利用紫外光譜測(cè)定黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)

1、一、利用紫外光譜測(cè)定黃酮類化合物的構(gòu)造大部分黃酮類化合物在甲醇中的紫外汲取光譜由兩個(gè)主要汲取帶構(gòu)成。出此刻300?400nm之間的汲取帶稱為帶I,出此刻240?280nm之間的汲取帶稱為帶口。不一樣樣種類的黃酮化合物的帶I或帶n的峰位、峰形和汲取強(qiáng)度不一樣樣，因此從紫外光譜可以推測(cè)黃酮類化合物的構(gòu)造種類。構(gòu)造種類峰位（nm）組內(nèi)差異組間差異帶I帶n（峰位）（峰強(qiáng)）黃酮310?350250?280帶I不一樣樣、H皆強(qiáng)黃酮醇350?385250?280異黃酮310?330（肩峰）245?275帶n不一樣樣I弱H強(qiáng)二氫黃酮（醇）300?330（肩峰）275?295查耳酮340?390230?270（

2、低強(qiáng)度）橙酮380?430230?270帶I不一樣樣I強(qiáng)H弱（低強(qiáng)度）當(dāng)向黃酮類化合物的甲醇（或乙醇）溶液中分別加入甲醇鈉（NaOMe）、乙酸鈉（NaOAc）、乙酸鈉-硼酸（NaOAc-H3BO3）、三氯化鋁或三氯化鋁-鹽酸（A1C13/HC1）試劑能使黃酮的酚羥基離解或形成絡(luò)合物等，以致光譜發(fā)生變化。據(jù)此變化可以判斷各樣化合物的構(gòu)造，這些試劑對(duì)構(gòu)造擁有診療意義，稱為診療試劑。黃酮和黃酮醇類（一）黃酮、黃酮醇類在甲醇中的UV光譜特色黃酮或黃酮醇的帶I是由B環(huán)桂皮?；到y(tǒng)的電子躍遷所惹起的汲取，帶II是由A環(huán)的苯甲?；到y(tǒng)的電子躍遷所惹起的汲取。黃酮和黃酮醇的UV光譜圖形相像，僅帶I地點(diǎn)不一樣樣

3、，黃酮帶I位于304?350nm,黃酮醇帶I位于358?385nm。利用帶I的峰位不一樣樣，可以差異這兩類化合物。黃酮、黃酮醇的B環(huán)或A環(huán)上取代基的性質(zhì)和地點(diǎn)不一樣樣將影響帶I或帶n的峰位和形狀。比方，7和4，位引入羥基、甲氧基等含氧取代基，可惹起相應(yīng)汲取帶向紅位移。又如3-或5-位引入羥基，因能與C4=O形成氫鍵締合，前者使帶I向紅位移，后者使帶I、帶H均向紅位移。B環(huán)上的含氧取代基逐漸增加時(shí)，帶I向紅位移值（nm）也逐漸增加，但不能使帶口產(chǎn)生位移。有時(shí)（比方3，4/-位有2個(gè)羥基或2個(gè)甲氧基或亞甲二氧基）僅可能影響帶口的形狀，使帶II歧分為雙峰或1個(gè)主峰（nb位于短波處）和1個(gè)肩峰（sh）

4、或曲折（na位于長(zhǎng)波處）。A環(huán)上的含氧取代基增加時(shí)，能帶口向紅位移，而對(duì)帶I無(wú)影響，或影響甚微（但5-羥基例外）。黃酮或黃酮醇的3-,5-或4-羥基被甲基化或昔化后，可使帶I向紫位移，3-OH甲基化或昔化使帶I（328?357nm）與黃酮的帶I的波長(zhǎng)范圍重疊（且光譜曲線的形狀也相像）,5-OH環(huán)基化使帶I和帶II都向紫位移5?15nm,4，-OH甲基化或昔化，使帶I向紫位移3?10nm。其他地點(diǎn)上的羥基取代對(duì)甲醇中的紫外光譜幾乎沒有影響。|（二）利用診療試劑對(duì)黃酮、黃酮醇類化合物UV光譜的影響檢出羥基地點(diǎn).甲醇鈉（NaOMe），主假如判斷能否有4/-OH,3、4，一二OH或3、3,、4，一三O

5、H。2.乙酸鈉，較為突出的是判斷能否有7-OH。舉例說(shuō)明3.乙酸鈉/硼酸主要判斷A環(huán)或B環(huán)能否有鄰二酚羥基（5,6-二OH除外）。舉例說(shuō)明4.三氯化鋁及三氯化鋁/鹽酸，為判斷有無(wú)鄰二酚羥基，3-OH、5-OH供應(yīng)信息。（三）異黃酮、二氫黃酮和二氫黃酮醇類在甲醇中的UV光譜特色這三類化合物都有苯甲酰系統(tǒng)，而無(wú)桂皮酰構(gòu)造，因此它們的紫外光譜都有強(qiáng)的帶II汲取,異黃酮帶口汲取在245?270nm,而二氫黃酮和二氫黃酮醇的帶II在270?295nm,一般只受A環(huán)的含氧取代基的影響，A環(huán)含氧取代基數(shù)增加，汲取峰向紅位移。（四）利用診療試劑對(duì)異黃酮、二氫黃酮和二氫黃酮醇類化合物的UV光譜的影響判斷羥基地點(diǎn)

6、.甲醇鈉都帶口向紅位移，示A環(huán)上有羥基。如有5,6,7-或5,7,8-三羥基或3，4/-二羥基，則汲取帶將隨擱置的延伸而逐漸衰敗。二氫黃酮、二氫黃酮醇帶口向紅位移的大小取決于能否有游離的5-OH。2.乙醇鈉乙醇鈉使7-羥基異黃酮的帶II向紅位移6?20nm，但6-位有含氧取代基時(shí)，乙醇鈉幾乎不可以使帶口產(chǎn)生挪動(dòng)。4,，5,6,7-四羥基異黃酮的紫外光譜隨時(shí)間延伸而衰敗。乙醇鈉使5,7-二羥基二氫黃酮和5,7-二羥基二氫黃酮醇帶II向紅位移34?37nm,而其相應(yīng)的5-去氧化合物則挪動(dòng)51?58nm。5,6,7-三羥基二氫黃酮的紫外光譜隨時(shí)間延長(zhǎng)而衰敗。3.乙醇鈉/硼酸不可以用NaOAc/H3B

7、O3對(duì)異黃酮、二氫黃酮和二氫黃酮醇類的紫外光譜的影響來(lái)檢查B環(huán)鄰位二羥基，由于它們的B環(huán)與主要發(fā)色團(tuán)缺少有效的共軸。但它們中的A環(huán)有6,7-二羥基時(shí)，加入NaOAc/H3BO3后使帶向紅位移10?15nm。4.三氯化鋁和三氯化鋁/鹽酸異黃酮、二氫黃酮（可能也包括二氫黃酮醇）的A環(huán)如有鄰二羥基（6,7-或7,8-,不包括5,6-）,則帶II在AlCl3中比在AlCl3/HCl中向紅位移11?30nm。有5-羥基的異黃酮，其帶II在AlCl3/HCl存在下與在甲醇中的光譜比較,向紅位移10?14nm，而有5-羥基的二氫黃酮和有5-羥基的二氫黃酮醇類的帶II在相同情況下向紅位移20?26nm。目標(biāo)檢

8、測(cè)：黃酮類化合物的鑒識(shí)與構(gòu)造測(cè)定此刻多依靠于譜學(xué)的綜合解析，而化學(xué)方法和色譜方法已降至協(xié)助地位。未知黃酮類化合物的判斷，多在測(cè)定分子式的基礎(chǔ)上，利用PPC或TLC獲得的Rf值或hRf值與文件比較或解析比較樣品在甲醇溶液中及加入各樣診療試劑后獲得的紫_外及可見光譜進(jìn)行解析。同時(shí)，關(guān)于化合物的顏色反響，以及在提取分別過(guò)程中所表現(xiàn)的行為（如溶解度、酸或堿中的溶解情況、鉛鹽積淀等）也應(yīng)注意解析。但這些方法均有必定局限性，并曾以致得出過(guò)一些錯(cuò)誤結(jié)論。質(zhì)子核磁共振（1HNMR）由于可定量測(cè)定H的個(gè)數(shù)，以及依照質(zhì)子的化學(xué)位移和芬芳?xì)浜酥g的自旋巧合所供應(yīng)的信息（裂分?jǐn)?shù)目及巧合常數(shù)大小），可確定黃酮母核上的取

9、代模式。近出處于儀器分辨率的千錘百煉，加以同核去偶、溶劑位移以及核磁共振技術(shù)的使用，1H-NMR譜的測(cè)定對(duì)解析天然黃酮類化合物的構(gòu)造已經(jīng)成為一種特別重要的手段?？墒钦绱撕笳劦降哪菢?，在黃酮類化合物的1H-NMR譜上，有時(shí)要想的確指認(rèn)每個(gè)信號(hào)其實(shí)不是一件簡(jiǎn)單的事情。比方當(dāng)黃酮類母核的A-環(huán)上只有一個(gè)芬芳?xì)浜藭r(shí)，要想與H-3信號(hào)差異，就是十分困難的問題。解決這種問題，13C核磁共振(13C-NMR)技術(shù)有很大的優(yōu)勢(shì)。加上各樣取代基位移及昔化位移效應(yīng)的發(fā)現(xiàn)，使得圖譜的解析工作大大簡(jiǎn)化。因此，13C-NMR技術(shù)在黃酮類化合物的構(gòu)造判斷中發(fā)揮著越來(lái)越重要的作_用。質(zhì)譜(MS)技術(shù)，特別場(chǎng)解析質(zhì)譜(FD-MS)與迅速原子轟擊質(zhì)譜(