常見(jiàn)血紅蛋白電泳圖譜和臨床應(yīng)用培訓(xùn)課件

1、血紅蛋白的結(jié)構(gòu)血紅蛋白是由4條多肽鏈（2對(duì)）和4個(gè)可以結(jié)合鐵和氧氣的血紅素組成血紅蛋白的結(jié)構(gòu)血紅蛋白是由4條多肽鏈（2對(duì)）和4個(gè)可以結(jié)合鐵血紅蛋白電泳的檢測(cè)一、原理：Hb中的珠蛋白和其他蛋白質(zhì)一樣為兩性電解質(zhì)，在不同的緩沖液中可帶正或負(fù)電荷，在電場(chǎng)中向陰極或陽(yáng)極移動(dòng)，由于不同的蛋白質(zhì)之間其等電點(diǎn)、分子大小、形態(tài)及所帶電荷不同，其移動(dòng)速率不同（電泳遷移率不同），在一定的支持介質(zhì)中可借以分離。二、儀器：Helena BioSciences SAS-3樣本分析系統(tǒng)(英國(guó)海倫娜生物科學(xué))三、操作：（一）血紅蛋白液的制取1、取一份紅細(xì)胞（或全血）加十份生理鹽水洗滌，3000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，棄鹽水 2

2、、洗滌三次后，棄鹽水3、按壓積紅細(xì)胞體積加等體積蒸餾水，搖勻，再加1/2體積的四氯化碳震蕩1-3分鐘，3000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，吸取上層血紅蛋白溶液（此濃度約為10%）待用（二）儀器操作1、開(kāi)機(jī)2、吸取30ul血紅蛋白溶液加入樣本盤3、取兩片點(diǎn)樣刀鋒放在自動(dòng)加樣器2，14號(hào)位，點(diǎn)樣的時(shí)候把梳子從14號(hào)的位置跳至12號(hào)位置4、電泳槽內(nèi)加界面液（3100）5、揭掉電泳片表面的保護(hù)膜，放入電泳片，避免氣泡，擦掉四周多余液6、用BLOTC吸去電泳片上多作的緩沖液7、放好碳棒，蓋好蓋子，按下箭頭選擇“”為測(cè)試項(xiàng)目再按“START”進(jìn)入程序再按“Enter”開(kāi)始電泳，約18分鐘，儀器示警，按“STOP”

3、結(jié)束操作，打開(kāi)蓋子，鏟掉鹽橋8、將電泳片放在染色架上，放入染色槽中，按下箭頭選擇“START”為測(cè)試項(xiàng)目約15分鐘，儀器示警，表示已完成操作，按下“STOP”結(jié)束操作9、拿出電泳片即可掃描血紅蛋白電泳的檢測(cè)一、原理：Hb中的珠蛋白和其他蛋白質(zhì)一樣為正常的血紅蛋白電泳帶正常成人：HbA(22): 94.5%-98.5% HbF(22): 1% HbA2(22): 2.5%-3.5% Hb A: a2b2Hb F: a2g2Hb A2:a2d2 正常的血紅蛋白電泳帶正常成人：HbA(22): 正常新生兒：HbA(22): 12%-40% HbF(22): 6%-93% HbA2(22):0.1%-1.0%Hb A: a2b2Hb F: a2g2Hb A2:a2d2 正常新生兒：HbA(22): 12%-40%Hb 三、HbH病三、HbH病四、Hb Barts胎兒水腫綜合征四、Hb Barts胎兒水腫綜合征異常Hb病常見(jiàn)有HbJ, HbK, HbG和HbD