醫(yī)院環(huán)境微生物

1、關(guān)于醫(yī)院環(huán)境微生物第1頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四概述一 概念醫(yī)院感染:是指病人在入院時不存在、也不處于潛伏期而在醫(yī)院內(nèi)發(fā)生的感染，同時也包括在醫(yī)院內(nèi)感染而出院后才發(fā)病的病人。二 對象：住院病人、醫(yī)護(hù)人員、門診病人、陪護(hù)人員、探視人員。第2頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四三、醫(yī)院感染情況據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）報告，全球每年有140萬名患者在住院期間發(fā)生醫(yī)院感染。我國醫(yī)院感染事故也屢見報道，感染的病原多種，以各種途徑傳播。第3頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四四、醫(yī)院感染案例案例1 1991年11月，某縣醫(yī)院發(fā)生新生兒鼠

2、傷寒的暴發(fā)流行，55名嬰兒發(fā)病，23名嬰兒死亡。在對感染原因的調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，該院衛(wèi)生設(shè)施條件差，產(chǎn)科消毒、隔離制度不嚴(yán)，在對產(chǎn)房、嬰兒室的56件物品進(jìn)行細(xì)菌檢測時，發(fā)現(xiàn)其中的26件物品，包括嬰兒被褥、尿布、奶瓶等都培養(yǎng)有鼠傷寒沙門菌生長。第4頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四案例2 1992年9月，某市醫(yī)院發(fā)生志賀痢疾桿菌C群13型暴發(fā)流行，26名新生兒感染，10名新生兒死亡。感染源系志賀氏痢疾桿菌攜帶者的產(chǎn)婦，通過接觸傳染給其嬰兒。因該院新生兒室無配奶間，配奶、換尿布、打包操作均在不足兩平方米的操作臺上進(jìn)行，通過污染的牛奶在新生兒之間傳播。第5頁，共76頁，2022年，5

3、月20日，1點(diǎn)54分，星期四案例3 1993年9月10月期間，沈陽市某婦嬰保健院共接生了244名嬰兒，其中49名于出生后318天先后出現(xiàn)發(fā)燒、拒乳、黃疸及心、肝、腎多臟器受損癥狀，并有15名重癥患兒死于DIC及多器官功能衰竭。此次暴發(fā)感染源系兩名已攜帶柯薩奇B族病毒的產(chǎn)婦，其所產(chǎn)兩名嬰兒被感染，后在嬰兒室內(nèi)引起了交叉感染。第6頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四案例4 1999年，上海某醫(yī)院多個病區(qū)約一周內(nèi)先后有10名患者、護(hù)士和醫(yī)生出現(xiàn)全身皮膚瘙癢和皮損，診斷為疥瘡（疥螨）。案例5 2001年，上海某醫(yī)院兒科心臟術(shù)后發(fā)生18例肺炎克雷伯菌血液感染。第7頁，共76頁，202

4、2年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四案例6 1998年深圳市某醫(yī)院集體感染事件暴發(fā)流行，系由于手術(shù)器械滅菌使用的戊二醛濃度偏低，造成術(shù)后切口膿腫分枝桿菌感染。案例7 2009年3月，天津市某保健院發(fā)生新生兒醫(yī)院感染事件， 6例重癥感染患兒中有5例患兒死亡。其中，3例患兒診斷為新生兒敗血癥，血培養(yǎng)結(jié)果均為陰溝腸桿菌陽性。第8頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四案例8 2008年12月2009年1月間，在山西某職工醫(yī)院進(jìn)行血液透析的47名患者中有 20名患者丙肝抗體陽性。調(diào)查表明，對丙肝抗體陽性患者不能實(shí)施專機(jī)血液透析和專區(qū)處理血液透析器，對反復(fù)用血液透析器消毒處理方法不規(guī)范，

5、存在交叉感染的安全隱患。第9頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四案例9 2008年8月9月，發(fā)生在西安交大某醫(yī)院的新生兒集體感染事件，死亡的8名患兒都是早產(chǎn)兒或體重不足2.5kg的低體重兒。對部分醫(yī)務(wù)人員手、病房物體表面、新生兒使用的奶瓶和奶嘴、新生兒暖箱注水口等進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)有金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯桿菌污染且這些病原菌為多重耐藥性菌株。第10頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四五、 醫(yī)院感染微生物的類別變化1 在青霉素和磺胺藥問世前，醫(yī)院感染的微生物大多數(shù)是由A型鏈球菌引起。 2 19401950年間青霉素、磺胺藥使用后，則以金黃色葡萄球菌為主。

6、3 20世紀(jì)70年代臨床開始使用頭孢類和氨基糖甙類抗生素，引起醫(yī)院感染的革蘭氏陰性桿菌上升，特別是銅綠假單胞菌和腸桿菌科細(xì)菌。 第11頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四4 隨著對革蘭氏陰性桿菌有效藥物的研制生產(chǎn)、介入性診療技術(shù)和免疫抑制劑等的使用，70年代末80年代初革蘭氏陽性球菌又一次成為重要的醫(yī)院感染微生物。 5 在1990年一1996年間，3種主要革蘭氏陽性球菌如金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌（表皮、人、溶血、頭、華納葡萄球菌）、腸球菌約占院內(nèi)感染的34，四種主要革蘭氏陰性桿菌如銅綠假單胞菌、大腸桿菌、腸桿菌屬細(xì)菌、肺炎克雷伯氏菌約占院內(nèi)感染的32。 第12頁，

7、共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四一 醫(yī)院環(huán)境的生境特征1. 醫(yī)院是病人集中的場所，也就是各種病原微生物聚集的地方，是最大的醫(yī)源性感染源。2. 醫(yī)院病人多為易感人群 現(xiàn)代社會和醫(yī)學(xué)的發(fā)展造就了一大批免疫力低下的人群：第13頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四（1）器官移植學(xué)的重大突破（免疫抑制劑的使用）（2）特殊病原體和新的病原體的感染仍沒有很好的治療措施，仍在迅速的傳播（3）腫瘤、血液及一些代謝性疾病的病人不斷增加（放、化療后引起骨髓抑制、中性粒細(xì)胞下降，95%有菌血癥）（4）社會趨向老齡化（2011,13.26%）第14頁，共76頁，2022年，5月2

8、0日，1點(diǎn)54分，星期四3. 侵入性診治措施（插管、穿刺、透析）的應(yīng)用 感染機(jī)會增多4.抗生素的大量使用及不合理應(yīng)用 使細(xì)菌的耐藥性增加，多重耐藥菌株在流行第15頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四5. 激素的應(yīng)用6. 消毒滅菌措施效果不達(dá)標(biāo)滅菌不徹底、不合格7.醫(yī)院內(nèi)病原種類多、密度大、構(gòu)成復(fù)雜第16頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四二 醫(yī)院內(nèi)感染病原體特點(diǎn)1.正常菌群或條件致病菌感染原因：抗菌藥物濫用、侵襲性診療。常見：銅綠假單胞菌、克雷伯桿菌、大腸埃希菌、不動桿菌、凝固酶陰性葡萄球菌等。第17頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期

9、四2. 耐藥菌株多見，呈交叉或多重耐藥或泛耐藥原因：耐藥基因突變、質(zhì)粒轉(zhuǎn)移交叉耐藥多重耐藥泛耐藥第18頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四醫(yī)院內(nèi)常見耐藥菌株有:耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）、耐萬古霉素的腸球菌、痢疾志賀菌和綠膿桿菌等；白假絲酵母菌；耐藥病毒株：HBV、 HIV、流感病毒、人巨細(xì)胞病毒等。第19頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四3 .非發(fā)酵革蘭氏陰性桿菌和真菌感染呈上升 趨勢原因：非發(fā)酵革蘭陰性菌分離率低；真菌感染危險因素 假單胞菌屬、不動桿菌屬、產(chǎn)堿桿菌屬、莫拉菌屬、黃桿菌屬等；白假絲酵母菌、新型隱球菌、霉菌、卡氏肺孢子菌等 。

10、 4.病原體抵抗力較強(qiáng)原因：對消毒劑的選擇壓力第20頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四三 醫(yī)院感染的來源 醫(yī)院感染的感染源多為內(nèi)源性即從自身獲得的感染，少數(shù)為外源性感染。 1. 病原從自身獲得：微生物來自病人自身，也稱內(nèi)源性感染。內(nèi)源性感染的微生物常常是人體固有的正常菌群 。侵襲性操作、廣譜抗生素、免疫抑制劑、激素、化療藥物、創(chuàng)傷等。第21頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四2病原從他人獲得：微生物感染來源于醫(yī)院病人、醫(yī)務(wù)人員。病人間、病人與醫(yī)務(wù)人員間通過接觸而感染，其中經(jīng)手傳播的作用很大。高?？剖裔t(yī)護(hù)人員、兒童，多重耐藥不動桿菌和MRSA的患者或攜帶

11、者。第22頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四3病原從醫(yī)院環(huán)境獲得：由于接觸污染的環(huán)境而獲得感染，稱環(huán)境感染?；颊哐骸Ⅲw液、分泌物、排泄物污染空氣、水、醫(yī)療用具、儀器設(shè)備等。第23頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四四 醫(yī)院內(nèi)感染的感染途徑醫(yī)院感染途徑多數(shù)是通過接觸感染，主要是通過侵入性檢查和治療引起 （一）醫(yī)院內(nèi)感染的主要感染部位：肺部感染，尿路感染，手術(shù)傷口感染，胃腸道感染。第24頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四（二）不同感染部位的傳播途徑1. 肺部感染（1）病人口咽部微生物吸入（2）含細(xì)菌氣溶膠的吸入（3）其它部位感染的血

12、源性播散第25頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四2. 尿路感染 多為G-，以內(nèi)源性的腸道桿菌和外源性的洋蔥假單胞菌多見，細(xì)菌主要經(jīng)導(dǎo)尿管等器械進(jìn)入（導(dǎo)尿管消毒不徹底，皮膚消毒不徹底、醫(yī)務(wù)人員手不清潔、導(dǎo)尿管留置時間長）。第26頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四3. 手術(shù)傷口感染 金黃色葡萄球菌、 G-桿菌、綠膿桿菌，多通過醫(yī)務(wù)人員手、敷料、消毒液、醫(yī)療器械、空氣感染。4. 胃腸道感染 沙門菌、志賀菌、致病性大腸桿菌、耶爾森菌、輪狀病毒等。第27頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四5. 血管內(nèi)感染 包括靜脈插管引起的感染和由輸液劑引

13、起的感染。靜脈插管：金黃色葡萄球菌輸液劑： G-桿菌，克雷伯菌、腸桿菌屬及沙雷菌屬，HIV,HBV,HCV第28頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四五 醫(yī)院內(nèi)感染的診斷原則1. 對有明確潛伏期的感染性疾病，自入院的第1天起，超過平均潛伏期后發(fā)生的感染為醫(yī)院感染，潛伏期不明確者，一般認(rèn)為入院后48h發(fā)生的感染為醫(yī)院感染。第29頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四2.病人出院后發(fā)生的感染，認(rèn)定與住院有直接關(guān)系者。3.慢性感染性疾病在醫(yī)院急性發(fā)作，若發(fā)現(xiàn)新的病原體，為醫(yī)院感染。第30頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四六 醫(yī)院內(nèi)感染常見病原

14、微生物(一)、細(xì)菌1.葡萄球菌(1)金黃色葡萄球菌 引起的感染疾病有癤、癰、膿包病、燒傷感染、咽炎、扁桃體炎、肺炎、骨髓炎、敗血癥等。MRSA:在醫(yī)院嬰兒室、重癥監(jiān)護(hù)病房及燒傷病房等常引起嚴(yán)重感染，且為多重耐藥.第31頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四(2) 凝固酶陰性的葡萄球菌(CNS)：這類葡萄球包括表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、人葡萄球菌、頭葡萄球菌、溶血葡萄球菌。引起的感染疾病有菌血癥、敗血癥、皮膚感染、尿路感染、心內(nèi)膜炎、呼吸道感染等。與侵襲性操作相關(guān)，新生兒ICU及免疫力低下患者人群易于感染的病原第32頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四2

15、克雷伯菌屬：為革蘭氏陰性小桿菌。該菌廣泛存在于自然界的水和土壤中，也是人和動物腸道及上呼吸道的正常菌群。 ICU最常見的條件致病菌，可引起肺炎、尿道感染、菌血癥等。易感因素為糖尿病、腫瘤患者、抗生素應(yīng)用、全身麻醉、年老體弱、嬰幼兒。第33頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四3. 大腸埃希菌：普通大腸桿菌在有些情況下可成為條件致病菌，在醫(yī)院感染中占重要地位，尤其在尿道系統(tǒng)院內(nèi)感染中，大腸桿菌占第一位?？梢鹉蚵犯腥?、腹瀉、菌血癥等。4. 沙雷菌屬 來源于腸道，可引起尿路感染、肺炎、創(chuàng)傷感染、腦膜炎、敗血癥等。第34頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四5.綠

16、膿桿菌：在醫(yī)院環(huán)境廣泛存在，尤其是潮濕的環(huán)境。醫(yī)療用器械如霧化器、氧氣濕化瓶、墻式氧氣吸人器連接口也經(jīng)常會污染該菌，甚至蒸餾水、季銨鹽類、洗必泰等消毒液中也存在銅綠假單胞菌污染。在正常人腸道、呼吸道均可存在銅綠假單胞菌 ，常引起燒傷感染、肺炎、尿路感染、傷口感染、敗血癥等。分布潮濕環(huán)境、抵抗力強(qiáng)、致病力強(qiáng)，生物被膜感染上升，且廣泛耐藥。是指細(xì)菌粘附于接觸表面，分泌多糖基質(zhì)、纖維蛋白、脂質(zhì)蛋白等，將其自身包繞其中而形成的大量細(xì)菌聚集膜樣物。 第35頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四6. 不動桿菌屬 寄居于人皮膚、黏膜、鼻咽腔、胃腸道、泌尿道，可引起肺炎、傷口感染、敗血癥等。

17、鮑曼不動桿菌（發(fā)病率，耐藥率上升，有資料報道從1999年-2008年，鮑曼不動桿菌對亞胺培南（新型-內(nèi)酰胺類抗生素 ）的耐藥率從10.0%上升為47.9%。第36頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四7.嗜麥芽寡養(yǎng)（窄食）單胞菌，分離率在非發(fā)酵菌中僅次于銅綠假單胞菌和鮑曼氏不動桿菌，對多種抗生素耐藥，主要引起肺部感染。8. 結(jié)核桿菌第37頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四9.非典型分枝桿菌龜型分枝桿菌和膿腫分枝桿菌（肺部慢性感染，外傷感染、中耳炎、皮膚軟組織感染，特別是術(shù)后易繼發(fā)感染。 ）鳥復(fù)合分枝桿菌 （MAC）:肺部慢性感染偶發(fā)分枝桿菌（為復(fù)合菌群，

18、可導(dǎo)致人的局部感染和肺部病變，對常規(guī)抗結(jié)核藥物均耐受）恥垢分枝桿菌:術(shù)后傷口感染第38頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四10.副傷寒沙門菌、鼠傷寒沙門菌：動物和人的腸道，常引起傷寒鼠傷寒沙門氏菌是近年來引起醫(yī)院感染常見病原體，尤其是嬰兒室和兒科病房更為多見，甚至造成該菌的院內(nèi)感染暴發(fā)流行。11. 溶血性鏈球菌：A群鏈球菌第39頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四12. 厭氧菌：擬桿菌屬、消化鏈球菌屬、產(chǎn)氣莢膜梭菌抵抗力下降下引起感染：造成機(jī)體抵抗力下降的全身性疾病局部組織缺血、缺氧、感染女性盆腔手術(shù)、胃腸手術(shù)或外傷第40頁，共76頁，2022年，5月2

19、0日，1點(diǎn)54分，星期四(二)、病毒1. HAV 糞口途徑，食物和飲水2. HBV 輸血傳播、體液傳播、母嬰傳播、消化道傳播、接觸傳播3 .HCV 輸血傳播、體液傳播、母嬰傳播第41頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四4 .輪狀病毒 糞口途徑，6歲2歲的嬰幼兒多發(fā)5. 柯薩奇病毒 糞口途徑，新生兒6 .人類免疫缺陷病毒 性傳播、輸血傳播、母嬰傳播7. 鼻病毒、流感病毒、帶狀皰疹病毒、水痘病毒等。第42頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四(三)、真菌白色念珠菌（外陰炎、陰道炎）：國內(nèi)外報道，白色念珠菌尿發(fā)生率可高達(dá)50%。霉菌：以肺部曲霉菌病最為多見。毛霉

20、感染多繼發(fā)于糖尿病或其他慢性消耗性疾病?？ㄊ戏伟合忍煨垣@得性免疫缺陷及免疫抑制患者易感，可致肺部感染，耐藥。新型隱球菌：肺炎、膿腫等。(四)、原蟲卡氏肺囊蟲第43頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四七 醫(yī)院環(huán)境微生物的分布及衛(wèi)生學(xué)意義1. 空氣醫(yī)院特有的致病菌:細(xì)菌類病毒類真菌類主要分布于候診室、門診廳、病房、手術(shù)室等。第44頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四2. 手：門把手、電話筒、自來水龍頭、化驗(yàn)單3. 醫(yī)療用品及環(huán)境（1）醫(yī)療器械（2）醫(yī)藥用品（3）手術(shù)環(huán)境：手術(shù)室空氣污染、手術(shù)者手的污染、手術(shù)器械、敷料的污染第45頁，共76頁，2022年，

21、5月20日，1點(diǎn)54分，星期四4. 周圍環(huán)境：日常生活用品，如門把手、地板、電話柄、床單、被褥、坐便器、水龍頭開關(guān)等5 .水和食品第46頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四八、醫(yī)院環(huán)境微生物檢驗(yàn)及衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(一)醫(yī)院環(huán)境微生物常規(guī)監(jiān)測醫(yī)院環(huán)境消毒滅菌及其效果評價壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測紫外線消毒效果醫(yī)療器械滅菌效果監(jiān)測醫(yī)院環(huán)境衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測（空氣、物體表面、手）各類醫(yī)療用品消毒、滅菌后監(jiān)測使用中消毒劑和無菌器械保存液檢測第47頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四（一）醫(yī)院環(huán)境微生物的檢測1 空氣（1）醫(yī)院空氣微生物采樣 自然沉降法或氣流撞擊法（2）醫(yī)院空氣微生物

22、評價標(biāo)準(zhǔn)菌落總數(shù)為700-1800cfu/m3，則存在空氣污染的可能。手術(shù)室內(nèi)要求菌落總數(shù)35cfu/m3。第48頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四2 .物體表面細(xì)菌污染的檢測物體表面受污染不均勻，血液、膿汁、污物直接沾染到物體表面，則受污染嚴(yán)重。因此，一件物體需采集數(shù)份標(biāo)本，才能真實(shí)地反映污染情況。物體表面微生物的檢測方法：涂抹法第49頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四對桌、椅、地、墻、門、金屬、玻璃等物體表面，用內(nèi)徑為5cm5cm的滅菌規(guī)格板放于物體表面，用浸有無菌生理鹽水的棉拭子，在規(guī)格板內(nèi)橫、豎往返各涂5次，并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子，連續(xù)采樣14個規(guī)

23、格板面積，剪去手接觸棉拭部分，將棉拭子放入裝有l(wèi)0 ml采樣液的試管內(nèi)。對于有凹面或小型物體，則采用棉拭子直接涂抹物體方法采樣，采樣后將每個采樣管振蕩約l min，10倍遞次稀釋，對每個稀釋度分別取l ml轉(zhuǎn)入滅菌平皿內(nèi)（ 2個平行樣），以平板計數(shù)法計數(shù)。第50頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四菌落計數(shù)及報告方法（257頁）物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)計算公式：第51頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四3 醫(yī)務(wù)人員手細(xì)菌污染的檢測：檢測方法：采樣時，用浸濕滅菌生理鹽水的棉拭子，在左、右手的每個掌側(cè)面來回涂抹各兩次(一只手涂擦面積約30cm2)，然后將棉拭子放入

24、l0ml無菌生理鹽水管內(nèi)，搖勻后作10倍遞次稀釋。每個稀釋度分別取1ml放入滅菌平皿內(nèi)（平行作兩塊平板），用普通營養(yǎng)瓊脂傾注培養(yǎng)。第52頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四4 醫(yī)療用品：涂抹法被采面積100cm2者，取100cm25 使用中消毒劑與無菌器械保存液測定使用的消毒液要加相應(yīng)的中和劑以中和被檢消毒液的殘效作用。 第53頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四（二）醫(yī)院感染微生物檢測1.常見醫(yī)院感染部位的微生物學(xué)檢驗(yàn)臨床微生物樣本采集采集方法：對感染病例應(yīng)在抗菌藥物使用前及時采集標(biāo)本，已用抗菌藥物者需停藥24-72小時后采樣；混有正常菌群的標(biāo)本，不宜

25、置于肉湯培養(yǎng)基中送檢；采集足夠量的標(biāo)本；嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。第54頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四判定不符合要求的標(biāo)本：運(yùn)送培養(yǎng)基不合適，如厭氧的按需氧標(biāo)本運(yùn)送；運(yùn)送時間過長；標(biāo)本容器標(biāo)志不清，未貼或貼錯標(biāo)簽；有明顯被污染的標(biāo)本，拭子上標(biāo)本已干；與標(biāo)本不符合，如痰標(biāo)本主要是唾液成分；標(biāo)本使用了固定劑或防腐劑；標(biāo)本量不夠。第55頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四病原體分離培養(yǎng)鑒定病原體藥物敏感性試驗(yàn)定性指標(biāo)：耐藥(R)、中度敏感(I)和敏感(S);定量指標(biāo)：MIC MBC第56頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四抗菌藥物敏感性試驗(yàn)定

26、性（紙片瓊脂擴(kuò)散法,即Kirby-Bauer法）純化菌落：在血平板、麥康凱等分離純化出單個菌落菌液制備：挑取數(shù)個菌落，用生理鹽水將菌液濃度調(diào)整至0.5麥?zhǔn)蠁挝唬?.01075.0108cfu/ml）；涂布MH（Mueller-Hinton agar plate ）平板：用棉簽沾取稀釋好的菌液均勻涂布3次，平板內(nèi)緣再涂抹一次，即涂滿平板；貼含藥紙片：用無鑷子將藥片緊貼于瓊脂表面，紙片中心間 24mm，距內(nèi)緣 15mm；培養(yǎng)1824h，根據(jù)抑菌圈直徑作出敏感、耐藥、中介。定量（MIC、MBC）手工或儀器分析第57頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四大腸桿菌在麥康凱平板上為紅色菌

27、落血平板主要培養(yǎng)鏈球菌等需氧菌第58頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四以肺炎鏈球菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)為例肺炎鏈球菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)第59頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四2.醫(yī)院感染暴發(fā)時的微生物學(xué)檢驗(yàn)樣本采集種類臨床樣本環(huán)境樣本（手、空氣、物體表面）病原體分離鑒定病原體同源性檢測第60頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四病原體分型方法表型分型法（血清學(xué)、噬菌體等分型）分子分型法（質(zhì)粒圖譜分析方法）臨床分離株及質(zhì)控株質(zhì)粒提取過程（具體見實(shí)驗(yàn)六部分）質(zhì)粒提取物電泳質(zhì)粒酶切電泳圖譜分析第61頁，共76頁，2022年，5月20日，

28、1點(diǎn)54分，星期四例2 1996年在解放軍某醫(yī)院外科病區(qū)，從6名患者的血液、大靜脈插管、腹腔引流液中分離出14株綠膿假單胞菌，血清型分型皆屬同型。用單引物PCR指紋圖譜分型方法，指紋圖譜完全相同，判定此次醫(yī)院感染由綠膿假單胞菌引起。第62頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四嬰兒室腸道致病菌監(jiān)測流程采樣時間：一月一次采樣面積 100cm2涂抹采樣：將涂抹后拭子置于乳糖膽鹽采樣管中。增菌培養(yǎng)：乳糖膽鹽采樣管37 ，培養(yǎng)1824h。轉(zhuǎn)種：渾濁的接種SS或伊紅美藍(lán)平板結(jié)果判定：不得檢出腸道致病菌第63頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四血液透析水和透析液染菌量監(jiān)

29、測流程樣本采集：透析用水在進(jìn)入透析機(jī)位置收集；透析液在進(jìn)入透析器位置收集。樣本接種、培養(yǎng)、菌落計數(shù)方法同上。標(biāo)準(zhǔn)：菌落總數(shù)200cfu/ml，并不得檢出致病微生物。第64頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四（二）醫(yī)院環(huán)境微生物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)1.各類環(huán)境空氣、物體表面、醫(yī)務(wù)人員手的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：第65頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四第66頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四2 致病性微生物限定標(biāo)準(zhǔn)：不得檢出乙型溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌及其他致病性微生物。在可疑污染情況下進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)的檢測。 母嬰同室、早產(chǎn)兒室、嬰兒室、新生兒及兒科病房的物體表面和醫(yī)護(hù)人員手上，不得檢出沙門氏菌。 第67頁，共76頁，2022年，5月20日，1點(diǎn)54分，星期四3醫(yī)療用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(1)進(jìn)入人體無菌組織、器官或接觸破損皮膚、粘膜的醫(yī)療用品必須無菌。(2)接觸粘膜的醫(yī)療用品細(xì)