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文檔簡介
1、普通光學顯微鏡以及顯微標本制作一 實驗目的二 實驗原理三 實驗儀器、材料和試劑四 實驗內(nèi)容與方法五 實驗報告實驗目的1.熟悉普通光學顯微鏡的主要結(jié)構(gòu)和基本性能。2.掌握低倍鏡、高倍鏡和油鏡的正確使用方法。3.初步了解光學顯微鏡的維護方法。4.了解并掌握簡單的顯微標本制作技術(shù)實驗原理 普通光學顯微鏡是最通用的一種光學顯微鏡。利用光線照明,標本中各點依照其光吸收的不同而在明亮的背景中成像。它由物鏡、目鏡、聚光鏡、光源、載物臺和支架等部件組成。其中聚光鏡用于調(diào)節(jié)顯微鏡的照明,物鏡和目鏡是放大微小物體成像的主要部件。其基本成像原理是:物鏡、目鏡、聚光鏡各自相當于一個凸透鏡,被檢標本置于聚光器與物鏡之間
2、,物鏡可使標本在物鏡上方形成一個倒立的放大實像。目鏡將此倒像進一步放大成像,該虛像看起來好像在離眼睛250mm處。 實驗原理 顯微標本制作技術(shù)是組織學、胚胎學、生理學及細胞學等學科研究觀察細胞、組織的生理、病理形態(tài)變化的一種主要方法。大多數(shù)的生物材料,在自然狀態(tài)下是不適合顯微觀察的,也無法看到其內(nèi)部結(jié)構(gòu)。因為材料較厚,光線不易透過,以致不易看清其結(jié)構(gòu),另外細胞內(nèi)的各個結(jié)構(gòu),由于其折射率相差很小,即使光線可透過,也難以辨明。但在經(jīng)過固定、脫水、透明、包埋等手續(xù)后就可把材料切成較薄的片,再用不同的染色方法就可以顯示不同細胞組織的形態(tài)及其中某些化學成份含量的變化,就可以在顯微鏡下清楚地看到其中不同的
3、區(qū)域組分狀態(tài),切片也便于保存,所以是教學和科研中常用的方法。實驗儀器、材料和試劑 普通光學顯微鏡、擦鏡紙、吸水紙、蒸餾水、載玻片、蓋玻片、香柏油、二甲苯、刀片等 實驗內(nèi)容與方法(二)普通光學顯微鏡的性能和質(zhì)量1.數(shù)值孔徑2.分辨力3.放大率4.焦點深度(三)普通光學顯微鏡的使用方法1.用前的準備工作2.低倍鏡的使用 3.高倍鏡的使用4.油鏡的使用方法實驗內(nèi)容與方法(四)本實驗室內(nèi)使用普通光學顯微鏡的主要注意事項1.取顯微鏡時,請盡量小心,防止震動損壞鏡頭2.觀察帶有液體的臨時標本時,請務必加蓋玻片,以免鏡頭受污染3.鏡頭污染時,請用專業(yè)擦鏡紙及時擦拭,注意單方向擦拭4.非觀察時候,請將物鏡鏡頭
4、偏離光軸,避免鏡頭受損5.非教師授課需要及實驗室管理員允許,請勿擅自拆卸零件6.每位同學本學期固定使用一臺顯微鏡,并做好登記工作;如有問題請及時報告管理員老師實驗內(nèi)容與方法 (4)磨片法:用于很堅硬的組織,如骨和牙。 (5)離析法:利用化學試劑使組織的細胞間質(zhì)溶解,使細胞能分散成單個個體;適用于肌肉、葉片、莖等部位。 (6)整裝片法等:裝片法是將生物材料采取整體封固制成玻片標本的方法,常用材料有:微小生物如衣藻、水綿、變形蟲、水螅,植物的葉表皮;昆蟲的翅、足、口器,人的口腔上皮細胞等。2.切片法 包括徒手切片法、石蠟切片法、火棉膠切法、冰凍切片法等類型。 實驗內(nèi)容與方法3.常用固定劑(1)包音氏固定液:由苦味酸飽和水溶液、甲醛、冰醋酸配制。(2)海利氏液:由重鉻酸鉀、氯化汞、蒸餾水100毫升、甲醛液配制。(3)卡諾固定液:由純酒精、冰醋酸配制。 (4)約翰森
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