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1、茯苓多糖的提取方法優(yōu)選【摘要】目的優(yōu)選茯苓多糖的提取方法。方法以茯苓多糖為評價指標,采用正交實驗法對茯苓多糖加熱回流及超聲波提取工藝進展優(yōu)選,并將兩種方法進展比擬。結(jié)果兩種方法的提獲得率有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論超聲波提取茯苓多糖較優(yōu)?!娟P(guān)鍵詞】茯苓;正交實驗法;超聲波提取;加熱回流提取Abstrat:bjetiveTptiizeextratinethdfpahyaninprias(Sh.)lf.ethdsTherthgnaltestasusedtptiizeextratintehniquefpahyaninprias(Sh.)lfbyultrasniandheatingrefluxit
2、hthententfpahyaninprias(Sh.)lfastheindex,andthetextratinethdserepared.ResultsThereeresignifiantdifferenesbeteenthetethds(P0.05)iththeextratinrate.nlusinUltrasniextratinisbetterthanheatingrefluxextratin.Keyrds:Prias(Sh.)lf;rthgnaltest;Ultrasniextratin;Heatingrefluxextratin茯苓Prias(Sh.)lf又稱茯菟、茯靈、松薯等,為多
3、孔菌科(Plypraeae)真菌茯苓的枯燥菌核,在我國資源豐富,全國各地均有栽培,主產(chǎn)于云南、安徽、湖南等剩茯苓是一味使用歷史悠久的中藥,在?神農(nóng)本草經(jīng)?中被列為上品,謂其“主胸脅逆氣,利小便,久服安魂寧神,不饑延年。?本草綱目?也記載:茯苓“治頭風虛眩,暖腰膝,主五勞七傷。歷代醫(yī)家均肯定茯苓既有滋補強身作用,又有滲濕利水、益脾和胃、寧心安神之功。茯苓藥性緩和,補而不峻,利而不猛,既能扶正,又可祛邪,能治療脾胃虛弱、遺精早泄、心悸失眠、健忘多夢、小便不利、嘔吐腹瀉等癥。其主要有效成分茯苓多糖1是一種非特異性免疫促進劑,其不僅可以進步機體的抗病才能,還有較強的抗癌作用2。為了進步茯苓多糖的提獲得
4、率,我們以茯苓多糖為考察指標,進展加熱回流和超聲波提取茯苓多糖的比照實驗。現(xiàn)報道如下。1儀器與藥品UV-2550型紫外可見分光光度儀(日本島津),超聲波清洗器(KQ-100DB型,江蘇昆山),F(xiàn)A1004電子分析天平(上海良平儀表)。茯苓(湖南靖州),葡萄糖標準品(供含量測定用,批號110833-202203,中國藥品生物制品檢驗所),苯酚,氫氧化納,冰乙酸,無水乙醇,丙酮,碳酸氫納,濃硫酸和鋁片等。2方法及結(jié)果2.1正交實驗設(shè)計及結(jié)果3根據(jù)茯苓多糖的理化性質(zhì),以及大消費中的可行性原那么(減少工序,降低本錢),選取提取次數(shù)、藥品粒度、固液比(提取溶液為0.5%的NaH溶液)、提取時間為考察因素
5、,進展L9(34)正交實驗,以茯苓多糖的含量(用苯酚-硫酸紫外分光光度法測定)為評價指標,優(yōu)選兩種方法的最正確工藝。因素程度見表12,實驗設(shè)計與結(jié)果見表34,方差分析見表56。2.2實驗結(jié)果分析2.2.1加熱回流提取茯苓多糖由表3可知,極差中項最大,D項最小,即該4個因素對用加熱回流提取多糖產(chǎn)量的影響程度由大到小為:ABD,說明在加熱回流的實驗條件下,就茯苓多糖的產(chǎn)率而言,各因素對其影響的主次順序是:固液比藥品粒度提取時間提取次數(shù),而由表5知因素對用該方法提取茯苓多糖有顯著影響,就多糖產(chǎn)率而言所選最適宜的提取工藝條件為:A2B32D3。綜合考慮,用加熱回流的方法提取茯苓多糖的最正確工藝條件為:
6、藥品粒度為40目,提取時間為100in,固液比為112,提取次數(shù)為2次。2.2.2超聲提取茯苓多糖根據(jù)表4可以知,極差中B項最大,項最小,即該4個因素對用超聲提取茯苓多糖的產(chǎn)量的影響程度由大到小為:BDA,說明在超聲提取該實驗條件下,各因素對其影響的主次順序是:提取時間提取次數(shù)藥品粒度固液比,由表6知因素B和D對用該方法提取茯苓多糖有極顯著的影響,因素A對用該方法提取茯苓多糖有顯著影響,就多糖產(chǎn)率而言所選最適宜的提取工藝條件為:A1B22D3。綜合考慮:用超聲提取茯苓多糖的最正確工藝條件為:藥品粒度為20目,提取時間45in,固液比為110,提取次數(shù)為3次。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.3最正確提
7、取工藝驗證在加熱回流提取最正確條件下(藥品粒度40目,提取時間為100in,固液比為112,提取次數(shù)為2次)進展3次重復(fù)實驗。結(jié)果見表7。表1因素程度設(shè)計(加熱回流法)表2因素程度設(shè)計(超聲提取法)表3加熱回流提取實驗結(jié)果表4超聲提取實驗結(jié)果表5加熱回流法方差分析結(jié)果表6超聲提取法的方差分析結(jié)果表7加熱回流提取茯苓多糖最正確條件驗證實驗從表7可看出,加熱回流提取茯苓多糖中最正確提取工藝條件具有較好重復(fù)性,茯苓多糖的產(chǎn)率較高,說明該最正確提取工藝是合理可靠的。在超聲提取最正確條件下(藥品粒度為20目,提取時間45in,固液比為1:10,提取時間為3次)進展3次重復(fù)實驗。結(jié)果見表8。表8超聲提取茯
8、苓多糖的最正確工藝條件驗證實驗從表8可看出,超聲提取茯苓多糖中最正確提取工藝條件具有較好重復(fù)性,茯苓多糖的產(chǎn)率較高,說明該最正確工藝條件是合理、可靠的。2.4加熱回流提取工藝和超聲提取工藝比擬對加熱回流提取工藝和超聲提取工藝的最正確提取工藝進展t檢驗,得t=5.4121,=0.05,f=3+3-2=4,t0.05/2(4)=2.776。故tt0.05/2,即P0.05,所以兩種方法提取茯苓多糖有顯著性差異。由實驗結(jié)果可知,就茯苓多糖的提獲得率而言,超聲波提取法優(yōu)于加熱回流提取法。3討論影響茯苓多糖的提取工藝的因素有:藥品粒度、提取時間、固液比、提取次數(shù)、提取溫度等。在本次的實驗中,采用的是加熱
9、回流和超聲波提取的方式,在回流提取中溫度是一定值,故不列入考察范圍之中。本實驗用苯酚-硫酸紫外分光光度法測定茯苓多糖。精細度實驗、重復(fù)性實驗、穩(wěn)定性實驗、回收率實驗等結(jié)果說明,用苯酚-硫酸紫外分光光度法測定茯苓中的茯苓多糖含量合理可行,且該方法快速、準確、重復(fù)性較好。本實驗考察了影響藥材有效成分提取的4個主要因素:藥材粒度、固液比、提取時間,提取次數(shù)來研究茯苓多糖的提取,并對用傳統(tǒng)加熱回流和超聲提取茯苓多糖的實驗均進展了最正確工藝的驗證,并對其因素的顯著性影響進展了分析,得到了加熱回流和超聲提取茯苓多糖的最正確工藝條件,并對它們進展了統(tǒng)計學處理,從而得到了從茯苓中提取茯苓多糖的較為理想的方法超聲提取法?!緟⒖嘉墨I】1胡斌,楊益平,葉陽.茯苓化學成分研究J.中草
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