細(xì)菌鑒定課件

細(xì)菌鑒定流程與方法臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集標(biāo)本采集的一般原則：1、早期采集2、無菌采集3、根據(jù)目的菌的特性用不同方法采集4、采取適量標(biāo)本5、安全采集標(biāo)本采集的種類：1、血液標(biāo)本2、腦脊液標(biāo)本3、膿液標(biāo)本4、痰液標(biāo)本5、糞便標(biāo)本6、尿液標(biāo)本7、生殖道標(biāo)本標(biāo)本的處理：1、增菌培養(yǎng)2、分離培養(yǎng)3、涂片革蘭染色一些對環(huán)境敏感的細(xì)菌如腦膜炎奈瑟菌等應(yīng)保溫并立即送檢，而其他所有的標(biāo)本采集后最好在２小時內(nèi)送到實(shí)驗室，若不能及時送檢，標(biāo)本應(yīng)置于一定環(huán)境中保存，一般情況下，用于細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本保存時間不應(yīng)超過２４小時病人標(biāo)本中可能含在大量致病菌，不管標(biāo)本運(yùn)送距離遠(yuǎn)近，都必須注意安全。標(biāo)本切勿污染容器的瓶口和外壁，容器必須包裝好，防止送檢過程中倒翻或碰破流出。對于烈性傳染病標(biāo)本運(yùn)送時更要特別嚴(yán)格，必須按規(guī)定包裝，由專人運(yùn)送．厭氧性標(biāo)本應(yīng)放在專門的運(yùn)送瓶或試管內(nèi)運(yùn)送，有時可直接用抽取標(biāo)本的注射器運(yùn)送。臨床細(xì)菌室的任務(wù)：1、是從臨床感染標(biāo)本中分離出病原菌并進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定2、指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物3、臨床感染性疾病的診斷、治療和流行病學(xué)調(diào)查4、為院內(nèi)感染的監(jiān)控提供可靠的依據(jù).臨床細(xì)菌學(xué)檢驗技術(shù)形態(tài)學(xué)觀察生化反應(yīng)試驗血清學(xué)試驗分型試驗血清學(xué)分型噬菌體分型（不常用）細(xì)菌素分型（不常用）動物試驗（普通臨床實(shí)驗室不用）細(xì)菌的形態(tài)學(xué)檢查鏡下形態(tài)學(xué)觀察：不染色標(biāo)本暗視野動力觀察念珠菌孢子和菌絲的觀察絲狀真菌小培養(yǎng)動態(tài)觀察L型菌落與特殊細(xì)菌菌落解剖結(jié)構(gòu)染色后鏡下形態(tài)Gram染色抗酸染色異染顆粒染色熒光染料染色熒光抗體染色乳酸酚棉蘭染色墨汁染色菌落形態(tài)觀察：大?。?xì)如針尖、小、中等、大）質(zhì)地（堅硬、干燥、濕潤、水滴狀）光滑程度（粗糙、光滑、粘液型）凹凸（扁平、微凸、凸起、中性凹陷）顏色（白色、灰色、黃色、綠色、紅色、黑色等）透明程度（透明、半透明、不透明）邊緣（整齊、星狀、有偽足、楓葉狀、樹葉狀等）溶血性（α、β、γ）其他、瓊脂凹陷、氣生菌絲、菌落背面顏色、菌落特殊氣味等營養(yǎng)需求（血瓊脂、巧克力、營養(yǎng)瓊脂生長情況）膽鹽耐受（麥康凱生長情況）萬古霉素耐受（含萬古霉素巧克力生長情況）液體培養(yǎng)基生長現(xiàn)象（菌膜、上半部生長、均勻渾濁、下半部生長、沉淀）半固體動力現(xiàn)象（清晰、毛刷樣、倒傘狀細(xì)菌分離與鑒定—培養(yǎng)基的種類1、按成分分：天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基2、按用途分：基礎(chǔ)培養(yǎng)基營養(yǎng)培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基特殊培養(yǎng)基3、按形態(tài)分：液體、固體、半固體培養(yǎng)基—培養(yǎng)基的選擇1、血平板（BA）：各類細(xì)菌生長2、巧克力平板：嗜血桿菌、奈瑟菌3、中國藍(lán)平板或伊紅亞甲藍(lán)平板4、麥康凱平板5、SS瓊脂6、堿性瓊脂平板或TCBS平板7、血液増菌培養(yǎng)基8、營養(yǎng)肉湯—分離培養(yǎng)細(xì)菌分離：1、平板劃線分離法2、斜面接種法3、液體接種法4、穿刺接種法5、傾注平板法6、涂布接種法細(xì)菌培養(yǎng)1、需氧培養(yǎng)2、CO2培養(yǎng)3、厭氧培養(yǎng)生化反應(yīng)

一、碳水化合物代謝試驗1、OF試驗2、糖苷醇類發(fā)酵試驗3、ONPG實(shí)驗4、七葉苷水解實(shí)驗5、甲基紅試驗6、V-P實(shí)驗二、蛋白質(zhì)代謝試驗1、明膠液化實(shí)驗2、吲哚試驗3、硫化氫試驗4、尿素分解試驗5、苯丙氨酸脫氨酶試驗6、氨基酸脫羧酶試驗碳源、氮源利用試驗酶類試驗氧化酶觸酶凝固酶DNA酶酯酶CAMP試驗

革蘭陽性球菌

觸酶鏈球菌科—+葡萄糖發(fā)酵微球菌—+玻片凝固酶金葡試管凝固酶

金葡+—+—新生霉素

表葡腐生葡萄球菌