結(jié)晶蒜氨酸制備及其工藝設(shè)計(jì)

中文摘要大蒜是一種極具潛力的天然藥用材料，其中所包含的硫化物質(zhì)具有獨(dú)特的藥理作用。尤其是主要活性成分蒜氨酸，它可以用于調(diào)節(jié)人體的血糖、血脂、營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)、抗氧化、清除自由基、增強(qiáng)免疫等醫(yī)用方面，而其在蒜氨酸酶水解作用下所得到的硫化物質(zhì)具有很強(qiáng)的殺菌、消炎作用。本文以節(jié)約材料、提高產(chǎn)量、降低生產(chǎn)成本方面考慮，對(duì)大蒜中的蒜氨酸進(jìn)行提取并將其制成晶體狀。主要研究?jī)?nèi)容如下：（1）確定蒜氨酸的最佳提取條件。首先對(duì)影響蒜氨酸提取率的因素進(jìn)行了單因素試驗(yàn)，通過(guò)對(duì)不同濃度下乙醇浸泡后的液體進(jìn)行紫外檢測(cè)，綜合各方面條件，可知當(dāng)乙醇濃度為20%時(shí)，對(duì)蒜氨酸的提取最有利。之后通過(guò)正交試驗(yàn)確定了最佳的提取工藝條件，最優(yōu)條件為乙醇濃度為20%、料液比為1：4、提取溫度為20℃、提取次數(shù)為3次、24h/次（2）采用過(guò)硅膠柱的方法，對(duì)蒜氨酸進(jìn)行純化。將蒜氨酸的濃縮物在硅膠柱上用75%的乙醇洗脫，從而可以獲得較高濃度的蒜氨酸。（3）由于有很多與蒜氨酸相似的其它物質(zhì)，所以想要在工業(yè)生產(chǎn)中獲得很高純度的蒜氨酸比較難實(shí)現(xiàn)。本實(shí)驗(yàn)采用了等電點(diǎn)結(jié)合溶劑結(jié)晶的方法對(duì)制得的蒜氨酸進(jìn)行重結(jié)晶，從而獲得高純的的蒜氨酸晶體。關(guān)鍵詞：蒜氨酸；硅膠柱；重結(jié)晶ABSTRACTGarlicisapotentialnaturalmedicinalmaterials,curingthematerialcontainedthereinhasauniquepharmacologicaleffects.Inparticular,themainactiveingredientallicin,whichcanbeusedtoregulatethebody'sbloodsugar,bloodlipids,neurotrophic,antioxidant,scavengingfreeradicals,enhanceimmunityandothermedicalaspects,anditsunderAlliinasehydrolysisoftheresultingvulcanizedsubstancehasastrongbactericidal,anti-inflammatoryeffect.Inthispaper,inordertosavematerial,increaseproduction,reduceproductioncostconsiderations,alliiningarlicisextractedandmade??intocrystals.Themaincontentsareasfollows:(1)determinetheoptimumextractionconditionsalliin.First,thefactorsaffectingtheextractionrateofalliinsinglefactortestconductedbythedifferentconcentrationsofliquidethanolsoakedbyUVdetection,integratedvariousconditions,wecanseewhentheethanolconcentrationof20%,theextractionofalliinthemostfavorable.Aftertheorthogonalexperimenttodeterminethebestextractionconditions,theoptimumconditionsfortheethanolconcentrationof20%,solid-liquidratioof1:4,extractiontemperatureis20℃(2)usingthemethodoverasilicagelcolumnandpurifiedonalliin.TheAlliinconcentrateonsilicagelelutedwith75%ethanol,whichcangetahigherconcentrationofalliin.(3)Astherearemanyothersubstanceswithsimilaralliin,soIwanttogethighpurityalliininindustrialproductionismoredifficulttoachieve.Theexperimentusesacombinationofisoelectricpointsolventcrystallizationmethodalliinobtainedbyrecrystallizationtoobtainhigh-puritycrystalsofalliin.Keywords:Alliin;silicagel;recrystallization

目錄第一章緒論 第二章實(shí)驗(yàn)部分我們知道蒜氨酸存在于大蒜中，故本實(shí)驗(yàn)我們選用大蒜作為實(shí)驗(yàn)材料。在實(shí)驗(yàn)中，我們首先將大蒜去皮，經(jīng)微波爐滅酶。雖然蒜氨酸是水溶性的，但是在提取過(guò)程時(shí)我們需要用低濃度的酒精來(lái)浸泡，以防只用水浸取將很多水溶性物質(zhì)一同浸取出來(lái)，不便于之后的提取結(jié)晶操作。2.1試驗(yàn)儀器與材料2.1.1試驗(yàn)材料和試劑表2-1試驗(yàn)材料和試劑表試劑名稱(chēng)廠(chǎng)家無(wú)水乙醇天津市大茂化學(xué)試劑廠(chǎng)磷酸二氫鉀北京化工廠(chǎng)磷酸氫二鈉天津市大茂化學(xué)試劑廠(chǎng)茚三酮北京化工廠(chǎng)氯化亞錫北京化工廠(chǎng)硅膠北京化工廠(chǎng)α-萘酚天津市大茂化學(xué)試劑廠(chǎng)濃硫酸天津市大茂化學(xué)試劑廠(chǎng)62.1.2試驗(yàn)設(shè)備表2-2試驗(yàn)設(shè)備表設(shè)備名稱(chēng)型號(hào)廠(chǎng)家電子天平AL104型梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)UV-2550日本島津電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱SKFG-01型湖北省黃石醫(yī)療儀器廠(chǎng)數(shù)顯恒溫水浴鍋HH型江蘇金壇市金城國(guó)勝試驗(yàn)儀器廠(chǎng)低速離心機(jī)LD4-2A型有限公司北京雷勃爾離心機(jī)電柜KQ-250DB昆山市超聲儀有限公司移液槍XLSRAININ微波爐Galanz打漿機(jī)諸城市昊昌食品機(jī)械廠(chǎng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-52AA上海亞榮生化儀器廠(chǎng)電子pH計(jì)METTLERTOLEDO循環(huán)水式真空泵SHZ-D(III)鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司72.2實(shí)驗(yàn)方法2.2.1工藝流程工藝流程見(jiàn)圖2-1。浸泡去皮乙醇提取過(guò)濾新鮮大蒜一一一一一→打漿一一一一一→提取液一一一一一一→粗體液微波滅酶過(guò)硅膠柱一一一一一→洗脫液Ⅰ粗提液一一一一一一一→一一一一一→洗脫液Ⅱ一一一一一→濃縮物乙醇洗脫減壓濃縮圖2-1工藝流程圖2.2.2單因素實(shí)驗(yàn)大蒜的預(yù)處理將從超市購(gòu)買(mǎi)回來(lái)的新鮮大蒜放在清水中浸泡，15分鐘后取出并將其蒜皮去除，然后準(zhǔn)確稱(chēng)量大蒜80g，之后將大蒜放在微波爐中，調(diào)至中高火檔，微波2分鐘后對(duì)其進(jìn)行滅酶操作。然后將滅酶后的大蒜放在研缽中對(duì)其進(jìn)行搗碎操作，再把搗碎后的打算倒置于打漿機(jī)中，進(jìn)行打漿操作20分鐘，之后將大蒜漿體平均分至四個(gè)100mL的燒杯中，分別編號(hào)為10號(hào)、11號(hào)、12號(hào)、13號(hào)。該實(shí)驗(yàn)要測(cè)量的是乙醇溶液的濃度對(duì)蒜氨酸提取率的影響：配制乙醇濃度為0%、20%、40%、80%的乙醇溶液60mL,將配制好的乙醇溶液分別加入到10號(hào)、11號(hào)、12號(hào)、13號(hào)燒杯中浸泡，并用保鮮膜封口，再室溫下浸泡12小時(shí)后，將各燒杯中的大蒜與乙醇混合液分別用篩網(wǎng)過(guò)濾，將濾液用離心機(jī)離8心20分鐘后，取上清液放在四個(gè)儲(chǔ)物瓶中，分別標(biāo)號(hào)為10號(hào)、11號(hào)、12號(hào)、13號(hào)，放在冰箱中儲(chǔ)存防止溶液變質(zhì)，再將篩網(wǎng)的濾渣以及離心的殘?jiān)旌弦陨鲜鐾瑯拥牟僮鹘?，重?fù)實(shí)驗(yàn)三次，最后將得到的乙醇提取液混合在一起，作為粗體液。粗體液中蒜氨酸的含量測(cè)定.1配制茚三酮指示劑用電子天平準(zhǔn)確稱(chēng)取茚三酮藥品1克，倒入50mL的容量瓶中，再加入35mL蒸餾水，在100℃.2配制磷酸鹽緩沖溶液首先用電子天平準(zhǔn)確稱(chēng)量4.5350克的磷酸二氫鉀，放置于500毫升的容量瓶中，加水定容至刻度線(xiàn)。之后再用電子天平準(zhǔn)確稱(chēng)量11.9380克的磷酸氫二鈉，放置于500毫升的容量瓶中，加水定容至刻度線(xiàn)。分別用量筒量取10mL的磷酸二氫鉀溶液和190mL的磷酸氫二鈉溶液，進(jìn)行混合操作，即得到pH8.04的磷酸鹽緩沖溶液。.3蒜氨酸含量的測(cè)定用移液槍分別從標(biāo)有10號(hào)、11號(hào)、12號(hào)、13號(hào)的儲(chǔ)物瓶中吸取400μL的粗體液，置于四個(gè)標(biāo)有10號(hào)、11號(hào)、12號(hào)、13號(hào)的具塞試管中，之后用移液槍分別吸取1200μL的蒸餾水加入到四個(gè)10mL的具塞試管中，然后再用移液槍分別吸取400μL的茚三酮指示劑加入到四個(gè)具塞試管中，最后用移液槍分別量取400μL的磷酸鹽緩沖溶液加入到四個(gè)具塞試管中。然后將四個(gè)具塞試管在100℃的恒溫水浴箱中加熱15分鐘。9刻度，靜置10分鐘后，分別從各個(gè)試管中吸取200μL液體倒入四個(gè)具塞試管，做好標(biāo)記，加水稀釋至刻度線(xiàn)，之后在紫外吸光光度計(jì)下測(cè)量各個(gè)試樣的吸光度值。2.2.3根據(jù)查閱的相關(guān)文獻(xiàn)資料，可知影響蒜氨酸提取率的影響因素可能會(huì)有浸取溫度（A）、浸取時(shí)間（B）、料液比例（C）、浸取次數(shù)（D）。對(duì)于以上四個(gè)因素，本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)了一個(gè)因素對(duì)應(yīng)三個(gè)水平，選用蒜氨酸的提取率作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，選取L9（34）表作為正交實(shí)驗(yàn)表，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)利用方差數(shù)據(jù)分析的方法來(lái)選取出蒜氨酸提取的最佳工藝條件，正交設(shè)計(jì)表如下：表2-3試驗(yàn)水平安排表水平因素A/℃B/hCD/次120121：21230181：32340241：43表2-4正交設(shè)計(jì)表序號(hào)ABCDyi(%)1A1B1C1D12A1B2C2D23A1B3C3D34A2B1C2D35A2B2C3D16A2B3C1D27A3B1C3D28A3B2C1D39A3B3C2D1102.2.4蒜氨酸的純化工藝旋蒸濃縮操作首先，將所制得的蒜氨酸粗提液在55℃硅膠柱層析該實(shí)驗(yàn)采用的是布氏漏斗，抽慮瓶及循環(huán)水式真空泵的組合來(lái)進(jìn)行硅膠柱層析的。.1裝柱首先在布氏漏斗的上面先鋪一層脫脂棉，為了防止洗脫劑外漏，之后在其上面墊一層濾紙。然后稱(chēng)取300g的硅膠，均勻平整的平鋪在濾紙之上，之后倒入無(wú)水乙醇洗脫，保證沒(méi)有空氣存在。.2上樣將經(jīng)過(guò)減壓旋蒸濃縮后的濃縮液體倒入布氏漏斗，加入到硅膠柱的上面。.3配制Molish試劑（檢測(cè)多糖反應(yīng)）首先用電子天平準(zhǔn)確稱(chēng)量α—萘酚10克，溶于一定量的酒精中，乙醇濃度為75%，然后倒入100mL的容量瓶中，倒入蒸餾水稀釋至刻度線(xiàn)，注意該試劑需要在實(shí)驗(yàn)前現(xiàn)做現(xiàn)配。.4多糖檢測(cè)反應(yīng)將收集到的抽慮后的液體用膠頭滴管吸取10滴放入試管中，之后再用膠頭滴管吸取Molish試劑兩滴加入到試管中，注意不要讓Molish試劑碰到試管壁（當(dāng)Molish試劑與濃硫酸接觸到后會(huì)生成綠色，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果）。之后將試管傾斜，沿著試管壁緩緩加入濃硫酸，直立試管，注意不要搖晃試管，觀(guān)察兩液體界面是否出現(xiàn)紫色現(xiàn)象，若出現(xiàn)則表示有多糖存在；若不出現(xiàn)，則表示無(wú)多糖物質(zhì)存在。.5洗脫首先將布氏漏斗的下端管口插入到250mL的抽慮瓶的膠塞中，然后將抽慮瓶的另一端與循環(huán)水式真空泵相連接，之后開(kāi)啟循環(huán)水式真空泵的開(kāi)關(guān)進(jìn)行抽真空操作。接著將蒸餾水勻速地倒入到布氏漏斗中，注意不要溢出，每加入100mL的蒸餾水后用100mL燒杯收集抽慮后的液體，進(jìn)行多糖檢測(cè)反應(yīng)。直至多糖檢測(cè)反應(yīng)顯示陰性為止，停止收集。之后用濃度為75%的酒精進(jìn)行洗脫，每加入50mL的酒精溶液后用50mL的燒杯收集抽慮后的液體，然后到紫外分光光度計(jì)下測(cè)量，直至沒(méi)有蒜氨酸存在時(shí)，停止收集，并將所得液體混合，放置于三角瓶中。濃縮結(jié)晶將三角瓶置于60℃的恒溫水浴箱中放置，每隔一個(gè)小時(shí)降低4℃，直至溫度降低到2.2.5蒜氨酸的精制工藝將所得的蒜氨酸粗制品加入一定量的乙醇，乙醇的加入量以剛能使蒜氨酸粗制品完全溶解于其中為宜，將PH調(diào)至4.86（蒜氨酸的等電點(diǎn)，便于蒜氨酸的析出），之后將溶解的蒜氨酸粗制品放在溫度為4℃的冰箱中冷藏，至結(jié)晶操作完全后，將結(jié)晶取出，進(jìn)行一次抽慮操作，將抽慮后的結(jié)晶平鋪在盤(pán)中，放置于60℃的恒溫干燥箱中進(jìn)行干燥操作，2.3分析方法在本實(shí)驗(yàn)中，從大蒜中提取蒜氨酸的工藝參數(shù)的優(yōu)劣，主要是利用蒜氨酸的提取率和除雜率來(lái)判斷的，而蒜氨酸的提取率和除雜率主要是通過(guò)紫外分光光度計(jì)測(cè)量樣品溶液的吸光度值，之后轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的濃度值從而計(jì)算得出的。122.3.1蒜氨酸的提取率計(jì)算在蒜氨酸提取率的計(jì)算中，本實(shí)驗(yàn)采用分光光度法來(lái)計(jì)算，將所得到的蒜氨酸粗制品的吸光度值測(cè)量下來(lái)，從而利用公式計(jì)算出峰面積，根據(jù)張文廣的實(shí)驗(yàn)研究我們知道，在210nm處蒜氨酸標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)為：以峰面積為縱坐標(biāo)，蒜氨酸濃度為橫坐標(biāo)，我們可得蒜氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)見(jiàn)下圖2-2。圖2-2蒜氨酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)我們可以知道，蒜氨酸的濃度在20.208μg/mL~202.08μg/mL的范圍內(nèi)，蒜氨酸的濃度與峰面積兩因素的線(xiàn)性關(guān)系很好。因此我們可以利用測(cè)得蒜氨酸樣品的吸光度值，從而通過(guò)軟件計(jì)算出峰面積，進(jìn)而利用峰面積與濃度之間的線(xiàn)性關(guān)系求出蒜氨酸的濃度值，再經(jīng)過(guò)公式換算即可得到蒜氨酸的產(chǎn)率。13第三章結(jié)果討論3.1單因素實(shí)驗(yàn)工藝研究本實(shí)驗(yàn)研究的是不同濃度的乙醇溶液對(duì)蒜氨酸提取的影響，分別選擇水、20%乙醇、40%乙醇、80%乙醇，我們知道蒜氨酸易溶于水，在實(shí)驗(yàn)中我們利用不同濃度的酒精作為浸取溶液是為了除掉易溶于水的糖類(lèi)、蛋白質(zhì)、果膠等雜質(zhì)。我們準(zhǔn)確稱(chēng)量80g大蒜，用清水浸泡15分鐘，之后將大蒜去皮，用微波爐滅酶2分鐘后平均分成四份，放置與四個(gè)燒杯中，之后分別用水、20%、40%、80%的乙醇按1：3的料液比例浸泡，12h將混合物過(guò)濾離心，將濾液分別收集起來(lái)，濾渣再次以相同的方式浸泡，重復(fù)以上操作三次，最后將所獲得的濾液混合，在用紫外分光光度計(jì)測(cè)量各自的吸光度值，紫外圖見(jiàn)下圖3-1，之后用軟件轉(zhuǎn)化成峰面積，再利用蒜氨酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算出蒜氨酸的提取率。最后將所獲得的濾液進(jìn)行干燥結(jié)晶操作，放置天平上分別測(cè)得其質(zhì)量，從而計(jì)算除雜率，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下圖3-1。圖3-1（10號(hào)）14圖3-2（11號(hào)）圖3-3（12號(hào)）15圖3-4（13號(hào)）表3-1乙醇濃度對(duì)蒜氨酸提取的影響浸取溶劑平均蒜氨酸含量%除雜率%水1.45914.3720%乙醇1.34515.1240%乙醇1.30714.8180%乙醇1.31215.96有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，水提取蒜氨酸的含量最高，但是其除雜率不如20%的乙醇溶液，并且20%的乙醇溶液與水相比，提取率僅僅稍低一些；而80%的乙醇溶液雖然除雜率最高，但是不利于之后操作的提取回收，況且20%乙醇溶液也能夠防腐作用，且比較節(jié)約原料，所以選擇20%的乙醇作為浸取液。3.2正交實(shí)驗(yàn)工藝研究通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)，讓我了解了最適合提取蒜氨酸的溶液濃度。在單因素實(shí)16驗(yàn)的基礎(chǔ)上，本實(shí)驗(yàn)選取了對(duì)蒜氨酸提取影響較大的四個(gè)因素，分別為浸取溫度（A）、浸取時(shí)間（B）、料液比例（C）、浸取次數(shù)（D），選用L9（34）表進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，以蒜氨酸的提取率作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，1-9號(hào)樣品在紫外分光光度計(jì)下測(cè)得的紫外圖見(jiàn)下圖3-1~3-10，正交實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)安排及數(shù)據(jù)見(jiàn)下表3-2、3-3、3-4：圖3-5（1號(hào)）17圖3-6(2號(hào))圖3-7（3號(hào)）圖3-8(4號(hào))18圖3-9（5號(hào)）圖3-10（6號(hào)）2019圖3-11（7號(hào)）圖3-12（8號(hào)）20 圖3-13（9號(hào)）表3-2試驗(yàn)水平安排表水平因素A/℃B/hCD/次120121：21230181：32340241：4321表3-3試驗(yàn)安排與數(shù)據(jù)分析序號(hào)ABCDYi(%)1111179.042122282.363133390.064212389.695223183.976231279.34（續(xù)表3-3）序號(hào)ABCDYi(%)7313283.188321386.949332180.09Yj183.8283.9781.7781.03優(yōu)水平：A1B3C3D3顯著性：D、C、B、AYj284.3384.4284.0581.63Yj383.4083.1685.7488.90R0.931.263.977.87表3-4提取率方差分析表來(lái)源偏差平方和S自由度f(wàn)均方和F比顯著性浸取溫度1.908920.95450.0533一浸取時(shí)間2.446221.22310.0683一料液比例23.8155211.90780.6645一浸取次數(shù)115.1499257.57503.21290.05總計(jì)143.32058F0.1(2,8)=3.11，F(xiàn)0.05(2,8)=4.4622由以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在四個(gè)因素中，浸取次數(shù)對(duì)蒜氨酸提取率的影響最高，其次為料液的配比，再次為浸取的時(shí)間，最低的為浸取的溫度。在實(shí)際工廠(chǎng)生產(chǎn)中，浸取次數(shù)越多所消耗的資金越大，故為了從經(jīng)濟(jì)利益出發(fā)，一般浸取次數(shù)不大于3次，綜合各方面因素考慮，可以給出最佳提取工藝為：A1B3C3D3。3.3精制實(shí)驗(yàn)工藝研究上述操作獲得的蒜氨酸粗制品，雖然是晶體，但是由于有一些雜質(zhì)存在，影響蒜氨酸的實(shí)際應(yīng)用，為了能夠得到我們需要的蒜氨酸純度，此時(shí)，我們?cè)O(shè)計(jì)了等電點(diǎn)結(jié)合溶劑重結(jié)晶的方法。即將所得的蒜氨酸粗制品加入一定量的乙醇，乙醇的加入量以剛能使蒜氨酸粗制品完全溶解于其中為宜，將PH調(diào)至4.86（蒜氨酸的等電點(diǎn)，便于蒜氨酸的析出），之后將溶解的蒜氨酸粗制品放在溫度為4℃的冰箱中冷藏，至結(jié)晶操作完全后，將結(jié)晶取出，進(jìn)行一次抽慮操作，將抽慮后的結(jié)晶平鋪在盤(pán)中，放置于55表3-5精制結(jié)果分析表樣品純度%精制前34.67精制后43.12很明顯，通過(guò)精制操作后可以大大提高蒜氨酸制品的純度。但是在投入到工廠(chǎng)實(shí)際生產(chǎn)中，隨著蒜氨酸制品純度的提高，相應(yīng)的費(fèi)用投入也將隨之增加，23故在實(shí)際生產(chǎn)中，應(yīng)該視情況而定。3.4蒜氨酸的穩(wěn)定性分析（1）蒜氨酸溶液的穩(wěn)定性分析結(jié)果見(jiàn)下表3-6：3-6蒜氨酸溶液的穩(wěn)定性分析表溫度（℃）原始溶液蒜氨酸的質(zhì)量（mg）加熱后溶液中蒜氨酸的質(zhì)量（mg）損失率（%）6079.370078.94800.53178079.370066.014616.826810079.370026.748066.2996由上表可以看出，當(dāng)蒜氨酸溶液在高溫加熱8小時(shí)后，蒜氨酸都會(huì)有損失，但是在溫度為60℃情況下，蒜氨酸的損失率最低，比較穩(wěn)定（2）蒜氨酸結(jié)晶的穩(wěn)定性分析見(jiàn)下表3-7：3-7蒜氨酸晶體的穩(wěn)定性分析表溫度（℃）原始蒜氨酸晶體的質(zhì)量（mg）加熱后蒜氨酸晶體的質(zhì)量（mg）損失率（%）6014.7214.590.88328014.7414.422.171010014.0313.563.3500根據(jù)上表我們可以發(fā)現(xiàn)，當(dāng)蒜氨酸晶體在高溫加熱中損失都不大，都比較穩(wěn)定，當(dāng)溫度在60℃24

第四章全文總結(jié)4.1結(jié)論本文選用新鮮的大蒜作為實(shí)驗(yàn)材料，利用蒜氨酸的水溶性性質(zhì)，將蒜氨酸從大蒜中提取出來(lái)。但是由于還有其它物質(zhì)也易溶于水，故用水和無(wú)水乙醇的混合溶液作為提取液，這樣就可以盡可能的除去那些易溶于水的雜質(zhì)，例如：糖類(lèi)物質(zhì)，果膠，蛋白質(zhì)等。之后將所制得的粗體液旋蒸濃縮，過(guò)硅膠柱，利用循環(huán)水式真空泵的抽真空作用，對(duì)其進(jìn)行抽率，得到蒜氨酸的粗制品，最后利用蒜氨酸的等電點(diǎn)進(jìn)行重結(jié)晶操作，以此獲得更高純度的蒜氨酸。本實(shí)驗(yàn)所得到的結(jié)論如下：（1）對(duì)提取蒜氨酸操作時(shí)的浸取液的濃度進(jìn)行了單因素實(shí)驗(yàn)。浸取液分別為水、20%乙醇、40%乙醇、80%乙醇，在20℃下浸泡按聊液比為1：3浸泡，每次浸泡12小時(shí)，重復(fù)試驗(yàn)3次。最后通過(guò)紫外測(cè)量及聯(lián)系實(shí)際應(yīng)用，確定了最佳（2）在確定了浸取液濃度之后，本實(shí)驗(yàn)對(duì)蒜氨酸提取操作時(shí)影響較大的四個(gè)因素（分別為浸取溫度、浸取時(shí)間、料液比例、浸取次數(shù)）分別設(shè)計(jì)了三個(gè)水平，（分別為20℃、30℃、40℃；12h、18h、24h；1：2、1：3、1：4；1次、2次、3次），選用了L9（3（3）在純化操作過(guò)程中，選用布氏漏斗、抽慮瓶及循環(huán)水式真空泵的組合可以大大地提高抽慮的效率，從而節(jié)約了大量的時(shí)間。（4）在精制操作過(guò)程中，通過(guò)控制溶液的pH使其達(dá)到蒜氨酸的等電點(diǎn)同樣可以大大地提高制備結(jié)晶的效率，節(jié)約了大量時(shí)間。25（5）重結(jié)晶的操作可以很好地提高蒜氨酸制品的純度，使其達(dá)到理想中的效果，進(jìn)而應(yīng)用到實(shí)際生產(chǎn)中，但是相應(yīng)的投入費(fèi)用也會(huì)提高，所以應(yīng)結(jié)合實(shí)際來(lái)確定生產(chǎn)方案。4.2建議和展望4.2.1蒜氨酸制品市場(chǎng)前景的展望隨著人們生活水平的不斷提高，大家飲食習(xí)慣已經(jīng)由當(dāng)初的解決溫飽問(wèn)題轉(zhuǎn)移到了健康問(wèn)題上了，大家更加關(guān)注的是保健產(chǎn)品，如何能夠吃的健康，用的放心已經(jīng)逐步成為了百姓關(guān)注的重點(diǎn)，也是近幾年來(lái)研究的熱點(diǎn)。我國(guó)新疆盛產(chǎn)大蒜，是大蒜的主要產(chǎn)地，原材料對(duì)于我們來(lái)說(shuō)充足且價(jià)格較低。然后大蒜中的蒜氨酸物質(zhì)具有其獨(dú)特的藥理作用，例如能夠起到消除自由基，抗衰老，殺菌抑菌，降低血糖，調(diào)節(jié)血壓，抗癌防癌等作用，因此蒜氨酸的需求量在國(guó)內(nèi)外急劇增加，然后對(duì)于龐大的市場(chǎng)來(lái)說(shuō)，如今的蒜氨酸生產(chǎn)水平還很低，故此對(duì)于蒜氨酸制品還是有很大的市場(chǎng)前景的。我們可以把生產(chǎn)出來(lái)的蒜氨酸成品投入到醫(yī)療領(lǐng)域中，亦可將其放在化妝品及食品中，可以起到保健的作用，如果將結(jié)晶蒜氨酸制備及其生產(chǎn)工藝真正的投入到了工廠(chǎng)生產(chǎn)中，那么將會(huì)對(duì)人類(lèi)的健康發(fā)展起到深遠(yuǎn)的影響。4.2.2蒜氨酸制品實(shí)驗(yàn)研究的展望本實(shí)驗(yàn)雖然能夠通過(guò)乙醇溶液浸泡大蒜，經(jīng)過(guò)一系列的純化、精制等操作將蒜氨酸提取出來(lái)，但是在實(shí)際生產(chǎn)中仍然面對(duì)著很多的不便之處，很難做到大規(guī)模連續(xù)生產(chǎn)。若是能夠?qū)⑺獍彼岬闹苽涔に嚺c實(shí)際的工廠(chǎng)生產(chǎn)緊密的結(jié)合到一起，將會(huì)對(duì)全世界人們有著深刻的影響。通過(guò)此次實(shí)驗(yàn)，我發(fā)現(xiàn)在制備過(guò)程中存在的難點(diǎn)如下：（1）在實(shí)際工廠(chǎng)生產(chǎn)中，才用微波滅酶的方法很難做到大批量操作，因26此這是首先面對(duì)的滅酶問(wèn)題。（2）對(duì)于蒜氨酸的提取過(guò)程中，運(yùn)用乙醇溶液雖然能夠制得較高純度的蒜氨酸制品，但是損失了很多原材料，這不符合可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略。（3）我們可以尋找一種酶合成的方法來(lái)合成蒜氨酸，這樣既可以提高生產(chǎn)效率，還能夠做到節(jié)約原材料，提高產(chǎn)率的作用，適合于工廠(chǎng)的連續(xù)大規(guī)?；a(chǎn)。27

致謝時(shí)間飛逝，轉(zhuǎn)眼之間我的大學(xué)生涯要在本次論文答辯結(jié)束后畫(huà)上了句號(hào)。在此次畢業(yè)設(shè)計(jì)過(guò)程中，獲得過(guò)成功，也經(jīng)歷過(guò)失敗，留下了汗水，享受了喜悅。其中得到過(guò)很多人的幫助，在次畢業(yè)之際，借此機(jī)會(huì)向大家表示感謝。我的畢業(yè)設(shè)計(jì)是在指導(dǎo)教師xxxx老師悉心地指導(dǎo)下完成的，在設(shè)計(jì)過(guò)程中李老師多次詢(xún)問(wèn)實(shí)驗(yàn)進(jìn)度，也曾數(shù)次走入實(shí)驗(yàn)室監(jiān)督我的實(shí)驗(yàn)。每當(dāng)我遇到問(wèn)題的時(shí)候，李老師都耐心地為我解答，當(dāng)實(shí)驗(yàn)缺少儀器的時(shí)候，李老師都能幫助我解決，為我能夠順利做實(shí)驗(yàn)創(chuàng)造了優(yōu)良的環(huán)境。老師嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶W(xué)習(xí)態(tài)度，和藹的待人方式值得我好好學(xué)習(xí)，這將是使我受益終生的財(cái)富。此外，我還有感謝在我實(shí)驗(yàn)過(guò)程中為我提供過(guò)幫助的學(xué)長(zhǎng)，還有我的同學(xué)，他們?cè)谖颐悦５臅r(shí)候給予我一些很好的意見(jiàn)，使我能夠順利的完成畢業(yè)設(shè)計(jì)。最后，我要感謝我的學(xué)院多年來(lái)對(duì)我們的培養(yǎng)，感謝曾經(jīng)教育過(guò)我，栽培過(guò)我的學(xué)院老師，因?yàn)橛心鷤兊慕陶d才讓我掌握了專(zhuān)業(yè)知識(shí)，順利地畢業(yè)。希望我們的學(xué)院越來(lái)越好，老師和朋友們生活幸福安康！28

參考文獻(xiàn)[1]DirschVM,KiemerAK,WagnerH.Effectofallicinandajoene,twocompoundsofgarlic,oninduciblenitricoxidesynthase[J].Atherosclerosis,1198,139(2):333-339.[2]LammDL,RiggsDR.Thepotencialaoolicationofalliumsativum(garlic)forthetreatmentofbladdercancer[J].UralClineNorthAm,2000,27:157-162.[3]TomsonM,AliM.Garlic(alliumsativum);areviewofitspotentialuseasananti-canceragent[J].CurCancerDrugTargets,2003,3:67-81.[4]MilnerJA.Ahistoricalperspectiveongarlicandcancer[J].JNutr,2001,31:1027-1031.[5]姚逸.大蒜的開(kāi)發(fā)利用研究概況[J].基層中藥雜志,2000,6:47-48.[6]賈江濱,許重遠(yuǎn),羅景慧等.大蒜中含硫氨基酸研究進(jìn)展[J].中草藥,2000,31(6):468-470.[7]陳能煜,伍睿,陳麗等.大蒜研究進(jìn)展[J].天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā),1999,12(2):67-74.[8]景文娟,唐輝等.蒜氨酸和大蒜多糖提取分離實(shí)驗(yàn)研究[D].石河子市：石河子大學(xué),2007,6:14-16.[9]R.Kamenetsky,I.LondonNShafir,F.Khassanov,etal.Diversityinfertilitypotentialandorgano-sulphurcompoundsamonggarlicsfromCentralAsia[J].BiodiversityandConservation,2005(14):281-295.29[10]鈴木恭二.蒜氨酸同系物分離提取方法[P].日本專(zhuān)利公報(bào)(1972)49-221.[11]VirginiaIanzotti.Theanalysisofonionandgarlic[J].Journalofchromatography,2006,1112(1-2):3-22.[12]楊三東,程天德,吳永堯.富硒大蒜中抗癌活性物質(zhì)的研究進(jìn)展[N].湖北民族學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2005,23(2):134-136.[13]SheelaCG,etal.IndinaJExpBiol,1992,30(6):523-525[14]MatsudaY.JP57142917,1982-09-03[15]Lancaster,J.E.,Kelly,K.E.,Quantitativeanalysi