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1、生理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)人:尚潔 王俊俊婁吉祥 羅明偉 趙銳豪 指導(dǎo)老師:* 2012年05月05日 2021/9/301實(shí)驗(yàn)課題腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管的比較2021/9/302實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟和血管的作用,比較和分析其作用機(jī)制2021/9/303實(shí)驗(yàn)原理激素部位綜合受體產(chǎn)生作用腎上腺素心臟1三正效應(yīng)血管皮膚,胃,腎 皮膚, 腸,血管平滑肌血管收縮骨骼肌,肝大劑量血管收縮小劑量 2血管舒張去甲腎上腺素心臟1三正效應(yīng)(弱)血管全身血管血管收縮2021/9/304實(shí)驗(yàn)材料與試劑實(shí)驗(yàn)1實(shí)驗(yàn)對(duì)象 家兔 試劑20%氨基甲酸乙脂,0.5%的肝素, 生理鹽水, 5:100000
2、腎上腺素, 1: 10000去甲腎上腺素實(shí)驗(yàn)2實(shí)驗(yàn)對(duì)象:蟾蜍試劑:任氏液, 5:100000腎上腺素, 1:10000去甲腎上腺素2021/9/305實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備 實(shí)驗(yàn)1哺乳動(dòng)物手術(shù)器械一套 生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)張力換能器 兔手術(shù)臺(tái) 動(dòng)脈夾 動(dòng)脈導(dǎo)管 鐵支架 絲線 注射器實(shí)驗(yàn)2蛙類手術(shù)器械一套 生物信號(hào)采集處理系統(tǒng) 鐵支架張力換能器 雙凹夾 試管夾 蛙心插管 滴管 絲線2021/9/306實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)1動(dòng)物的分組與處理:取8只身體狀況基本相同的家兔,隨機(jī)等分為兩組,一組為在體實(shí)驗(yàn)組,另一組為在體對(duì)照組指標(biāo)的觀察: 以動(dòng)脈血壓為指標(biāo),分析腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)血管活動(dòng)的調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)2 取8只身體
3、狀況基本相同的蟾蜍,隨機(jī)等分為兩組,一組為在體實(shí)驗(yàn)組,另一組為在體對(duì)照組2021/9/307實(shí)驗(yàn)2取8只身體狀況基本相同的蟾蜍,隨機(jī)等分為兩組,一組為在體實(shí)驗(yàn)組,另一組為在體對(duì)照組指標(biāo)的觀察: 以心率,心肌收縮力為指標(biāo),分析腎上腺素和去甲腎上腺素對(duì)心臟活動(dòng)的調(diào)節(jié)2021/9/308實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線1,麻醉: 家兔稱重后,耳緣靜脈緩慢注射20氨基甲酸 乙酯( 戊巴比妥鈉( 乙酯(5 mlkg-1)進(jìn)行麻醉。當(dāng)動(dòng)物 四肢松軟,呼吸變深變慢,角膜反射遲鈍時(shí),表明動(dòng)物已被麻醉, 即可停止注射。2:動(dòng)物的固定:將麻醉的家兔仰臥位固定于兔手術(shù)臺(tái)上。2021/9/309實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線3,手術(shù)操作剪去頸前部兔毛,沿
4、正中線切開(kāi)皮膚5-7cm,用止血鉗縱向分離皮下組織于正中線分開(kāi)頸部肌肉,暴露氣管。在氣管下方穿一根線備用,在甲狀軟骨下約1cm處剪一倒“T”型切口,插入氣管插管,用備用線結(jié)扎并固定。在氣管兩側(cè)找到并辨認(rèn)迷走神經(jīng),交感神經(jīng),減壓神經(jīng)(即家兔的主動(dòng)脈神經(jīng))以及頸總神經(jīng)。用玻璃分針先仔細(xì)分離右側(cè)減壓神經(jīng),然后分離右側(cè)迷走神經(jīng),交感神經(jīng)和頸總神經(jīng)。分別在各神經(jīng)、血管下穿一根不同顏色的絲線備用。2021/9/3010動(dòng)脈插管分離左側(cè)頸總動(dòng)脈2-3cm(盡可能向頭端游離),遠(yuǎn)心端穿線并結(jié)扎,近心端用動(dòng)脈夾夾閉,在血管下穿線備用。在耳緣靜脈注射0.5肝素生理鹽水2ml,并在動(dòng)脈導(dǎo)管尖端注入0.5%肝素生理鹽
5、水0.1ml。用眼科剪在結(jié)扎線的近端動(dòng)脈上剪一斜切口,向心臟方向插入已準(zhǔn)備好的動(dòng)脈導(dǎo)管(注意管內(nèi)不應(yīng)有氣泡),結(jié)扎固定。壓力換能器與動(dòng)物心臟應(yīng)保持在同一水平。2021/9/3011觀察項(xiàng)目1,記錄正常血壓放開(kāi)動(dòng)脈夾,記錄靜息狀態(tài)下家兔動(dòng)脈血壓曲線,觀察正常血壓波動(dòng)曲線。2,靜脈注射小劑量腎上腺素耳緣靜脈注射小劑量腎上腺素溶液,觀察血壓變化3,靜脈注射大劑量腎上腺素待動(dòng)脈血壓曲線恢復(fù)正常后,耳緣靜脈注射大劑量的腎上腺素溶液觀察血壓的變化4,靜脈注射去甲腎上腺素耳緣靜脈注射去甲腎上腺素溶液0.20.3ml,觀察血壓變化2021/9/3012實(shí)驗(yàn)儀器連接與調(diào)試及裝置1,儀器裝置將動(dòng)脈導(dǎo)管與壓力換能器
6、相連,通過(guò)三通開(kāi)關(guān)用生理鹽水沖灌壓力換能器和動(dòng)脈導(dǎo)管。排盡壓力換能器與動(dòng)脈導(dǎo)管中的氣泡。然后關(guān)閉三通開(kāi)關(guān)備用,若壓力換能器沒(méi)有定標(biāo),要對(duì)壓力換能器定標(biāo)。2儀器連接將壓力換能器與生物信號(hào)采集系統(tǒng)相連,將刺激電極輸入端與刺激輸出端相連,將刺激電極輸出端與保護(hù)電極相連3調(diào)零,壓力定標(biāo)和制壓實(shí)驗(yàn)前,一般已調(diào)整好測(cè)量系統(tǒng),實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,勿輕易改動(dòng)。2021/9/3013實(shí)驗(yàn)21,備用線將前后腔靜脈和左右肺靜脈一起結(jié)扎(注意勿結(jié)扎住靜脈竇).將心臟回復(fù)指原位1,取蟾蜍一只,用探針搗毀腦和脊髓,將其仰臥固定在蛙板上。用鑷子夾起皮膚,然后將胸部劍突軟骨下方的皮膚剪出一個(gè)“V”字形切口,暴露出劍突。用鑷子夾住劍突
7、下端,在肌肉層上剪出“V”形切口。再用粗剪刀沿正中線剪開(kāi)胸骨,并把左右兩側(cè)胸骨完全剪掉,眼科剪仔細(xì)剪開(kāi)心包膜,暴露心臟。2,仔細(xì)識(shí)別心房、心室、動(dòng)脈圓錐、主動(dòng)脈、靜脈竇、前后腔靜脈等。3,結(jié)扎血管:在右主動(dòng)脈下穿一根線并結(jié)扎,再在左右主動(dòng)脈下穿一根線備用。用玻璃分針將心尖向上翻至背面,以備用線將前后腔靜脈和左右肺靜脈一起結(jié)扎(注意勿結(jié)扎住靜脈竇).將心臟回復(fù)指原位。2021/9/3014蛙心插管在左主動(dòng)脈下穿兩根線。用一根線結(jié)扎左主動(dòng)脈遠(yuǎn)心端,另一線備用。提起左主動(dòng)脈遠(yuǎn)端縛線,用眼科剪在左主動(dòng)脈上靠近動(dòng)脈圓錐處剪一“V”形切口,將盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入主動(dòng)脈,插至動(dòng)脈圓錐時(shí),略向后
8、退,在心室收縮時(shí),沿心室后壁方向下插,經(jīng)主動(dòng)脈瓣插入心室腔內(nèi)(不可插入過(guò)深,以免心室壁堵住插管下口)。若插管成功進(jìn)入心室,管內(nèi)液體會(huì)隨著心室搏動(dòng)而上下移動(dòng)。用左主動(dòng)脈近心端的備用線結(jié)扎插管,并將結(jié)扎線固定于插管側(cè)面的小突起上。2021/9/3015游離心臟提起插管,在接線遠(yuǎn)端分別剪斷主動(dòng)脈左右分支;剪短左右肺動(dòng)脈和前后腔靜脈,將心臟離體。用滴管吸進(jìn)插管內(nèi)的余血加入新鮮任氏液反復(fù)沖洗數(shù)次,直至液體完全澄清。保持灌流液面高度恒定(1-2cm),即可進(jìn)行試驗(yàn)。2021/9/3016儀器連接用試管夾將制備好的離體蛙心固定于支架上,在心臟舒張期用蛙心夾夾住心尖部,并連接到張力換能器上(勿將心臟受到過(guò)度牽
9、拉)。將張力換能器的輸出線與生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)相連。2021/9/3017觀察項(xiàng)目1,描記正常蛙心收縮曲線幅度:代表心臟波動(dòng)的強(qiáng)弱。疏密:代表心率。規(guī)律性:代表心臟波動(dòng)的節(jié)律性。頂點(diǎn)水平:代表心臟收縮的程度?;€:代表心臟舒張的程度。2,腎上腺素的影響 在任氏液中滴加1-2滴5:100000去甲腎上腺素溶液,觀察曲線的變化。出現(xiàn)效應(yīng)后,用新鮮任氏液換洗,直至心跳曲線恢復(fù)正常。3,去甲腎上腺素的影響 在任氏液中滴加1-2滴1:10000去甲腎上腺素溶液,觀察曲線的變化。2021/9/3018實(shí)驗(yàn)預(yù)期結(jié)果實(shí)驗(yàn)1器官加入試劑預(yù)期現(xiàn)象心臟腎上腺素溶液0.5mi心臟活動(dòng)加強(qiáng),心率加快去甲腎上腺素溶液0
10、.5mi心臟活動(dòng)加強(qiáng),心率加快腸系膜動(dòng)脈小劑量腎上腺素溶液0.1mi血管收縮去甲腎上腺素溶液0.1mi血管收縮大劑量腎上腺素溶液0.5mi血管收縮去甲腎上腺素溶液0.5mi血管收縮肝動(dòng)脈小劑量腎上腺素溶液0.1mi血管收縮去甲腎上腺素溶液0.1mi血管收縮大劑量腎上腺素溶液0.5mi血管舒張去甲腎上腺素溶液0.5mi血管收縮2021/9/3019實(shí)驗(yàn)21,滴加腎上腺素溶液后,心率加快,心肌收縮力增強(qiáng)2,滴加去甲腎上腺素溶液后,心率變慢2021/9/3020實(shí)驗(yàn)分析1,靜脈注射氨基甲酸乙酯溶液時(shí),剛開(kāi)始小兔子異常興奮,為使兔子快速鎮(zhèn)靜下來(lái),注射前3ml時(shí)應(yīng)迅速,但不可過(guò)速防止兔子死亡,若兔子在注射時(shí)出現(xiàn)異常情況,應(yīng)停止注射觀察5分鐘后再做決定。2,靜脈注射時(shí)針不易扎入血管,靜脈注射時(shí)應(yīng)該從耳緣靜脈遠(yuǎn)心端開(kāi)始進(jìn)針,先進(jìn)入靜脈下端然后在任氏液中滴加1-2滴1:10000去甲腎上腺素溶液,觀察曲線的變化。3,插蛙心插管時(shí),稍有不慎,蛙心可能停止跳動(dòng)而使實(shí)驗(yàn)失敗,所以插蛙心插管要小心,先使蛙心插管進(jìn)入動(dòng)脈圓錐,在向下進(jìn)入左心室,實(shí)驗(yàn)中保持心臟處于任氏液環(huán)境中
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