硝酸鹽還原試驗(yàn)

1、硝酸鹽還原試驗(yàn)什么是硝酸鹽還原測(cè)試？這是一種根據(jù)產(chǎn)生硝酸還原酶的能力區(qū)分腸桿菌科成員的程序，該酶將硝酸鹽水解 為亞硝酸鹽，并最終降解為不同的氮產(chǎn)物，例如一氧化二氮，一氧化氮和氨。硝酸鹽還原試驗(yàn)的其他用途如下：它有助于區(qū)分分枝桿菌。減少硝酸鹽含量的測(cè)試可以幫助鑒定奈瑟氏球菌，并將其與莫拉氏菌和金 氏菌等其他菌種區(qū)分開(kāi)。它有助于區(qū)分林病奈瑟氏球菌和反硝化克氏桿菌。它有助于識(shí)別棒狀桿菌。硝酸鹽還原測(cè)試的主要目的是檢查生物體產(chǎn)生硝酸還原酶的能力。通過(guò)進(jìn)行該測(cè)試，將容易區(qū)分具有能夠從不產(chǎn)生所述酶的革蘭氏陰性生物產(chǎn)生硝酸 還原酶的能力的腸桿菌科成員。硝酸鹽還原試驗(yàn)原理在厭氧環(huán)境下，某些微生物具有將硝酸鹽（

2、如KNO3）還原為亞硝酸鹽的能力。該 過(guò)程稱為無(wú)氧呼吸，其中硝酸鹽分子充當(dāng)電子受體。硝酸鹽與試劑A和B反應(yīng)，由于形成偶氮染料而引起紅色。在某些情況下，某些 微生物可以進(jìn)一步將亞硝酸鹽還原為游離氮和氨。將待測(cè)生物的接種物在硝酸鹽肉湯中孵育。應(yīng)孵育四個(gè)小時(shí)，并檢查肉湯中硝酸鹽 是否還原為亞硝酸鹽。通過(guò)添加磺胺酸試劑和a-萘胺來(lái)完成。如果被測(cè)微生物的硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，您會(huì)注意到亞硝酸的形成。如果添加磺 胺酸，它會(huì)到達(dá)并產(chǎn)生重氮化的磺胺酸，然后與a-萘胺反應(yīng)生成紅色化合物。顏色變化:如果添加硝酸鹽試劑后培養(yǎng)基變成紅色，則被測(cè)試的硝酸鹽還原生物為陽(yáng)性。如果 添加試劑后培養(yǎng)基的顏色沒(méi)有變化，則表明被測(cè)

3、生物沒(méi)有還原硝酸鹽的能力。這也 可能意味著該生物已經(jīng)將硝酸鹽或亞硝酸鹽反硝化，從而產(chǎn)生氨或分子氮。如果介質(zhì)的顏色沒(méi)有變化，則需要進(jìn)行下一步，即添加少量鋅粉。如果介質(zhì)變成紅 色，則表明存在未還原的硝酸鹽，表明結(jié)果為真陰性。請(qǐng)記住，如果添加鋅粉后培養(yǎng)基沒(méi)有變紅，則意味著硝酸鹽還原測(cè)試結(jié)果為陽(yáng)性未能產(chǎn)生紅色的原因：被測(cè)生物未能還原硝酸鹽。被測(cè)生物具有強(qiáng)大的硝酸鹽還原酶，可將硝酸鹽進(jìn)一步還原為氨或分子N2。注意：僅需向培養(yǎng)物中添加少量鋅粉，便需要進(jìn)一步測(cè)試。鋅粉的作用是將硝酸鹽還原為 亞硝酸鹽。注意顏色的變化。添加鋅粉后，如果顏色變?yōu)榧t色，則表示硝酸鹽未還原。硝酸鹽還原測(cè)試需要哪些材料？用倒置的Dur

4、hams管專門培養(yǎng)基硝酸鹽肉湯試劑種類o a萘胺試劑o亞硫酸試劑o鋅粉刻錄機(jī)接種環(huán)滴管被測(cè)試的生物保溫箱硝酸鹽還原測(cè)試如何進(jìn)行？第一步是用無(wú)菌方法將正在測(cè)試的生物體生長(zhǎng)接種到硝酸鹽肉湯中。孵化。向肉湯中加入一滴磺胺酸和一滴a萘胺。如果顏色變?yōu)榧t色，則表示被測(cè)生物對(duì)硝酸鹽還原測(cè)試呈陽(yáng)性。附加步驟：如果在添加必要的試劑后培養(yǎng)物未變紅，則需要執(zhí)行下一步，即添加鋅粉。仔細(xì)檢 查顏色是否變化。如果顏色變?yōu)榧t色，則表示被測(cè)生物對(duì)硝酸鹽還原測(cè)試呈陰性。解釋結(jié)果:陰性如果培養(yǎng)基的顏色不變，則硝酸鹽還原試驗(yàn)為陰性。這意味著不存在 亞硝酸鹽。但是，應(yīng)執(zhí)行另一步驟以確認(rèn)結(jié)果是否為真陰性。為什么？因 為某些生物體具有將硝酸鹽進(jìn)一步還原為亞硝酸鹽的另一個(gè)分子的能力。 因此，您需要在肉湯中添加少量鋅粉。鋅的作用是它將催化硝酸鹽還原為 亞硝酸鹽。如果介質(zhì)的顏色變?yōu)榧t色，則表示結(jié)果為真負(fù)片。如果添加鋅 粉后顏色未發(fā)生變化，則表示結(jié)果為陽(yáng)性。陽(yáng)性-如果添加試劑后顏色變?yōu)闄烟壹t色，則硝酸鹽還原測(cè)試為陽(yáng)性。如果 采取了其他步驟（例如添加鋅粉），則在添加鋅粉后介質(zhì)的顏色未變?yōu)榧t色 的情況下，結(jié)果為肯定。安全措施試劑a萘胺和亞硫酸是有毒的，吞咽時(shí)可能極為有害和致命。這些試劑應(yīng)具有良好 的腐蝕性，因此應(yīng)妥善處理，并且不應(yīng)與皮膚，眼睛和呼吸道接觸。如果試劑與您的眼睛接觸，應(yīng)立即用水沖洗