維生素測(cè)定(3)課件

1、關(guān)于維生素的測(cè)定 (3)第一張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月Vitamin的一般知識(shí)一、共同特點(diǎn)：大多不能在體內(nèi)合成（可少量合成）大多不能大量?jī)?chǔ)存于組織中不構(gòu)成組織的原料不提供能量以輔酶或輔基形式參與酶反應(yīng)第二張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第三張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、命名與分類(lèi)以字母、化學(xué)結(jié)構(gòu)或功能命名Vitamin A/視黃醇/干眼病維生素第四張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月分類(lèi)：脂溶性、水溶性第五張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三、維生素缺乏臨床缺乏亞臨床缺乏(marginal deficiency)降低對(duì)

2、疾病的抵抗力、降低工作效率和生活質(zhì)量。脂溶性維生素主要儲(chǔ)存在肝臟中，攝取過(guò)多，可能會(huì)引起中毒。攝取過(guò)少，可緩慢出現(xiàn)缺乏癥狀。水溶性的呢？第六張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第七張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 概述一、vitamin含量和測(cè)定意義1 含量分布：VA 0.1-300mg/100g 魚(yú)肝-胡蘿卜素 0.1-12mg/100g 果蔬Vc 0.1-1000mg/100gVB的含量較低第八張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2 測(cè)定意義A 利用性：人體需要、合理膳食B 貯存C 加工第九張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、維生素分析

3、工作的特點(diǎn)1 個(gè)別測(cè)定。無(wú)所謂總量2 穩(wěn)定性差，光、熱、氧、酶敏感3 干擾雜質(zhì)多4 結(jié)合態(tài)存在的問(wèn)題第十張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、維生素分析的一般程序1 使游離出來(lái)2 提?。ㄟx溶劑）3 純化（根據(jù)待測(cè)vit與雜質(zhì)的性質(zhì)差異）4 測(cè)定第十一張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月維生素分析的方法有 化學(xué)法(比色法、滴定法） 儀器法（紫外法、熒光法） 微生物法(水溶性維生素、B2） 生物鑒定法 (VD )第十二張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 水溶性維生素的測(cè)定 水溶性維生素的性質(zhì)樣品預(yù)處理第十三張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第十四

4、張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月維生素名稱(chēng)一般使用的化學(xué)名其他常用別稱(chēng)及說(shuō)明維生素B1硫胺維生素B2核黃素維生素G維生素B3煙酸維生素PP、煙堿酸、尼古丁酸維生素B5泛酸遍多酸維生素B6吡哆醇類(lèi)包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺維生素B7生物素維生素H、輔酶R維生素B9蝶酰谷氨酸葉酸、維生素M、葉精維生素B12鈷胺素氰鈷胺、輔酶B12第十五張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月一、維生素B2的測(cè)定第十六張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月在食品中以游離形式或磷酸酯等結(jié)合形式。是機(jī)體許多重要輔酶的組成成分，對(duì)機(jī)體內(nèi)糖、蛋白質(zhì)、脂肪代謝起著重要作用。主要來(lái)源是各種動(dòng)物性食品

5、，其中以肝、腎、心、蛋、奶含量最多，其次是植物性食品的豆類(lèi)和新鮮綠葉蔬菜。第十七張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1原理熒光計(jì)法 核黃素在440500 nm波長(zhǎng)光照射下發(fā)出黃綠色熒光。 在440nm激發(fā)波長(zhǎng)，525nm發(fā)射波長(zhǎng)下測(cè)定提純液的（黃綠色）熒光強(qiáng)度。之后，試液中加入低亞硫酸鈉(Na2S2O4)，將核黃素還原為無(wú)熒光物質(zhì)，再測(cè)定殘余雜質(zhì)的熒光強(qiáng)度，熒光值之差與核黃素含量成正比。第十八張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第十九張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3測(cè)定方法 (1)樣品提取 (2)氧化去雜質(zhì) (3)核黃素的吸附和洗脫(4)熒光測(cè)定 樣品經(jīng)酸解

6、、酶解處理使核黃素游離出來(lái)，用高錳酸鉀和過(guò)氧化氫氧化其它色素和雜質(zhì)，再經(jīng)硅鎂吸附劑進(jìn)行柱層析，吸附提純核黃素。第二十張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4 結(jié)果計(jì)算第二十一張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月5 說(shuō)明核黃素對(duì)光敏感，整個(gè)操作應(yīng)在暗室中進(jìn)行。核黃素可被低亞硫酸鈉還原成無(wú)熒光型，但搖動(dòng)后很快就被空氣氧化成有熒光物質(zhì)，所以要立即測(cè)定。第二十二張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、維生素B1 比色法硫色素?zé)晒夥ㄒ合嗌V法以游離態(tài)，或以焦磷酸酯形式存在于自然界。在酵母、米糠、麥胚、花生、黃豆以及綠色蔬菜和牛乳、蛋黃中含量較為豐富。動(dòng)物組織不如植物含量豐富。

7、第二十三張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二十四張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月熒光計(jì)法1原理硫胺素在堿性鐵氰化鉀溶液中，能被氧化成硫色素，在紫外光照射下產(chǎn)生藍(lán)色熒光。如果不存在其它熒光物質(zhì)干擾，熒光強(qiáng)度與硫色素含量成正比，即與溶液中硫胺素含量成正比。 第二十五張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二十六張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4操作方法(1)樣品提取 水解 酶解 (2)凈化 (3)氧化 (4)熒光強(qiáng)度的測(cè)定 第二十七張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月5 結(jié)果計(jì)算第二十八張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月6說(shuō)明

8、一般食品中的維生素B1有游離型的，也有結(jié)合型的，即與淀粉、蛋白質(zhì)等結(jié)合在一起的，故需用酸和酶水解，使結(jié)合型B1成為游離型，再采用此法測(cè)定。第二十九張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月可在加入酸性氯化鉀后停止實(shí)驗(yàn)，因?yàn)榱虬匪卦诖巳芤褐斜容^穩(wěn)定。第三十張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月樣品與鐵氰化鉀溶液混合后，所呈現(xiàn)的黃色應(yīng)至少保持15秒，否則應(yīng)再滴加鐵氰化鉀溶液12滴。第三十一張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月紫外線破壞硫色素，所以硫色素形成后要迅速測(cè)定，并力求避光操作。第三十二張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月氧化是操作的關(guān)鍵步驟，操作中應(yīng)保持加試

9、劑的迅速一致第三十三張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三、維生素C的測(cè)定1 Vc的性質(zhì)已糖醛基酸 易溶于水、醇，不溶于乙醚、氯仿等干燥狀態(tài)較穩(wěn)定、酸性介質(zhì)中較穩(wěn)定對(duì)光、氧、銅離子敏感第三十四張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第三十五張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第三十六張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2 測(cè)定方法(一) 2，4二硝基苯肼比色法(二) 2，6二氯靛酚滴定法(三)熒光法第三十七張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(一)2,4二硝基苯肼比色法1原理 用活性炭（其中吸附的氧）將還原型抗壞血酸氧化為脫氫抗壞血酸，然后與2，4

10、二硝基苯阱作用生成紅色的脎。在濃硫酸的脫水作用下，可轉(zhuǎn)變?yōu)榻奂t色的無(wú)水化合物雙2，4二硝基苯。在硫酸溶液中顯色穩(wěn)定，最大吸收波長(zhǎng)為500nm，吸光度與總抗壞血酸含量成正比，故可進(jìn)行比色。第三十八張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3測(cè)定步驟樣品提取 氧化 顯色反應(yīng) 85硫酸處理 比色 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 第三十九張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4 結(jié)果計(jì)算第四十張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月5、說(shuō)明活性炭對(duì)抗壞血酸的氧化作用，是基于其表面吸附的氧進(jìn)行界面反應(yīng)，加入量過(guò)低，氧化不充分，測(cè)定結(jié)果偏低，加入量過(guò)高，對(duì)抗壞血酸有吸附作用，使結(jié)果也偏低。第四十一張，P

11、PT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月對(duì)無(wú)色或已脫色樣品，也可用溴液作氧化劑。還可用2，6二氯靛酚作氧化劑。第四十二張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(二)2,6二氯靛酚滴定法1、原理 還原型抗壞血酸可以還原染料2，6二氯靛酚。該染料在酸性溶液中呈粉紅色(在中性或堿性溶液中呈藍(lán)色)，被還原后顏色消失。還原型抗壞血酸還原染料后，本身被氧化成脫氫抗壞血酸。在沒(méi)有雜質(zhì)干擾時(shí)，一定量的樣品提取液還原標(biāo)準(zhǔn)染料液的量，與樣品中抗壞血酸含量成正比。第四十三張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第四十四張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3測(cè)定步驟(1)提取 鮮樣制備 干樣制備

12、 (2)滴定 第四十五張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4 結(jié)果計(jì)算第四十六張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月5說(shuō)明所有試劑最好用重蒸餾水配制。 樣品采取后，應(yīng)浸泡在已知量的2草酸溶液中，以防止維生素C氧化損失。測(cè)定時(shí)整個(gè)操作過(guò)程要迅速，防止抗壞血酸被氧化。第四十七張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月若測(cè)動(dòng)物性樣品，須用10三氯醋酸代替2草酸溶液提取。 若樣品濾液顏色較深，影響滴定終點(diǎn)觀察，可加入白陶土再過(guò)濾。白陶土使用前應(yīng)測(cè)定回收率。 若樣品中含有Fe2+、Cu2+、Sn2+、亞硫酸鹽、硫化硫酸鹽等還原性雜質(zhì)時(shí)，會(huì)使結(jié)果偏高。第四十八張，PPT共一百一十一頁(yè)

13、，創(chuàng)作于2022年6月第三節(jié) 脂溶性維生素的測(cè)定維生素A的測(cè)定胡蘿卜素的測(cè)定維生素D的測(cè)定維生素E的測(cè)定第四十九張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月脂溶性維生素的理化性質(zhì)主要有下列方面：1、溶解性2、耐酸/堿性3、耐熱性、耐氧化性第五十張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1、溶解性：脂溶性維生素不溶于水，易溶于脂肪、乙醇、丙酮、氯仿、乙醚、苯等有機(jī)溶劑。第五十一張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2、耐酸堿性：維生素E對(duì)堿不穩(wěn)定，但在抗氧化劑存在下或惰性氣體保護(hù)下，也能經(jīng)受堿的煮沸。酸堿維生素A、D不穩(wěn)定穩(wěn)定維生素E穩(wěn)定不穩(wěn)定第五十二張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作

14、于2022年6月3、耐熱性、耐氧化性：耐熱性耐氧化性維生素A好，能經(jīng)受煮沸分子中有雙鏈，易被氧化，光、熱促進(jìn)其氧化維生素D好，能經(jīng)受煮沸不易被氧化維生素E好，能經(jīng)受煮沸空氣中能慢慢被氧化，光、熱、堿能促進(jìn)其氧化作用。 第五十三張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月一、維生素A的測(cè)定（一）概述（二）三氯化銻比色法（三）紫外分光光度法（四）高效液相色譜法第五十四張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月概述第五十五張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第五十六張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第五十七張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月測(cè)定方法三氯化銻比色

15、法紫外分光光度法熒光法氣相色譜法高效液相色譜法第五十八張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三氯化銻比色法（GB第二法）1原理 在氯仿溶液中，維生素A與三氯化銻可生成藍(lán)色可溶性絡(luò)合物，在620nm波長(zhǎng)處有最大吸收峰，其吸光度與維生素A的含量在一定的范圍內(nèi)成正比，故可比色測(cè)定。第五十九張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2適用范圍及特點(diǎn)本法適用于維生素A含量較高的各種樣品(高于5一l0gg)，對(duì)低含量樣品，因受其他脂溶性物質(zhì)的干擾，不易比色測(cè)定。第六十張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3測(cè)定方法 (1)樣品處理 皂化 （氫氧化鉀，乙醇） 提取 （乙醚） 洗滌 （水，

16、氫氧化鉀） 濃縮 （無(wú)水硫酸鈉，三氯甲烷）第六十一張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 (3)樣品測(cè)定 第六十二張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月結(jié)果計(jì)算第六十三張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月所用氯仿中不應(yīng)含有水分，因三氯化銻遇水會(huì)出現(xiàn)沉淀，干擾比色測(cè)定。 故在每m1氯仿中應(yīng)加入乙酸酐1滴，以保證脫水。 說(shuō)明與注意點(diǎn)第六十四張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月維生素A見(jiàn)光易分解，整個(gè)實(shí)驗(yàn)應(yīng)在暗處進(jìn)行，防止陽(yáng)光照射，或采用棕色玻璃避光。 第六十五張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月測(cè)定結(jié)果也可以每100g食品中所含維生

17、素A的國(guó)際單位表示，每國(guó)際單位維生素A相當(dāng)于0.3g維生素A。1g胡蘿卜素=0.167g視黃醇當(dāng)量。以往VA的量常用國(guó)際單位（IU）表示。1IUVA=0.33gVA=0.33g視黃醇當(dāng)量。第六十六張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三氯化銻腐蝕性強(qiáng)，不能沾在手上；三氯化銻遇水生成白色沉淀，因此用過(guò)的儀器要先用稀鹽酸浸泡后再清洗。第六十七張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月比色法除用三氯化銻作顯色劑外，還可用三氟乙酸、三氯乙酸作顯色劑。其中三氟乙酸沒(méi)有遇水發(fā)生沉淀而使溶液混濁的缺點(diǎn)。第六十八張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(二)紫外分光光度法1.原理 維生素A的

18、異丙醇溶液在325nm波長(zhǎng)下有最大吸收峰，其吸光度與維生素A的含量成正比。第六十九張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2適用范圍及特點(diǎn) 本法的靈敏度較比色法高，可測(cè)定維生素A含量低于5gg的樣品。主要缺點(diǎn)是在維生素A最大吸收波長(zhǎng)325nm附近許多其他化合物也有吸收，干擾測(cè)定，第七十張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月故本法適用于透明魚(yú)油，維生素A的濃縮物等純度較高的樣品。對(duì)于一般樣品，測(cè)定前必須先將脂肪抽提出來(lái)進(jìn)行皂化，萃取其不皂化部分，再經(jīng)柱層析除去干擾物。第七十一張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（三）高效液相色譜法1、原理（GB/T5009.82-2003

19、第一法） 皂化、提取樣品中的維生素A和維生素E后，用高效液相色譜法C18反相柱將兩者分離，用紫外檢測(cè)器檢測(cè)，內(nèi)標(biāo)法定量。第七十二張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 測(cè)定步驟（1）樣品處理（皂化、提取、洗滌、濃縮）（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備第七十三張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、胡蘿卜素的測(cè)定450nm波長(zhǎng)處有最大吸收HPLC法（GB/T5009.83）紙層析、柱層析薄層層析法 -胡蘿卜素含有兩個(gè)維生素A1的結(jié)構(gòu)，稱(chēng)為維生素A原。第七十四張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第七十五張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月一、高效液相色譜法1原理試樣中的-胡

20、蘿卜素，用石油醚+丙酮(80+20)混合液提取，經(jīng)三氧化二鋁柱純化，然后以高效液相色譜法測(cè)定，以保留時(shí)間定性，峰高或峰面積定量。第七十六張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、紙層析法1原理： 以丙酮和石油醚提取食物中的胡蘿卜素及其他植物色素；以石油醚為展開(kāi)劑進(jìn)行紙層析。胡蘿卜素極性最小，移動(dòng)速度最快，從而與其它色素分開(kāi)。剪下含胡蘿卜素的區(qū)帶，洗脫后于450nm波長(zhǎng)下進(jìn)行比色，測(cè)定。第七十七張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4、測(cè)定步驟（1）樣品提取與洗滌(石油醚）（2）濃縮與定容（3）紙層析（4）比色測(cè)定（5）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制第七十八張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于202

21、2年6月點(diǎn)樣：帶狀點(diǎn)樣展開(kāi)洗脫：剪下位于展開(kāi)劑前沿的胡蘿卜素層析帶，石油醚第七十九張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第八十張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月5、結(jié)果計(jì)算第八十一張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月6說(shuō)明與討論此法也為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法，方法簡(jiǎn)便，色帶清晰，最小檢出限為0.11g 。 樣品和標(biāo)準(zhǔn)液的提取一定要注意避免丟失。第八十二張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月濃縮提取液時(shí)，一定要防止蒸干，避免胡蘿卜素在空氣中氧化或因高溫、紫外線直射等破壞。定容、點(diǎn)樣、層析后剪樣點(diǎn)等操作環(huán)節(jié)一定要迅速。第八十三張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6

22、月三、維生素D的測(cè)定第八十四張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第八十五張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第八十六張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月7-脫氫膽固醇經(jīng)光照可轉(zhuǎn)變?yōu)閂D3第八十七張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第八十八張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月維生素D的測(cè)定方法有：比色法、紫外分光光度法、氣相色譜法、液相色譜法薄層層析法第八十九張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（一）HPLC法試樣經(jīng)皂化后，用苯提取不皂化物，餾去苯后，使用第一階段的分取型HPLC，分取維生素D組分，以去除大部分干擾物質(zhì)。得到的維生素D組

23、分，用于第二階段分析型HPLC，得樣品色譜圖，與按同樣操作條件得到的維生素D標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖比較進(jìn)行定量。第九十張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月本法對(duì)維生素D2和D3不加區(qū)別，兩者混合存在時(shí)，以總維生素D定量。按國(guó)際單位，每1IU相當(dāng)于0.025 g維生素D。第九十一張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(二)三氯化銻比色法1、原理 在三氯甲烷溶液中，維生素D與三氯化銻結(jié)合生成一種橙黃色化合物，呈色強(qiáng)度與維生素D的含量成正比。第九十二張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3、測(cè)定步驟 (1)樣品處理 (2)測(cè)定 第九十三張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4 結(jié)果計(jì)算第九十四張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月5說(shuō)明與討論 食品中維生素D的含量一般很低，而維生素A、維生素E、膽固醇，甾醇等成分的含量往往都大大超過(guò)維生素D、嚴(yán)重干擾維生素D的測(cè)定，因此測(cè)定前必須經(jīng)過(guò)層析除去這些干擾成分。第九十五張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月可參考柱層析圖第九十六張，PPT共一百一十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月此法不能區(qū)分D2和D3，測(cè)定值是兩者的總量。第九十七張，PPT共一百一十一