糖與苷類精品課件

1、關(guān)于糖和苷類第一張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 糖 類 化 合 物一. 概述 糖和苷是自然界分布很廣的兩大類成分。中草藥中存在的糖類成分有兩個特點：1、幾乎所有的中藥（礦物藥除外）都含有糖或苷，并幾乎占植物體內(nèi)有機物總量的8590。 2、除葡萄糖和葡萄糖醛酸對人體有營養(yǎng)和解毒作用，香菇、靈芝、人參、黃芪等所含多糖有一定抗腫瘤及提高免疫活性作用外，大多數(shù)糖至今還未發(fā)現(xiàn)有別的顯著的生理活性。 二. 糖類的結(jié)構(gòu)與分類 單糖 低聚糖 多糖 第二張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月(一) 單糖(Monosaccharides) 1. 中草藥中常見的單糖及構(gòu)型 單糖是糖類可被水解的

2、最小糖單位。按含糖或醛基的不同又可分為 （1）常見的單糖 中草藥中存在最多的是己糖和戊糖，最常見的是以下幾種五碳醛糖 六碳醛糖 第三張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月六碳酮糖： 去氧糖 甲基五碳醛糖（6-去氧糖） 2，6-去氧糖（主要存在于強心苷） 去氧糖由于比2羥基糖少氧，理化性質(zhì)也有不同。 第四張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月此外還有一些特殊的糖及衍生物 以上要能分出是哪個結(jié)構(gòu)類型的糖，其中g(shù)lc，gal，rha，fru等最好記憶一下。 第五張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月單糖由于有手性碳，因此有旋光異構(gòu)體，我們復(fù)習(xí)一下糖的構(gòu)型。 （2）單糖的構(gòu)型 以glu為例

3、復(fù)習(xí)一下單糖構(gòu)型確定的方法 確定D或L型看離羰基C最遠的手性碳上的OH的位置，右為D型，左為L型。 第六張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 成環(huán)狀半縮醛結(jié)構(gòu)后，端基C上的OH與決定D或L手性C上的OH同側(cè)為型異側(cè)為型。 第七張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 單糖Hawarth式的絕對構(gòu)型主要看成環(huán)C上的取代基，向上為D型向下為L型。端基異構(gòu)體看端基C上OH與成環(huán)C上取代基同側(cè)為型異側(cè)為型。因此可以總結(jié)為：第八張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月第九張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）低聚糖(Oligosaccharides) 由29個單糖經(jīng)苷鍵聚合而成的糖為

4、低聚糖。 例如第十張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 自然界的三糖（指游離糖）一般說是以蔗糖為基本結(jié)構(gòu)，再接上另一個糖而成非還原糖，稱蔗糖系列或蔗糖族，例： 而四糖基本上是以棉子糖為基本結(jié)構(gòu)再接上兩個糖而成，非還原糖（指游離糖）稱棉子糖族或棉子糖系列。 第十一張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）多聚糖(Polysaccharides) 多聚糖由10個以上的單糖聚合而成,簡稱多糖。 一般由幾百至幾千個單糖組成。聚合方式有支鏈型分子,也有直鏈型分子。多糖的分類有二種方法，一種是按多糖在生物體內(nèi)的功能分類： 組織結(jié)構(gòu)多糖 (水不溶)：纖維素，甲殼素 貯藏養(yǎng)料多糖（水溶性）：淀粉，

5、菊糖，果膠，粘液質(zhì)，樹膠 。另一種是按多糖的分子結(jié)構(gòu)分類： 第十二張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 習(xí)慣以化學(xué)結(jié)構(gòu)進行的分類，我們主要按結(jié)構(gòu)分類順序看看中藥中常見的多糖： 1. 均多糖（homosaccharides） （1）纖維素（cellulose） 纖維素是由Dglu以1 4苷鍵反向連接聚合而成的直鏈葡聚糖，聚合度為30005000，分子主要約200，000500，000，與半纖維素等形成細胞壁，組成植物的支持組織。 從結(jié)構(gòu)中可以看出由于各個糖都是反向連接，因此大基團（伯醇基）相距較遠，斥力小，對稱性強，結(jié)構(gòu)緊密，并排列成繩索狀，分子量大。因此： 不溶于水（冷或熱）和有機溶劑，

6、稀酸或堿水難以水解。只能用：發(fā)煙HCl（36）加壓水解成Dglu。 醋酐濃H2SO4乙酰解成八乙酰纖維二糖。 第十三張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月(2) 淀粉（Starch） 淀粉是植物的貯藏養(yǎng)料。 按結(jié)構(gòu)又可分為支鏈淀粉和支直鏈淀粉。 A . 直鏈淀粉（糖淀粉 amylose） 由Dglu以1 4苷鍵直線聚合成螺旋狀，聚合度為300350（隨來源不同而有差異）。 不溶于冷水及有機溶劑，溶于熱水且澄明。 B . 支鏈淀粉（膠淀粉amylopectin） 分子大于直鏈淀粉，聚合度為3000左右（隨來源不同而有差異）。分子結(jié)構(gòu)中除有1 4苷鍵相連的糖鏈外，還有1 6苷鍵相連的支鏈，也呈

7、螺旋狀，支鏈多達幾百條，平均支鏈只為25個glu單位。 支鏈淀粉不溶于冷水及有機溶劑，溶于熱水呈膠體溶液。 第十四張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 支鏈淀粉與直鏈淀粉在淀粉中的比例為1：34。因此,淀粉不溶于冷水和乙醇等有機試劑，溶于熱水呈粘膠狀。 淀粉由于是螺旋結(jié)構(gòu)因此能與I2絡(luò)和顯色。且隨聚合度不同其色調(diào)也不同。聚合度 46 不顯色 2050 紫色或藍紫 1218 紅色 50以上 藍色 纖維素和淀粉這兩種葡聚糖是植物界分布最廣的多糖，但沒有特殊的生物活性認為是無效成分，常常除去，特例是淀粉，在中藥提取液中形成糊狀膠體溶液很難過濾。因此含淀粉量高的中藥提取時，多采用乙醇提，使淀粉不

8、溶出，避免干擾。 第十五張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月(3) 其它葡聚糖 在植物界除纖維素，淀粉這兩種葡聚糖外還存在其它一些葡聚糖，并且常隨來源而定名。如昆布多糖（20個Dglu經(jīng)1 3苷鍵聚合），末端接一個甘露醇（但仍歸葡聚糖）。香菇多糖1 3聚合糖，分子量80萬105萬，對S180瘤株有較強的抑制作用。我們國內(nèi)已重視對此類有1 3葡聚糖的研究。但因糖屬水溶性成分，較難提純鑒定，因此在中藥中發(fā)現(xiàn)其它的葡聚糖還是不多的。 由果糖聚合而成，若分子中既有一個別的糖仍還是歸為果聚糖。 (4) 果聚糖 第十六張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2. 雜多糖（heterosacchar

9、ides） (1) 半纖維素（hemecellulase） 半纖維素是指與纖維素和木質(zhì)素共同組成細胞壁的一類不溶于水而能被稀堿（220NaOH）溶出的酸性多糖。如： 因此半纖維素并不是指的一種結(jié)構(gòu)的多糖，而是指一類不同結(jié)構(gòu)的多糖，是隨提取來源而來的定義。不同來源的半纖維素所含的糖有木聚糖、甘露聚糖等均多糖或葡萄甘露聚糖等雜多糖，并多連有糖醛酸，分子量多在萬到十幾萬之間。 一般半纖維素不溶于水和有機溶劑。易溶于稀的堿水（在酸水中不溶）。 如：禾本科植物所含的半纖維素主要是由D木糖1 4連成主鏈，在C1C3處連有L阿拉伯糖和Dglu的分支糖鏈。 第十七張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月(2

10、) 樹膠（gum） 樹膠是植物受到外界傷害后分泌的物質(zhì)，多為無定形的質(zhì)脆透明或半透明的固體。如阿拉伯膠等。 由于樹膠常和蛋白質(zhì)、淀粉、樹脂、揮發(fā)油等伴存于植物體內(nèi)，加上分子較大，提取分離很困難，因此其化學(xué)結(jié)構(gòu)至今不十分清楚，僅了解： 分子中多含有D半乳糖醛酸或葡D萄糖醛酸，此外多含有Dgal、Dman、Dxyl、Lara、LRha這五種糖中的兩種糖，且多為支鏈雜多糖。 例：阿拉伯膠的主要部分結(jié)構(gòu)由D半乳糖1 3接成主鏈。C6上連有LRha、Lara、DgluA。 可溶于冷水呈膠體溶液或懸浮液，不溶于乙醇等有機溶劑。 (3) 粘液質(zhì)（mucilage）和粘膠質(zhì)（pectic substance）

11、 粘液質(zhì)：是植物體正常生理狀態(tài)的分泌產(chǎn)物，化學(xué)組成與樹膠相似，如車前子膠就是中藥車前子中存在的一種粘液質(zhì)。白芨，南五味子中也都含有粘液質(zhì)。 粘液質(zhì)難溶于冷水，溶于熱水呈膠體溶液，難溶于乙醇等有機溶劑。 粘膠質(zhì)：中藥中存在粘膠質(zhì)的主要是果膠，果膠主要存在于植物的果實中。是由DgalA 1 4連接而成。平均每4個半乳糖醛酸羧基就有1個形成甲酯。分子量在在150，000300，000?？扇苡诶渌?，溶于熱水及稀酸水冷后呈凍狀。不溶于乙醇等有機溶劑。 第十八張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月3菌類多糖 （1）豬苓多糖（polyporus polysaccharide） 是從多孔菌科真菌豬苓Pol

12、yporus umbellatus(Pers.)Fr.中提得的，以13、14、16鍵結(jié)合的葡聚糖，支鏈在C3和C6位上。藥理實驗證明，能顯著提高荷瘤小鼠巨噬細胞的吞噬能力，促進抗體形成，是良好的免疫調(diào)節(jié)劑，具有抗腫瘤轉(zhuǎn)移和調(diào)節(jié)機體細胞免疫功能的作用。此外，對慢性肝炎也有良好的療效。 (2)茯苓多糖（pachyman） 是多孔菌科真菌科真菌茯苓Poria cocos（Schw.） Wolf中提得的一種多糖，為具有16吡喃葡萄糖為支鏈的13葡聚糖。茯苓多糖本身無抗腫瘤活性，若切斷其所含的16吡喃葡聚糖支鏈，成為單純的13葡聚糖（稱為茯苓次聚糖pachymaran）則具有顯著的抗腫瘤作用。 (3)靈

13、芝多糖 是從多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lunidum (leyss.ex Fr.)karst中提得20多種多糖。有葡聚糖（16，13等）、雜多糖（16，13阿拉伯半乳聚糖等）及肽多糖。就抗腫瘤活性而言，靈芝多糖間并無差異，但多糖的三維螺旋結(jié)構(gòu)遭破壞則影響其活性。 第十九張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月4動物多糖 （1）肝素（heparin） 是一種含有硫酸酯的粘多糖，它的組分是氨基葡萄糖、艾杜糖醛酸和葡萄糖醛酸。（2）透明質(zhì)酸（hyaluronic acid） 是由D-葡萄糖醛酸14和乙酰D-葡萄糖胺13連接而成的直鏈酸性粘多糖。（3）硫酸軟骨素（chondroitin s

14、ulfate） 是從動物的軟骨組織中得到的酸性粘多糖，有A、B、C、D、E、F、H等多種。（4）甲殼素（chitin） 是組成甲殼類昆蟲外殼的多糖，其結(jié)構(gòu)和安定性與纖維素類似。由N-乙酰葡萄糖胺以14反向連接成直線狀結(jié)構(gòu)。 肝素廣泛分布于哺乳動物的內(nèi)臟、肌肉和血液里，作為天然抗凝血物質(zhì)受到高度重視，國外用于預(yù)防血栓疾病，并已形成了一種肝素療法。 透明質(zhì)酸廣泛存在于動物的各種組織中，在哺乳動物體內(nèi)，以玻璃體、臍帶和關(guān)節(jié)滑液中含量最高，雞冠的含量與滑液相似。透明質(zhì)酸可用于視網(wǎng)膜脫離手術(shù)，并作為天然保濕因子，廣泛用于化妝品中。 不溶于水，對稀酸和堿穩(wěn)定。甲殼素經(jīng)濃堿處理，可得脫乙酰甲殼素（chito

15、san）。甲殼素及脫乙酰甲殼素應(yīng)用非常廣泛，可制成透析膜、超濾膜，用作藥物的載體具有緩釋，持效的優(yōu)點，還可用于人造皮膚、人造血管、手術(shù)縫合線等。 第二十張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 苷類（glycosides） 一. 概述 糖或糖的衍生物（氨基糖，糖醛酸）與非糖物質(zhì)經(jīng)糖的端基碳原子以苷鍵連接而成的化合物稱為苷（苷，配糖體）。非糖部分稱作苷元，配基（aglycone,genin）第二十一張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月二. 結(jié)構(gòu)分類 苷類成分結(jié)構(gòu)種類非常多的，其分類方法也很多。 按苷鍵所處的立體化學(xué)狀態(tài)分 第二十二張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月按苷元連糖

16、的多少及類型分 連 糖 個 數(shù) 分: 單糖苷、二糖苷、三糖苷、四糖苷。糖 鏈 的類型分： 直鏈糖苷（苷元連直鏈糖）。 支鏈糖苷（苷元連支鏈糖）。 連糖鏈的多少分: 單糖鏈苷(苷元與一串糖成苷) 。 雙糖鏈苷(苷元不同的兩個部位與兩串糖成苷) 。按苷是否水解分 原苷 （原生苷）： 在植物體內(nèi)原始狀態(tài)存在未經(jīng)水解的苷。 次級苷（次生苷）：原生苷經(jīng)水解去部分糖的苷。 按苷元結(jié)構(gòu)種類分 黃酮苷，香豆素苷，甾體皂苷 第二十三張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月按苷鍵原子不同分 天然苷的苷鍵原子有0、N、S、C，因此可分為 O苷、S苷、N苷、C苷 （一） O苷（發(fā)現(xiàn)的數(shù)量最多） O苷是中藥中存在最多

17、的一種苷，數(shù)量遠比別的苷要多。 O苷化合物種類也很多，按苷元結(jié)構(gòu)又可分為： 1.醇苷： 糖與苷元中的醇羥基縮合形成的苷。如： 中藥中的強心苷、皂苷、萜苷都屬于醇苷。 第二十四張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2. 酚苷 糖與苷元酚OH縮合形成的苷。酚苷類化合物在中藥苷類成分中為數(shù)最多。如： 中藥中的黃酮苷，香豆素苷，蒽醌苷等都屬此類。 3酯苷 結(jié)構(gòu)中苷鍵可看作具半縮醛結(jié)構(gòu)或酯鍵樣結(jié)構(gòu)，因此易為稀酸或稀堿水解。第二十五張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 4. 氰苷 糖與羥腈類化合物的羥基縮合而形成的苷。 結(jié)構(gòu)中可以看出有氰基，因此酶解或水解這種苷時可生成HCN（cyanogeni

18、c glycoside生氰的苷，由此得名）。所以若服用過量含有氰苷的中藥是會中毒甚至喪命的。 氰苷很不穩(wěn)定，遇到酸、堿立刻水解 第二十六張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月5.吲哚苷 糖與苷元吲哚醇中的羥基縮合形成的苷。 （二）S苷 糖的端基C與苷元以CS苷鍵相連的苷。 在十字花科植物中存在最多，在白花菜科，南美金蓮花科中也有存在 。異硫氰酸脂結(jié)構(gòu) 酶解后的苷元即吃生蘿卜后生成的氣味 HON=C 氰酸O=C=NH 異氰酸O=C=NR 異氰酸酯S=C=NR 異硫氰酸酯 （芥子油）第二十七張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）N苷 糖的端基C與苷元以CN苷鍵相連而成的苷。如： N苷

19、在中藥中發(fā)現(xiàn)的不是很多，是生化研究的對象。 （四）C苷 糖的端基C直接以CC苷鍵與苷元相連而成的苷。 C苷的苷元都是具有被活化的芳H的，從而能與糖的端基C上的OH縮合而成C苷。如： 糖與苷元直接以CC相連，則水溶性低，水解難。 第二十八張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月三、苷的一般性質(zhì) （一）性狀 一般少糖苷多為結(jié)晶，多糖苷多為無定形粉末。具吸濕性，含糖越多吸濕性越強（如皂苷），苷多無味，少數(shù)具甜或苦味。苷的顏色隨苷元不同而不同，苷比相應(yīng)的苷元色淺。 （二）旋光性 糖具*C有旋光性，苷連糖，故具有旋光性（無論苷元是否有旋光性），多數(shù)苷呈左旋。苷類水解后由于生成的糖是右旋的，因而使水解混

20、合液呈右旋。 苷類旋光度的大小取決于苷元、糖及苷鍵的結(jié)構(gòu)，因此可利用某些苷的旋光度及相應(yīng)苷元的旋光度計算苷鍵構(gòu)型。 第二十九張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）溶解性 苷是由苷元與糖經(jīng)苷鏈相連而成，苷的溶解性與此3個結(jié)構(gòu)片斷的水溶性及脂溶性關(guān)系很大： 因此用低極性至高極性的不同溶劑提取中藥，在各個提取部位都有提出苷的可能（石油醚部位除外）。從提取分離的角度來說，糖是水溶性成分，而苷也有一定的水溶性。因此提取分離苷比提取分離生物堿以及苷元都要難。第三十張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（四）苷鍵的裂解 1.酸催化水解反應(yīng) （1）水解歷程 苷鍵屬縮醛結(jié)構(gòu)，因此可被稀酸（35或更

21、高的稀酸水或稀酸的醇溶液）催化水解。我們以O(shè)苷為例說明水解過程： 苷原子上的電子云密度大（即堿度大）吸引H力強，易水解，反之難水解。苷原子周圍的結(jié)構(gòu)空間位阻小，H易進攻，易水解，反之難水解。 水解中間體和生成物的穩(wěn)定性高，易水解，反之難水解。 第三十一張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月依照這些影響苷水解的因素，我們可以總結(jié)出苷鍵酸催化水解的規(guī)律。 （2）酸催化水解規(guī)律 不同苷原子組成的苷鍵水解難易順序為N苷 O苷 S苷 C苷（高濃度強酸，長時間加熱才部分水解） C無未共用電子對，故最不易水解。N的電負性低于O，給出電子的能力強于O，對H的吸引力強于O。S為16號元素，原子半徑大于O，形

22、成的H佯鹽不穩(wěn)定。 呋喃糖比吡喃糖易水解（水解通常大50100倍）。 因五元環(huán)的平面性，各取代基都處于重疊位置，環(huán)張力較大，而水解后生成的水解中間體要比呋喃糖苷穩(wěn)定，因此水解容易進行。 酮糖較醛糖易水解 因酮糖多為呋喃糖，醛糖多為吡喃糖。 第三十二張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月吡喃糖苷中，吡喃環(huán)C5上取代基越大越難水解，水解速度為： 五碳糖 甲基五碳糖 六碳糖 七碳糖 糖醛酸苷 因空間位阻大氨基糖、去氧糖和羥基糖的水解難易順序為： 2，3去氧糖 2去氧糖 3去氧糖 羥基糖 2氨基糖 因2，3位有羥基或氨基存在，使得苷鍵原子周圍空間位阻增大，同時羥基和氨基也競爭吸引H，因此難水解。

23、芳香族苷比脂肪族苷易水解 雖氧可與苯環(huán)形成P供軛（電子云向苯環(huán)移動），但糖上的OH有較強的吸電子作用，結(jié)果使使P供軛的電子云反而向氧移動，增加了氧上未共用電子對的密度，因此易水解。 第三十三張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月兩相酸水解： 如：仙客來皂苷的水解第三十四張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月如：以上為建議機理，并沒有成定論。 2堿催化水解 苷鍵屬縮醛結(jié)構(gòu)，因此一般稀堿水是難以水解苷鍵的，所以我們很少用堿水解苷鍵。但酯苷，酚苷，烯醇苷，成苷羥基具吸電子基取代的苷的苷鍵有類似酯的性質(zhì)，均可被堿水解。 第三十五張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月3乙酰解： 用醋酐分別與

24、H2SO4，HClO4, Lewis酸（ZnCl2，BF3等）組成的混合溶劑裂解苷鍵的反應(yīng)稱乙酰解。 機理：與酸水解相似，但是以 為進攻基團進攻苷原子。特點：反應(yīng)不加熱，條件比酸水解溫和，故不可能將所有苷鍵全部 切斷，只能切斷一部分苷鍵（相對不太穩(wěn)定的苷鍵），保留另一部分苷鍵，而得到一部分乙酰化的低聚糖。 用TLC或GC檢出乙酰化的低聚糖和乙?；瘑翁?，并可對照酸水解后TLC（GC）檢出的全部單糖，來定出苷中部分糖的連接順序。 第三十六張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月如Holotoxin A（三萜皂苷，抗真菌）的乙酰解根據(jù)乙酰解產(chǎn)物，即可推出Holotoxin A四個單糖的連接順序。

25、第三十七張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月4氧化開裂法（Smith降解水解法） 由于開鏈縮醛水解時不用加熱，反應(yīng)條件溫和。苷元在這種條件下不會發(fā)生結(jié)構(gòu)上的變化。因此可得到結(jié)構(gòu)完整的苷元（特別是C苷）。那么對于在加熱條件下苷元結(jié)構(gòu)易發(fā)生變化的苷，可用此法水解得到結(jié)構(gòu)完整的苷元。 特點：第三十八張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月如：人參皂苷Rg1的水解 顯然只有Smith降解水解法才能得到真正的苷元。 第三十九張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 另外從Smith降解水解法所得水解產(chǎn)物多元醇，有助于推測C苷中所連糖的結(jié)構(gòu)類型： 第四十張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月

26、5酶水解反應(yīng) 選用一定的酶（工具酶）水解苷鍵的反應(yīng)。酶催化水解有兩個特點： 如： 轉(zhuǎn)化糖酶（果糖苷酶）：水解果糖苷鍵 麥芽糖酶： 水解葡萄糖苷 杏仁苷酶（苦杏仁苷酶）： 水解葡萄糖苷鍵 櫻葉酶： 水解櫻葉苷利用工具酶可測 再檢識可知蔗糖由果糖和glu組成，而且果糖是以苷鍵與glu相連。第四十一張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月經(jīng)檢識除可知苦杏仁苷由2個glu和杏仁腈組成外，還可知2個苷鍵中一個是苷鍵， 另一個是氰苷。一般可用 注意： 并不是所有的糖苷酶或糖苷酶都能將所有相應(yīng)的構(gòu)型苷鍵切斷，即能用工具酶切斷的苷鍵應(yīng)是相應(yīng)的苷鍵或苷鍵，但不被工具酶所切斷的苷，則不一定就不是相應(yīng)的苷鍵或苷鍵

27、。第四十二張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月第三節(jié) 糖和苷的提取及分離一提?。ㄒ唬┨穷惖奶崛?. 提取注意（1）殺酶 加熱回流或加入無機鹽（如碳酸鈣）破壞酶活性。（2）中和酸 若有酸性成分共存，碳酸鈣、碳酸鈉等中和。（3）防霉變 低溫保存提取液。 2. 方法 (1)提取單糖及低聚糖第四十三張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月第四十四張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（2）多糖以及大分子量的低聚糖 除用水及稀醇外（中性多糖），還可用稀堿、稀鹽溶液或二甲基亞砜提取（酸性多糖）。用乙醇、甲醇、丙酮（中性多糖）或乙酸、鹽酸、銅鹽（酸性多糖）沉淀純化。第四十五張，PPT共八十三頁，

28、創(chuàng)作于2022年6月（二）苷類的提取 1. 提取注意（1）提取原生苷：防苷鍵裂解，鮮藥材迅速干燥，用沸水、甲醇、乙醇提取，或碳酸鈣拌勻藥材沸水提取以殺酶，不用或少用強酸或堿防苷鍵水解。(2)提次級苷:保酶活性（溫度，濕度），先酶解，再提取。(3)中和酸:若有酸性成分共存，碳酸鈣、碳酸鈉等中和。(4)防霉變:苷的水提液長時間放置應(yīng)冷藏或加防腐劑。第四十六張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2提取 也可先用沸水提，但水提液中糖類雜質(zhì)較多，給后來的提取分離造成過濾等諸多麻煩，但工廠多用沸水，再用乙醇沉淀除去多糖類，成本低。 大量 的苷的水提液可用大孔樹脂吸附純化替代正丁醇萃取純化。第四十七張，

29、PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）苷元的提取 苷元多屬脂溶性成分，可用親脂性有機溶劑提取。 注意防止苷元酸水解時的結(jié)構(gòu)變化。有時也可先提取出總苷，再將總苷水解為苷元，繼用親脂性有機溶劑提取。第四十八張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月二、糖和苷類的分離 (一)糖的分離 糖類化合物極性均較大，一般要經(jīng)色譜法才能拿到單體（含量很高的單糖或二糖，有可能用結(jié)晶法拿）。 1 單糖和低聚糖 常用于分離糖的色譜法有活性炭、大孔吸附樹脂、纖維素等，硅膠及反相硅膠也有運用。第四十九張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 2多糖 分級沉淀法 凝膠色譜第五十張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年

30、6月(二) 苷的分離（純化） 設(shè)計分離苷的基本構(gòu)思是利用苷元結(jié)構(gòu)及糖的種類，數(shù)目，苷鍵的位置不同所引起的溶解性，酸堿性，極性及分子量等理化性質(zhì)的差異，選擇相應(yīng)的方法將苷與雜質(zhì)分離。 1非色譜法 (1) 沉淀法第五十一張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（2） 鉛鹽沉淀法 如:第五十二張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（3）色譜法 非極性大孔樹脂用得較多，極性及中等極性大孔樹脂近年來也逐漸有所應(yīng)用。 目前銀杏葉提取物等許多苷的部位性提取物多用大孔樹脂分離純化。第五十三張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 第四節(jié) 糖和苷類的檢識 一. 顏色及沉淀反應(yīng)檢識（一） Molish反應(yīng)

31、 單糖(糖醛酸)、低聚糖、多糖、苷均為陽性反應(yīng)。注意碳苷與Molish試劑反應(yīng)有時呈陰性。第五十四張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 機理 此顏色反應(yīng)是糖先形成糠醛再與-萘酚縮合顯色。 1. 糠醛的形成 單糖分子結(jié)構(gòu)中有多個OH，因此可產(chǎn)生類似多元醇的脫水反應(yīng)。五碳糖、六碳糖及糖醛酸（有5C以上）在濃酸（410N）和加熱條件下（有的，如濃硫酸甚至不用加熱）可脫去三分子水而形成糠醛或糠醛的衍生物：第五十五張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 2縮合顯色 糖和苷的許多顏色反應(yīng)機理都是這樣，如：第五十六張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（二） 菲林反應(yīng)和多倫反應(yīng) 反應(yīng)呈陽性，說

32、明存在還原糖，而非還原糖和苷類則呈陰性反應(yīng)。（三）水解反應(yīng) 水解后產(chǎn)生的單糖水溶性強不會有沉淀出現(xiàn)，而產(chǎn)生的苷元脂溶性強則生成沉淀，可對此進行是否是苷及苷元種類的檢識。 第五十七張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 二、色譜檢識（一）薄層色譜固定相 ：硅膠（多用） 纖維素（少，用PC更方便）作擔(dān)體。固定相 ：硼酸或無機鹽（強堿弱酸鹽Na2HPO4 或NaH2PO4）溶液 。 正丁醇甲醇水(4:5:1) 0.3mol/L Na2HPO4 正丁醇吡啶水(8:4:3) 0.3mol/L NaH2PO4 正丁醇乙酸乙酯異丙醇醋酸水 (7:20:12:2:6) 0.03mol/L硼酸正丁醇-乙酸-

33、水（4：1： 5，上層）氯仿-甲醇-水（65：35：10，下層）乙酸乙酯-正丁醇-水（4：5：1，上層） 也有氯仿-甲醇、甲醇-水等溶劑系統(tǒng)(少)移動相：第五十八張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 顯色劑 顯不同顏色 水溶性及極性較小的苷可用反相硅膠薄層色譜，以氯仿-甲醇、丙酮-甲醇的二元溶劑系統(tǒng)展開分離。第五十九張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 (二) 紙色譜 固定相：色譜用（層析）濾紙（分配）移動相：顯色劑： 第六十張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 第五節(jié) 苷的結(jié)構(gòu)研究 第六十一張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 一物理常數(shù)的測定 測定TLC、熔點、比旋

34、度(少)等主要是測定純度 。 二分子量及分子式的測定 經(jīng)典法：鈉熔法，元素分析，由于樣品量需求大，現(xiàn)多不用。波譜法：多用FD-MS,、FAB-MS(HR-FAB-MS)。 三苷元及單糖的測定 第六十二張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（一） 苷元結(jié)構(gòu)測定 （二）苷中糖的種類鑒定 主要用色譜法測定，近年來波譜法也有應(yīng)用。 1色譜法 （1） PC及 硅膠TLC鑒定 （2）GLC鑒定 第六十三張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 2波譜法 主要利用1H-NMR和13C-NMR單糖端基碳及氫的信號與其它位置碳及氫信號的區(qū)別測定。 端基碳及其氫，受偕碳二氧原子的吸電作用，其核磁共振信號的出

35、峰位置較其它位置碳及其氫低 。第六十四張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 不同單糖端基碳及其氫出峰的位置不同，可將樣品所測數(shù)據(jù)與對照品或文獻值進行對照以鑒定單糖種類。如：部分單糖及單糖甲苷的1H-NMR譜數(shù)據(jù)部分單糖及其甲苷的碳譜數(shù)據(jù)第六十五張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）苷中單糖數(shù)目確定 1. TLC-scaning法 在確定單糖種類的基礎(chǔ)上，對TLC上各單糖含量比進行測定，算出分子比，推定單糖數(shù)目。 2.波譜法 （1）MS 用FD-MS 或 FAB-MS軟電離質(zhì)譜分別測定出苷及水解所得苷元的分子離子峰 M+苷M苷元糖的總量 結(jié)合單糖種類推定單糖個數(shù)，但不太準確 目前

36、軟電離源質(zhì)譜可做到使苷中各單糖逐個裂解下來，對測定單糖數(shù)目非常方便。 第六十六張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（2） 1H-NMR端基質(zhì)子H面積計算：端基碳上的氫化學(xué)位移處較低場，且為d峰，易于識別?？衫闷涠嘶鶜涞臍涿娣e值推定相應(yīng)單糖數(shù)目。 B. 甲氧基或乙?；盘枖?shù)目計算： 第六十七張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月（一）苷元與糖連接位置的確定 一般對比水解前后苷元結(jié)構(gòu)部分的13C-NMR ，可確定苷元成苷位置（可與對照品或文獻值對照）。四、苷分子中苷元與糖，糖與糖連接位置第六十八張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月(二) 糖與糖之間連接位置確定 1. 化學(xué)法 例第

37、六十九張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月常用的苷的甲基化反應(yīng)苷OH甲基化反應(yīng)比較經(jīng)典的方法有兩種： Purdic法只能用于苷，因Ag2O有氧化作用能將醛氧化成酸。 反應(yīng)物的量要大。因要做兩次或多次這種反應(yīng)才能達到全甲基化，因此達不到微量糖的甲基化。 同時溶劑甲醇也能發(fā)生甲基化反應(yīng)而干擾主反應(yīng)。 第七十張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 Hawarth于1915年提出用另一種方法： Hawarth法雖可避免糖的氧化，但有時也要進行兩次或多次才能將所有的OH都甲基化，因此反應(yīng)所用的糖的量也很大，仍達不到微量水平。 注意(CH3)2SO4有劇毒，呼吸或皮膚接觸都能引起中毒，輕者抽搐，

38、重可引起死亡。第七十一張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 為了達到能將微量的糖（mg級）能做出全甲基化產(chǎn)物，Kuhn在Purdic和Hawarth方法上進行了改進： 由于DMF對糖和甲基化試劑以及催化劑的溶解性都很好，因此一次就可以加入過量的甲基化試劑使反應(yīng)徹底進行，不象前兩種方法那樣反應(yīng)兩次或多次，使轉(zhuǎn)移等過程中損失糖，因此可以使少到340mg的乳糖上的OH全部甲基化（反應(yīng)要靜置過夜）。第七十二張，PPT共八十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 Kuhn改良法雖然比前兩種方法有所提高，但反應(yīng)時仍要一定的溫度（40左右），同時反應(yīng)慢，要過夜，用箱守（Hakonori）法甲基化比Kuhn改良法效果好。 箱守法特點是反應(yīng)快，幾小時即可，室溫即可起反應(yīng)，同