血細胞染色體檢查培訓(xùn)課件

1、血液病診斷要求【內(nèi)容銜接】形態(tài)學(xué)： 骨髓象 骨髓病理活檢免疫學(xué)檢驗： 流式細胞術(shù)（CD抗原）遺傳學(xué)與分子生物學(xué)：染色體、基因臨床資料形態(tài)學(xué)免疫分型遺傳、分生1血細胞染色體檢查10/4/2022血液病診斷要求【內(nèi)容銜接】形態(tài)學(xué)：臨床資料形態(tài)學(xué)免疫分型遺傳血液病診斷要求2血細胞染色體檢查10/4/2022血液病診斷要求2血細胞染色體檢查10/3/2022血液病診斷要求3血細胞染色體檢查10/4/2022血液病診斷要求3血細胞染色體檢查10/3/2022血細胞染色體檢驗【染色體檢驗?zāi)康摹?.白血?。涸\斷、分型 治療方案制定 復(fù)發(fā)監(jiān)測 預(yù)后判斷 舉例：急性早幼粒細胞白血?。∕3型） 90%會出現(xiàn)t（1

2、5，17），形成PML-RARa融合基因。4血細胞染色體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗【染色體檢驗?zāi)康摹?.白血?。涸\斷、分型4血血細胞染色體檢驗5血細胞染色體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗5血細胞染色體檢查10/3/2022血細胞染色體檢驗【染色體檢驗?zāi)康摹?.診斷遺傳性血液病: 血友病-X染色體隱性遺傳 鐮刀狀紅細胞貧血常染色體顯性遺傳 蠶豆病- X染色體6血細胞染色體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗【染色體檢驗?zāi)康摹?.診斷遺傳性血液病:6血血細胞染色體檢驗【染色體】 光鏡下染色體 電鏡下染色體7血細胞染色體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗【染色體】 血細胞染

3、色體檢驗【染色體】8血細胞染色體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗【染色體】8血細胞染色體檢查10/3/202血細胞染色體檢驗【染色體】染色體：雙股DNA長鏈反復(fù)折疊形成 染色體結(jié)構(gòu)展開圖9血細胞染色體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗【染色體】染色體：雙股DNA長鏈反復(fù)折疊形成10血細胞染色體檢查10/4/202210血細胞染色體檢查10/3/2022血細胞染色體檢驗【起始】時間：1960年人物：諾維爾Nowell和亨格福德Hungerford地點：美國費城Philadelphia事件：發(fā)現(xiàn)慢粒特異染色體即Ph染色體（費城染色體）意義：開啟了血液遺傳學(xué)時代，推動了分物發(fā)展。11血細胞

4、染色體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗【起始】時間：1960年11血細胞染色體檢查血細胞染色體檢驗【發(fā)展史】血細胞染色體檢查經(jīng)歷了4個階段12血細胞染色體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗【發(fā)展史】血細胞染色體檢查經(jīng)歷了4個階段12血細胞染色體核型分析技術(shù)一.【染色體非顯帶技術(shù)】(一)原理:骨髓液分裂中期血細胞染色體為對象,根據(jù)形態(tài)特征進行分析，排序，編號在骨髓液中加入秋水仙素，破壞紡錘絲，使細胞停留在分裂中期。然后對細胞進行固定，制片，染色前期中期后期末期13血細胞染色體檢查10/4/2022血細胞染色體核型分析技術(shù)一.【染色體非顯帶技術(shù)】在骨髓液中加一.染色體非顯帶技術(shù)(二)非顯

5、帶染色體命名 中著絲粒染色體 著絲粒 亞中著絲粒染色體.形態(tài)特征 近端著絲粒染色體 隨體：近端著絲粒染色體 短臂的球形小體14血細胞染色體檢查10/4/2022一.染色體非顯帶技術(shù)(二)非顯帶染色體命名14血細胞染色體檢一.染色體非顯帶技術(shù)(二)非顯帶染色體命名 2.染色體識別的指標：染色體相對長度 臂率：短臂（p）與長臂（q）比例 有無隨體 3 染色體分組 15血細胞染色體檢查10/4/2022一.染色體非顯帶技術(shù)(二)非顯帶染色體命名15血細胞染色體檢一.染色體非顯帶技術(shù)(二)非顯帶染色體命名16血細胞染色體檢查10/4/2022一.染色體非顯帶技術(shù)(二)非顯帶染色體命名16血細胞染色體檢

6、一.染色體非顯帶技術(shù)(二)非顯帶染色體命名 3 染色體分組 人類染色體數(shù)目：46條（23對） 根據(jù)染色體識別指標把染色體從小到大編號：1-22號， 并分為AG七組。 17血細胞染色體檢查10/4/2022一.染色體非顯帶技術(shù)(二)非顯帶染色體命名17血細胞染色體檢一.染色體非顯帶技術(shù)(二)非顯帶染色體命名4. 染色體核型：通過顯微攝影技術(shù)給單個細胞中所有染色體拍照并編號分析得到其核型 染色體正常核型：正常男性核型表示：46，XY正常女性核型表示：46，XX正常男性染色體模式圖（非顯帶）18血細胞染色體檢查10/4/2022一.染色體非顯帶技術(shù)(二)非顯帶染色體命名正常男性染色體模式二.染色體常

7、規(guī)顯帶技術(shù)(一)原理：染色體經(jīng)過特殊處理或用熒光染料染色，可是染色體顯示明暗相間的條紋稱顯帶染色體。臨床上最常用的顯帶技術(shù)是G顯帶法，R顯帶法。G帶帶型分析19血細胞染色體檢查10/4/2022二.染色體常規(guī)顯帶技術(shù)(一)原理：染色體經(jīng)過特殊處理或用熒光二.染色體常規(guī)顯帶技術(shù)(二)顯帶染色體命名 顯帶技術(shù)有利于染色體的更好識別，為深入研究染色體異常和基因定位奠定了基礎(chǔ)。 染色體區(qū)：以著絲粒為起始向臂端延伸，依次編號為1區(qū)，2區(qū)，3區(qū)； 染色體帶：染色體上明暗條紋20血細胞染色體檢查10/4/2022二.染色體常規(guī)顯帶技術(shù)(二)顯帶染色體命名20血細胞染色體檢二.染色體常規(guī)顯帶技術(shù)(二)顯帶染色

8、體命名顯帶染色體表示需四項內(nèi)容：染色體號、臂號、區(qū)號、帶號21血細胞染色體檢查10/4/2022二.染色體常規(guī)顯帶技術(shù)(二)顯帶染色體命名21血細胞染色體檢三.染色體核型分析系統(tǒng)自動染色體核型分析系統(tǒng)為臨床提供了簡單、高效的細胞遺傳學(xué)檢測手段。22血細胞染色體檢查10/4/2022三.染色體核型分析系統(tǒng)自動染色體核型分析系統(tǒng)為臨床提供了簡單二.染色體常規(guī)顯帶技術(shù)23血細胞染色體檢查10/4/2022二.染色體常規(guī)顯帶技術(shù)23血細胞染色體檢查10/3/2022四.常規(guī)顯帶技術(shù)的應(yīng)用（一）染色體數(shù)目異常（常見于血液病） 1.多倍體：成倍增加，如三倍體69條 （3n） 2.非整倍體：增減不成倍 亞二

9、倍體（少于46條）- 見于3% ALL 超二倍體（多于46條）- 見于32% ALL 3.嵌合體：多見于先天性異?；颊?。如 45,X/46,XY數(shù)目異常描述：染色體前寫“+”或“-” 表示該整條染色體增加或減少， 如 47,xy,+8 69,XXY24血細胞染色體檢查10/4/2022四.常規(guī)顯帶技術(shù)的應(yīng)用（一）染色體數(shù)目異常（常見于血液?。?shù)四.常規(guī)顯帶技術(shù)的應(yīng)用25血細胞染色體檢查10/4/2022四.常規(guī)顯帶技術(shù)的應(yīng)用25血細胞染色體檢查10/3/2022四.常規(guī)顯帶技術(shù)的應(yīng)用（二）染色體結(jié)構(gòu)異常 原因：染色體斷裂及重排 常見結(jié)構(gòu)異常： 缺失del 倒位inv 易位t 重復(fù)dup 結(jié)構(gòu)異

10、常描述：染色體后寫“+”或“-” 表示染色體部分獲得或缺失。如 46,XY,3p-26血細胞染色體檢查10/4/2022四.常規(guī)顯帶技術(shù)的應(yīng)用（二）染色體結(jié)構(gòu)異常 結(jié)構(gòu)異常描述：染異常核型舉例及練習(xí)46，XY, del 6q47, XX, ? +2146, XY, +18, -2146, XY, inv (3) (q21;q26)46，XY, t (9;11) (q21;q26)27血細胞染色體檢查10/4/2022異常核型舉例及練習(xí)46，XY, del 6q27血細胞染色血細胞染色體檢驗【課堂小結(jié)】 1.了解：血細胞染色體檢驗?zāi)康募鞍l(fā)展史 2.掌握：常見異常核型的表示方法及意義28血細胞染色

11、體檢查10/4/2022血細胞染色體檢驗【課堂小結(jié)】28血細胞染色體檢查10/3/2四.常規(guī)顯帶技術(shù)應(yīng)用常規(guī)顯帶技術(shù)不足之處： 1 只能分析分裂中期細胞 2 染色體質(zhì)量差，顯帶不佳 3 難于識別微小異常（104kb） 4 無法確定的異常分裂像來自哪種細胞29血細胞染色體檢查10/4/2022四.常規(guī)顯帶技術(shù)應(yīng)用常規(guī)顯帶技術(shù)不足之處：29血細胞染色體檢五.染色體原位熒光雜交技術(shù)（FISH）FISH 技術(shù) 是20世紀80年代在，細胞遺傳學(xué)，分子生物學(xué)，免疫學(xué)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的新技術(shù)。工具為“探針”： 標記熒光素，可與目的基因通過堿基互補結(jié)合的一段DNA或RNA片段。檢測對象：分裂中期或分裂間期的細胞

12、30血細胞染色體檢查10/4/2022五.染色體原位熒光雜交技術(shù)（FISH）FISH 技術(shù)30血細五.染色體原位熒光雜交技術(shù)（FISH）原位熒光雜交原理31血細胞染色體檢查10/4/2022五.染色體原位熒光雜交技術(shù)（FISH）原位熒光雜交原理31血五.染色體原位熒光雜交技術(shù)（FISH）Bcr/abl 融合基因陽性46， XY， t（9；22)(q34；q11)32血細胞染色體檢查10/4/2022五.染色體原位熒光雜交技術(shù)（FISH）Bcr/abl 融合基五.染色體原位熒光雜交技術(shù)（FISH）染色體t（3；5）33血細胞染色體檢查10/4/2022五.染色體原位熒光雜交技術(shù)（FISH）染色體t（3；5）33六. 多色熒光原位雜交技術(shù)（FISH）染色體t（3；5）多色