PCR實(shí)驗(yàn)入門經(jīng)驗(yàn)總結(jié)

1、PCR 實(shí)驗(yàn)入門經(jīng)驗(yàn)總結(jié)一、PCR二、各區(qū)必備物品清單三、PCRPCRPCR些年，分子診斷行業(yè)快速發(fā)展，使得很多從業(yè)者關(guān)于PCR了一個(gè)新的階段，但是鑒于實(shí)驗(yàn)室基本知識(shí)仍然是非常重要的一環(huán)。一、PCR 實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)原則4區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。根據(jù)使用儀器的功能，區(qū)域可適當(dāng)合并且。使用實(shí)PCR提取及擴(kuò)增檢測為一體的自動(dòng)化分析儀，則標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可合并且。二、各區(qū)必備物品清單試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)（1）功能：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴(kuò)增反映混合液的準(zhǔn)備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準(zhǔn)備。820（覆蓋 1000 。標(biāo)本制備區(qū)（2）功能：核酸（RNA、NA）提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反映

2、管。關(guān)于于涉及臨床樣本的操作，應(yīng)契合生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室防護(hù)設(shè)備、個(gè)人防護(hù)和操作規(guī)矩的要求。必備物品：2-820或-80水浴箱或加熱模塊，微量加樣器（覆蓋0.2-1000，生物安全柜。擴(kuò)增區(qū)（3）功能：cNA 合成、NA 擴(kuò)增及檢測。必備物品：核酸擴(kuò)增儀（或熒光定量PCR04（4）功能：擴(kuò)增片段的進(jìn)一步分析測定，如雜交、酶切電泳、變性高效液相分析、測序等。必備物品：雜交儀、電泳儀、測序儀等，微量加樣器（覆蓋 100。消耗品：一次性手套、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭，專用工2區(qū)，防爆夾2區(qū) PCR管架（2區(qū)、傳遞窗，其他物品。三、PCR 基本工作原則進(jìn)入各工作區(qū)域應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格依照單一方向進(jìn)行試劑儲(chǔ)存

3、和準(zhǔn)備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)擴(kuò)增區(qū)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。得混用。（例如不同的顏色離開各工作區(qū)域時(shí)，不得將工作服帶出。擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)的方向進(jìn)行。不同的實(shí)驗(yàn)區(qū)域應(yīng)當(dāng)有其各自的清潔用具以防止交叉污染。應(yīng)當(dāng)可耐受諸如次氯酸鈉的化學(xué)物質(zhì)的消毒清潔作用。實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面的紫外照射應(yīng)當(dāng)方便有效?？梢苿?dòng)紫外燈254nm波長，在工作完成后調(diào)至實(shí)驗(yàn)臺(tái)上6090cm內(nèi)照射。（b此紫外照射擴(kuò)增片段必需延長照射時(shí)間，最好是照射過夜。四、注意事項(xiàng)(一)試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)貯存試劑和用于標(biāo)本制備的消耗品等材料應(yīng)當(dāng)直接運(yùn)送至試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)，不能經(jīng)過擴(kuò)增檢測區(qū)，試劑盒中的陽性關(guān)于照品及質(zhì)控品不應(yīng)當(dāng)保存在該區(qū)，應(yīng)當(dāng)保存在標(biāo)本處理區(qū)。(二)標(biāo)本制備區(qū)由于在樣本混合、核酸純化進(jìn)程中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染， 可經(jīng)過在本區(qū)內(nèi)設(shè)立正壓條件