CRP及臨床應(yīng)用課件

1、C-反應(yīng)蛋白及臨床應(yīng)用 祥云縣醫(yī)院檢驗(yàn)科 王在銀Protein Structure CRP結(jié)構(gòu) CRP介紹由5個(gè)結(jié)構(gòu)相同的未糖基化多肽亞單位連接而成，其亞單位由187個(gè)氨基酸組成，電鏡下呈環(huán)狀對稱的五面體，不溶于水，結(jié)晶為菱形，可能被硫酸鈉沉淀，不耐熱(5630min即被破壞)其電泳遷移率在 和N蛋白正常. CRP介紹在急性炎癥病人血清中出現(xiàn)可以結(jié)合肺炎球菌細(xì)胞壁C-多糖的蛋白質(zhì)(1941年發(fā)現(xiàn))，命名C-反應(yīng)蛋白(C-reactiveprotein,CRP)CRP可以激活補(bǔ)體和加強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬而起調(diào)理作用，從而清除入侵機(jī)體的病原微生物和損傷，壞死，凋亡的組織細(xì)胞，在機(jī)體的天然免疫過程中發(fā)揮

2、重要的保護(hù)作用。C反應(yīng)蛋白的生理和生化 在細(xì)胞因子IL-6家族誘導(dǎo)下，CRP在肝中合 成迅速。 正常合成率為 l10 mgd，急性炎癥時(shí)每 天合成超過 lg/d。 在急性相反應(yīng)高峰時(shí)肝大量合成蛋白，其中 20是合成CRP。 當(dāng)IL-6刺激物缺乏時(shí)，在 24 h內(nèi)合成率降 至正常。 循環(huán)中CRP半衰期約19h，但一旦它與配體結(jié) 合，可快速的被清除。CRP的生物學(xué)功能-機(jī)理結(jié)合配體的CRP激活下列生物系統(tǒng)，導(dǎo)致配體的消除：CRP對補(bǔ)體系統(tǒng)的激活.CRP結(jié)合IgGFcR，增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞的活性。CRP的調(diào)理性質(zhì)，調(diào)理即刺激細(xì)胞吞噬作用。CRP和血小板激活因子(PAF)結(jié)合抑制PAF刺激的血小板聚集。

3、CRP的生物學(xué)功能-機(jī)理CRP具有多效性的作用。 當(dāng)抑制干擾素的合成時(shí) ，CRP可誘導(dǎo)IL-1受體拮抗劑而增加抗炎細(xì)胞因子IL-10的釋放 . CRP也可誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)。 CRP向上-調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子的表達(dá)，刺激許多細(xì)胞釋放IL-8， 增加血漿纖維蛋白酶原催化劑抑制劑-1的表達(dá)和活性、增加IL-1, IL-6, IL-18, 和腫瘤壞死因子的釋放. 方法靈敏度參考獻(xiàn)試管內(nèi)沉淀試驗(yàn)- JExpMed1930;52561毛細(xì)管內(nèi)沉淀試驗(yàn)1020mg/LAmJMed1950;8445改良平板雙擴(kuò)散法1020mg/LIntArchAllergy1962改良瓊脂柱擴(kuò)散法3.0mg/LProcSocEx

4、pBiol1955改良單擴(kuò)散法1.0mg/L ActaPatholMicrobiolScand瓊脂糖凝膠電泳法1.0mg/LClinChimActa1969放射電免疫擴(kuò)散法10g/LJClinLabInvest1973補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)0.6mg/LProcSocExpBiol1954膠乳凝集試驗(yàn)1.0mg/LNature(London)1961高敏乳膠增強(qiáng)濁度 0.35mg/ml Dade Germany2000熒光抗體法 Nature(London)1961放射免疫測定法 3g/L JLabClinMed1976檢測方法 CRP檢測方法 -免疫濁度法 可溶性CRP-Ag與可溶性抗CRP-Ab反應(yīng)

5、,形成可見的網(wǎng)絡(luò)狀沉淀性IC復(fù)合物點(diǎn).IC復(fù)合物對光具有散射作用,使溶液具有肉眼尚不可見的濁度。在被測樣品中加抗血清后一定時(shí)間,測定反應(yīng)系統(tǒng)散射光強(qiáng)度或濁度變化,可對被檢物及其濁度加以檢測。根據(jù)儀器的光學(xué)系統(tǒng),濁度法分為散射濁度法和透射濁度法兩類。許多自動(dòng)化生化分析儀和自動(dòng)化免疫測定儀都可CRP測定項(xiàng)目。CRP檢測方法 -膠乳凝集試驗(yàn)(LAT)將強(qiáng)化的兔抗CRP抗體固定于膠乳微粒上。加入被測樣品后與CRP在3分鐘內(nèi)形成肉眼可見的凝集物。膠乳強(qiáng)化濁度法的靈敏度優(yōu)于傳統(tǒng)濁度法,試劑穩(wěn)定性佳。檢測方法 - 膠乳增強(qiáng)試驗(yàn)（shCRP）：常規(guī)CRP檢驗(yàn)方法可在感染或組織損傷時(shí)檢測出CRP10mg/L。該

6、檢測方法具有較高的靈敏度。超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）是使用高敏感的檢測方法，即檢測方法具有檢測到0.3mg/L的CRP的能力.這個(gè)水平（0.110mg/L）的C反應(yīng)蛋白又被稱為超敏C反應(yīng)蛋白（hsCRP）。 CRP檢測的評估1、半定量：膠乳凝集試驗(yàn)等已棄用。2、定量：散射免疫比濁法、透射免疫比濁法：是目前常用方法。檢測限度為5150 mgL ，CV5% 。膠乳增強(qiáng)試驗(yàn)-shCRP檢測：很大程度提高了敏感度。酶免疫分析和熒光免疫分析：有潛在的靈敏度優(yōu)勢。膠乳增強(qiáng)試驗(yàn)-shCRP檢測方法很大程度提高了敏感度。CRP檢測對標(biāo)本的采集也無特殊要求。高濃度的類風(fēng)濕因子可產(chǎn)生CRP假性升高。CRP篩查

7、的費(fèi)用遠(yuǎn)小于其他心血管檢查的費(fèi)用。臨床意義 器質(zhì)性疾病的篩選 急性或慢性炎癥如伴有細(xì)菌感染。自身免疫或免疫復(fù)合物病。組織壞死和惡性腫瘤。臨床意義感染的診斷與鑒別CRP在細(xì)菌感染發(fā)生后68h即開始升高，2448h達(dá)到高峰，在感染消除后其含量急驟下降，一周內(nèi)可恢復(fù)正常。CRP在病毒感染時(shí)無顯著升高。革蘭陰性感染：可發(fā)生最高水平的CRP，有時(shí)高達(dá) 500 mgL。革蘭陽性菌感染和寄生蟲感染：通常引起中等程度的反應(yīng)，典型的是在100 mgL 左右。病毒感染：引起的反應(yīng)最輕，通常不超過50 mgL，極少超過 100 mgL。在細(xì)菌感染的急性期，CRP顯著升高在病毒感染時(shí)CRP水平正?；蜉p微升高臨床意義C

8、反應(yīng)蛋白是心血管疾病較強(qiáng)的危險(xiǎn)指標(biāo)，C反應(yīng)蛋白水平可預(yù)測將來心肌梗塞及中風(fēng)的危險(xiǎn)性。C反應(yīng)蛋白含量2.1mg/L的人與1mg/L者比較:將來發(fā)生心肌梗塞的危險(xiǎn)性為后者的2.9倍；發(fā)生缺血性中風(fēng)的危險(xiǎn)性為后者的1.9倍；發(fā)生外周動(dòng)脈血管性疾病的危險(xiǎn)性為后者的4.1倍。在痛疼開始后數(shù)小時(shí)內(nèi)，CRP升高，34d達(dá)高峰，在CK-MB回到正常后7-10d也降至正常。 臨床意義用于心血管疾病危險(xiǎn)性評估時(shí)： 一般認(rèn)為，hs-CRP1.0mg/L為低危險(xiǎn)性；1.03.0mg/L為中度危險(xiǎn)性；P3 mg/L為高度危險(xiǎn)性。部分研究報(bào)道CRP3.0mg/ L作為預(yù)測心臟意外發(fā)生指標(biāo)的敏感性為90%，特異性為82%。

9、臨床意義自身免疫或免疫復(fù)合物病系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多肌炎、系統(tǒng)性硬化癥CRP無明顯改變，所以可用于與風(fēng)濕性疾病鑒別。若存在發(fā)熱為并發(fā)感染而非疾病的惡化。臨床意義-癌癥已升高或正在升高的CRP預(yù)示著不良的預(yù)后及常提示轉(zhuǎn)移。結(jié)腸癌是導(dǎo)致死亡人數(shù)第二多的癌癥。 研究顯示，血液C-反應(yīng)蛋白含量最高的那些人患結(jié)直腸癌的危險(xiǎn)，是C-反應(yīng)蛋白含量最低者的兩倍.臨床意義-抗生素的治療監(jiān)測 系列血漿CRP的測定，可用來作為下列情況的治療監(jiān)測： 在許多感染時(shí)最有效使用抗生素治療。根據(jù)CRP水平的變化來決定抗炎藥物的劑量。在CRP下降至正常時(shí)，中 斷抗菌素治療。在高危人群缺少微生物學(xué)診斷時(shí)，為抗生素治療的指引。臨床意義

10、-抗生素的治療監(jiān)測 臨床意義-外科有研究顯示：應(yīng)用ROC曲線評價(jià)血清CRP、白細(xì)胞總數(shù)和中性粒細(xì)胞對急性闌尾炎的診斷效率由高到低排序?yàn)镃RP白細(xì)胞總數(shù)中性粒細(xì)胞，針對老年患者排序?yàn)镃RP中性粒細(xì)胞白細(xì)胞總數(shù)臨床意義-內(nèi)科 肺炎: CRP100mg/L，強(qiáng)烈提示細(xì)菌感染，如化膿性支氣管炎或肺炎;典型的病毒性肺炎不會(huì)超過50mg/L。 心血管病，在痛疼開始后數(shù)小時(shí)內(nèi)，CRP升高， 3-4d達(dá)高峰，在CK-MB回到正常后7-10d也降至正常。 代謝綜合征 代謝綜合征分組，根據(jù)CRP水平可將為低危險(xiǎn)組，3 mg/臨床意義-婦產(chǎn)科 盆腔炎和子宮附件炎. CRP值升高 盆腔腫塊和子宮肌瘤通常多為陰性。 診

11、斷胎膜早破宮內(nèi)感染. 胎膜早破時(shí)，如母親CRP在產(chǎn)前6-19h超過50mg/L可作為出現(xiàn)AIS的標(biāo)準(zhǔn)；產(chǎn)后第一天出現(xiàn)的AIS的CRP將比正常分娩時(shí)高出2-3倍。 無并發(fā)癥的CT和NG感染不會(huì)引起CRP升高。 但擴(kuò)散到盆腔可引起急時(shí)相反應(yīng)。臨床意義-兒科新生兒濃毒血癥:出生3天前CRP10mg/L表示感染.如果CRP在24h內(nèi)沒有超過10mg/L，多無新生兒感染.小兒發(fā)熱 : 患病超過12h，CRP顯著40mg/L，ESR顯著30mm/h應(yīng)關(guān)注為細(xì)菌性感染。腦膜炎 : CRP20mg/L提示為細(xì)菌感染的可能；100mg/L時(shí)具有細(xì)菌感染診斷價(jià)值。結(jié)腦CRP在20-60 mg/L。成功的治療可使CRP在一周內(nèi)降至正常。 小 結(jié)CRP是一五球體結(jié)構(gòu)的高度保守的急時(shí)相蛋白。為宿主先天性免疫應(yīng)答的一部分，在機(jī)體平衡和自身保護(hù)中起著重要貢獻(xiàn)。血CRP濃度