生物化學(xué)大題生化

1、大題目：什么是蛋白質(zhì)的變性(protein denaturation)？哪些因素可引起蛋白質(zhì)的變性？變性蛋白質(zhì)的性質(zhì)發(fā)生了哪些變化？有哪些應(yīng)用？天然蛋白質(zhì)在某些物理或化學(xué)因素作用下，其特定的空間結(jié)構(gòu)被破壞，從而導(dǎo)致理化性質(zhì)改變和生物學(xué)活性的喪失，稱為蛋白質(zhì)的變性作用。變性主要是二硫鍵及非共價(jià)鍵的斷裂，并不涉及一級結(jié)構(gòu)氨基酸序列的改變。物理因素：加熱，加壓，脫水，攪拌，振蕩，紫外線照射，超聲波的作用等化學(xué)因素：強(qiáng)酸，強(qiáng)堿，有機(jī)溶劑，尿素，重金屬鹽，生物堿試劑等性質(zhì)的改變：溶解度降低、溶液的粘滯度增高、不容易結(jié)晶、易被酶消化。蛋白質(zhì)變性后，疏水基團(tuán)暴露，相互之間容易聚集而發(fā)生沉淀。蛋白質(zhì)變性的應(yīng)用

2、：高溫、高壓滅菌。低溫保存酶、疫苗等，防止蛋白質(zhì)變性。大題目：Watson -Crick DNA double helix model要點(diǎn)：兩條反向平行的多核苷酸鏈圍繞同一個(gè)中心軸相互纏繞構(gòu)成右手雙螺旋結(jié)構(gòu)。嘧啶與嘌呤堿位于雙螺旋的內(nèi)側(cè)，磷酸與核糖在外側(cè)，彼此通過3,5-磷酸二酯鍵相連接，形成DNA分子的骨架。雙螺旋的直徑為2nm。每一圈雙螺旋有10對核苷酸，每圈高度為3.4nm。兩條鏈由堿基間的氫鍵相連。A與T配對，形成兩個(gè)氫鍵。G與C配對，形成三個(gè)氫鍵。由于堿基對排列的方向性，使得堿基對占據(jù)的空間是不對稱的，所以雙螺旋結(jié)構(gòu)上有兩條螺形凹溝，一條較深，稱為大溝；一條較淺，稱為小溝。維持DNA

3、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的作用力主要是堿基堆積力和氫鍵。堿基堆積力維持DNA 縱向穩(wěn)定，而氫鍵維持DNA 的橫向穩(wěn)定。大題目：酶原(zymogen)、酶原激活原理及其生理意義：酶原：有些酶在細(xì)胞內(nèi)合成或初分泌時(shí)只是酶的無活性前體，此前體物質(zhì)稱為酶原。酶原激活的原理：酶原（在特定條件下） 一個(gè)或幾個(gè)特定的肽鍵斷裂，水解掉一個(gè)或幾個(gè)短肽 分子構(gòu)象發(fā)生改變 形成或暴露出酶的活性中心。酶原激活的生理意義: 避免細(xì)胞產(chǎn)生的酶對細(xì)胞進(jìn)行自身消化，使酶在特定的部位和環(huán)境中發(fā)揮作用?？梢暈槊傅膬Υ嫘问?。糖代謝：酵解有氧氧化磷酸戊糖途徑糖元合成糖元分解糖異生場所胞漿胞漿、線粒體胞漿胞漿（肌肉、肝臟）胞漿胞漿、線粒體（肝臟）起始

4、物/終產(chǎn)物G/乳酸G/CO2+H2OG/磷酸核糖、NADPH、CO2G/糖元糖元/G非糖物質(zhì)/G關(guān)鍵步驟1、3、10（不可逆）1、3、4（不可逆）4個(gè)不可逆反應(yīng)，糖酵解1、3、10的逆向以及丙酮酸到草酰乙酸的不可逆反應(yīng)關(guān)鍵酶己糖激酶、6-磷酸葡萄糖激酶、丙酮酸激酶檸檬酸合酶異檸檬酸脫氫酶、-酮戊二酸脫氫酶復(fù)合體 6-磷酸葡萄糖脫氫酶糖原合成酶糖原磷酸化酶丙酮酸羧化酶、葡萄糖-6-磷酸酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶大題目：斜體加粗部分能量利用與產(chǎn)生產(chǎn)生4個(gè)ATP(1、3)，消耗2個(gè)ATP（7、10）凈生成36/38個(gè)ATP（一次TAC生成12個(gè)）。不產(chǎn)生ATP消耗2個(gè)ATP不生成也不消耗能量消耗6個(gè)

5、ATP還原力利用與產(chǎn)生生成1分子NADH，后在生成乳酸是被利用生成3分子NADH和1分子FADH2生成1分子NADPH消耗2分子NADH大題目：酵解、有氧氧化和糖異生途徑要求掌握關(guān)鍵酶所催化的關(guān)鍵反應(yīng)：糖酵解的關(guān)鍵酶有：己糖激酶、6-磷酸果糖激酶-1、丙酮酸激酶 。關(guān)鍵反應(yīng)：（1）葡萄糖磷酸化為6-磷酸葡萄糖、（2）6-磷酸果糖轉(zhuǎn)變?yōu)?,6-雙磷酸果糖、(3)磷酸烯醇式丙酮酸轉(zhuǎn)變成丙酮酸， 并通過底物水平磷酸化生成ATP。有氧氧化的關(guān)鍵步驟（加粗）和關(guān)鍵酶：丙酮酸脫氫酶復(fù)合體的組成：三種酶：丙酮酸脫氫酶、二氫硫辛酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、二氫硫辛酸脫氫酶。五種輔酶：TPP、硫辛酸、HSCoA、FAD、NA

6、D+。三羧酸循環(huán)中的關(guān)鍵酶：檸檬酸合酶、異檸檬酸脫氫酶、-酮戊二酸脫氫酶復(fù)合體。糖異生見上表。大題目：血糖的概念、正常值；血糖來源和去路：血糖：指血液中的葡萄糖。血糖水平，即血糖濃度，正常血糖濃度 ：3.896.11mmol/L（70-110mg/dL）。血糖來源：食物消化吸收；肝糖元分解；非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化。血糖去路：（1）通過酵解途徑生成丙酮酸，有氧時(shí)生成氧氣、水和能量，無氧時(shí)生成乳酸和能量；（2）合成肝糖元和肌糖元；（3）磷酸戊糖途徑形成其他糖，如乳糖；（4）代謝合成脂肪和氨基酸。大題目：脂酸-氧化的概念、（部位/亞細(xì)胞定位）、主要過程、關(guān)鍵酶、反應(yīng)部位及能量的計(jì)算：脂酸的-氧化：在氧氣供給充

7、足的條件下，脂酸可在體內(nèi)分解成CO2及H2O并釋放大量能量，以ATP形式供機(jī)體利用。主要過程包括：1.脂酸活化，生成脂酰CoA；2.脂酰CoA進(jìn)入線粒體；3.脂酰CoA的-氧化；4.三羧酸循環(huán)和氧化磷酸化。關(guān)鍵酶：肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶。反應(yīng)部位：除腦組織外/多數(shù)組織/以肝臟和肌肉最為活躍。亞細(xì)胞定位：1.FFA的活化(胞液 )；2.脂肪酸的-氧化(線粒體)。能量計(jì)算：（舉例：一分子三軟脂酰甘油徹底氧化成CO2和H2O，產(chǎn)生多少分子ATP？寫出代謝途徑的主要過程。）：1分子脂酸通過-氧化生成1分子乙酰CoA、1分子比原來少2個(gè)碳原子的脂酰CoA、1分子NADH+H+、1分子FADH2。1分子NADH

8、+H+氧化生成3分子ATP，1分子FADH2氧化生成2分子ATP,1分子乙酰CoA通過三羧酸循環(huán)生成12分子ATP。以軟脂酸（16C）為例：供進(jìn)行7次-氧化，生成7分子FADH2、7分子NADH+H+及8分子乙酰CoA。1分子軟脂酸徹底氧化生成的ATP=7(32)812=131。脂肪活化是消耗2分子ATP，因此凈生成129分子ATP。 飽和脂肪酸的碳原子數(shù)乙酰CoA分子數(shù)= 2-氧化次數(shù)=乙酰CoA分子數(shù)1ATP生成數(shù)=-氧化次數(shù)（23）乙酰CoA分子數(shù)12凈生成數(shù)=生成數(shù)1大題目：酮體(ketone body)的概念、合成及利用的部位、生理意義：酮體（ketone bodies）：酮體是肝臟

9、FFA代謝特有的中間產(chǎn)物，包括乙酰乙酸（占30）、-羥丁酸（占70）和丙酮（微量）。酮體合成的部位: 線粒體，利用特點(diǎn)：肝內(nèi)生酮肝外用。生理意義：一、酮體分子量小，水溶性大，易于通過血腦屏障和肌肉毛細(xì)血管壁，是腦組織和肌肉組織的重要能源。二、酮體的利用增加可減少葡萄糖的利用，有利于維持血糖水平的恒定，節(jié)省蛋白質(zhì)的消耗。大題目：氨的來源、去路，氨中毒的機(jī)理：氨的來源：（1）氨基酸脫氨基作用產(chǎn)生的氨是體內(nèi)氨的主要來源。（2）腸道吸收的氨，包括腸內(nèi)氨基酸砸腸道細(xì)菌作用下產(chǎn)生的氨和腸道尿素經(jīng)腸道細(xì)菌尿素酶水解產(chǎn)生的氨。（3）腎小管上皮細(xì)胞分泌的氨，主要來自谷氨酰胺。去路：（1）在肝內(nèi)合成尿素，這是做主

10、要的去路；（2）合成非必需氨基酸及其他含氮化合物；（3）合成谷氨酰胺；（4）腎小管泌氨，生成的NH3在酸性條件下生成NH3+，隨尿排出。肝昏迷氨中毒的機(jī)制:氨進(jìn)入腦組織，與腦中的酮戊二酸結(jié)合生成谷氨酸，氨也可進(jìn)一步與谷氨酸結(jié)合生成谷氨酰胺，因此，腦中氨的增加使得腦細(xì)胞中的酮戊二酸減少，導(dǎo)致三羧酸循環(huán)減弱，從而使腦組織中ATP生成減少，引起大腦功能障礙，嚴(yán)重時(shí)可引起中毒。大題目：復(fù)制與轉(zhuǎn)錄的異同：一、相同點(diǎn)：都以DNA為模板；都需要依賴DNA的聚合酶；聚合過程都是核苷酸之間生成磷酸二酯鍵；都從5至3方向延伸新鏈；都遵從堿基配對規(guī)律二、不同點(diǎn)：復(fù)制轉(zhuǎn)錄模板兩股鏈均復(fù)制模板鏈轉(zhuǎn)錄（不對稱轉(zhuǎn)錄）原料d

11、NTPNTP酶DNA聚合酶RNA聚合酶產(chǎn)物子代雙鏈DNA（半保留復(fù)制）mRNA、tRNA、rRNA配對AT、GCAU、TA、GC兩個(gè)題目結(jié)合考大題目：原核生物乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)：內(nèi)含Z、Y和A三個(gè)結(jié)構(gòu)基因，分別編碼-半乳糖苷酶、透酶和乙?；D(zhuǎn)移酶，此外還有一個(gè)操縱序列O、一個(gè)啟動序列P及一個(gè)調(diào)節(jié)基因I。調(diào)節(jié)機(jī)制：阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)、CAP的正性調(diào)節(jié)、協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)。大題目：大腸桿菌為什么在葡萄糖和乳糖共存的情況下，首先利用葡萄糖，然后再利用乳糖？乳糖存在時(shí)，由-半乳糖苷酶催化成半乳糖，半乳糖與I序列表達(dá)的阻遏蛋白結(jié)合，使蛋白質(zhì)構(gòu)想變化，導(dǎo)致阻遏蛋白與O序列解離，發(fā)生轉(zhuǎn)錄。葡萄糖濃度較低時(shí)，cAMP濃度

12、較高，cAMP與CAP結(jié)合，這是CAP結(jié)合CAP位點(diǎn)，刺激RNA的轉(zhuǎn)錄活性。因此，葡萄糖濃度低，乳糖濃度高時(shí)，轉(zhuǎn)錄表達(dá)更好地進(jìn)行。單純?nèi)樘谴嬖跁r(shí)，細(xì)菌利用乳糖作碳源；若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在時(shí)，細(xì)菌首先利用葡萄糖才是最節(jié)能的，這時(shí)，葡萄糖通過降低cAMP濃度，阻礙cAMP與CAP結(jié)合而抑制lac操縱子轉(zhuǎn)錄，使細(xì)菌只能利用葡萄糖。大題目：基因工程的操作步驟：（1）分離目的基因和載體DNA。（2）用合適的內(nèi)切酶切割上述兩者，產(chǎn)生匹配的末端。（3）連接酶連接目的基因和載體，形成重組DNA分子。（4）重組DNA分子轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞。（5）篩選有目的基因的陽性克隆。大題目：以腎上腺素為例，扼要說明作

13、用于膜受體激素的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程。（cAMP-蛋白激酶途徑）腎上腺素與受體結(jié)合，形成腎上腺素-受體復(fù)合物，激活無活性的GGDP形成有活性的GGTP，G蛋白又激活無活性的腺苷酸環(huán)化酶（AC）形成有活性的AC，ATP在AC的作用下形成cAMP，激活cAMP蛋白激酶（PKA）的形成。PKA通過抑制糖元合酶，促進(jìn)糖元磷酸化酶來影響糖元的代謝。大題目：成熟紅細(xì)胞的糖代謝特點(diǎn)(糖代謝及其生理意義)：紅細(xì)胞中ATP的功能維持紅細(xì)胞膜上鈉泵(Na+-K+-ATPase)的正常運(yùn)轉(zhuǎn)；維持紅細(xì)胞膜上鈣泵(Ca2+-ATPase)的正常運(yùn)轉(zhuǎn)；維持紅細(xì)胞膜上脂質(zhì)與血漿脂蛋白中的脂質(zhì)進(jìn)行交換；少量ATP用于谷胱甘肽、NAD+ 的生物合成；ATP用于葡萄糖的活化，啟動糖酵解過程。2, 3-BPG的功能：2, 3-BPG是調(diào)節(jié)血紅蛋白(Hb)運(yùn)氧的重