病毒性腦炎患兒腦脊液病毒核酸檢測及臨床分析

1、病毒性腦炎患兒腦脊液病毒核酸檢測及臨床分析【關(guān)鍵詞】腦炎，病毒性;兒童;聚合酶鏈反響【abstrat】bjetivetprehendthepssiblenstitutinfpathgensanddisparityinlinialanifestatininhildrenithviralenephalitis.ethds(1)thednarrnafev,hsv,vzvandhveredetetedbyprintheerebrspinalfluid(sf).(2)thelinialanifestatinsereanalyzedanggrupsfdifferentages.results(1)thep

2、sitiveultureappearedin32f53ases(60.38%).angthe,evasdisveredin23ases(43.40%),hsvin8ases(15.09%)andhvin1ase(1.89%).vzvasntdeteted.(2)thenvulsiningrupsaandbassignifiantlygreaterthaningrup(p0.01).grupiththeearlysyptsfheadaheas23ases(85.19%),hileaandbgrupserenly4asesand1ase(p0.01).hseasrethantherviralene

3、phalitis.nlusinsevandhsvightplayaniprtantrleinetilgialnstitutinfviralpathgensinhildrenithviralenephalitis.thelinialsyptsfhseerereserius.itissuggestedpathgendetetinbeenhanedregardingviralenephalitis,andprtestingintheerebrspinalfluidinhildrenithspeifivirusnuleiaidfragenteettherequireentfrapid,speifidi

4、agnsislinially.【keyrds】enephalitis,viral;hild;plyerasehainreatin1資料與方法1.1臨床資料實驗組為2022-2022年安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院兒科收治的臨床診斷為病毒性腦炎、腦膜炎的患兒53例，其中男34例，女19例，年齡1個月13歲，中位年齡6.4歲。根據(jù)兒科常用年齡階段劃分法再分為3組，其中a組15例(嬰幼兒期，3歲)，b組11例(學齡前期，3歲6歲)，組27例(學齡期，6歲)。診斷均符合?實用兒科學?病毒性腦炎及腦膜炎的診斷標準2。正常對照組為確診為化膿性腦膜炎或結(jié)核性腦膜炎的患兒20例，其中男12例，女8例，年齡4月11歲

5、，中位年齡5.9歲。1.4儀器與試劑病毒rna/dna快速純化試劑盒購自大連寶生物工程。逆轉(zhuǎn)錄試劑盒購自美國prega公司。pr檢測采用biate公司梯度pr儀,試劑購自大連寶生物工程。所有引物均由上海生物技術(shù)工程公司合成。1.5實驗方法1.6統(tǒng)計學方法使用spss10.0進展統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料采用2檢驗或fisher確切概率法，兩兩比擬采用2分割法，p0.05有統(tǒng)計學意義。2結(jié)果2.2pr檢測結(jié)果53例病毒性腦炎、腦膜炎患兒中，8例sf中hsvdna陽性(圖2)，陽性檢出率為15.09%;1例sf中hvdna陽性(圖3)，陽性檢出率為1.89%。未檢出vzvdna。對照組20例患兒均為陰性

6、。2.3不同年齡組患兒腦脊液病毒核酸檢測結(jié)果a組檢測出10例ev和1例hsv，b組檢測出7例ev和1例hsv，組檢測出6例ev、6例hsv及1例hv，不同年齡組中病毒分布差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。見表1表1不同年齡組患兒腦脊液病毒病原2.4不同年齡組患兒臨床表現(xiàn)3組中全部患兒均有發(fā)熱;絕大局部患兒有煩躁(84.91%)、嗜睡(71.70%)等表現(xiàn)，3組間差異無統(tǒng)計學意義(p0.05);驚厥表如今3組之間有差異(p0.01)，其中a、b兩組中有驚厥者多于組(p0.01)，組以頭痛為早期病癥者23例(85.19%)，而a、b兩組分別只有1例和4例(p0.01)。見表2。表2不同年齡組患兒臨床

7、表現(xiàn)表3不同病毒感染患兒臨床表現(xiàn)2.5不同病毒感染患兒臨床表現(xiàn)全部患兒均有發(fā)熱;不同病毒性腦炎中驚厥的發(fā)生有差異(p0.05)，其中病原不明的病毒性腦炎患兒發(fā)生驚厥的少于ev和hsv感染組;大局部患兒均有意識障礙(75.47%)，其中70%以上表現(xiàn)為嗜睡，但除2例hse患兒出現(xiàn)昏迷外，其余病毒性腦炎患兒均未發(fā)生;絕大多數(shù)患兒都有煩躁不安、易激惹病癥(84.91%);ev腦炎表現(xiàn)頭痛有6例(26.09%)，低于hsv感染組(75.00%)和病原不明組(71.43%);只有ev腦炎出現(xiàn)皮疹;而口周或咽峽粘膜皰疹那么只在ev腦炎和hse中出現(xiàn)。見表3。3討論病毒性腦炎是兒童的常見并多發(fā)病，病死率高，

8、存活者易留有不同程度的后遺癥。其臨床表現(xiàn)多種多樣，輕重不一。據(jù)報道全世界大約有100多種病毒可以引起病毒性腦炎1，主要有ev，包括脊髓灰質(zhì)炎病毒、埃可病毒、柯薩奇病毒和腸道病毒71型;皰疹病毒，包括hsv、vzv、eb病毒和hv;腺病毒;麻疹病毒;腮腺炎病毒;流行性乙型腦炎病毒以及新發(fā)的尼帕病毒和西尼病毒等。隨著方案免疫接種的不斷廣泛和深化，常見病毒種類也逐漸發(fā)生了變化3，脊髓灰質(zhì)炎病毒、麻疹病毒、風疹病毒、腮腺炎病毒及流行性乙型腦炎病毒等引起的腦炎已經(jīng)很少見，而ev和hsv那么成為最常見的病毒感染類型。本次研究從53例患兒腦脊液中檢測到23例ev、8例hsv和1例hv，陽性率分別為43.40

9、%、15.09%和1.89%，未檢測到vzv。說明該地區(qū)病毒性腦炎、腦膜炎也以ev和hsv為主，與既往報道相似4。進一步分析說明，隨年齡的增長，ev感染率逐漸降低，而hsv感染那么正好相反，組最多，有6例。但病毒在不同年齡組分布差異無統(tǒng)計學意義，可能與病例數(shù)較少有關(guān)。病毒的這種特定年齡分布特點的原因可能為安康兒童的腸道和呼吸道帶有大量的ev,嬰幼兒免疫功能發(fā)育不完善，易于侵入體內(nèi)而發(fā)病，因此ev好發(fā)于嬰幼兒;而hsv屬獲得性感染，年齡越大接觸的時機越多，故hsv以年齡較大兒童多見。此外，由于目前僅能在1/31/4的中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒感染病例中確定其致病病毒5，且此次只檢測了目前臨床較多見的幾種病

10、原，未對也可導(dǎo)致病毒性腦炎的諸如eb、腺病毒以及流感病毒等進展檢測。故本次研究中尚有21例患兒病原不明。不同年齡病毒性腦炎患兒臨床病癥有很大不同。本文患兒共有的臨床病癥為發(fā)熱、嗜睡和煩躁等，驚厥和頭痛在各組中出現(xiàn)概率不同。a、b組中分別有73.33%和54.55%的患兒伴有驚厥，組有85.19%的患兒頭痛?？赡苁怯捎谀暧變簾o法主動表達頭痛等不適病癥，直至出現(xiàn)較重臨床表現(xiàn)時才引起家長的注意。而年長兒在出現(xiàn)頭痛時即能就診，防止了驚厥等嚴重的神經(jīng)系統(tǒng)病癥的出現(xiàn)。但頭痛、嗜睡等是臨床常見病癥，可為多種疾病表現(xiàn)，故易被忽略而延誤治療，造成患兒發(fā)生行為異常、學習困難等影響生活質(zhì)量的后遺癥3。因此認識所在地

11、區(qū)病毒性腦炎患兒各年齡段的病癥特點，對早期診斷、及時治療，從而減少后遺癥具有重要意義。本次研究中，不同病毒感染引起的病毒性腦炎的臨床表現(xiàn)有很多相似之處,但昏迷那么只發(fā)生于兩例hse患兒。提示病毒性腦炎中，以hse的臨床病癥較重，意識障礙較為突出，病癥持續(xù)時間也較長，而腸道病毒腦炎那么相對較輕。然而單憑病癥、體征及一般檢查較難確診病原。確診的主要根據(jù)是腦脊液的病原學診斷，病毒別離培養(yǎng)通常被認為是“金標準，但腦脊液中病毒含量甚低，其病毒別離培養(yǎng)陽性率極低,僅為4%14,不但費時、費力，而且敏感性不高，遠遠不能滿足臨床要求，嚴重滯后于臨床治療，造成該類疾病的診療困難。而腦脊液和血清病毒igg抗體通常在發(fā)病后2周方可到達檢測程度，且有時可能因病毒間的穿插反響而導(dǎo)致誤診。ig抗體屬早期反響性抗體,機體在感染病毒后35d即可產(chǎn)生，應(yīng)用elisa方法在起病后15d即可在血及腦脊液中測出陽性結(jié)果,是早期病原學診斷的方法之一11。然而臨床診斷的試劑盒可以檢測的病毒種類有限,且血清和腦脊液中病毒抗體ig含量低，因此ig陽性檢出率較低，有文獻報道腦脊液和血清中病毒ig抗體陽性率分別為41.1%和35.14%14。近年來，應(yīng)用pr技術(shù)直接檢測腦脊液中的病毒核酸成為早期診斷病毒性腦炎的較好方法15。本文53例臨床確診的病毒性腦炎中，有32例在疾病的早期腦脊液病毒核酸檢測陽