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/9如果樣品較熱或較冷,但沒有明顯的溶血或結(jié)冰,可以處理樣品,但要在工作表的報(bào)告上注明溫度條件。不要馬上加熱和冷凍樣品以使其達(dá)到室溫,因?yàn)檫@樣會(huì)對(duì)免疫表型檢測(cè)的結(jié)果產(chǎn)生不利的影響,散射光模式的不正常會(huì)顯示出所受到的影響。不可檢測(cè)溶血或結(jié)冰的樣品。不可檢測(cè)凝血的樣品。如果樣品的采集時(shí)間已超出48h,不可檢測(cè)。流腦標(biāo)本采集1、腦脊液(CSF):如果懷疑為腦膜炎,CSF是用于分離和鑒定病原體最好的標(biāo)本。取患者CSF2-3ml,注入無菌的試管內(nèi)。3000轉(zhuǎn)/分,離心20分鐘,用無菌吸管取沉淀物直接接種到10%羊血巧克力色瓊脂平皿上做細(xì)菌培養(yǎng)。CSF沉渣還可涂片,作革蘭氏染色鏡檢。CSF離心后的上清液可置-20℃,供做血清學(xué)檢查腦膜炎奈瑟氏菌(Nm)群特異性抗原。2、血液:疾病早期,病人高熱時(shí)采取靜脈血5?7ml,往盛有50ml葡萄糖肉湯的三角瓶?jī)?nèi)注入3?5ml血做增菌培養(yǎng)。留2ml血注入無菌試管內(nèi)分離血清,做血清學(xué)檢查腦膜炎奈瑟氏菌(Nm)群特異抗原和急性期抗體。在病人病后1-3周采取第二次血液2ml,注入無菌試管內(nèi)分離血清,檢查病人恢復(fù)期抗體。若恢復(fù)期抗體的滴度比急性期升高4倍或4倍以上,具有追溯診斷的意義。3、淤血點(diǎn):選病人皮膚上的新鮮淤斑或淤血點(diǎn),消毒后用針頭挑破,擠出組織液,用無菌棉簽蘸取先接種含雙抗的葡萄糖增菌肉湯管中增菌8~12小時(shí)后分離培養(yǎng)或直接接種EPV平板,再涂片染色直接鏡檢。涂片也可做免疫熒光檢查。4、鼻咽拭子:對(duì)健康人群或病人密切接觸者進(jìn)行帶菌檢驗(yàn)時(shí)一般采咽拭子。咽拭子直接接種到10%巧克力色雙抗血瓊脂平皿或卵黃雙抗瓊脂平皿上分離Nm。咽拭子也可以插入卵黃雙抗液體培養(yǎng)基或雙抗兔血清肉湯中37℃,5%CO2增菌后再分離。5、尿液標(biāo)本:取病人急性期尿液5ml加20ml無水乙醇,置4℃2小時(shí),離心(3000轉(zhuǎn)/分鐘,15分鐘),棄上清,收集沉淀部分加0.25ml磷酸鹽緩沖液將其溶解,同前離心,吸取上清液檢測(cè)腦膜炎奈瑟氏菌(Nm)群特異抗原。菌種保存a)保溫運(yùn)送:腦膜炎雙球菌對(duì)溫度較為敏感,溫度過低或過高均可導(dǎo)致菌株死亡。在運(yùn)送樣品及培養(yǎng)物(葡萄糖肉湯或平板培養(yǎng)基)時(shí),應(yīng)保持樣品處于20-36℃之間,切記不能低溫運(yùn)送(檢測(cè)抗體的血清標(biāo)本除外)2)分離出腦膜炎雙球菌的保存與運(yùn)送:將鮮牛奶煮沸三次,每次煮沸后冷卻,去除奶液上層的油脂(奶液上層的奶皮),8磅15分鐘高壓后分裝成小管。將腦膜炎雙球菌挑入含1ml脫脂
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