮頸癌的研究，使該項(xiàng)技術(shù)得到迅速發(fā)展，被稱之為一場細(xì)胞學(xué)制片技術(shù)的革命。TCT從根本上解決了常規(guī)脫落細(xì)胞制片假陰性率高、丟失細(xì)胞率高（80%）和涂片質(zhì)量差等技術(shù)難題，使宮頸癌的陽性檢出率達(dá)95%以上，為脫落細(xì)胞學(xué)診斷作出了重大貢獻(xiàn)。但是過去該技術(shù)需要國外的制片機(jī)、細(xì)胞保存液等，它的價(jià)格昂貴，在國內(nèi)也只能是一些大醫(yī)院才能開展該項(xiàng)目，在基層醫(yī)院的推廣則比較緩慢。后來國內(nèi)的一些廠家研發(fā)了半自動(dòng)的離心法制片機(jī)，并自主研發(fā)了細(xì)胞保存液，大大地降低了薄層液基細(xì)胞的制片成本，從而使該項(xiàng)技術(shù)易于被廣大基層醫(yī)院所接受并且進(jìn)行推廣使用。目前，它已成為篩查宮頸癌最好的推薦方法之一，為宮頸癌的早期診斷和治療提供了非常明確的診斷依據(jù)，是一項(xiàng)非常值得推廣應(yīng)用的臨床檢驗(yàn)技術(shù)。二，產(chǎn)品作用原理：通過采集陰道或?qū)m頸分泌物，獲得脫落細(xì)胞后浸入液基細(xì)胞處理試劑中進(jìn)行處理，試劑中的裂解成分能對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行裂解，去除紅細(xì)胞對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成的干擾；同時(shí)試劑中的固定成分能保存固定白細(xì)胞、脫落上皮細(xì)胞等有價(jià)值的細(xì)胞；并使包裹在黏液中的有效細(xì)胞充分分離出來，防止有價(jià)值細(xì)胞的丟失。將有效細(xì)胞制備成細(xì)胞懸液，最后通過過濾離心方法清除黏液對(duì)制片的干擾，制成脫落細(xì)胞薄片?？捎肏E染色、巴氏染色或其他免疫組織化學(xué)染色等方法使細(xì)胞著色，再通過人工觀察分析來檢查陰道或?qū)m頸的細(xì)胞形態(tài)，診斷子宮頸癌及其癌的前期變化、人乳頭瘤病毒和單純皰疹病毒感染。三，主要開展的檢查項(xiàng)目：宮頸脫落細(xì)胞檢查、胸腹水脫落細(xì)胞檢查、尿沉渣檢查、痰液脫落細(xì)胞檢查、支氣管刷片細(xì)胞檢查。特別適用于所有的女性的宮頸癌的早期診斷。四，TCT優(yōu)點(diǎn)：1、保存液試劑盒有裂解紅細(xì)胞功能，能快速裂解采集樣品中的紅細(xì)胞，裂解能力強(qiáng)，裂解更完全，能去除血液對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成的干擾。2、試劑盒含有細(xì)胞固定劑成分，能快速對(duì)樣品中的白細(xì)胞、脫落上皮細(xì)胞等有檢驗(yàn)價(jià)值的細(xì)胞進(jìn)行固定保存，防止有效細(xì)胞發(fā)生自溶。經(jīng)試劑盒固定保存的細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)完好，能保持樣品采集時(shí)細(xì)胞的原始形態(tài)，不會(huì)發(fā)生膨脹、固縮等形態(tài)變化，保證檢驗(yàn)對(duì)有效細(xì)胞的數(shù)量和質(zhì)量要求。3、試劑盒對(duì)粘液具有稀釋作用，能分離出大量包埋在粘液中的有效細(xì)胞。使更多有檢驗(yàn)價(jià)值的細(xì)胞被保存下來，提供充足的細(xì)胞數(shù)量，為檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確提供保證；同時(shí)，處理后的樣品經(jīng)低速離心過濾后能徹底清除樣本中的粘液，有效防止粘液對(duì)樣品檢驗(yàn)結(jié)果的干擾。4、處理過的樣本經(jīng)過低速離心后可制成均勻單層的細(xì)胞薄片，達(dá)到檢驗(yàn)要求。5、、經(jīng)試劑盒處理的脫落細(xì)胞對(duì)生物染色劑具有親和性，有利于生物染色劑著色，為診斷工作提供了方便。6、、試劑盒使用簡單，操作方便，大大節(jié)省了制備樣品標(biāo)本的時(shí)間，同時(shí)克服了傳統(tǒng)檢查方法的不足。五，宮頸癌是常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率位于女性惡性腫瘤的第二位，據(jù)相關(guān)組織公布全世界每年大約有20萬名婦女死于這種疾病。近年篩查發(fā)現(xiàn)，發(fā)達(dá)國家發(fā)病率明顯下降，而發(fā)展中國家的發(fā)病率是發(fā)達(dá)國家的6倍，我國婦女宮頸癌的發(fā)病率和死亡率占世界的1/3，可見改善衛(wèi)生狀況，及時(shí)就診，早發(fā)現(xiàn)、早治療極為重要。子宮頸癌——嚴(yán)重威脅女性健康哪些人容易患子宮頸癌？1.人乳頭狀瘤病毒（HPV）感染者2.多個(gè)性伴侶者3.早婚多育者－50歲子宮頸癌高發(fā)5.宮頸上皮不典型增生6.口服避孕藥子宮頸癌的常見臨床表現(xiàn)？1.早期患者可以沒有任何表現(xiàn)。2.性生活后出血，如婦科檢查及便后接觸性出血，晚期子宮頸癌常表現(xiàn)為大量出血。3.有的可以出現(xiàn)腰、腿痛，下肢腫脹，排便、排尿困難，尿血，便血等。4.年輕患者也可以表現(xiàn)為經(jīng)期延后，周期縮短，經(jīng)量增多等。5.老年性患者常主訴絕經(jīng)后不規(guī)則流血。預(yù)防措施？1.婦科檢查2.液基細(xì)胞學(xué)檢查3.宮頸活體組織檢查薄層液基細(xì)胞學(xué)（TCT）檢查的臨床意義是普查子宮頸癌，早期診斷，早期治療，降低宮頸癌死亡率的有效方法。尤其是通過發(fā)現(xiàn)宮頸癌上皮內(nèi)病變采取合適的處理，可阻止這些癌前病變發(fā)展為宮頸癌。近年來發(fā)現(xiàn)，過去的傳統(tǒng)抹片存在許多局限性，比如細(xì)胞數(shù)量相對(duì)較少，其陽性檢出率低，容易漏診等現(xiàn)象。TCT細(xì)胞學(xué)檢查取樣方便，易于定期復(fù)查，于傳統(tǒng)抹片相比，在制片上有重大的突破，使圖像更加清晰，便于診斷，可以早期確診癌及癌前病變，及時(shí)給予相應(yīng)的治療，有效降低宮頸癌的發(fā)病率和死亡率，大大提高了婦女的生活質(zhì)量。哪些人應(yīng)定期做TCT宮頸病變的檢查？18歲以上有性生活的女性應(yīng)每年做一次宮頸細(xì)胞學(xué)檢查，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有宮頸糜爛，宮頸肥大，在性生活后宮頸出血，絕經(jīng)后陰道不規(guī)則流血的癥狀都應(yīng)該立即進(jìn)行宮頸細(xì)胞學(xué)檢查.我們?cè)谌粘９ぷ髦凶畛Ｔ\斷的結(jié)果是：HPV(人乳頭瘤病毒）感染，LSIL（低度鱗狀上皮內(nèi)病變）,HSIL(高度鱗狀上皮內(nèi)病變),ASCUS(意義不明確的不典型鱗狀細(xì)胞）,還有就是輕、中、重度炎癥。HPV感染是所有子宮頸癌前病變及子宮頸癌發(fā)病的主要病因。HPV感染分為一過性和持續(xù)性感染。只有高危型HPV持續(xù)性感染才是宮頸癌發(fā)生的致病因素。高危型HPV與LSIL（低度鱗狀上皮內(nèi)病變）和HSIL（高度鱗狀上皮內(nèi)病變）都有關(guān)，但更多見于HSIL。最常見的為HPV16型.專家指出，宮頸癌發(fā)病的危險(xiǎn)因素包括高危HPV感染、初次性生活年齡、生產(chǎn)次數(shù)、文化程度等。子宮頸癌是目前唯一病因明確的癌癥，最能被有效預(yù)防、早期發(fā)現(xiàn)和有機(jī)會(huì)治愈的癌癥。子宮頸癌前病變與早期癌多無癥狀，婦科檢查亦難發(fā)現(xiàn)，出現(xiàn)癥狀時(shí)80%以上已成為浸潤癌，難以治愈。從HPV感染到宮頸癌前病變可長達(dá)5-15年，但是只要定期篩查以及HPV感染期和癌變前期的及時(shí)治療，就能降低子宮癌患病率和死亡率。LSIL（低度鱗狀上皮內(nèi)病變）共同特征：1.胞漿成熟，為表層和中表層細(xì)胞.2.核不同程度異型：包括深染，大小，數(shù)量和形狀的變化3.一般無核仁，即使有也不明顯4.細(xì)胞邊界清楚，可單個(gè)或成片排列。HPV感染常出現(xiàn)“挖空細(xì)胞化”，“挖空細(xì)胞化”的診斷要點(diǎn)：1.核周空暈：透亮，不規(guī)則，寬幅。2.核的異型。3.周邊濃集的胞漿。HPV感染可以引起非常明顯的核周空暈，但并不是出現(xiàn)了核周空暈就一定是HPV感染，在糖原溶解，核固縮等情況下都可以出現(xiàn)核周空暈現(xiàn)象。因此要掌握HPV感染所致挖空細(xì)胞的核周空暈三個(gè)要點(diǎn)：第一，透亮。這個(gè)特點(diǎn)在低倍鏡下都非常的明顯，透亮的感覺就如一張白紙，不著任何色彩，與糖原溶解所致的朦朧感是很好鑒別的。第二，不規(guī)則。HPV感染引起的空暈，一般都不圓整，而糖原溶解引起的則是非常規(guī)則的圓形或者橢圓形。第三，寬幅。HPV感染引起的核周空暈幅度往往較寬，有的時(shí)候，幅度過寬把周邊的胞漿都?jí)嚎s成了一層皮。這個(gè)特點(diǎn)能很好的區(qū)分HPV感染與核固縮引起的核周小空暈。核的異型可以從小到大，有時(shí)候HPV感染引起的核異型程度很小，可能僅僅表現(xiàn)為核的深染，偏位。但有時(shí)候核的異型程度很大，能達(dá)到CIN1的形態(tài)學(xué)改變。此外，雙核的出現(xiàn)也是HPV感染一個(gè)比較常見的特點(diǎn)。雙核加空暈往往提示有HPV感染的可能。胞漿的改變主要體現(xiàn)在表層或淺表層的細(xì)胞。HPV感染引起的病變細(xì)胞，胞漿由于被推擠到周邊，染色加深，境界清楚。掌握了這三個(gè)特點(diǎn)，診斷HPV感染就思路比較清楚了，也能很好的避免把糖原溶解誤診為HPV感染。HPV與宮頸癌的關(guān)系：上個(gè)世紀(jì)90年代以前，已有研究發(fā)現(xiàn)HPV與宮頸癌有關(guān)，90年代以后，被確認(rèn)為宮頸癌的主要病因。%的宮頸癌都可檢測(cè)到高危HPVDNA.而HPV陰性者幾乎不會(huì)發(fā)生宮頸癌。宮頸癌成為目前人類所有癌癥病變中唯一一個(gè)病因明確的癌癥。HPV分為高危型與低危型，低危型常引起外生殖器濕疣等良性病變，高危型與宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤變相關(guān)。高危型中，主要致病性的HPV16和18型。有研究表明16型更常見在鱗癌病變，18型更常見在腺癌病變。在基因水平上，又分為游離型與整合型兩種感染形式。游離型是指病毒DNA位于宿主染色體之外，侵犯鱗狀上皮底層細(xì)胞，表現(xiàn)為宮頸良性病變，CIN1；整合型是指病毒基因整合到宿主細(xì)胞的DNA中，侵犯鱗狀上皮由底層到中表層細(xì)胞，表現(xiàn)為CIN3，宮頸癌。LSIL(低度鱗狀上皮內(nèi)病變)診斷要點(diǎn)：1.細(xì)胞成熟，多為表層或中表層的細(xì)胞。2.核增大，面積常大于中層鱗狀細(xì)胞的3倍。3.核有輕度異型，包括核膜的輕度不規(guī)則，核染色質(zhì)增粗等。中層鱗狀細(xì)胞的判斷標(biāo)準(zhǔn)：1.網(wǎng)狀核（10~12um）2.成熟的淡藍(lán)染的胞漿3.核漿比約為1：5。小結(jié)：LSIL的細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變是從ASC-US到LSIL到HSIL的一個(gè)演變的過程。核的增大是鑒別ASC與LSIL的重要指標(biāo)，核漿比的增大是鑒別LSIL與HSIL的重要指標(biāo)，而核的異型程度不斷增大是貫穿整個(gè)演變過程。掌握了這些重要指標(biāo)，再結(jié)合整張片子中病變細(xì)胞的“數(shù)量與質(zhì)量”，以及病史，做出正確的判讀就要容易很多。LSIL的臨床處理：約85%的LSIL病變被檢測(cè)有高危型HPV感染，當(dāng)然，通過HPV檢測(cè)發(fā)現(xiàn)病人是否持續(xù)感染高危型病毒，對(duì)判斷，預(yù)估“病變進(jìn)展”是有一定意義的。LSIL的早期處理措施為陰道鏡檢查.HSIL（高度鱗狀上皮內(nèi)病變）診斷要點(diǎn)：1.高核漿比2.核的異型性，尤其是核明顯不規(guī)則及核染色質(zhì)增粗.診斷標(biāo)準(zhǔn)：1.病變細(xì)胞比LSIL的小且較不“成熟”。2.可單個(gè)，成片或成堆出現(xiàn)。3.核深染，大小，形態(tài)不一，核染色質(zhì)粗，核膜不規(guī)則。4.核漿比明顯增高。5.一般沒有核仁，偶爾可見。HSIL中的其它形態(tài)特點(diǎn)：1.角化性病變。2.鱗狀上皮內(nèi)病變累及腺體。3.小細(xì)胞的高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變。4.成串的高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變。5.梭形的高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變。角化性病變：雖然大多數(shù)HSIL的特征是高核漿比，但是有一些HSIL的胞漿豐富，異常角化。其特點(diǎn)是核深染，有一定異型。有時(shí)出現(xiàn)怪異的蝌蚪狀細(xì)胞。需要注意的是往往這類細(xì)胞核致密，深染，很難看清楚核的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，需要與變性造成的角化細(xì)胞鑒別。小細(xì)胞的HSIL：腫瘤細(xì)胞體積非常小，且往往細(xì)胞數(shù)量不多，很容易漏診。診斷的要點(diǎn)在于觀察細(xì)胞與細(xì)胞中間的大小，形態(tài)差異以及單個(gè)細(xì)胞不規(guī)則的核膜結(jié)構(gòu)。需要鑒別的是不成熟鱗化細(xì)胞，組織細(xì)胞，副基底層細(xì)胞及IUD的改變。成串排列的HSIL：很多時(shí)候是由于混雜在黏液中形成的串狀，細(xì)胞體積一般較小。高倍鏡下能清晰的觀察到HSIL所具有的特點(diǎn)。需要鑒別的是化生細(xì)胞，組織細(xì)胞。HSIL的鑒別診斷1.宮頸管細(xì)胞2.鱗狀化生細(xì)胞3.炎性細(xì)胞團(tuán)4.萎縮性改變5.子宮下段內(nèi)膜細(xì)胞6.子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。HSIL的誤診病例中，最常見的現(xiàn)象是將深染的，細(xì)胞界限不清楚的，核信息表達(dá)不清晰的高核漿比細(xì)胞誤判。包括：宮頸管細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞，副基底層細(xì)胞，化生細(xì)胞，組織細(xì)胞，修復(fù)細(xì)胞，皰疹病毒感染等等。判斷一張制片染色效果是否滿意，不是觀察散在的鱗狀上皮細(xì)胞，而是觀察成團(tuán)的細(xì)胞。判斷指標(biāo)：細(xì)胞界限是否清楚，排列結(jié)構(gòu)是否顯示完整，核的信息是否表達(dá)清晰。只有成團(tuán)細(xì)胞觀察清楚的片子才是合格的液基制片。只有細(xì)胞核信息表達(dá)清晰的細(xì)胞才是有診斷價(jià)值的細(xì)胞。關(guān)于HSIL判讀的個(gè)人體會(huì)：1.片子質(zhì)量是前提：建議平常染色核漿都稍微淡染一點(diǎn)，當(dāng)腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)的時(shí)候，大多有染色加深的改變，便于判讀是其次，減少誤診是關(guān)鍵。2.對(duì)細(xì)胞核的判讀最重要：單個(gè)細(xì)胞強(qiáng)調(diào)核染色質(zhì)的增粗與核膜的不規(guī)則，成堆成片的細(xì)胞強(qiáng)調(diào)核與核之間的大小形態(tài)差異。3.對(duì)成團(tuán)的細(xì)胞判讀最難：聚集成團(tuán)的細(xì)胞注意觀察周邊細(xì)胞的胞漿，判斷出鱗或腺的來源是第一步，有可能的話初步得出良惡性的判斷。4.尋找最終判讀意見的充分證據(jù)：懷疑成團(tuán)的有問題就去找散在的；懷疑單個(gè)或散在的細(xì)胞HSIL，就去找LSIL或者ASC-US；臨床懷疑有問題的就去找取材醫(yī)生溝通；從數(shù)量和質(zhì)量上綜合分析。