復(fù)方降脂合劑中五味子質(zhì)控方法的研究

1、復(fù)方降脂合劑中五味子質(zhì)控方法的研究 ）復(fù)方降脂合劑welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience復(fù)方降脂合劑由五味子、當歸、枸杞、白芍、川芎、黨參、黃芪、麥冬、菟絲子等多味中藥經(jīng)水煎煮而成，具有降壓降脂的功效。五味子作為一種常用藥材，在本復(fù)方制劑中五味子投藥量較大，且其中五味子醇甲對于治療病癥療效較為明顯，為治療病癥的主要成分，但是五味子醇甲的含量較少，所以保證五味子在制劑中的內(nèi)在質(zhì)量及其穩(wěn)定性極為重要。復(fù)方降脂合劑中五味子質(zhì)控方法的研究1、目的2、方法與結(jié)果3、總結(jié)1、目的w

2、elcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience本實驗用高效液相色譜法建立五味子藥材中五味子醇甲的含量測定及方法學(xué)驗證的方法合理性，為有效控制制劑中五味子的內(nèi)在質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。復(fù)方降脂合劑中五味子質(zhì)控方法的研究1、目的2、方法與結(jié)果3、總結(jié)2.1 實驗儀器島津高效色譜儀（包括：shimadzu LC-6A泵，shimadzu SPD-6AV紫外檢測器，7725i型進樣閥，Anastar色譜工作站）；色譜分析柱KromasilC18； Micro Centaur型離心機（MSE

3、）； YKH-1型液體快速混合器（江西醫(yī)療器械廠）；Model C9860A超聲波清洗器（CBL）；HGC-12A型氮吹儀（天津恒奧科技發(fā)展有限公司）。2.2 實驗試劑五味子醇甲標準品（批號：110857-201211，中國食品藥品檢定研究院,）甲醇（天津市康科德科技有限公司，色譜純）、實驗用水為蒸餾水、三氯甲烷（天津市江天化工技術(shù)有限公司，含量：99%，分析純），乙醇（天津市化學(xué)試劑三廠）、乙酸乙酯（天津市化學(xué)試劑三廠）。2.3 色譜條件色譜柱KromasilC18 (250mm4.6mm,5m,天津琛航科學(xué)儀器有限公司)；流動相：甲醇水（60:40）；檢測波長：254nm流速：1 mLmi

4、n-1；進樣量20 uL。2.4 溶液制備標準溶液：精密稱取10.0 mg五味子醇甲對照品，置于10mL容量瓶中，配置成1 mg/mL的溶液，對照品溶液即得。樣品溶液：充分搖勻本制劑，取本制劑10 mL，加入15 mL氯仿萃取，靜置15 min，取上層；加入10 mL氯仿萃取，靜置15 min，取上層；加入10mL氯仿萃取，靜置，取下層；合并下層溶液，使用氮吹儀吹至無氯仿味，之后加入甲醇至1 mL，渦旋，放入離心機12000 rmin-1離心5 min，取出上清液，精密吸取上清液500 L，加入甲醇（1:3）稀釋至2 mL，即得。2.5 標準曲線的制備將對照品溶液用甲醇分別稀釋成0.5、1、2

5、、5、10 、25、50 gmL-1的系列溶液，分別進樣3次,每次20 L,記錄峰面積。以五味子醇甲的濃度（X）為橫坐標，測得的峰面積(Y)為縱坐標，繪制標準曲線，所得回歸方程為y=20285x-4531.8（r=0.9998）五味子醇甲標準曲線2.6 合理性檢驗 2.穩(wěn)定性試驗 精密吸取同一供試品溶液按以上色譜條件分別于2、4、6、8、12、24h進樣測定峰面積，供試品峰面積的RSD為2.51%，測定五味子醇甲峰面積結(jié)果表明, 供試品溶液在配制后的24h內(nèi)基本無變化，穩(wěn)定性良好。取已稀釋的樣品600 L分別于標低、中、高的三個1.5 mL離心管中，分別加入其含量的80%、100%、120%的

6、標品，標品濃度為10 gmL-1,其加入量分別為169 、212 、254 L混勻即可，該樣品溶液的日內(nèi)相對標準偏差為3.04%，日間相對標準偏差為1.28%，均小于5% 。4.重復(fù)性試驗 精密稱取同一批號樣品6 份，制備供試品溶液，測定峰面積并計算五味子醇甲含量，結(jié)果五味子醇甲平均含量3.5 gmL-1，RSD為1.47%，結(jié)果表明樣品的重復(fù)性良好。1 精密度試驗3.加樣回收率試驗 取已稀釋的樣品600 L分別于標低、中、高的三個1.5 mL離心管中，分別加入其含量的80%、100%、120%的標品，標品濃度為10 gmL-1,其加入量分別為169、212、254 L混勻即可，按2.1項下色

7、譜條件進行試驗，結(jié)果測得樣品的平均回收率為97.29%，RSD為0.49% 。2.7 樣品含量測定 充分搖勻樣品，取本制劑10 mL，加入15 mL氯仿萃取，靜置15 min，取上層；加入10 mL氯仿萃取，靜置15 min，取上層；加入10mL氯仿萃取，靜置，取下層；合并下層溶液，使用氮吹儀吹至無氯仿味，之后加入甲醇至1 mL，渦旋，放入離心機12000 rmin-1離心5 min，取出上清液，精密吸取上清液500 L，加入甲醇（1:3）稀釋至2 mL即可，以此方法處理三批樣品，按錢數(shù)色譜條件進行試驗，每批樣品進樣六針，記錄峰面積。測得五味子醇甲的平均含量為3.535gmL-1。3、總結(jié)本實

8、驗選擇五味醇甲作為含測指標，高效液相色譜法操作較為簡便、儀器設(shè)備易得，該方法容易普及，并能快速、準確、有效的測定五味子醇甲的含量。實驗中采用高效液相色譜法測定五味子醇甲的濃度水平，進而可能建立該制劑的質(zhì)量控制方法。樣品萃取溶劑的選擇三氯甲烷與乙醚極性比較相近，考慮安全因素,故改用氯仿作為本品的萃取溶劑用氯仿萃取對其提取相對比較完全, 且雜質(zhì)對五味子醇甲測定的影響不大, 適用于同類產(chǎn)品的質(zhì)量標準研究實驗中五味子醇甲大多分布在油層且含量較少,樣品在萃取前要充分搖勻樣品制劑五味子醇甲的含量作為考察指標，結(jié)果表明提取采用三氯甲烷提取3次效果最佳。123薄層色譜法在2010版藥典中應(yīng)用的更加廣泛。近年來，由于薄層掃描儀的出現(xiàn)以及高質(zhì)量的預(yù)控板、高效薄層板的應(yīng)用以及上樣技術(shù)的改進。目前，薄層色譜已進入儀器化、高效化、定量化及數(shù)據(jù)處理自動化階段，即向儀