外源性ATP對(duì)大鼠移植胰腺的作用及機(jī)制

1、外源性ATP對(duì)大鼠移植胰腺的作用及機(jī)制【關(guān)鍵詞】胰十二指腸移植；三磷酸腺苷；細(xì)胞凋亡；細(xì)胞脹亡PrtetiveeffetfexgenusATPntransplantedpanreasinratsanditsehanis【Keyrds】panreatidudenaltransplantatin;adensinetriphsphate;apptsis;nsis【摘要】目的：探究外源性三磷酸腺苷(ATP)對(duì)大鼠移植胰腺的作用和機(jī)制.要領(lǐng)：創(chuàng)立SD大鼠同種異位全胰十二指腸移植模子，供體胰腺別離用肝素平衡鹽液或肝素平衡鹽添加ATP液舉行低溫(04)灌注并保存60in后行移植手術(shù)，檢測(cè)再灌注0,1,6,1

2、2h時(shí)血糖、脂肪酶、淀粉酶含量，同時(shí)查抄胰腺構(gòu)造病理學(xué)變革，ATP含量及凋亡、脹亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù).效果：ATP組胰腺構(gòu)造布局損傷顯著輕于比較組，ATP6,12h組血糖、血清淀粉酶、脂肪酶含量顯著低于同時(shí)間點(diǎn)比較組(血糖，脂肪酶，P0.05；淀粉酶，P0.01)，ATP0,1h組胰腺構(gòu)造ATP含量顯著高于同時(shí)間點(diǎn)比較組P0.01，ATP組各時(shí)間點(diǎn)脹亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù)顯著小于同時(shí)間點(diǎn)比較組(0,1,6h,P0.01;12h,P0.05)，ATP含量與脹亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù)顯著負(fù)相干r=-0.756,P0.01,與凋亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù)無顯著相干.結(jié)論：外源性ATP對(duì)移植胰腺有庇護(hù)作用，淘汰胰腺構(gòu)造細(xì)胞脹亡的產(chǎn)生大概是其緊張

3、的庇護(hù)機(jī)制.【關(guān)鍵詞】胰十二指腸移植；三磷酸腺苷；細(xì)胞凋亡；細(xì)胞脹亡0弁言進(jìn)步移植物低溫保存質(zhì)量，淘汰移植物細(xì)胞殞命是移植樂成的緊張因素1-2.有資料表現(xiàn)，外源性三磷酸腺苷(ATP)可以或許進(jìn)入低溫保存的胰腺細(xì)胞內(nèi)3.我們通過增補(bǔ)外源性ATP以進(jìn)步移植器官內(nèi)ATP的儲(chǔ)藏，研究其對(duì)胰腺構(gòu)造中能量代謝以及細(xì)胞殞命方法的影響，探究外源性ATP對(duì)移植胰腺的作用及機(jī)制.1質(zhì)料和要領(lǐng)2效果2.1構(gòu)造學(xué)變革ATP組再灌注0h時(shí)胰腺構(gòu)造光鏡查抄未見顯著非常，再灌注1h時(shí)胰腺構(gòu)造布局改變略微，腺泡外表清楚，局部有胰腺小葉間隙增寬，間質(zhì)無炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及外滲，6h時(shí)胰腺構(gòu)造光鏡下仍可保持根本正常布局，僅有小葉間隙水

4、腫，少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)圖1A，12h時(shí)可見少量出血及炎細(xì)胞浸潤(rùn)，偶見腺泡壞死圖1B.比較組再灌注0h時(shí)胰腺構(gòu)造光鏡查抄未見顯著非常，1h時(shí)見胰腺構(gòu)造布局根本完備，可見較多炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，6，12h時(shí)構(gòu)造粉碎顯著，腺泡壞死、出血和炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)嚴(yán)峻圖1,D.2.2血生化變革再灌注后6h及12hATP組血糖、血清淀粉酶和脂肪酶含量均較比較組同時(shí)間點(diǎn)顯著低落表1.A：ATP組再灌注6h；B：ATP組再灌注12h；：比較組再灌注6h；D：比較組再灌注12h.圖1構(gòu)造學(xué)變革略表1移植胰腺再灌注后血糖、血清淀粉酶和脂肪酶含量變革略aP0.05,bP0.01vs比較.2.3胰腺構(gòu)造ATP和各種細(xì)胞的變革ATP組再

5、灌注0,1h時(shí)胰腺構(gòu)造ATP含量較比較組顯著增高P0.01，ATP組各時(shí)間點(diǎn)脹亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù)較比較組均顯著低落P0.05，ATP含量與脹亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù)顯著負(fù)相干r=-0.756,P0.01,與凋亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù)無顯著相干表2.表2大鼠移植胰腺再灌注后胰腺構(gòu)造ATP及各種細(xì)胞的變革略aP0.05,bP0.01vs比較.3討論脹亡細(xì)胞與凋亡細(xì)胞胞膜上的磷脂酰絲氨酸(PS)表露于細(xì)胞膜外，標(biāo)識(shí)表記標(biāo)幟有FIT的AnnexinV可特異結(jié)合PS；脹亡細(xì)胞細(xì)胞膜通透性改變，PI可以穿過細(xì)胞膜結(jié)合在DNA雙股螺旋鏈之間.以上2種染料對(duì)單細(xì)胞懸液舉行雙染色，那么脹亡細(xì)胞可同時(shí)結(jié)合上述2種染料，凋亡細(xì)胞由于細(xì)胞膜完備，

6、只能結(jié)合AnnexinVFIT，正常細(xì)胞那么兩種染料均不染色，據(jù)此可以應(yīng)用雙染色法通過流式細(xì)胞儀盤算3種細(xì)胞百分?jǐn)?shù).本實(shí)行效果表白，再灌注后ATP組胰腺構(gòu)造病理改變顯著輕于比較組；再灌注6,12h后ATP組血糖、淀粉酶、脂肪酶比比較組顯著低落，以上效果說明在灌注保存液中添加外源性ATP可以或許減輕移植胰腺缺血再灌注損傷.效果同時(shí)表現(xiàn)，ATP組保存后胰腺構(gòu)造中ATP程度比比較組顯著升高且再灌注以后ATP程度規(guī)復(fù)較比較組快；ATP組脹亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù)顯著小于比較組，ATP程度與脹亡細(xì)胞百分?jǐn)?shù)顯著負(fù)相干，提示外源性ATP對(duì)大鼠移植胰腺的庇護(hù)作用大概在于ATP可以或許淘汰細(xì)胞脹亡的產(chǎn)生.諸多研究以為，AT

7、P程度影響細(xì)胞殞命方法，細(xì)胞凋亡是細(xì)胞斲喪ATP的自動(dòng)殞命，細(xì)胞脹亡是細(xì)胞缺乏ATP的被動(dòng)殞命4.我們的效果表白，ATP組保存后的胰腺構(gòu)造能量狀態(tài)優(yōu)于移植比較組，提示ATP富足時(shí)構(gòu)造細(xì)胞以凋亡這一自動(dòng)殞命方法掃除受損細(xì)胞，ATP不敷時(shí),凋亡無法完成其步伐,細(xì)胞轉(zhuǎn)向脹亡.關(guān)于細(xì)胞殞命方法，尚有很多未知范疇，有待更深化的研究.本實(shí)行僅提示當(dāng)缺血再灌注損傷不成制止時(shí),起首應(yīng)淘汰缺血所引起缺氧及能量斲喪這一始動(dòng)因素，如在術(shù)前或術(shù)中賜與能量物質(zhì)臨時(shí)進(jìn)步構(gòu)造細(xì)胞能量?jī)?chǔ)藏，有利于淘汰細(xì)胞脹亡，減輕炎癥反響,防范移植器官缺血/再灌注損傷.【參考文獻(xiàn)】1UhlannD,ArannB,LudigS,etal.pa

8、risnfelsirandUslutininexperientalpanreaspreservatinJ.JSurgRes,2002,105(2):173-180.2TrisiR,eesterD,RegaertB,etal.Tleraneftheprinepanreastarandldisheia:parisnbeteenUniversityfisnsinandhistidinetryptphanketglutarateslutinJ.TransplantPr,2002,34(3):820-822.3原春輝，劉永鋒，李桂臣,等.外源性腺苷三磷酸對(duì)移植胰腺再灌注損傷庇護(hù)作用的實(shí)行研究J.消化外科,2022,3(4):274-277.4HEinS,ArnnE,KstinS,etal.Prgressi