力相關功能基因研究及疫苗開發(fā)和海洋文昌魚繁育與免疫基

1、關于發(fā)布863計劃海洋技術領域遲鈍愛德華氏菌毒力相關功能基因研究及疫苗開發(fā)和海洋文昌魚繁育與免疫基因功能解析關鍵技術研究項目申請指南的通知各有關單位：“十一五”期間，依據(jù)國家中長期科學和技術發(fā)展規(guī)劃綱要(2006-2020)、國家“十一五”科學技術發(fā)展規(guī)劃和863計劃“十一五”發(fā)展綱要，863計劃海洋技術領域的戰(zhàn)略目標是：“深化近淺海、開拓深遠?！保攸c圍繞提高近海資源利用水平和深海戰(zhàn)略性資源的儲備，開發(fā)近海邊際油田、深水油氣田、天然氣水合物和大洋海底固體礦產(chǎn)資源勘探開發(fā)關鍵技術與重大裝備；發(fā)展和完善海洋環(huán)境監(jiān)測技術，特別是深遠海監(jiān)測技術，形成200海里專屬經(jīng)濟區(qū)及西太平洋海洋環(huán)境立體綜合監(jiān)測

2、與監(jiān)控的技術能力；開展深海生物資源的探查、開發(fā)與利用技術研究，研制海洋創(chuàng)新藥物與海洋生物制品等高值產(chǎn)品；建立一批海洋高技術研發(fā)基地,發(fā)展一批海洋前沿技術；實現(xiàn)我國海洋技術從近淺海向深遠海的戰(zhàn)略性轉(zhuǎn)移。圍繞“十一五”戰(zhàn)略目標，863計劃海洋技術領域在項目和專題兩個層次進行部署。項目分為重大項目和重點項目。重大項目以重大產(chǎn)品開發(fā)和重大技術體系建設為目標，重點項目以突破核心技術、開發(fā)單項戰(zhàn)略產(chǎn)品原型或解決中試中的重要工藝問題為目標。項目遵循“成熟一個、啟動一個，成熟一批、啟動一批”的原則，分次分批啟動。此次發(fā)布的是本領域遲鈍愛德華氏菌毒力相關功能基因研究及疫苗開發(fā)和海洋文昌魚繁育與免疫基因功能解析關

3、鍵技術研究2個重點項目的申請指南，合計擬安排863計劃專項經(jīng)費3200萬元。本批重點項目的申請采取網(wǎng)上集中申報。申報通過“國家科技計劃項目申報中心”進行，網(wǎng)址為，有關申請的程序要求和注意事項詳見“十一五”國家高技術研究發(fā)展計劃（863計劃）申請指南。項目或課題申請負責人出生日期要求為1952年7月1日（含）以后。項目或課題申請受理的截止日期為2007年9月14日24時。指南內(nèi)容:附件一：“遲鈍愛德華氏菌毒力相關功能基因研究及疫苗開發(fā)”重點項目申請指南附件二：“海洋文昌魚繁育與免疫基因功能解析關鍵技術研究”重點項目申請指南科學技術部863計劃海洋技術領域辦公室二八年七月二十四日附件一：“十一五”

4、863計劃海洋技術領域“遲鈍愛德華氏菌毒力相關功能基因研究及疫苗開發(fā)”重點項目課題申請指南一、指南說明“遲鈍愛德華氏菌毒力相關功能基因研究及疫苗開發(fā)”是“十一五”863計劃海洋技術領域重點項目之一。其總體目標是：針對目前嚴重危害我國各種經(jīng)濟海水養(yǎng)殖魚種的病原菌遲鈍愛德華氏菌，利用分子生物學、現(xiàn)代病原微生物學和疫苗學的原理和技術，揭示遲鈍愛德華氏菌黏附、侵染、胞內(nèi)寄生和疾病爆發(fā)相關的毒力因子以及它們的調(diào)控機制。針對遲鈍愛德華氏菌特定的毒力因子和致病機制，獲得具有自主知識產(chǎn)權的候選疫苗，促進我國海水養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。本項目擬下設1個課題，申報團隊需按指南內(nèi)容進行整體申報，提提出詳細可考核的課題考核

5、指標。二、指南內(nèi)容1項目名稱遲鈍愛德華氏菌毒力相關功能基因研究及疫苗開發(fā)2項目總體目標確定遲鈍愛德華氏菌的易感魚類和細胞系，揭示遲鈍愛德華氏菌黏附、侵染、胞內(nèi)寄生和疾病爆發(fā)相關的毒力因子以及它們的調(diào)控機制；針對遲鈍愛德華氏菌特定的毒力因子和致病機制，獲得34個具有自主知識產(chǎn)權的高效疫苗，進行疫苗的實驗室安全和效力評價，至少一株獲得環(huán)境安全試驗許可證書，并進入環(huán)境安全試驗。3項目主要研究內(nèi)容（1）遲鈍愛德華氏菌易感細胞和動物模型研究。選取遲鈍愛德華氏菌易感魚類細胞（系）和宿主動物，考察其在感染過程中與遲鈍愛德華氏菌之間的相互作用，建立用于遲鈍愛德華氏菌侵染和致病規(guī)律研究的易感宿主模型。（2）遲鈍

6、愛德華氏菌全基因組測序和基因組學分析。對遲鈍愛德華氏菌進行全基因組測序并拼裝；對獲得的全基因組序列進行全面的生物信息學分析，初步篩選出候選的毒力相關基因，并對其進行功能驗證；分析遲鈍愛德華氏菌不同毒株間的基因差異及其與毒力差異之間的關系。（3）遲鈍愛德華氏菌重要致病相關基因/蛋白的表達調(diào)控分析。以全基因組序列為基礎，以病原細菌重要毒力調(diào)控基因/蛋白為靶點，進行基因表達譜差異分析，確定關鍵毒力基因及其調(diào)控網(wǎng)絡。研究重要調(diào)控基因和蛋白在病原菌致病過程中的生物學功能，建立遲鈍愛德華氏菌作為魚類胞內(nèi)寄生病原菌的致病機制模型。（4）遲鈍愛德華氏菌抗原蛋白組學分析。以遲鈍愛德華氏菌的全基因組為平臺，預測毒

7、力因子、分泌抗原及表面相關抗原，尋找外膜抗原以及侵染和毒力相關的抗原。對篩選得到的免疫顯性抗原進行免疫保護力評價，為海水養(yǎng)殖疫苗研究提供候選靶點。（5）遲鈍愛德華氏菌疫苗的構(gòu)建和評價。以關鍵毒力基因或保護性抗原為靶點，設計和構(gòu)建遲鈍愛德華氏菌減毒活疫苗或者亞單位疫苗，并在實驗室規(guī)模上進行安全性和免疫效力評價，篩選具有產(chǎn)業(yè)開發(fā)前景的疫苗。初步確定疫苗的實驗室制備工藝和免疫策略，在此基礎上進行環(huán)境安全試驗。4主要考核指標（1）完成遲鈍愛德華氏菌的全基因組測序，全基因組測序覆蓋率達到10倍以上；進行遲鈍愛德華氏菌全基因組序列的拼裝，給出全基因組的精細圖，完成遲鈍愛德華氏菌全基因組分析。（2）建立遲鈍

8、愛德華氏菌致病機制研究的易感細胞和動物模型。開展遲鈍愛德華氏菌與魚類致病相關基因的功能研究，對其中的10-20個基因的功能進行較深入系統(tǒng)的研究。新發(fā)現(xiàn)1-2個重要致病因子。（3）構(gòu)建34個遲鈍愛德華氏菌的減毒活疫苗或者亞單位疫苗，浸泡或者口服的相對免疫保護率達到70%以上。至少一株獲得環(huán)境安全試驗許可證書，并進入環(huán)境安全試驗。申請或獲得國家發(fā)明專利34項，國際發(fā)明專利12項。5項目經(jīng)費及組成本重點項目總支持經(jīng)費為1320萬元，其中863專項經(jīng)費擬支持1200萬元，要求落實地方或部門配套經(jīng)費120萬元。配套經(jīng)費需提供證明。6項目支持年限自課題任務書簽定日起4年。7其他內(nèi)容本項目申請必須針對項目整

9、體任務，針對部分研究內(nèi)容的申請將視為無效申請。項目申請者需填寫項目申請書。附件二： “十一五”863計劃海洋技術領域“海洋文昌魚繁育與免疫基因功能解析關鍵技術研究”重點項目課題申請指南一、指南說明“海洋文昌魚繁育與免疫基因功能解析關鍵技術研究”是“十一五”863計劃海洋技術領域重點項目之一。項目總體目標：本重點項目通過文昌魚全基因組的測序和相關生物信息學分析， 再進行系統(tǒng)的功能研究，以獲取生殖與免疫相關的功能基因，從而為海水養(yǎng)殖的優(yōu)良品種培育與病害控制提供關鍵技術和自主知識產(chǎn)權的保證。項目重點任務：完成中國文昌魚全基因組序列測定、組裝和全部基因潛在功能的注釋，建立文昌魚的人工繁育與養(yǎng)殖技術體系

10、，建立文昌魚細胞系及其相關的培養(yǎng)技術，初步建立文昌魚遺傳基因的修飾與改造技術，獲得一系列與海水魚養(yǎng)殖繁育和免疫防御相關的功能基因，其中至少獲得10個功能基因的知識產(chǎn)權保護，為海水養(yǎng)殖優(yōu)良品種培育與病害控制提供關鍵技術，提高我國在海洋生物科技方面的創(chuàng)新力和競爭力。說明：根據(jù)863計劃有關管理辦法和規(guī)定，本重點項目參照重大項目任務落實方式，對項目全部內(nèi)容公開發(fā)布課題申請指南，以課題為單位進行申請，申請者請?zhí)顚戫椖空n題申請書。本項目擬支持的863專項經(jīng)費控制額為2000萬元，課題支持年限為自課題任務書簽定日起4年。二、指南內(nèi)容課題1海洋模式生物文昌魚全基因組的測序和基因功能注釋的生物信息分析 研究目

11、標：通過建立我國文昌魚高質(zhì)量基因組BAC文庫，采用超快速基因測序技術完成中國文昌魚基因組測序，對全基因組序列進行拼接、組裝，完成全部基因潛在功能的注釋，建立信息完整、數(shù)據(jù)豐富、界面友好、開放應用的中國文昌魚全基因組數(shù)據(jù)庫和研究平臺，奠定我國在海洋模式生物及其功能基因研究領域的國際競爭力。主要研究內(nèi)容：建立高質(zhì)量單一個體的文昌魚BAC基因組文庫，對文昌魚全基因組進行大規(guī)模測序，用生物信息技術對大量的原始序列數(shù)據(jù)進行拼接組裝，利用已有的中國文昌魚EST數(shù)據(jù)和國際文昌魚數(shù)據(jù)庫中的EST數(shù)據(jù)，給合生物信息技術，對全部基因潛在功能進行注釋，建立資源共享的數(shù)據(jù)庫。主要考核指標：文昌魚基因組文庫的平均插入片

12、段不小于100 kb，總庫容達基因組10倍以上；全基因組測序覆蓋深度達8，組裝序列對基因組的覆蓋率不低于98%；注釋基因不少于1.5萬，達到高質(zhì)量工作“框架圖”要求；基因組數(shù)據(jù)庫信息完整，界面友好并開放使用；申請或獲得國家發(fā)明專利2-3項。課題設置：本課題擬支持專項經(jīng)費700萬元，擬支持課題數(shù)不超過1個。課題2海洋文昌魚的人工繁育與養(yǎng)殖及其生殖相關功能基因的研究研究目標：利用我國豐富的文昌魚資源，突破文昌魚人工繁育和養(yǎng)殖的技術瓶頸，建立實驗室條件下長期繁育的文昌魚人工繁殖群，克隆一批文昌魚生殖相關功能基因，為將文昌魚作為模式動物奠定基礎。主要研究內(nèi)容：通過品種篩選和優(yōu)化養(yǎng)殖條件，提高文昌魚生長

13、速度，縮短生殖周期；研究文昌魚卵母細胞和精原細胞基本發(fā)育規(guī)律，實現(xiàn)產(chǎn)卵時間的可預見性和可調(diào)控性，誘導養(yǎng)殖群體室內(nèi)產(chǎn)卵；改變原有生活習性和生殖習性，使文昌魚能在人工海水中長期養(yǎng)殖；研制和建立適合實驗室大規(guī)模養(yǎng)殖的專用設備和技術方法；克隆文昌魚生殖相關功能基因，研究這些基因的功能及其在文昌魚生殖周期和繁育中的作用。主要考核指標：建立一個不少于10萬尾全人工繁育的文昌魚實驗室繁殖群，調(diào)節(jié)延伸產(chǎn)卵期至自然條件下2倍以上，建立人工海水條件下的繁育和室內(nèi)誘導產(chǎn)卵技術，申請或獲得國家發(fā)明專利2-3項。經(jīng)費安排：本課題擬支持專項經(jīng)費550萬元，擬支持課題數(shù)不超過1個。課題3：海洋模式生物文昌魚免疫防御的關鍵基

14、因研究研究目標：針對海水養(yǎng)殖病害防治這一關鍵問題，研究海洋模式生物文昌魚對病原感染應答的規(guī)律和免疫防御機制，克隆一批重要的免疫相關基因，研究這些基因在免疫防御中的作用，為開發(fā)海水養(yǎng)殖病害控制新的免疫防治技術提供理論依據(jù)。主要研究內(nèi)容：不同病原感染文昌魚的轉(zhuǎn)錄組研究；不同病原感染文昌魚的蛋白組學研究；文昌魚重要免疫基因家族研究；重要免疫細胞信號傳導通路及關鍵基因研究；免疫相關組織和器官發(fā)生相關基因研究；早期免疫識別分子的產(chǎn)生和識別機制研究；原始適應性免疫分子的簽定和功能研究等。主要考核指標：克隆30-60個病害控制和免疫防御相關的功能基因，闡明10-20個重要病害控制和免疫防御相關基因的功能，發(fā)表高水平研究論文5-10篇以上，申請或獲得國家發(fā)明專利3-5個。經(jīng)費安排：本課題擬支持專項經(jīng)費550萬元，擬支持課題數(shù)不超過1個。課題4：海洋文昌魚細胞系的建立及其遺傳修飾與改造技術研究目標：針對文昌魚細胞不能體外培養(yǎng)這一難題，本課題將突破文昌魚細胞體外培養(yǎng)的技術瓶頸，實現(xiàn)文昌魚細胞的原代培養(yǎng)和永生細胞系的建立，為重要海水養(yǎng)殖動物的遺傳育種和基因修飾改造提供技術支持。主要研究內(nèi)容：建立文昌魚原代細胞的培養(yǎng)條件和傳代培養(yǎng)的方法；通過各種誘導方法，使原代培養(yǎng)細胞轉(zhuǎn)化為細