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1、關(guān)于微生物培養(yǎng)方法第1頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三微生物的種類非細(xì)胞:病毒;原核細(xì)胞:細(xì)菌、藍(lán)藻、放線菌、支原體等。真核細(xì)胞:真菌、原生生物、藻類等。 細(xì)菌:大腸桿菌、乳酸菌等 真菌:酵母菌、霉菌; 原生生物:草履蟲、變形蟲等。第2頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三微生物的特點(diǎn)體積小,面積大 吸收多,轉(zhuǎn)化快 生長(zhǎng)旺,繁殖快; 適應(yīng)強(qiáng),易變異; 分布廣,種類多。 第3頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三微生物的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基:碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等。適宜的環(huán)境條件:溫度、pH、氧氣等。自養(yǎng)型:無機(jī)碳源;異養(yǎng)型:有機(jī)碳源。第
2、4頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三細(xì)菌(1)結(jié)構(gòu):?jiǎn)渭?xì)胞的原核生物,有球形,桿形,螺旋形。 基本結(jié)構(gòu):細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、擬核。 特殊結(jié)構(gòu):莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞。 (3)繁殖: 二分裂。 第5頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三菌落菌落: 單個(gè)細(xì)菌用肉眼是看不見的,當(dāng)單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí),便會(huì)形成一個(gè)肉眼可見的,具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群落。 菌落是菌種鑒定的重要依據(jù)。不同種類的細(xì)菌菌落的大小,形狀光澤度顏色硬度透明度都不同。 第6頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三培養(yǎng)基的種類及應(yīng)用按物理狀態(tài)不同劃
3、分固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基按化學(xué)組成不同劃分:合成培養(yǎng)基/天然培養(yǎng)基按用途不同劃分鑒別培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基第7頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三無菌技術(shù)消毒:不能殺死芽孢和孢子。 煮沸、紫外線、化學(xué)藥劑滅菌:能殺死芽孢和孢子。 高壓蒸汽滅菌、灼燒、干熱、過濾。第8頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三配制培養(yǎng)基包器材滅菌菌種擴(kuò)增倒平板接種培養(yǎng)觀察記錄實(shí)驗(yàn)操作微生物的培養(yǎng)第9頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三配制培養(yǎng)基 LB培養(yǎng)基: 蛋白胨: 10g 酵母粉: 5g NaCl: 10g 瓊脂: 20g 將上述物質(zhì)溶解后, 用
4、蒸餾水定容至1000ml, 分裝后及時(shí)滅菌。第10頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三包器材第11頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三滅 菌高壓蒸汽滅菌 : 通過加熱使菌體內(nèi)蛋白質(zhì)凝固變性,從而達(dá)到殺菌目的。條件:壓力100 kPa 溫度121 時(shí)間15-30 min第12頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三菌種擴(kuò)增搖床震蕩培養(yǎng)12h(于LB液體培養(yǎng)基中)本圖來自十一學(xué)校第13頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三實(shí)驗(yàn)用具LB固體培養(yǎng)基大腸桿菌菌液(LB液體培養(yǎng)基)培養(yǎng)皿接種環(huán)酒精棉酒精燈鑷子、火柴、記號(hào)筆第
5、14頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三接種前準(zhǔn)備用肥皂洗手并使用酒精消毒。順序: 點(diǎn)燃酒精燈酒精棉擦拭雙手酒精棉擦拭桌面第15頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三倒平板第16頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三接種、劃線灼燒接種環(huán)取菌液劃線分離燒至暗紅第17頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三接種、劃線灼燒接種環(huán)取菌液劃線分離菌液膜第18頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三接種、劃線灼燒接種環(huán)取菌液劃線分離第19頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三接種、劃線第2
6、0頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三劃線分離為什么通過劃線分離可得到單菌落?第21頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三第22頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三倒置后做好標(biāo)記,寫在培養(yǎng)皿側(cè)面劃線分離我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果第23頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三培養(yǎng)為什么要倒置培養(yǎng)?恒溫37培養(yǎng)第24頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三配制菌懸液1個(gè)99ml無菌水 2個(gè)9ml無菌水得10-2, 10-3, 10-4的菌懸液1g土壤第25頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期
7、三稀釋菌懸液 (10-4)高濃度低濃度,換槍頭第26頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三接種取200ul菌懸液(10-4)第27頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三涂布分離低濃度高濃度,可不用換槍頭第28頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三涂布分離涂布前后三角刮刀需要灼燒嗎?第29頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三37倒置培養(yǎng)按濃度捆成一摞恒溫37培養(yǎng)第30頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三第31頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三10-4 、 10-3,、 10-2第32頁,共34頁,2022年,5月20日,18點(diǎn)21分,星期三常見
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