常用微生物培養(yǎng)基配方大全

1、 /24常用培養(yǎng)基配方目錄：01糖發(fā)酵管02ONPG培養(yǎng)基03西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基04緩沖葡萄糖蛋白胨水（MR和VP試驗(yàn)用）05克氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基06丙二酸鈉培養(yǎng)基07葡葡糖銨培養(yǎng)基08Hugh-Leifson培養(yǎng)基（O/F試驗(yàn)用）09馬尿酸鈉培養(yǎng)基10營養(yǎng)明膠11苯丙氨酸培養(yǎng)基12氨基酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基13蛋白胨水（靛基質(zhì)試驗(yàn)用）硫酸亞鐵瓊脂（硫化氫試驗(yàn)用）尿素瓊脂16氰化鉀（KCN）培養(yǎng)基氧化酶試驗(yàn)硝酸鹽培養(yǎng)基細(xì)胞色素氧化酶試驗(yàn)過氧化氫酶試驗(yàn)過氧化物酶試驗(yàn)磷酸鹽緩沖液23明膠磷酸鹽緩沖液乳酸-苯酚溶液肉浸液肉湯26肉浸液瓊脂27牛肉（或牛心）消化湯28血消化湯29豆粉瓊脂30血瓊脂31營養(yǎng)

2、瓊脂32營養(yǎng)肉湯33乳糖膽鹽發(fā)酵管34乳糖發(fā)酵管35EC肉湯36緩沖蛋白胨水（BP）37氯化鎂孔雀綠增菌液（MM）38四硫磺酸鈉煌綠增菌液（TTB）39四硫磺酸鈉煌綠增菌液（換用方法）40亞硒酸鹽胱氨酸增菌液（SC）GN增菌液腸道菌增菌肉湯43亞硫酸鉍瓊脂(BS)DHL瓊脂HE瓊脂SS瓊脂WS瓊脂麥康凱瓊脂49伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)50三糖鐵瓊脂(TSI)51三糖鐵瓊脂(換用方法)52克氏雙糖鐵瓊脂(KI)克氏雙糖鐵瓊脂(換用方法)葡萄糖半固體發(fā)酵管5%乳糖發(fā)酵管CAYE培養(yǎng)基Honda氏產(chǎn)毒肉湯Elek氏培養(yǎng)基(毒素測定用)氯化鎂孔雀綠羧芐青霉素培養(yǎng)基胰蛋白胨水Rustigian氏尿素培養(yǎng)液

3、氯化鈉結(jié)晶紫增菌液氯化鈉蔗糖瓊脂嗜鹽菌選擇性瓊脂3.5%氯化鈉三糖鐵瓊脂氯化鈉血瓊脂3.5%氯化鈉生化試驗(yàn)培養(yǎng)基改良磷酸鹽緩沖液(小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌專用)CIN-1培養(yǎng)基70嗜鹽性試驗(yàn)培養(yǎng)基01糖發(fā)酵管成分:牛肉膏5g蛋白胨10g氯化鈉3g磷酸氫二鈉(Na2HPO4-12H2O)2g0.2%滇麝香草酚藍(lán)溶液12mL蒸餾水1000mLpH7.4制法:1葡萄糖發(fā)酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分裝于有一個(gè)倒置小管的小試管內(nèi),121高壓滅菌15min.2其他各種糖發(fā)酵管可按上述成分配好后，分裝每瓶100mL,121高壓滅菌15min.另將各種糖類分別配好10%溶液,同時(shí)高壓滅菌.將5m

4、L糖溶液加入于100mL培養(yǎng)基內(nèi)，以無菌操作分裝小試管.注:蔗糖不純,加熱后會自行水解者,應(yīng)采用過濾法除菌.試驗(yàn)方法:從瓊脂斜面上挑取小量培養(yǎng)物接種，于361培養(yǎng)，一般觀察23d.遲緩反應(yīng)需觀察1430d.02ONPG培養(yǎng)基成分:鄰硝基酚-D-半乳糖昔(ONPG)60mg(O-Nitrophenyl-D-galactopyranoside)0.01mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5)10mL1%蛋白胨水(PH7.5)30mL制法:將ONPG溶于緩沖液內(nèi)，加入蛋白胨水，以過濾法除菌,分裝于10mmx75mm試管，每管0.5mL,用橡皮塞塞緊.試驗(yàn)方法:自瓊脂斜面上挑取培養(yǎng)物1滿環(huán)接種，于361培

5、養(yǎng)13h和24h觀察結(jié)果.如果-半乳糖苷酶產(chǎn)生，則于13h變黃色，如無此酶則24h不變色.03西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基成分:氯化鈉5g硫酸鎂(MgSO4-7H2O)0.2g磷酸二氫銨1g磷酸氫二鉀1g檸檬酸鈉5g瓊脂20g蒸餾水1000mL0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液40mLpH6.8制法:先將鹽類溶解于水內(nèi)，校正pH,再加瓊脂，加熱溶化.然后加入指示劑,混合均勻后分裝試管,121高壓滅菌15min.放成斜面.試驗(yàn)方法:挑取少量瓊脂培養(yǎng)物接種，于361培養(yǎng)4d,每天觀察結(jié)果.陽性者斜面上有菌落生長，培養(yǎng)基從綠色轉(zhuǎn)為藍(lán)色.04緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR和VP試驗(yàn)用)成分:磷酸氫二鉀5g多胨7g葡萄糖5g蒸

6、餾水1000mLpH7.0制法:溶化后校正pH,分裝試管，每管1mL,121高壓滅菌15min.甲基紅(MR)試驗(yàn):自瓊脂斜面挑取少量培養(yǎng)物接種本培養(yǎng)基中，于361培養(yǎng)25d,哈夫尼亞菌則應(yīng)在2225培養(yǎng).滴加甲基紅試劑一滴,立即觀察結(jié)果.鮮紅色為陽性，黃色為陰性.甲基紅試劑配法:10mg甲基紅溶于30mL95%乙醇中，然后加入20mL蒸餾水.V-P試驗(yàn):用瓊脂培養(yǎng)物接種本培養(yǎng)基中，于361培養(yǎng)24d.哈夫尼亞菌則應(yīng)在2225培養(yǎng).加入-a萘酚-乙醇溶液0.5mL和40%氫氧化鉀溶液0.2mL,充分振搖試管，觀察結(jié)果.陽性反應(yīng)立刻或于數(shù)分鐘內(nèi)出現(xiàn)紅色，如為陰性,應(yīng)放在361下培養(yǎng)4h再進(jìn)行觀察

7、.05克氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基成分:檸檬酸鈉3g葡萄糖0.2g酵母浸膏0.5g單鹽酸半胱氨酸0.1g磷酸二氫鉀1g氯化鈉5g0.2%酚紅溶液6mL瓊脂15g蒸餾水1000mL制法:加熱溶解，分裝試管,121高壓滅菌15min.放成斜面.試驗(yàn)方法:用瓊脂培養(yǎng)物接種整個(gè)斜面，在361培養(yǎng)7d,每天觀察結(jié)果.陽性者培養(yǎng)基變?yōu)榧t色.06丙二酸鈉培養(yǎng)基成分:酵母浸膏1g硫酸銨2g磷酸氫二鉀0.6g磷酸二氫鉀0.4g氯化鈉2g丙二酸鈉3g0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液12mL蒸餾水1000mLpH6.8制法:先將酵母浸膏和鹽類溶解于水，校正pH后再加入指示劑，分裝試管,121高壓滅菌15min.試驗(yàn)方法:用新鮮的瓊脂

8、培養(yǎng)物接種，于361培養(yǎng)48h,觀察結(jié)果.陽性者由綠色變?yōu)樗{(lán)色.07葡葡糖銨培養(yǎng)基成分:氯化鈉5g硫酸鎂(MgSO4-7H2O)0.2g磷酸二氫銨1g磷酸氫二鉀1g葡萄糖2g瓊脂20g蒸餾水1000mL0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液40mLpH6.8制法:先將鹽類和糖溶解于水內(nèi)，校正pH,再加瓊脂，加熱溶化,然后加入指示劑,混合均勻后分裝試管,121高壓滅菌15min,放成斜面.試驗(yàn)方法:用接種針輕輕觸及培養(yǎng)物的表面,在鹽水管內(nèi)做成極稀的懸液,肉眼觀察不見混濁,以每一接種環(huán)內(nèi)含菌數(shù)在20100之間為宜.將接種環(huán)滅菌后挑取菌液接種,同時(shí)再以同法接種普通斜面一支作為對照.于361培養(yǎng)24h.陽性者葡萄糖

9、銨斜面上有正常大小的菌落生長;陰性者不生長，但在對照培養(yǎng)基上生長良好.如在葡萄糖銨斜面生長極微小的菌落可視為陰性結(jié)果.注:容器使用前應(yīng)用清潔液浸泡.再用清水,蒸餾水沖洗干凈,并用新棉花做成棉塞,干熱滅菌后使用.如果操作時(shí)不注意,有雜質(zhì)污染時(shí),易造成假陽性的結(jié)果.08Hugh-Leifson培養(yǎng)基(O/F試驗(yàn)用)成分:蛋白胨2g氯化鈉5g磷酸氫二鉀0.3g瓊脂4g葡萄糖10g0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液12mL蒸餾水1000mLpH7.2制法:將蛋白胨和鹽類加水溶解后，校正pH至7.2.加入葡萄糖，瓊脂煮沸，溶化瓊脂,然后加入指示劑.混勻后，分裝試管,121高壓滅菌15min,直立凝固備用.試驗(yàn)方法

10、:從斜面上挑取小量培養(yǎng)物作穿刺接種,同時(shí)接種兩支培養(yǎng)基,其中一支于接種后滴加溶化的1%瓊脂液于表面,高度約1cm,于361培養(yǎng).09馬尿酸鈉培養(yǎng)基成分:馬尿酸鈉1g肉浸液100mL制法:將馬尿酸鈉溶解于肉浸液內(nèi),分裝于小試管內(nèi),并于管壁畫一橫線.以標(biāo)志管內(nèi)液面高度,高壓滅菌12120min.試劑三氯化鐵(FeCl36H2O)12g,溶于2%鹽酸溶液100mL中即成.試驗(yàn)方法:用純培養(yǎng)物接種，于42培養(yǎng)48h,觀察培養(yǎng)液是否到達(dá)試管壁上記號處，如不足時(shí)，用蒸餾水補(bǔ)足至原量.經(jīng)離心沉淀，吸取上清液0.8mL,加入三氯化鐵試劑0.2mL,立即混合均勻，經(jīng)1015min,觀察結(jié)果.結(jié)果:出現(xiàn)恒久之沉淀

11、物為陽性.10營養(yǎng)明膠成分:蛋白胨5g牛肉膏3g明膠120g蒸餾水1000mLpH6.87.0制法:加熱溶解,校正至pH7.47.6，分裝小管,121高壓滅菌10min,取出后迅速冷卻，使其凝固.復(fù)查最終pH應(yīng)為6.87.0.試驗(yàn)方法:用瓊脂培養(yǎng)物穿刺接種，放在2225培養(yǎng),每天觀察結(jié)果，記錄液化時(shí)間.或放在36士1培養(yǎng)，每天取出，放冰箱內(nèi)30min后再觀察結(jié)果.11苯丙氨酸培養(yǎng)基成分:酵母浸膏3gDI-苯丙氨酸（或L-苯丙氨酸1g）2g磷酸氫二鈉1g氯化鈉5g瓊脂12g蒸餾水1000mL制法:加熱溶解后分裝試管,121高壓滅菌15min,使成斜面.試驗(yàn)方法:自瓊脂斜面上挑取大量培養(yǎng)物，移種于

12、苯丙氨酸瓊脂，在361培養(yǎng)4h或1824h.滴加10%三氯化鐵溶液23滴,自斜面培養(yǎng)物上流下,苯丙氨酸脫氨酶陽性者呈深綠色.12氨基酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基成分:蛋白胨5g酵母浸膏3g葡萄糖1g蒸餾水1000mL1.6%滇甲酚紫-乙醇溶液1mLL-氨基酸或DL-氨基酸0.5或1g/100mLpH6.8制法:除氨基酸以外的成分加熱溶解后，分裝每瓶100mL,分別加入各種氨基酸:賴氨酸，精氨酸和鳥氨酸.L-氨基酸按0.5%加入,口匕-氨基酸按1%加入.再行校正pH至6.8.對照培養(yǎng)基不加氨基酸分裝于滅菌的小試管內(nèi),每管0.5mL,上面滴加一層液體石蠟,115高壓滅菌10min.試驗(yàn)方法:從瓊脂斜面上挑取

13、培養(yǎng)物接種，于361培養(yǎng)1824h,觀察結(jié)果.氨基酸脫羧酶陽性者由于產(chǎn)堿，培養(yǎng)基應(yīng)呈紫色.陰性者無堿性產(chǎn)物,但因葡萄糖產(chǎn)酸而使培養(yǎng)基變?yōu)辄S色.對照管應(yīng)為黃色.13蛋白胨水（靛基質(zhì)試驗(yàn)用）成分:蛋白胨（或胰蛋白胨）20g氯化鈉5g蒸餾水1000mLpH7.4制法:按上述成分配制，分裝小試管,121高壓滅菌15min.靛基質(zhì)試劑柯凡克試劑:將5g對二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中.然后緩慢加入濃鹽酸25mL.歐-波試劑:將1g對二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇內(nèi).然后緩慢加入濃鹽酸20mL.試驗(yàn)方法:挑取小量培養(yǎng)物接種，在361培養(yǎng)12d,必要時(shí)可培養(yǎng)45d.加入柯凡克試劑約0.5mL,輕

14、搖試管,陽性者于試劑層呈深紅色;或加入歐-波試劑約0.5mL,沿管壁流下，覆蓋于培養(yǎng)液表面，陽性者于液面接觸處呈玫瑰紅色.注:蛋白胨中應(yīng)含有豐富的色氨酸.每批蛋白胨買來后,應(yīng)先用已知菌種鑒定后方可使用.硫酸亞鐵瓊脂(硫化氫試驗(yàn)用)成分:牛肉膏3g酵母浸膏3g蛋白胨10g硫酸亞鐵0.2g硫代硫酸鈉0.3g氯化鈉5g瓊脂12g蒸餾水1000mLpH7.4制法:加熱溶解，校正pH,分裝試管,115高壓滅菌15min,取出直立候其凝固.試驗(yàn)方法:挑取瓊脂培養(yǎng)物，沿管壁穿刺，于361培養(yǎng)12d,觀察結(jié)果.產(chǎn)硫化氫者使培養(yǎng)基變?yōu)楹谏?注:腸桿菌科細(xì)菌測定硫化氫的產(chǎn)生,應(yīng)采用三糖鐵瓊脂或本培養(yǎng)基.尿素瓊脂成

15、分:蛋白胨1g氯化鈉5g葡萄糖1g磷酸二氫鉀2g0.4%酚紅溶液3mL瓊脂20g蒸餾水1000mL20%尿素溶液100mLpH7.20.1制法:將除尿素和瓊脂以外的成分配好,并校正pH,加入瓊脂,加熱溶化并分裝燒瓶.121高壓滅菌15min.冷至5055c加入經(jīng)除菌過濾的尿素溶液.尿素的最終濃度為2%,最終pH應(yīng)為7.20.1.分裝于滅菌試管內(nèi)，放成斜面?zhèn)溆?試驗(yàn)方法:挑取瓊脂培養(yǎng)物接種，在361培養(yǎng)24h,觀察結(jié)果.尿素酶陽性者由于產(chǎn)堿而使培養(yǎng)基變?yōu)榧t色.16氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基成分:蛋白胨10g氯化鈉5g磷酸二氫鉀0.225g磷酸氫二鈉5.64g蒸餾水1000mL0.5%氰化鉀溶液20m

16、LpH7.6制法:將除氰化鉀以外的成分配好后分裝燒瓶,121高壓滅菌15min.放在冰箱內(nèi)使其充分冷卻.每100mL培養(yǎng)基加入0.5%氰化鉀溶液2.0mL（最后濃度為1:10000），分裝于12mmx100mm滅菌試管,每管約4mL,立刻用滅菌橡皮塞塞緊,放在4冰箱內(nèi),至少可保存兩個(gè)月.同時(shí),將不加氰化鉀的培養(yǎng)基作為對照培養(yǎng)基,分裝試管備用.氧化酶試驗(yàn)試劑:1%鹽酸二甲基對苯二胺溶液:少量新鮮配制,干冰箱內(nèi)避光保存.1%-萘酚-乙醇溶液.試驗(yàn)方法:取白色潔凈濾紙沾取菌落.加鹽酸二甲基對苯二胺溶液一滴，陽性者呈現(xiàn)粉紅色，并逐漸加深;再加-萘酚溶液一滴,陽性者于半分鐘內(nèi)呈現(xiàn)鮮藍(lán)色.陰性于兩分鐘內(nèi)不

17、變色.以毛細(xì)吸管吸取試劑,直接滴加于菌落上,其顯色反應(yīng)與以上相同.硝酸鹽培養(yǎng)基成分:硝酸鉀0.2g蛋白5g蒸餾水1000mLpH7.4制法:溶解，校正pH,分裝試管,每管約5皿匕,121高壓滅菌15min.硝酸鹽還原試劑:甲液:將對氨基苯磺酸0.8g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中.乙液:將甲萘胺0.5g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中.試驗(yàn)方法:接種后在361培養(yǎng)144加入甲液和乙液各一滴，觀察結(jié)果.硝酸鹽還原為亞硝酸鹽時(shí)于立刻或數(shù)分鐘內(nèi)顯紅色.注:本試驗(yàn)陰性的原因有三:細(xì)菌不能還原硝酸鹽;亞硝酸鹽繼續(xù)分解,生成氨和氮;培養(yǎng)基不適于細(xì)菌的生長.如欲檢查培養(yǎng)基中硝酸鹽是否未

18、被分解,可再加入鋅粉少許,可使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽而呈現(xiàn)紅色.細(xì)胞色素氧化酶試驗(yàn)試劑:1%鹽酸二甲基對苯二胺溶液.1%-萘酚-乙醇溶液.試驗(yàn)方法:取37（或低于37）培養(yǎng)20h的斜面培養(yǎng)物一支,將兩種試劑各23滴，從斜面上端滴下,并將斜面略加傾斜,使試劑混合液流經(jīng)斜面上的培養(yǎng)物.如系平板培養(yǎng)物,則可用試劑混合液滴在菌落上.結(jié)果:于2min內(nèi)呈現(xiàn)藍(lán)色者為陽性.陽性培養(yǎng)物大多數(shù)于半分鐘內(nèi)出現(xiàn)強(qiáng)陽性反應(yīng),2min以后出現(xiàn)微弱或可疑反應(yīng)均作為陰性結(jié)果.過氧化氫酶試驗(yàn)試劑:3%過氧化氫溶液:臨用時(shí)配制.試驗(yàn)方法:挑取固體培養(yǎng)基上菌落一接種環(huán)，置于潔凈試管內(nèi)，滴加3%過氧化氫溶液2mL,觀察結(jié)果.結(jié)果:于

19、半分鐘內(nèi)發(fā)生氣泡者為陽性,不發(fā)生氣泡者為陰性.過氧化物酶試驗(yàn)試劑:2%兒茶酚溶液.3%過氧化氫溶液.試驗(yàn)方法:挑取固體培養(yǎng)基上菌落一接種環(huán)，置于潔凈試管內(nèi)，滴加2%兒茶酚溶液1mL及3%過氧化氫溶液1mL.靜置于室溫(20)中3060min,觀察結(jié)果.結(jié)果:陽性反應(yīng),細(xì)菌變?yōu)楹诤稚?陰性反應(yīng),細(xì)菌不變色.注:過氧化物酶的作用可受氰化鉀的抑制.磷酸鹽緩沖液儲存液磷酸二氫鉀34g1mol/L氫氧化鈉溶液175mL蒸餾水825mLpH7.2制法:先將磷酸鹽溶解于500mL蒸餾水中用1mol/L氫氧化鈉溶液校正pH后，再用蒸餾水稀釋至1000mL.稀釋液:取儲存液1.25mL用蒸餾水稀釋至1000mL

20、.分裝每瓶100mL或每管10mL,121高壓滅菌15min.23明膠磷酸鹽緩沖液成分:明膠2g磷酸氫二鈉4g蒸餾水1000mLpH6.2制法:加熱溶解，校正pH,121高壓滅菌15min.乳酸-苯酚溶液成分:苯酚10g乳酸(比重1.21)10g甘油20g蒸餾水10mL制法:將苯酚在水中加熱溶解,然后加入乳酸及甘油.用途:檢驗(yàn)真菌形態(tài)時(shí)用.肉浸液肉湯成分:絞碎牛肉500g氯化鈉5g蛋白胨10g磷酸氫二鉀2g蒸餾水1000mL制法:將絞碎之去筋膜無油脂牛肉500g加蒸餾水1000mL，混合后放冰箱過夜，除去液面之浮油,隔水煮沸半小時(shí),使肉渣完全凝結(jié)成塊,用絨布過濾,并擠壓收集全部濾液,加水補(bǔ)足原

21、量.加入蛋白胨,氯化鈉和磷酸鹽,溶解后校正pH7.47.6煮沸并過濾，分裝燒瓶,121高壓滅菌30min.26肉浸液瓊脂成分:肉浸液肉湯（PH7.4）1000mL瓊脂1720g制法:加熱溶化瓊脂，分裝燒瓶或試管,121高壓滅菌30min.根據(jù)需要，傾注平板或放成斜面.27牛肉（或牛心）消化湯成分:絞碎牛肉（或牛心）1000g15%氫氧化鈉溶液27mL胰蛋白酶40mL三氯甲烷1mL氯化鈉10g蒸餾水2000mL制法:1稱取碎牛肉，加蒸餾水，隔水加熱到80c維持15min.2加氫氧化鈉溶液，對pH試紙呈弱堿性，冷至40.3加胰蛋白酶，氯仿，在361放置45h,每小時(shí)搖動一二次.44h后，吸取上層液

22、5mL于試管中，加5%硫酸銅溶液0.1mL,4%氫氧化鈉溶液5mL,混合之.若呈紅色,則不須再消化,可由溫箱取出.5加入15%乙酸溶液45mL,對pH試紙呈酸性.6煮沸15min,使胰蛋白酶破壞，冷后，放冰箱內(nèi)一夜.7次日吸取上層清液，加氯化鈉10g,并加水補(bǔ)足原量,煮沸.8校正pH7.47.6（加15%氫氧化鈉溶液約10mL）,加熱，用濾紙過濾，分裝燒瓶,121高壓滅菌20min.注:此培養(yǎng)基可作為瓊脂培養(yǎng)基的基礎(chǔ)，不需加蛋白胨.胰蛋白酶之配制:稱取去脂絞碎的豬胰500g,力口入乙醇500mL,蒸餾水1500mL，混合之,裝人玻塞瓶內(nèi).每日搖勻三次.3d后,用絨布過濾擠出其汁，加鹽酸至0.0

23、5%,放冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?28血消化湯成分:絞碎豬胃100g絞碎豬血塊100g蒸餾水1000mL濃鹽酸10mL制法:洗滌豬胃,除去油脂,保留胃粘膜,用絞肉機(jī)絞碎.用絞肉機(jī)將豬血塊絞碎.3將蒸餾水加熱至55,加入豬胃，豬血塊和鹽酸，置55水浴中24h,時(shí)常加以搖動.4從水浴內(nèi)取出，加入1moL/L碳酸鈉溶液5mL,煮沸10min,置于冰箱內(nèi)一夜.5吸取上層清液，加磷酸氫二鉀1g,加熱至75,加入1mol/L碳酸鈉溶液45mL,煮沸，校正pH7.27.4.6用濾紙過濾，分裝燒瓶,121高壓滅菌20min.29豆粉瓊脂成分:牛心消化湯(PH7.47.6)1000mL瓊脂20g黃豆粉浸液50mL制法:將

24、瓊脂加在牛心消化湯內(nèi)，加熱溶解，過濾.加入豌豆粉浸液，分裝每瓶100mL,121高壓滅菌15min.豌豆粉浸液制法:取豌豆粉5g,氯化鈉10g,加入蒸餾水100mL.置100水浴內(nèi)加熱1h,放于冰箱中過夜.吸取上清液即為豌豆浸液.30血瓊脂成分:pH7.47.6豆粉瓊脂100mL脫纖維羊血(或兔血)510mL制法:加熱溶化瓊脂,冷至50,以滅菌手續(xù)加入脫纖維羊血,搖勻,傾注平板.亦可分裝滅菌試管,置成斜面.亦可用其他營養(yǎng)豐富的基礎(chǔ)培養(yǎng)基配制血瓊脂.31營養(yǎng)瓊脂成分:蛋白胨10g牛肉膏3g氯化鈉5g瓊脂1520g蒸餾水1000mL制法:將除瓊脂以外的各成分溶解于蒸餾水內(nèi),加入15%氫氧化鈉溶液約

25、2mL,校正pH至7.27.4.加入瓊脂,加熱煮沸，使瓊脂溶化.分裝燒瓶,121高壓滅菌15min.注:此培養(yǎng)基可供一般細(xì)菌培養(yǎng)之用,可傾注平板或制成斜面.如用于菌落計(jì)數(shù),瓊脂量為1.5%;如作成平板或斜面,則應(yīng)為2%.32營養(yǎng)肉湯成分:蛋白陳10g牛肉膏3g氯化鈉5g蒸餾水1000mLpH7.4制法:按上述成分混合，溶解后校正pH,分裝燒瓶，每瓶225mL,121高壓滅菌15min.33乳糖膽鹽發(fā)酵管成分:蛋白胨20g豬膽鹽(或牛,羊膽鹽)5g乳糖10g0.04%滇甲酚紫水溶液25mL蒸餾水1000mLpH7.4制法:將蛋白胨,膽鹽及乳糖溶于水中，校正pH,加入指示劑，分裝每管10mL,并放

26、入一個(gè)小倒管,115高壓滅菌15min.注:雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管除蒸餾水外,其他成分加倍.34乳糖發(fā)酵管成分:蛋白胨20g乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液25mL蒸餾水1000mLpH7.4制法:將蛋白胨及乳糖溶于水中，校正pH,加入指示劑，按檢驗(yàn)要求分裝30mL,10mL或3mL,并放入一個(gè)小倒管,115高壓滅菌15min.注:雙料乳糖發(fā)酵管除蒸餾水外，其他成分加倍.30mL和10mL乳糖發(fā)酵管專供醬油及醬類檢驗(yàn)用,3mL乳糖發(fā)酵管供大腸菌群證實(shí)試驗(yàn)用.35EC肉湯成分:胰蛋白胨20g3號膽鹽(或混合膽鹽)1.5g乳糖5g磷酸氫二鉀4g磷酸二氫鉀1.5g氯化鈉5g蒸餾水1000mL制法:將上

27、述成分混合,溶解后，分裝有發(fā)酵倒管的試管中,121高壓滅菌15min,最終pH為6.90.2.36緩沖蛋白胨水(BP)成分:蛋白胨10g氯化鈉5g磷酸氫二鈉(Na2HPO4-12H2O)9g磷酸二氫鉀1.5g蒸餾水1000mLpH7.2制法:按上述成分配好后以大燒瓶裝,121高壓滅菌15min.臨用時(shí)無菌分裝每瓶225mL.注:本培養(yǎng)基供沙門氏菌前增菌用.37氯化鎂孔雀綠增菌液(MM)甲液胰蛋白胨5g氯化鈉8g磷酸二氫鉀1.6g蒸餾水1000mL乙液氯化鎂(化學(xué)純)40g蒸餾水100mL4.13.3丙液0.4%孔雀綠水溶液.制法:分別按上述成分配好后,121高壓滅菌15min備用.臨用時(shí)取甲液

28、90mL,乙液9mL,丙液0.9mL,以無菌操作混合即可.注:本培養(yǎng)基亦稱Rappaport10(R10)增菌液.38四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB)基礎(chǔ)培養(yǎng)基多胨或際胨5g膽鹽1g碳酸鈣10g硫代硫酸鈉30g蒸餾水1000mL碘溶液碘6g碘化鉀5g蒸餾水20mL制法:將基礎(chǔ)培養(yǎng)基的各成分加入蒸餾水中，加熱溶解，分裝每瓶100mL.分裝時(shí)應(yīng)隨時(shí)振搖，使其中的碳酸鈣混勻.121高壓滅菌15min備用.臨用時(shí)每100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入碘溶液2mL,0.1%煌綠溶液1mL.39四硫磺酸鈉煌綠增菌液(換用方法)基礎(chǔ)液:蛋白胨10g牛肉膏5g氯化鈉3g碳酸鈣45g蒸餾水1000mL將各成分加入于蒸餾水中

29、，加熱至約70溶解，校正pH至7.00.1,121高壓滅菌20min.硫代硫酸鈉溶液硫代硫酸鈉(Na2s2O3-5H2O)50g蒸餾水加至100mL碘溶液碘片20g碘化鉀25g蒸餾水加至100mL將碘化鉀充分溶解于是少量的蒸餾水中,加入碘片,振搖玻瓶至碘片全部溶解,再加入蒸餾水至規(guī)定量.貯于棕色玻瓶內(nèi),緊塞瓶蓋備用.煌綠水溶液煌綠0.5g蒸餾水100mL存放暗處,不少于1d,使其自然滅菌.牛膽鹽溶液干燥的牛膽鹽10g蒸餾水100mL煮沸溶解,121高壓滅菌20min.制備:基礎(chǔ)液900mL硫代硫酸鈉溶液100mL碘液20mL煌綠溶液2mL牛膽鹽溶液50mL臨用前,按上列順序,以無菌操作依次加入于基礎(chǔ)液中,每加入一種成分,均應(yīng)搖勻后再加入另一種成分.分裝于滅菌瓶中，每瓶100mL.40亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC)成分:蛋白胨5g乳糖4g亞硒酸氫鈉4g磷酸氫二鈉5.5g磷酸二氫鉀4.58L-胱氨酸0.01g蒸餾水1000mL1%L-胱氨酸-氫氧化鈉溶液的配法:稱取L-胱氨酸0.1g(或DL-胱氨酸0.2g)加1mol/L氫氧化鈉1.5mL,使溶解,再加入蒸餾水8.5mL即成.制法:將除亞硒酸氫鈉和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸餾水中，加熱煮沸，俟冷備用.另將亞硒酸氫鈉溶解于100mL蒸餾水中，加熱煮沸，候冷，以無