培養(yǎng)基適用性驗證方案

培養(yǎng)基適用性驗證方案培養(yǎng)基適用性驗證方案培養(yǎng)基適用性驗證方案資料僅供參考文件編號：2022年4月培養(yǎng)基適用性驗證方案版本號：A修改號：1頁次：1.0審核：批準:發(fā)布日期：培養(yǎng)基適用性驗證第1頁共7頁培養(yǎng)基適用性驗證方案起草人：日期：年月日方案審核人：日期：年月日方案批準人：日期：年月日目錄1.驗證目的…………32.參照標準…………33.驗證項目…………34.驗證小組人員及職責……………3-45.驗證可接受的標準………………46.驗證材料…………4-57.菌液制備…………58.適用性檢查………………………5-69.控制菌檢查………………………71.驗證目的：需氧菌、霉菌及酵母菌計數(shù)用的培養(yǎng)基及控制菌培養(yǎng)基應進行培養(yǎng)基的適用性檢查。本次驗證的目的是確認胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱液體培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基適合需氧菌、霉菌及酵母菌、大腸埃希菌的測定和控制菌適用性檢查。2.參照標準：2015版中國藥典微生物限度檢查法。3.驗證項目：胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱液體培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基的適用性檢查4.驗證小組人員及職責：驗證小組人員:小組人員職務姓名所在部門職務組長劉秀質量管理部經理組員郝枝桃質量管理部QC主任組員王和霞質量管理部檢驗員組員蘭丹質量管理部檢驗員驗證人員職責及要求按驗證方案及相關文件實施驗證。認真觀察并做好驗證原始記錄。對實施驗證的結果負責。驗證中各部門的職責驗證領導組職責制訂驗證總計劃，負責全公司驗證工作的管理。確定驗證項目及驗證項目負責人。負責驗證方案的批準工作。負責驗證資料及結果的審核工作。負責驗證報告的批準工作。驗證工作小組職責負責驗證方案的起草工作。參與驗證方案的討論、確認工作。負責驗證方案的實施。負責驗證結果的分析、統(tǒng)計、報告工作。參與驗證結果的評價工作。質量部職責負責驗證方案的審核工作。負責驗證過程中儀器、儀表、計量器具的校驗工作。負責驗證中各項檢測工作，提供驗證的檢驗記錄、檢驗報告，對驗證過程中的各項檢驗工作負責。負責驗證資料和報告的審核工作。負責驗證文件回收、歸檔管理工作。5.合格標準：被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)不小于對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的70%，且菌落形態(tài)大小與對照培養(yǎng)基上的菌落一致。6.試驗材料：.被驗證培養(yǎng)基：沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱液體培養(yǎng)基.儀器設備：手提式不銹鋼蒸鍋型電熱恒溫培養(yǎng)箱250B生化培養(yǎng)箱101型電熱恒溫培養(yǎng)箱.驗證用培養(yǎng)基名稱生產廠家批號胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基麥康凱瓊脂培養(yǎng)基麥康凱液體培養(yǎng)基胰酪大豆胨瓊脂對照培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂對照培養(yǎng)基麥康凱瓊脂對照培養(yǎng)基麥康凱液體對照培養(yǎng)基.驗證用菌株：(第代)試驗菌株培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間（小時）白色念珠菌沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基20-25℃24-48h黑曲霉5-7天金黃色葡萄球菌胰酪大豆胨培養(yǎng)基30—35℃18-24h大腸埃希菌銅綠假單胞菌7.菌液制備.取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、白色念球菌的新鮮培養(yǎng)物。.用%的無菌氯化鈉溶液，制成適宜濃度的菌懸液。.取黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物加入3-5ml濃度為%的無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。7..4.采用適宜的方法吸出孢子懸液至無菌試管中。.用%的無菌氯化鈉溶液制成適宜濃度的孢子懸液。.注意事項：菌液制備后，如在室溫下放置，應在2h內使用；如保存在2-8℃，可在24h內使用，黑曲霉孢子懸液可保存在2-8℃，在驗證過的儲存期內使用。8、培養(yǎng)基適用性檢查：分別接種不大于100cfu的金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌的菌液至胰酪大豆胨培養(yǎng)基。每株試驗菌平行制備2個平板，混勻、凝固，置于30-35℃培養(yǎng)不超過3天計數(shù)。分別接種不大于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉的菌液至沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。每個試驗菌平行制備2個平板，混勻、凝固，置于20-25℃培養(yǎng)不超過5天計數(shù)。用對應的對照培養(yǎng)基代替被檢培養(yǎng)基進行上述試驗。結果判定：被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)≥對照培養(yǎng)基上菌落平均數(shù)的70%，且菌落形態(tài)大少與對照培養(yǎng)基上的菌落一致，判定培養(yǎng)基的適用性試驗檢測符合規(guī)定。試驗時間年月日完成時間年月日驗證菌株平皿號供試品組cfu∕ml對照培養(yǎng)基組cfu∕ml回收率%應≥70%銅綠假單胞菌(培養(yǎng)3天計數(shù))1--2--平均值金黃色葡萄球菌(培養(yǎng)3天計數(shù))1--2--平均值大腸埃希菌(培養(yǎng)3天計數(shù))1--2--平均值白色念珠菌(培養(yǎng)5天開始計數(shù))1--2--平均值黑曲霉菌(培養(yǎng)5天開始計數(shù))1--2--平均值結論試驗人復核人9、控制菌檢查控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查項目包括促生長能力、抑制能力及指示特性的檢查。常用培養(yǎng)基適用性檢測項目及所用菌株見下表。大腸埃希菌麥康凱液體培養(yǎng)基促生長能力大腸埃希菌抑制能力金黃色葡萄球菌麥康凱瓊脂培養(yǎng)基促生長能力+指示特性大腸埃希菌麥康凱液體培養(yǎng)基適用性檢查促生長能力檢查分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中。在35℃條件下培養(yǎng)24h，與對照培養(yǎng)基管比較。檢查標準：被檢培養(yǎng)基管試驗菌應生長良好。檢驗結果：抑制能力檢查分別接種不少于100cfu的金黃色葡萄球菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中。在35℃條件下培養(yǎng)24h，并將被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基管比較。檢查標準：被檢培養(yǎng)基管和對照培養(yǎng)基管試驗菌均不得生長檢驗結果：麥康凱瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查：促生長能力+指示特性的檢查用涂布法分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上。在35℃條件下培養(yǎng)24h。檢查標準：被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基上試驗菌生長的菌落大小、形態(tài)特征應、指示劑反應情況等應一致。檢驗結