食品毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)管理知識(shí)

1、第一章 食品品毒理學(xué)學(xué)實(shí)驗(yàn)基基礎(chǔ)以科學(xué)研研究為目目的而進(jìn)進(jìn)行科學(xué)學(xué)飼養(yǎng)繁繁殖的動(dòng)動(dòng)物稱為為實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物。實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物學(xué)作為為在現(xiàn)代代科學(xué)帶帶動(dòng)崛起起的一門門以生命命科學(xué)為為主體，以醫(yī)學(xué)學(xué)、生物物為核心心的綜合合性獨(dú)立立的新興興學(xué)科，正以嶄嶄新的面面貌，異異乎尋常常的速度度，影響響著整個(gè)個(gè)生命科科學(xué)各領(lǐng)領(lǐng)域，成成為生命命科學(xué)研研究的奠奠基學(xué)科科和重要要支撐條條件，因因而受到到世界各各國政府府和科學(xué)學(xué)家的重重視，甚甚至作為為衡量一一個(gè)國家家生物科科學(xué)水平平高低的的標(biāo)志之之一。食品毒理理學(xué)的很很多研究究工作需需要通過過動(dòng)物實(shí)實(shí)驗(yàn)來進(jìn)進(jìn)行。使使用實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)進(jìn)行科研研的優(yōu)點(diǎn)點(diǎn)是花費(fèi)費(fèi)人力、物力較較少，時(shí)

2、時(shí)間短，易發(fā)現(xiàn)現(xiàn)單因素素與結(jié)果果的關(guān)系系，能提提供大量量有價(jià)值值的可與與人類生生命活動(dòng)動(dòng)現(xiàn)象相相類比的的資料。在毒理理學(xué)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)研究中中，健康康的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物是是保證工工作順利利進(jìn)行和和獲得正正確可靠靠的研究究結(jié)果的的重要條條件。食品毒理理學(xué)研究究外源化化學(xué)物對(duì)對(duì)于機(jī)體體(特別是是人體)的有害害作用及及其機(jī)制制。食品品毒理學(xué)學(xué)研究的的主要手手段是動(dòng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)。體內(nèi)內(nèi)試驗(yàn)是是以實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物為為模型，最終目目的是通通過外源源化學(xué)物物對(duì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物的的毒性反反應(yīng)，向向人(原型)外推，以期評(píng)評(píng)估外源源化學(xué)物物對(duì)人的的危害及及危險(xiǎn)性性。體外外實(shí)驗(yàn)主主要用于于篩選和和預(yù)測(cè)急急性毒性性和機(jī)制制研究；人體實(shí)實(shí)驗(yàn)和流流

3、行病學(xué)學(xué)調(diào)查則則可進(jìn)一一步深化化和證實(shí)實(shí)在動(dòng)物物實(shí)驗(yàn)中中所得到到的資料料。實(shí)際際上，食食品毒理理學(xué)作為為一門實(shí)實(shí)驗(yàn)科學(xué)學(xué)是以動(dòng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)為中心心的，食食品毒理理學(xué)動(dòng)物物實(shí)驗(yàn)的的設(shè)計(jì)、實(shí)施、結(jié)果觀觀察和評(píng)評(píng)價(jià)是毒毒理學(xué)研研究的基基本方法法。食品毒理理學(xué)試驗(yàn)驗(yàn)是對(duì)化化學(xué)物安安全性評(píng)評(píng)價(jià)的主主要手段段，已為為各國際際組織或或各國的的行政部部門所頒頒布的規(guī)規(guī)程或指指南列為為常規(guī)試試驗(yàn)，有有稱為法法規(guī)毒理理學(xué)試驗(yàn)驗(yàn)(reegullatoory toxxicoo1oggy ttestt)，這這類毒理理學(xué)試驗(yàn)驗(yàn)是以篩篩查和描描述外來來化學(xué)物物的毒性性為目的的，屬于于描述毒毒理學(xué)范范疇。食品毒理理學(xué)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)的原

4、則則和局限限性一、食品品毒理學(xué)學(xué)實(shí)驗(yàn)的的原則在毒理學(xué)學(xué)的試驗(yàn)驗(yàn)中，有有三個(gè)基基本的原原則。第一個(gè)原原則，化化學(xué)物在在實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物產(chǎn)生生的作用用，可以以外推于于人?；炯僭O(shè)設(shè)為：人是最最敏感的的動(dòng)物物物種；人和實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物的生物物學(xué)過程程包括化化學(xué)物的的代謝，與體重重(或體表表面積)相關(guān)。這兩個(gè)個(gè)假設(shè)也也是全部部實(shí)驗(yàn)生生物學(xué)和和醫(yī)學(xué)的的前提。以單位位體表面面積計(jì)算算在人產(chǎn)產(chǎn)生毒作作用的劑劑量和實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物通常相相近似。而以體體重計(jì)算算則人通通常比實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物敏感，差別可可能達(dá)110倍。因此可可以利用用安全系系數(shù)來計(jì)計(jì)算人的的相對(duì)安安全劑量量。已知知人致癌癌物都對(duì)對(duì)某種實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物具有致致癌性；實(shí)

5、驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物致癌癌物是否否都對(duì)人人有致癌癌性，還還不清楚楚，但這這已作為為動(dòng)物致致癌試驗(yàn)驗(yàn)的基礎(chǔ)礎(chǔ)。一般般認(rèn)為，如果某某一化學(xué)學(xué)物對(duì)幾幾個(gè)物種種實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物的毒毒性是相相同的，則人的的反應(yīng)也也可能是是相似的的。第二個(gè)原原則是實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物必須暴暴露于高高劑量，這是發(fā)發(fā)現(xiàn)對(duì)人人潛在危危害的必必需的和和可靠的的方法。此原則則是根據(jù)據(jù)質(zhì)反應(yīng)應(yīng)的概念念，隨劑劑量或暴暴露增加加，群體體中效應(yīng)應(yīng)發(fā)生率率增加。毒理學(xué)學(xué)試驗(yàn)中中，一般般要設(shè)33個(gè)或3個(gè)以上上劑量組組，以觀觀察劑量量-反應(yīng)(效應(yīng))關(guān)系，確定受受試化學(xué)學(xué)物引起起毒效應(yīng)應(yīng)及其毒毒性參數(shù)數(shù)。毒性性試驗(yàn)的的設(shè)計(jì)并并不是為為了證明明化學(xué)品品的安全全性，而而是為了

6、了表征化化學(xué)品可可能產(chǎn)生生的毒作作用。僅僅僅檢測(cè)測(cè)受試化化學(xué)物在在人的暴暴露劑量量是否引引起毒效效應(yīng)是不不夠的。當(dāng)引起起毒效應(yīng)應(yīng)的最低低劑量(LOAAEL)與人的的暴露劑劑量接近近時(shí)，說說明該化化學(xué)物不不安全。當(dāng)該劑劑量與人人的暴露露劑量有有很大的的距離(幾十倍倍，幾百百倍或以以上)，才認(rèn)認(rèn)為具有有一定安安全性，此距離離越大，安全性性越可靠靠。如果果在研究究中所用用的一系系列的劑劑量不能能引起毒毒性效應(yīng)應(yīng)，則認(rèn)認(rèn)為所用用劑量還還不足夠夠高，應(yīng)應(yīng)增加劑劑量，以以確定受受試化學(xué)學(xué)品的毒毒性。但但如果在在試驗(yàn)的的最高劑劑量組的的劑量與與人可能能的暴露露劑量有有足夠的的安全界界限，則則對(duì)于安安全性評(píng)評(píng)

7、價(jià)來說說未觀察察到毒效效應(yīng)的研研究是可可以接受受的。在在毒理學(xué)學(xué)試驗(yàn)中中實(shí)驗(yàn)?zāi)ＤＰ退栊璧膭?dòng)物物總是遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于處處于危險(xiǎn)險(xiǎn)中的人人群。為為了在少少量動(dòng)物物得到有有統(tǒng)計(jì)學(xué)學(xué)意義的的可靠的的結(jié)果，需要應(yīng)應(yīng)用相對(duì)對(duì)較高的的劑量，以使效效應(yīng)發(fā)生生的頻率率足以檢檢測(cè)。例例如，低低達(dá)0.01的的癌癥發(fā)發(fā)生率，這意味味著在1100萬萬人群中中有1000人發(fā)發(fā)生癌癥癥，此發(fā)發(fā)生率太太高，不不能為公公眾接受受。在實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物直接檢檢測(cè)如此此低發(fā)生生率將至至少需要要300000只只動(dòng)物。因此，別無選選擇，在在毒理學(xué)學(xué)試驗(yàn)中中，對(duì)相相對(duì)較少少的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物必必須以較較高劑量量進(jìn)行試試驗(yàn)，然然后根據(jù)據(jù)毒理學(xué)學(xué)原則外外推估

8、計(jì)計(jì)低劑量量暴露的的危險(xiǎn)性性。第三個(gè)原原則，成成年的健健康(雄性和和雌性未未孕)實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物和人人可能的的暴露途途徑是基基本的選選擇。選選用成年年的健康康(雄性和和雌性未未孕)實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物是為為了使實(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果果具有代代表性和和可重復(fù)復(fù)性。以以成年的的健康(雄性和和雌性未未孕)實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物作為為一般人人群的代代表性實(shí)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ托?，而將將幼年和和老年?dòng)動(dòng)物、妊妊娠的雌雌性動(dòng)物物、疾病病狀態(tài)作作為特殊殊情況另另作研究究。這樣樣可降低低實(shí)驗(yàn)對(duì)對(duì)象的多多樣性，減少實(shí)實(shí)驗(yàn)誤差差。毒理理學(xué)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)結(jié)果的的敏感性性取決于于受試物物處理引引起毒效效應(yīng)強(qiáng)度度和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)誤差兩兩個(gè)因素素，處理理引起的的毒效應(yīng)應(yīng)強(qiáng)，實(shí)實(shí)驗(yàn)誤差差小

9、，則則實(shí)驗(yàn)結(jié)結(jié)果的敏敏感性增增加，反反映受試試物處理理的真實(shí)實(shí)效應(yīng)，反之亦亦然。在在下文所所述的實(shí)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)計(jì)是要規(guī)規(guī)定實(shí)驗(yàn)驗(yàn)條件，嚴(yán)格控控制可能能影響毒毒效應(yīng)的的各種因因素，實(shí)實(shí)施質(zhì)量量保證，降低實(shí)實(shí)驗(yàn)誤差差。只有有這樣，才能保保證試驗(yàn)驗(yàn)結(jié)果的的準(zhǔn)確性性和可重重復(fù)性，不能重重復(fù)的實(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果果是沒有有任何科科學(xué)價(jià)值值的。外外源化學(xué)學(xué)物以不不同途徑徑染毒，實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物表現(xiàn)現(xiàn)的毒性性可有很很大差異異，這是是由于因因染毒部部位解剖剖生理特特點(diǎn)不同同，外源源化學(xué)物物吸收進(jìn)進(jìn)入血液液的速度度和量也也不同，首先到到達(dá)的器器官和組組織也不不同。因因此，毒毒理學(xué)試試驗(yàn)中染染毒途徑徑的選擇擇，應(yīng)盡盡可能模模擬人接接

10、觸該受受試物的的方式。二、食品品毒理學(xué)學(xué)實(shí)驗(yàn)的的局限性性歷史上，環(huán)境污污染物及及某些藥藥物所引引起的中中毒和死死亡多次次發(fā)生，引起各各國的重重視，推推動(dòng)了毒毒理學(xué)的的發(fā)展，各國政政府主管管部門制制訂和多多次修訂訂了有關(guān)關(guān)藥品和和各種化化學(xué)品安安全性評(píng)評(píng)價(jià)的規(guī)規(guī)范或準(zhǔn)準(zhǔn)則，希希望在嚙嚙齒類和和非嚙齒齒類的毒毒理學(xué)研研究能為為有關(guān)候候選新藥藥和各種種化學(xué)品品提供安安全性證證據(jù)，但但以動(dòng)物物的資料料預(yù)測(cè)人人的毒性性的預(yù)測(cè)測(cè)價(jià)值尚尚有待于于研究。Lummleyy(19990)和Igarrashhi(119944)根據(jù)據(jù)有限的的臨床資資料報(bào)告告，發(fā)現(xiàn)現(xiàn)對(duì)人的的毒性約約一半不不能由臨臨床前(動(dòng)物)毒性研研

11、究預(yù)測(cè)測(cè)。Heeywoood(19883)報(bào)報(bào)告277個(gè)化學(xué)學(xué)物(大多為為藥品)的靶器器官毒性性在大鼠鼠和狗(或猴)之間的的相符率率僅200。OOlsoon等(19998)報(bào)告1331種化化學(xué)物對(duì)對(duì)動(dòng)物的的毒性與與人的毒毒性相符符率，嚙嚙齒類為為6，非非嚙齒類類(狗和猴猴)為28，合并達(dá)達(dá)36，所有的的物種相相符率可可達(dá)699。按按照目前前的規(guī)范范，進(jìn)行行毒理學(xué)學(xué)安全性性評(píng)價(jià)，可以在在一定程程度上提提高新藥藥和各種種化學(xué)品品的使用用安全性性，但仍仍不能完完全排除除對(duì)人健健康危害害的風(fēng)險(xiǎn)險(xiǎn)。WHHO在臨床前前藥物安安全性實(shí)實(shí)驗(yàn)原則則的文文件中指指出“雖然事事先對(duì)生生物活性性物質(zhì)進(jìn)進(jìn)行了最最仔細(xì)徹

12、徹底的研研究，但但給人使使用時(shí)總總是不可可避免地地要冒一一定的風(fēng)風(fēng)險(xiǎn)?！边@就是是利用動(dòng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)的局限限性，即即動(dòng)物實(shí)實(shí)驗(yàn)的結(jié)結(jié)果外推推到人的的不確定定性。用實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物的毒毒理學(xué)實(shí)實(shí)驗(yàn)資料料外推到到人群接接觸的安安全性時(shí)時(shí)，會(huì)有有很大的的不確定定性。這這是因?yàn)闉?，外源源化學(xué)物物的毒性性作用受受到許多多因素的的影響。首先，實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物和人對(duì)對(duì)外源化化學(xué)物的的反應(yīng)敏敏感性不不同，有有時(shí)甚至至存在著著質(zhì)的差差別。雖雖然在毒毒理學(xué)實(shí)實(shí)驗(yàn)中通通過用兩兩種或兩兩種以上上的動(dòng)物物，并盡盡可能選選擇與人人對(duì)毒物物反應(yīng)相相似的動(dòng)動(dòng)物，但但要完全全避免物物種差異異是不可可能的。而且，實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物不能能述說涉涉及主觀

13、觀感覺的的毒效應(yīng)應(yīng)，如疼疼痛、腹腹脹、疲疲乏、頭頭暈、眼眼花、耳耳鳴等，這些毒毒效應(yīng)就就難以或或不可能能發(fā)現(xiàn)。在動(dòng)物物實(shí)驗(yàn)中中，可觀觀察到體體征(ssignn)，而而沒有癥癥狀(ssympptomm)。第二，在在毒理學(xué)學(xué)實(shí)驗(yàn)中中，為了了尋求毒毒作用的的靶器官官，并能能在相對(duì)對(duì)少量的的動(dòng)物上上就能得得到劑量量-反應(yīng)或或劑量-效應(yīng)關(guān)關(guān)系，往往往選用用較大的的染毒劑劑量，這這一劑量量通常要要比人實(shí)實(shí)際接觸觸的劑量量大得多多。有些些化學(xué)物物在高劑劑量和低低劑量的的毒性作作用規(guī)律律并不一一定一致致，如大大劑量下下出現(xiàn)的的反應(yīng)有有可能是是由于化化學(xué)物在在體內(nèi)超超過了機(jī)機(jī)體的代代謝能力力，這就就存在高高劑量

14、向向低劑量量外推的的不確定定性。第三，毒毒理學(xué)實(shí)實(shí)驗(yàn)所用用動(dòng)物數(shù)數(shù)量有限限，那些些發(fā)生率率很低的的毒性反反應(yīng)，在在少量動(dòng)動(dòng)物中難難以發(fā)現(xiàn)現(xiàn)。而化化學(xué)物一一旦進(jìn)入入市場(chǎng)，接觸人人群往往往會(huì)很大大。這就就存在小小數(shù)量實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物到大量量人群外外推的不不確定性性。第四，實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物一般都都是實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室培育育的品系系，一般般選用成成年健康康動(dòng)物，反應(yīng)較較單一，而接觸觸人群可可以是不不同的人人種、種種族，而而且包括括年老體體弱及患患病的個(gè)個(gè)體，在在對(duì)外源源化學(xué)物物毒性反反應(yīng)的易易感性上上存在很很大差異異。以上這些些都構(gòu)成成了從毒毒理學(xué)動(dòng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)結(jié)果向向人群安安全性評(píng)評(píng)價(jià)外推推時(shí)的不不確定因因素。毒理學(xué)毒

15、毒性評(píng)價(jià)價(jià)試驗(yàn)的的基本目目的毒理學(xué)實(shí)實(shí)驗(yàn)的常常規(guī)部分分是毒性性評(píng)價(jià)或或安全性性評(píng)價(jià)試試驗(yàn)。為為了對(duì)受受試物的的毒性進(jìn)進(jìn)行全面面的測(cè)試試，增強(qiáng)強(qiáng)測(cè)試結(jié)結(jié)果的可可靠性，權(quán)威機(jī)機(jī)構(gòu)規(guī)定定了評(píng)價(jià)價(jià)程序，以保證證毒性評(píng)評(píng)價(jià)研究究可以達(dá)達(dá)到普遍遍能接受受的最低低要求和和原則。毒理學(xué)學(xué)家認(rèn)為為毒理學(xué)學(xué)試驗(yàn)程程序應(yīng)該該有一定定的靈活活性。對(duì)對(duì)毒理學(xué)學(xué)試驗(yàn)的的原理和和設(shè)計(jì)思思路的深深入理解解，有助助于研究究者對(duì)評(píng)評(píng)價(jià)程序序的實(shí)施施，在發(fā)發(fā)現(xiàn)新的的現(xiàn)象或或線索時(shí)時(shí)，可進(jìn)進(jìn)行一些些補(bǔ)充實(shí)實(shí)驗(yàn)來證證實(shí)，并并可進(jìn)一一步研究究其機(jī)制制。毒性評(píng)價(jià)價(jià)或安全全性評(píng)價(jià)價(jià)方面的的基本目目的包括括以下幾幾點(diǎn)： 1. 受試物物毒作用用

16、的表現(xiàn)現(xiàn)和性質(zhì)質(zhì)。在急急性和慢慢性毒性性試驗(yàn)中中，觀察察受試物物對(duì)機(jī)體體的有害害作用，對(duì)有害害作用的的觀察應(yīng)應(yīng)該是對(duì)對(duì)每個(gè)實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物進(jìn)行全全面的逐逐項(xiàng)的觀觀察和記記錄。發(fā)發(fā)現(xiàn)有害害作用是是進(jìn)行劑劑量-反應(yīng)(效應(yīng))研究的的前提。 2. 劑量-反應(yīng)(效應(yīng))研究。劑量-反應(yīng)(效應(yīng))研究是是毒性評(píng)評(píng)價(jià)和安安全性評(píng)評(píng)價(jià)的基基礎(chǔ)。通通過對(duì)不不同有害害作用的的劑量-反應(yīng)(效應(yīng))研究，可以得得到該受受試物的的多種毒毒性參數(shù)數(shù)。在急急性(致死性性)毒性試試驗(yàn)中，應(yīng)該得得到LDD50，也也可以得得到LDD01和MTDD。在急急性非致致死性毒毒性試驗(yàn)驗(yàn)中，應(yīng)應(yīng)該得到到急性可可觀察到到有害作作用的最最低劑量量(LO

17、OAELL)和未未觀察到到有害作作用的劑劑量(NNOAEEL)。在亞急急性、亞亞慢性及及慢性毒毒性試驗(yàn)驗(yàn)中，應(yīng)應(yīng)該得到到相應(yīng)的的LOAAEL和和NOAAEL。在致突突變、致致癌和致致畸等特特殊毒性性試驗(yàn)中中，劑量量-反應(yīng)(效應(yīng))研究將將為確定定受試物物是否具具有這些些特殊毒毒性提供供依據(jù)。在致畸畸試驗(yàn)也也可得到到LOAAEL和和NOAAEL；在致突突變、致致癌試驗(yàn)驗(yàn)中，盡盡管認(rèn)為為是無閾閾值的，但也可可得到表表觀的LLOAEEL和NOAAEL。3. 確確定毒作作用的靶靶器官。確定受受試物有有害作用用的靶器器官，是是毒理學(xué)學(xué)研究的的重要目目的，以以闡明受受試物毒毒作用的的特點(diǎn)，并為進(jìn)進(jìn)一步的的機(jī)

18、制研研究和毒毒性防治治提供線線索。4. 確確定損害害的可逆逆性。一一旦確認(rèn)認(rèn)有害作作用存在在，就應(yīng)應(yīng)研究停停止接觸觸后該損損害是否否可逆和和消失，器官和和組織功功能是否否能恢復(fù)復(fù)，還是是像化學(xué)學(xué)致癌作作用那樣樣停止接接觸后損損害繼續(xù)續(xù)發(fā)展? 毒性性的可逆逆性關(guān)系系到對(duì)人人的危害害評(píng)價(jià)，如果受受損的器器官組織織能夠修修復(fù)并恢恢復(fù)正常常功能，則可能能接受較較高危險(xiǎn)險(xiǎn)性的接接觸水平平。當(dāng)然，毒毒理學(xué)研研究還可可能有其其他的目目的和要要求，例例如毒作作用的敏敏感檢測(cè)測(cè)指標(biāo)和和生物學(xué)學(xué)標(biāo)志、毒作用用機(jī)制研研究、受受試物的的毒物動(dòng)動(dòng)力學(xué)和和代謝研研究、中中毒的解解救措施施等。對(duì)對(duì)這些要要求，應(yīng)應(yīng)擴(kuò)展常常規(guī)

19、試驗(yàn)驗(yàn)的設(shè)計(jì)計(jì)以包括括有關(guān)的的項(xiàng)目，或者另另外設(shè)計(jì)計(jì)和進(jìn)行行靶器官官毒理學(xué)學(xué)研究及及機(jī)制毒毒理學(xué)研研究。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物的選擇擇和處理理毒理學(xué)的的動(dòng)物實(shí)實(shí)驗(yàn)是以以實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物作為為研究對(duì)對(duì)象的，為獲得得可靠的的研究結(jié)結(jié)果，先先決條件件是正確確地選用用實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物。一、實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物物物種的選選擇外源化學(xué)學(xué)物的固固有毒性性往往在在人和不不同物種種實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物之間間表現(xiàn)不不同，物物種差別別可以表表現(xiàn)在量量方面，引起毒毒性的劑劑量差別別，即毒毒性大小小的差別別，如有有報(bào)道，對(duì)人1138種種化學(xué)物物的敏感感性為大大鼠的11.810.5倍。物種差差別也可可以表現(xiàn)現(xiàn)在質(zhì)方方面(毒性效效應(yīng)的差差別)，如除除草劑百百草枯(對(duì)

20、草快快)對(duì)人引引起肺損損傷，而而對(duì)狗則則未見到到。因此此，需要要對(duì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物物物種進(jìn)行行選擇。物種間間毒性反反應(yīng)差別別的原因因，可能能歸納為為解剖與與生理學(xué)學(xué)差異，遺傳與與代謝的的差異等等。對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物物種種選擇的的基本原原則是：選擇對(duì)對(duì)受試物物在代謝謝、生物物化學(xué)和和毒理學(xué)學(xué)特征與與人最接接近的物物種；自自然壽命命不太長(zhǎng)長(zhǎng)的物種種；易于于飼養(yǎng)和和實(shí)驗(yàn)操操作的物物種；經(jīng)經(jīng)濟(jì)并易易于獲得得的物種種。在選擇實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物時(shí)存在在固有的的限制?？衫糜玫奈锓N種不多，主要原原因包括括經(jīng)濟(jì)(購買和和飼養(yǎng)的的費(fèi)用)、實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物的的壽命、行為和和生活能能力、處處置，也也許最重重要的是是對(duì)該物物種“正?！鄙砗?/p>

21、和病理的的資料，以及對(duì)對(duì)所研究究的毒性性的敏感感性。要要利用對(duì)對(duì)受試物物在代謝謝、生物物化學(xué)和和毒理學(xué)學(xué)特征與與人最接接近的物物種，這這就需要要了解實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物物種和和人對(duì)受受試化學(xué)學(xué)物的吸吸收、生生物轉(zhuǎn)化化等資料料，但這這往往并并不切合合實(shí)際，因?yàn)槭资紫刃枰M(jìn)行一一系列的的比較研研究，而而對(duì)人體體的資料料在動(dòng)物物試驗(yàn)之之前是很很難得到到的。在毒理學(xué)學(xué)研究中中常用的的實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物物種種如下：大鼠、小鼠、豚鼠、兔、狗狗。其他他可能用用到的實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物有地鼠鼠、獼猴猴、小型型豬、雞雞等。其其中，大大鼠、小小鼠、豚豚鼠和地地鼠為嚙嚙齒目動(dòng)動(dòng)物。常常用實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物生生物學(xué)和和生理學(xué)學(xué)參數(shù)見見表5-1。以

22、上所述述毒理學(xué)學(xué)實(shí)驗(yàn)常常用的實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物各物種種中，實(shí)實(shí)際上沒沒有一種種完全符符合上述述物種選選擇的原原則，目目前常規(guī)規(guī)選擇物物種的方方式是利利用兩個(gè)個(gè)物種，一種是是嚙齒類類，另一一種是非非嚙齒類類。系統(tǒng)統(tǒng)毒性研研究最常常用的嚙嚙齒類是是大鼠和和小鼠，非嚙齒齒類是狗狗。豚鼠鼠常用于于皮膚刺刺激試驗(yàn)驗(yàn)和致敏敏試驗(yàn)，兔常用用于皮膚膚刺激試試驗(yàn)和眼眼刺激試試驗(yàn)。遺遺傳毒理理學(xué)試驗(yàn)驗(yàn)多用小小鼠，致致癌試驗(yàn)驗(yàn)常用大大鼠和小小鼠，致致畸試驗(yàn)驗(yàn)常用大大鼠、小小鼠和兔兔。遲發(fā)發(fā)性神經(jīng)經(jīng)毒性試試驗(yàn)常用用母雞。一般假假設(shè)，如如以與人人相同的的接觸方方式、大大致相同同的劑量量水平，在兩個(gè)個(gè)物種有有毒性反反應(yīng)，則則人

23、有可可能以相相同的方方式發(fā)生生毒性反反應(yīng)。當(dāng)當(dāng)不同物物種的毒毒性反應(yīng)應(yīng)有很大大的差異異時(shí)，必必須研究究外源化化學(xué)物在在不同物物種的代代謝、動(dòng)動(dòng)力學(xué)及及毒作用用機(jī)制，然后才才可將實(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果果外推到到人。表5-11 常常用實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物生生物學(xué)和和生理學(xué)學(xué)參數(shù)參 數(shù)數(shù)猴狗貓兔大鼠小鼠豚鼠地鼠成體體重重(kg)3.514.003.33.70.4550.03350.4330.122壽命(aa)161514631.531水消耗(ml/d)45035032030035614530飼料消耗耗 (成本本g/dd)1504001001801051210成體代謝謝(calkgd)1588080110130600100

24、250體溫()38.8838.9938.6639l4438l2237.4438.6638.00呼吸頻率率50202553851609083(次mmin)(4060)(1030)(2030)(4065)(651100)(802400)(701000)(351300)心率(次次minn)200100120200328600300450血壓mmmHg15912771481000155100011080130/901207577/550108/77(收縮舒張)出生體重重(g)500700011000220001251005-61.57511002.0斷乳時(shí)體體重(gg)4400058000300001

25、0015000405501011225035開眼(dd)出生當(dāng)天天81228122101011211出生當(dāng)天天15妊娠(dd)16863633121206716性周期(d)282215228151164545161194動(dòng)情期(d)1271339199301111窩數(shù)量136161133691122151122斷乳年齡齡(周)162246698343234生殖年齡齡(月)549106723232生殖期(年)1011551004131131生殖季節(jié)節(jié)任何時(shí)間間春，秋冬季23個(gè)月任何時(shí)間間任何時(shí)間間任何時(shí)間間任何時(shí)間間任何時(shí)間間所需面積積(tff2)*68330.40.40.70.344環(huán)境溫度度

26、()1822818228182281822819225192251922519225血容量( MLL/Kgg)7579605365807585凝血時(shí)間間(s)90180120300601460143HCT(紅細(xì)胞胞)4245404246414250Hb(ggbl)12.5516.0011.8813.6614.8816.0012.4412.00*所需面面積(fft2)，及為英英尺，1ftt30.48ccm引自：參考書書7，P133二、實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物品品系的選選擇品系(sstraain)是實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)學(xué)的專用用名詞，指用計(jì)計(jì)劃交配配的方法法，獲得得起源于于共同祖祖先的一一群動(dòng)物物。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物按遺傳傳學(xué)

27、控制制分類可可分為：近交系系：指全全同胞兄兄妹或親親子之間間連續(xù)交交配200代以上上而培育育的純品品系動(dòng)物物。如小小鼠有津津白I、津白白、6155，DBAA1和DBAA2，BALLB/CC，C3HH，C577B6J，A和AHe等。雜交群群動(dòng)物(雜交1代，F(xiàn)11)，指指兩個(gè)不不同的近近交系之之間有目目的進(jìn)行行交配，所產(chǎn)生生的第一一代動(dòng)物物。封閉群群：一個(gè)個(gè)種群在在五年以以上不從從外部引引進(jìn)新血血緣，僅僅由同一一品系的的動(dòng)物在在固定場(chǎng)場(chǎng)所隨機(jī)機(jī)交配繁繁殖的動(dòng)動(dòng)物群。如昆明種種小鼠、NIHH小鼠、LACCA小鼠鼠、F3344大大鼠、WWisttar大大鼠、SSD(SSpraaguee-Daaulee

28、y)大大鼠等。根據(jù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物遺遺傳的均均一性排排序，近近交系最最高、雜雜交群次次之、封封閉群較較低。不不同品系系實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物對(duì)外外源化學(xué)學(xué)物毒性性反應(yīng)有有差別，所以毒毒理學(xué)研研究要選選擇適宜宜的品系系，對(duì)某某種外源源化學(xué)物物毒理學(xué)學(xué)系列研研究中應(yīng)應(yīng)固定使使用同一一品系動(dòng)動(dòng)物，以以求研究究結(jié)果的的穩(wěn)定性性。遺傳毒理理學(xué)一般般利用嚙嚙齒類動(dòng)動(dòng)物，主主要是小小鼠或大大鼠。如如果有合合適的理理由，其其他物種種也可接接受。有有的文獻(xiàn)獻(xiàn)報(bào)告在在小鼠骨骨髓微核核試驗(yàn)MMSAe品系系比dddy，CD-1或BDFF品系更更敏感。但一般般認(rèn)為還還沒能證證明某一一品系對(duì)對(duì)所有的的遺傳毒毒性物質(zhì)質(zhì)比其他他品系都都敏感。

29、在致癌癌試驗(yàn)中中對(duì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物的的品系有有一定的的要求，特別重重視有關(guān)關(guān)病理損損害的自自發(fā)發(fā)生生率。例例如，某某些大鼠鼠品系垂垂體腫瘤瘤發(fā)生率率高，則則不適用用于靶器器官為內(nèi)內(nèi)分泌系系統(tǒng)的毒毒性研究究。又如如B6CC3F11雄小鼠鼠肝腫瘤瘤高發(fā)生生率可能能有礙于于肝致癌癌反應(yīng)的的檢測(cè)。三、對(duì)實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物微生物物控制的的選擇按微生物物控制分分類，實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物分為四四級(jí)，見見表5-2。對(duì)對(duì)于毒性性試驗(yàn)及及毒理學(xué)學(xué)研究應(yīng)應(yīng)盡可能能使用二二級(jí)(或二級(jí)級(jí)以上)的動(dòng)物物，以保保證實(shí)驗(yàn)驗(yàn)結(jié)果的的可靠性性。表5-22 實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物微生生物等級(jí)級(jí)級(jí) 別要 求I 級(jí) 級(jí) 級(jí)IV 級(jí)級(jí)普通動(dòng)物物，應(yīng)沒沒有傳染染給人的的

30、疾病清潔動(dòng)物物，除II級(jí)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)外，種種系清楚楚，沒有有該動(dòng)物物特有的的疾病無特定病病原體動(dòng)動(dòng)物(SSPF)，除級(jí)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)外，動(dòng)動(dòng)物為剖剖腹產(chǎn)或或子宮切切除產(chǎn)、按純系系要求繁繁殖，在隔離器器內(nèi)或?qū)訉恿魇覂?nèi)內(nèi)飼養(yǎng)，可有不不致病細(xì)細(xì)菌叢，沒有致致病病原原體無菌動(dòng)物物，在全全封閉無無菌條件件下飼養(yǎng)養(yǎng)的純系系動(dòng)物，動(dòng)物體體外不帶帶有任何何微生物物和寄生生蟲(包括絕絕大部分分病毒)四、個(gè)體體選擇 實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)對(duì)外來化化學(xué)物的的毒性反反應(yīng)還存存在個(gè)體體差異，應(yīng)注意意實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物的個(gè)個(gè)體選擇擇。1. 性性別同一一物種、同一品品系的實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物雌雄兩兩性通常常對(duì)相同同外源化化學(xué)物毒毒性反應(yīng)應(yīng)類似但但雌雄兩兩性對(duì)化化

31、學(xué)物的的毒性敏敏感性上上存在著著差別。有文獻(xiàn)獻(xiàn)報(bào)道在在1499種外源源化學(xué)物物中雌雄雄敏感性性比值小小鼠平均均為0.92，大鼠為為0.888，這這種差別別表現(xiàn)在在實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物性發(fā)發(fā)育成熟熟開始，直至老老年期。可見雌雌雄兩性性動(dòng)物的的性激素素性質(zhì)和和水平是是關(guān)鍵因因素，一一般講雄雄性動(dòng)物物體內(nèi)微微粒體細(xì)細(xì)胞色素素P-4450酶酶系活性性大于雌雌性動(dòng)物物，所以以經(jīng)該酶酶系降解解解毒的的外源化化學(xué)物對(duì)對(duì)雌性動(dòng)動(dòng)物表現(xiàn)現(xiàn)的毒性性大，然然而經(jīng)該該酶活化化增毒的的外源化化學(xué)物卻卻相反。如果已知知不同性性別的動(dòng)動(dòng)物對(duì)受受試物敏敏感性不不同，應(yīng)應(yīng)選擇敏敏感的性性別。如如對(duì)性別別差異不不清楚，則應(yīng)選選用雌雄雄兩種

32、性性別。如如實(shí)驗(yàn)中中發(fā)現(xiàn)存存在性別別差異，則應(yīng)將將不同性性別動(dòng)物物的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)結(jié)果分分別統(tǒng)計(jì)計(jì)分析。在遺傳毒毒理學(xué)體體內(nèi)試驗(yàn)驗(yàn)中，對(duì)性別別的選擇擇有幾種種意見： (1) 對(duì)單單個(gè)物種種應(yīng)用兩兩種性別別。 (2) 對(duì)單單個(gè)物種種應(yīng)用兩兩種性別別，除非非已在一一個(gè)性別別得到陽陽性反應(yīng)應(yīng)，就不不必對(duì)另另一種性性別進(jìn)行行試驗(yàn)。 (3) 對(duì)單單個(gè)物種種應(yīng)用兩兩種性別別，除非非經(jīng)毒代代動(dòng)力學(xué)學(xué)研究證證明受試試物(和其代代謝產(chǎn)物物)在雄性性和雌性性無差別別和或或如果在在確定劑劑量的預(yù)預(yù)試驗(yàn)證證明有相相等毒性性。此假假定在非非遺傳毒毒性與遺遺傳毒性性之間有有相關(guān)。 (4) 對(duì)單單個(gè)物種種常規(guī)用用一種性性別(雄性或

33、或雌性)，除非非預(yù)期證明存存在性別別差異。由于歷歷史的原原因UDDS體內(nèi)內(nèi)體外外試驗(yàn)常常規(guī)用雄雄性大鼠鼠。一般來說說，對(duì)于于初次試試驗(yàn)的受受試物，應(yīng)該采采用兩種種性別。對(duì)大鼠鼠和小鼠鼠各一種種性別進(jìn)進(jìn)行試驗(yàn)驗(yàn)可能比比單個(gè)物物種兩種種性別提提供更好好的危害害鑒定，但這需需要更多多的資料料來證明明。 2. 年齡和和體重實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物同人類類一樣，生命全全程大體體上可區(qū)區(qū)分三個(gè)個(gè)階段，即幼年年期(從出生生到性成成熟之前前)、成年年期和老老年期。在成年年期，各各種激素素(包括性性激素)、代謝謝酶都處處于高峰峰穩(wěn)定期期，并對(duì)對(duì)外源化化學(xué)物的的毒性反反應(yīng)差異異較小，且有代代表性。在幼年年期和老老年期，對(duì)外源

34、源化學(xué)物物的生物物轉(zhuǎn)運(yùn)和和生物轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)化，靶靶器官和和受體的的敏感性性均與成成年期不不同。如如有報(bào)道道外源化化學(xué)物對(duì)對(duì)成年動(dòng)動(dòng)物的致致死劑量量(或LD500)與新生生動(dòng)物比比較，其其比值在在0.000216之間間，表明明有的外外源化學(xué)學(xué)物對(duì)新新生動(dòng)物物毒性低低，也有有的毒性性反應(yīng)強(qiáng)強(qiáng)。毒理理學(xué)試驗(yàn)驗(yàn)選用實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物的年齡齡取決于于試驗(yàn)的的類型。急性試試驗(yàn)一般般選用成成年動(dòng)物物;慢性試試驗(yàn)因?qū)崒?shí)驗(yàn)周期期長(zhǎng)，應(yīng)應(yīng)選用較較年幼的的或初斷斷乳的動(dòng)動(dòng)物，以以使實(shí)驗(yàn)驗(yàn)周期能能復(fù)蓋成成年期。實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物的年年齡應(yīng)由由其出生生日期來來定，但但實(shí)際工工作中常常以動(dòng)物物的體重重粗略地地判斷動(dòng)動(dòng)物的年年齡，作作為挑選選適

35、齡動(dòng)動(dòng)物的依依據(jù)。同同一試驗(yàn)驗(yàn)中，組組內(nèi)個(gè)體體間體重重差異應(yīng)應(yīng)小于110，各組間間平均體體重差異異不應(yīng)超超過5。 3. 生理狀狀態(tài)在毒毒理學(xué)試試驗(yàn)中動(dòng)動(dòng)物如出出現(xiàn)妊娠娠，則影影響體重重及其他他指標(biāo)的的檢測(cè)結(jié)結(jié)果，并并且，性性激素對(duì)對(duì)外源化化學(xué)物代代謝轉(zhuǎn)化化有影響響，故應(yīng)應(yīng)選用未未產(chǎn)未孕孕的雌性性動(dòng)物。雌雄動(dòng)動(dòng)物應(yīng)分分籠飼養(yǎng)養(yǎng)。但在在某些試試驗(yàn)如顯顯性致死死試驗(yàn)、致畸試試驗(yàn)及繁繁殖試驗(yàn)驗(yàn)等，則則需有計(jì)計(jì)劃地合合籠交配配。 4. 健康狀狀況實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物的的健康狀狀態(tài)對(duì)毒毒理學(xué)試試驗(yàn)結(jié)果果有很大大的影響響，因此此應(yīng)選用用健康動(dòng)動(dòng)物。對(duì)對(duì)于實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物微微生物控控制的選選擇實(shí)際際上是選選擇健康康狀況的的一

36、個(gè)重重要指標(biāo)標(biāo)，健康康個(gè)體的的選擇還還包括了了其他方方面。健健康動(dòng)物物應(yīng)發(fā)育育正常、體形健健壯，無無外觀畸畸形，被被毛濃密密、有光光澤、順順貼而不不蓬亂，行動(dòng)靈靈活、反反應(yīng)敏捷捷，眼睛睛明亮有有神，表表皮無潰潰瘍和結(jié)結(jié)癡，天天然孔道道干凈無無分泌物物等。為確保選選擇健康康動(dòng)物，一般在在實(shí)驗(yàn)前前觀察557天。對(duì)對(duì)于大鼠鼠和狗的的亞慢性性和慢性性試驗(yàn)，可在實(shí)實(shí)驗(yàn)前采采血進(jìn)行行血液學(xué)學(xué)和血液液生化學(xué)學(xué)檢查，異常的的動(dòng)物應(yīng)應(yīng)剔除；對(duì)狗應(yīng)應(yīng)常規(guī)驅(qū)驅(qū)除腸道道寄生蟲蟲。合理的全全營養(yǎng)飼飼料對(duì)維維持實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物健健康和正正常的生生理活動(dòng)動(dòng)是至關(guān)關(guān)重要的的。高溫溫與低溫溫時(shí)外源源化學(xué)物物的毒性性一般比比常溫為為高

37、。氣氣溫升高高而毒性性增大，這種毒毒性變化化可能是是由于溫溫度影響響了毒物物動(dòng)力學(xué)學(xué)所致。高溫、高濕環(huán)環(huán)境共存存時(shí)皮膚膚更易于于外源化化學(xué)物經(jīng)經(jīng)皮膚吸吸收。人工晝夜夜周期，即使動(dòng)動(dòng)物處于于人工調(diào)調(diào)控的112小時(shí)時(shí)白晝(早6點(diǎn)至晚晚6點(diǎn))及12小時(shí)時(shí)黑夜(晚6點(diǎn)至次次日早66點(diǎn))，以穩(wěn)穩(wěn)定其生生物時(shí)間間節(jié)律。在正常常、健康康的動(dòng)物物每天224小時(shí)時(shí)的生理理規(guī)律不不盡相同同，即存存在著生生物時(shí)間間節(jié)律，對(duì)外源源化學(xué)物物的毒性性反應(yīng)也也有晝夜夜性時(shí)間間變化，因此出出現(xiàn)毒理理學(xué)新的的分支學(xué)學(xué)科，稱稱為時(shí)間間毒理學(xué)學(xué)(Chhronnotooxiccoloogy)。由于于動(dòng)物存存在時(shí)間間節(jié)律，外源化化學(xué)物

38、在在不同時(shí)時(shí)間表現(xiàn)現(xiàn)的毒性性反應(yīng)有有差別，所以在在毒理學(xué)學(xué)實(shí)際工工作中，尤其是是進(jìn)行亞亞慢性和和慢性染染毒時(shí)，每日的的染毒時(shí)時(shí)間應(yīng)固固定一致致，以防防止出現(xiàn)現(xiàn)時(shí)間毒毒性的影影響。而而且采取取動(dòng)物生生物樣品品(如血、尿等)進(jìn)行各各種指標(biāo)標(biāo)的化驗(yàn)驗(yàn)或一些些生理功功能的檢檢查(如血壓壓、體溫溫等)也應(yīng)固固定時(shí)間間。根據(jù)我國國的法規(guī)規(guī)和有關(guān)關(guān)規(guī)定，國家實(shí)實(shí)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物的的質(zhì)量監(jiān)監(jiān)督和質(zhì)質(zhì)量合格格證制度度。實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物的的保種、飼育、供應(yīng)和和應(yīng)用單單位，由由各級(jí)醫(yī)醫(yī)學(xué)動(dòng)物物管理委委員會(huì)進(jìn)進(jìn)行定期期監(jiān)督、監(jiān)測(cè)，并頒發(fā)發(fā)實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物和實(shí)實(shí)驗(yàn)設(shè)施施的合格格證書(有效期期5年)。應(yīng)用用的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物必必須有完完整的資

39、資料。進(jìn)進(jìn)行動(dòng)物物實(shí)驗(yàn)的的人員應(yīng)應(yīng)經(jīng)培訓(xùn)訓(xùn)，取得得資格認(rèn)認(rèn)可(上崗證證)。實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物的的飼養(yǎng)設(shè)設(shè)施、環(huán)環(huán)境條件件及飼料料等必須須符合有有關(guān)的國國家標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)。食品毒理理學(xué)試驗(yàn)驗(yàn)設(shè)計(jì)要要點(diǎn)一、體內(nèi)內(nèi)毒理學(xué)學(xué)試驗(yàn)設(shè)設(shè)計(jì) 1. 劑量分分組在毒毒理學(xué)試試驗(yàn)中，最重要要的就是是研究劑劑量-反應(yīng)(效應(yīng))關(guān)系，也就是是當(dāng)外源源化學(xué)物物染毒劑劑量增加加，實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物的的毒性反反應(yīng)(效應(yīng))隨之而而增強(qiáng)。劑量-反應(yīng)(效應(yīng))關(guān)系的的存在是是確定外外源化學(xué)學(xué)物與有有害作用用的因果果關(guān)系的的重要依依據(jù)，也也可證明明實(shí)驗(yàn)結(jié)結(jié)果的可可靠性。因此，在毒理理學(xué)試驗(yàn)驗(yàn)中，一一般至少少要設(shè)33個(gè)劑量量組(即高劑劑量組、中劑量量組、低低劑

40、量組組)，希望望能得到到滿意的的劑量-反應(yīng)(效應(yīng))關(guān)系。一般要求求，高劑劑量組應(yīng)應(yīng)出現(xiàn)明明確的有有害作用用，或者者高劑量量組劑量量已達(dá)到到染毒的的極限劑劑量(如大鼠鼠或小鼠鼠灌胃或或注射的的最大容容量)。低劑劑量組應(yīng)應(yīng)不出現(xiàn)現(xiàn)任何可可觀察到到的有害害作用(即相當(dāng)當(dāng)于NOOAELL)，但但低劑量量組劑量量應(yīng)當(dāng)高高于人可可能的接接觸劑量量，至少少等于人人可能的的接觸劑劑量。中中劑量組組的劑量量介于高高劑量組組和低劑劑量組之之間，應(yīng)應(yīng)出現(xiàn)輕輕微的毒毒性效應(yīng)應(yīng)(即相當(dāng)當(dāng)于LOOAELL)。高高、中、低劑量量組劑量量一般按按等比例例計(jì)算，劑量間間距應(yīng)為為2或，低劑劑量組劑劑量一般般為高劑劑量組劑劑量的1

41、1/101/20。急性毒性性試驗(yàn)分分組和劑劑量選擇擇見下一一章。亞亞慢性毒毒性試驗(yàn)驗(yàn)的高劑劑量應(yīng)該該用急性性毒性的的LD500的某個(gè)個(gè)分?jǐn)?shù)或或LD011。在長(zhǎng)長(zhǎng)期或致致癌試驗(yàn)驗(yàn)，最高高劑量選選擇為由由亞慢性性毒性試試驗(yàn)確定定的最大大耐受劑劑量(MMTD)，毒動(dòng)動(dòng)學(xué)或代代謝資料料可能有有助于決決定劑量量，特別別是有受受試物或或其代謝謝產(chǎn)物的的蓄積或或有劑量量依賴性性解毒改改變的證證據(jù)。有有人認(rèn)為為，在新新藥安全全性評(píng)價(jià)價(jià)中，試試驗(yàn)期限限等于或或小于114天，限度劑劑量為22g(kggd)；如如大于114天限限度劑量量為1gg(kgg、d)。在在無毒性性情況下下，對(duì)限限度劑量量的例外外是基于于該途

42、徑徑的最大大染毒容容量。毒理學(xué)試試驗(yàn)常用用的對(duì)照照有4種： (1) 未處處理對(duì)照照組(以前有有稱為空空白對(duì)照照組)：即對(duì)對(duì)照組不不施加任任何處理理因素，不給受受試物也也不給以以相應(yīng)的的操作。未處理理對(duì)照組組往往用用于遺傳傳毒理學(xué)學(xué)試驗(yàn)中中，確定定指示生生物的生生物學(xué)特特征的本本底值，進(jìn)行質(zhì)質(zhì)量控制制。 (2) 陰性性(溶劑賦形劑劑)對(duì)照：不給處處理因素素但給以以必須的的實(shí)驗(yàn)因因素(溶劑賦形劑劑)，以排排除此實(shí)實(shí)驗(yàn)因素素(溶劑賦形劑劑)的影響響，陰性性對(duì)照作作為與染染毒組比比較的基基礎(chǔ)。沒沒有陰性性對(duì)照組組就不能能說明受受試物染染毒與有有害作用用之間的的關(guān)系。例如，在實(shí)驗(yàn)驗(yàn)中，染染毒各劑劑量組實(shí)

43、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物出現(xiàn)某某些異常常、甚至至死亡；如果陰陰性對(duì)照照組沒有有發(fā)現(xiàn)異異常，我我們可以以認(rèn)為此此種異常常和死亡亡是由于于受試物物的毒作作用；如如果陰性性對(duì)照組組也出現(xiàn)現(xiàn)同樣的的異常和和死亡，則應(yīng)考考慮是由由于實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物患患某種傳傳染病或或其他非非實(shí)驗(yàn)因因素所致致，必須須重新進(jìn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)。 (3) 陽性性對(duì)照：用已知知的陽性性物(如致突突變物)檢測(cè)試試驗(yàn)體系系的有效效性。陽陽性對(duì)照照組最好好與受試試物用相相同的溶溶劑、染染毒途徑徑及采樣樣時(shí)間。在遺傳傳毒理學(xué)學(xué)試驗(yàn)、致畸試試驗(yàn)和致致癌試驗(yàn)驗(yàn)中都使使用了陽陽性對(duì)照照組，陽陽性對(duì)照照組是用用已知的的致突變變物、致致畸物或或致癌物物染毒，應(yīng)該得得到肯定

44、定的陽性性結(jié)果(即致突突變性、致畸性性或致癌癌性)。這是是由于這這些試驗(yàn)驗(yàn)，特別別是遺傳傳毒理學(xué)學(xué)試驗(yàn)的的變異較較大，為為了進(jìn)行行質(zhì)量控控制而設(shè)設(shè)置陽性性對(duì)照組組。當(dāng)同同時(shí)進(jìn)行行的陰性性(溶劑賦形劑劑)對(duì)照組組不能得得到陰性性結(jié)果，陽性對(duì)對(duì)照組不不能得到到陽性結(jié)結(jié)果，說說明此次次實(shí)驗(yàn)質(zhì)質(zhì)量有問問題，全全部數(shù)據(jù)據(jù)無效，必須重重新實(shí)驗(yàn)驗(yàn)。在遺遺傳毒理理學(xué)試驗(yàn)驗(yàn)中，陽陽性對(duì)照照與受試試物應(yīng)該該用同樣樣的途徑徑和溶劑劑賦形形劑，但但如有困困難，則則不同的的染毒途途徑、不不同溶劑劑賦形形劑也可可以接受受。 (4) 歷史史性對(duì)照照：由本本實(shí)驗(yàn)室室過去多多次實(shí)驗(yàn)驗(yàn)的對(duì)照照組數(shù)據(jù)據(jù)組成，上述三三種對(duì)照照都可構(gòu)

45、構(gòu)成相應(yīng)應(yīng)的歷史史對(duì)照。歷史對(duì)對(duì)照的最最好用途途是通過過同質(zhì)性性檢驗(yàn)檢檢查試驗(yàn)驗(yàn)體系的的穩(wěn)定性性，即進(jìn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室質(zhì)量量控制和和保證。由于實(shí)實(shí)驗(yàn)毒理理學(xué)的各各種參數(shù)數(shù)至今尚尚沒有公公認(rèn)的參參考值，因此歷歷史性對(duì)對(duì)照均值值及其范范圍在評(píng)評(píng)價(jià)研究究結(jié)果時(shí)時(shí)至為重重要。以上所述述適用于于大多數(shù)數(shù)的毒理理學(xué)體內(nèi)內(nèi)試驗(yàn)。在急性性毒性試試驗(yàn)測(cè)定定LD500或LC500時(shí)，劑劑量組數(shù)數(shù)根據(jù)選選用的設(shè)設(shè)計(jì)和統(tǒng)統(tǒng)計(jì)學(xué)方方法而定定，可以以是4組，也也可以是是57組。根根據(jù)預(yù)實(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果果，希望望所設(shè)計(jì)計(jì)的中間間劑量組組的劑量量與最后后得到的的LD500(LCC50)接近。由于急急性毒性性試驗(yàn)的的觀察指指標(biāo)是死死亡，

46、并并伴有嚴(yán)嚴(yán)重的中中毒癥狀狀，對(duì)于于有經(jīng)驗(yàn)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)者可以以不設(shè)陰陰性對(duì)照照組。當(dāng)當(dāng)然，如如果使用用了一種種不常用用的溶劑劑或者要要測(cè)定某某種其他他的參數(shù)數(shù)如MTTD、急急性LOOAELL和NOAAEL，則需要要設(shè)置陰陰性對(duì)照照組。 2. 各組動(dòng)動(dòng)物數(shù)毒毒理學(xué)安安全性評(píng)評(píng)價(jià)試驗(yàn)驗(yàn)各組動(dòng)動(dòng)物數(shù)取取決于很很多因素素，如實(shí)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡暮驮O(shè)計(jì)計(jì)，要求求的敏感感度、實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物的壽命命、生殖殖能力，經(jīng)濟(jì)的的考慮及及動(dòng)物的的可利用用性。各各組動(dòng)物物數(shù)的設(shè)設(shè)計(jì)應(yīng)考考慮到統(tǒng)統(tǒng)計(jì)學(xué)的的要求。對(duì)各種種常規(guī)毒毒性試驗(yàn)驗(yàn)的動(dòng)物物數(shù)要求求，見以以后有關(guān)關(guān)章節(jié)。 3. 試驗(yàn)期期限某些些試驗(yàn)(如致畸畸試驗(yàn)和和多代生生殖試驗(yàn)驗(yàn)

47、)的試驗(yàn)驗(yàn)期限是是由受試試實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物物種種或品系系而決定定的。而而其他毒毒性試驗(yàn)驗(yàn)的期限限在某種種程度上上由定義義所決定定。如急急性毒性性是一次次或1天內(nèi)多多次染毒毒觀察114天，亞慢性性毒性試試驗(yàn)規(guī)定定為染毒毒持續(xù)至至實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物壽命命的100，對(duì)對(duì)大鼠和和小鼠為為90天，對(duì)狗應(yīng)應(yīng)為1年。慢慢性毒性性試驗(yàn)致癌試試驗(yàn)一般般規(guī)定為為持續(xù)至至實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物壽命命的大部部分。又又可分為為兩類，即規(guī)定定試驗(yàn)期期限的試試驗(yàn)，或或直到最最敏感的的組死亡亡率達(dá)到到某一水水平(通常為為80)的試驗(yàn)驗(yàn)。二、體外外毒理學(xué)學(xué)試驗(yàn)設(shè)設(shè)計(jì)此處簡(jiǎn)要要討論在在遺傳毒毒理學(xué)體體外試驗(yàn)驗(yàn)共同考考慮的幾幾個(gè)問題題。 1測(cè)測(cè)定受試試物溶

48、解解性應(yīng)該該測(cè)定受受試物在在試驗(yàn)介介質(zhì)中的的溶解性性。已注注意到在在試驗(yàn)系系統(tǒng)暴露露期內(nèi)，受試物物的溶解解性可能能改變，因?yàn)榇娲嬖诩?xì)胞胞、S99、血清清等。因因此，在在試驗(yàn)開開始和結(jié)結(jié)束時(shí)評(píng)評(píng)價(jià)溶解解性是有有意義的的。溶解解性限度度就是出出現(xiàn)沉淀淀的最低低濃度。 2試試驗(yàn)最高高劑量的的推薦對(duì)對(duì)可溶性性受試物物濃度高高于100mmool/LL時(shí)可因因高滲透透壓在哺哺乳動(dòng)物物細(xì)胞引引起損傷傷或人工工假象，對(duì)細(xì)菌菌則無此此影響。由于受受試物的的分子量量并不一一定知道道(如聚合合物或混混合物)，因此此，在大大多數(shù)情情況下，可溶性性受試物物的試驗(yàn)驗(yàn)上限應(yīng)應(yīng)該是：(1)對(duì)哺乳乳動(dòng)物細(xì)細(xì)胞為110mmmol

49、/L或5mgg/mll。(2)對(duì)細(xì)菌菌試驗(yàn)為為5mgg/平板板。當(dāng)受受試物供供應(yīng)困難難或非常常昂貴(如生物物藥劑)，最高高劑量低低于100mmool/LL或5mgg/mll(或平扳)是可以以接受的的。對(duì)不溶性性受試物物最高濃濃度的推推薦有爭(zhēng)爭(zhēng)論，日日本學(xué)者者的資料料表明，有的受受試物僅僅在沉淀淀劑量于于細(xì)菌試試驗(yàn)和染染色體畸畸變?cè)囼?yàn)驗(yàn)中出現(xiàn)現(xiàn)遺傳毒毒性。哺哺乳動(dòng)物物細(xì)胞具具有吞噬噬作用，細(xì)菌不不具有吞吞噬作用用。一般般認(rèn)為無無毒性的的可溶于于適當(dāng)?shù)牡娜軇┒蝗苡谟趯?shí)驗(yàn)培培養(yǎng)液(介質(zhì))中的受受試物，最高濃濃度應(yīng)是是溶解性性限制(即產(chǎn)生生沉淀的的最低濃濃度)，但不不應(yīng)干擾擾終點(diǎn)的的計(jì)數(shù)。對(duì)于有毒

50、毒性的受受試物，最高濃濃度在細(xì)細(xì)菌試驗(yàn)驗(yàn)中應(yīng)該該是明顯顯顯示毒毒性的劑劑量，對(duì)對(duì)哺乳動(dòng)動(dòng)物細(xì)胞胞試驗(yàn)最最高劑量量，基因因突變?cè)囋囼?yàn)應(yīng)達(dá)達(dá)到100200存活活率，而而染色體體畸變和和UBSS試驗(yàn)應(yīng)應(yīng)達(dá)到550存存活率。對(duì)于沒有有適當(dāng)溶溶劑，完完全不溶溶的受試試物，則則可以按按5mgg/平板板或100mmool/LL(5mmg/mml)進(jìn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)以檢測(cè)測(cè)雜質(zhì)的的致突變變性?；蚧蛘撸刹捎蒙砝睇}水提提取物進(jìn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)。 3. 代謝活活化代謝謝活化常常規(guī)使用用Aroocloor 112544（多氯氯聯(lián)苯112544）預(yù)處處理的雄雄性成年年大鼠肝肝勻漿9900000g離離心上清清液(SS9)，及相應(yīng)

51、應(yīng)的輔因因子(NNADPPH再生生系統(tǒng))。由于于各國禁禁用限用用多氯聯(lián)聯(lián)苯，可可用苯巴巴比妥和和-萘黃黃酮聯(lián)合合誘導(dǎo)制制備S99(Ell1ioott，19992)。對(duì)體外外哺乳動(dòng)動(dòng)物細(xì)胞胞試驗(yàn)，還可利利用大鼠鼠肝原代代培養(yǎng)細(xì)細(xì)胞等作作為代謝謝活化系系統(tǒng)。 4. 陽性對(duì)對(duì)照陽性性對(duì)照的的劑量應(yīng)應(yīng)選擇其其劑量-反應(yīng)的的直線部部分，并并且構(gòu)成成歷史性性資料(歷史性性對(duì)照)，并以以其作為為實(shí)驗(yàn)質(zhì)質(zhì)量控制制的措施施之一5. 重重復(fù)由質(zhì)質(zhì)控良好好的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)得到明明確的陰陰性結(jié)果果和陽性性結(jié)果，不強(qiáng)調(diào)調(diào)要求重重復(fù)?？煽梢山Y(jié)果果則應(yīng)重重復(fù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)，最好好改變劑劑量范圍圍劑量量間隔、改變SS9濃度度或改變變實(shí)驗(yàn)方方

52、法進(jìn)行行重復(fù)。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物的柒毒毒和處置置本節(jié)簡(jiǎn)要要介紹在在動(dòng)物實(shí)實(shí)驗(yàn)前的的實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物準(zhǔn)備備、受試試物的準(zhǔn)準(zhǔn)備、染染毒途徑徑和方法法、動(dòng)物物處死和和生物標(biāo)標(biāo)本采集集的基本本內(nèi)容，詳細(xì)的的方法和和步驟請(qǐng)請(qǐng)查閱有有關(guān)的毒毒理學(xué)實(shí)實(shí)驗(yàn)方法法專著。一、動(dòng)物物實(shí)驗(yàn)前前的準(zhǔn)備備實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物在購進(jìn)進(jìn)之后，應(yīng)雌雄雄分開飼飼養(yǎng)。一一般應(yīng)進(jìn)進(jìn)行57天的檢檢疫，在在此期間間應(yīng)多次次觀察動(dòng)動(dòng)物，及及時(shí)剔除除不健康康的動(dòng)物物。觀察察期結(jié)束束，將實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物按實(shí)驗(yàn)驗(yàn)設(shè)計(jì)的的要求進(jìn)進(jìn)行標(biāo)記記和分組組。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物的標(biāo)記記方法對(duì)對(duì)嚙齒動(dòng)動(dòng)物常用用染色法法，可用用苦味酸酸(黃色)、品紅紅(紅色)的酒精精飽和溶溶液在動(dòng)動(dòng)物被毛毛上染

53、色色，不同同的顏色色和染色色部位表表示不同同的編號(hào)號(hào)，可標(biāo)標(biāo)出199號(hào)。由于被被毛上顏顏色會(huì)逐逐步消失失，故需需重復(fù)染染色。對(duì)對(duì)嚙齒動(dòng)動(dòng)物還可可用剪耳耳法標(biāo)記記。對(duì)狗狗等大動(dòng)動(dòng)物一般般用掛牌牌法。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物分組的的原則要要求所有有的動(dòng)物物分配到到各劑量量組和對(duì)對(duì)照組的的機(jī)會(huì)均均等，避避免主觀觀選擇傾傾向，減減少偏性性，以保保證結(jié)果果的準(zhǔn)確確可靠。正確的的分組方方法是隨隨機(jī)分組組。實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物按按性別、體重順順序編號(hào)號(hào)，然后后利用統(tǒng)統(tǒng)計(jì)學(xué)的的隨機(jī)數(shù)數(shù)字表，按完全全隨機(jī)分分組法或或配伍組組隨機(jī)分分組法，將實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物分分配到各各劑量組組和對(duì)照照組。然然后應(yīng)計(jì)計(jì)算各組組實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物體重重的均值值和標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)差

54、，必必要時(shí)可可將實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物適適當(dāng)調(diào)組組，以使使各組實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物物體重的的均值的的差別不不超過允允許范圍圍。二、受試試物和樣樣品的準(zhǔn)準(zhǔn)備應(yīng)了解受受試物的的純度及及雜質(zhì)成成分，了了解受試試物的化化學(xué)結(jié)構(gòu)構(gòu)和理化化性質(zhì)，特別是是其揮發(fā)發(fā)性和溶溶解性。查閱文文獻(xiàn)，檢檢索與受受試物化化學(xué)結(jié)構(gòu)構(gòu)和理化化性質(zhì)相相似的化化合物的的毒性資資料，以以作參考考。對(duì)各各個(gè)毒理理學(xué)試驗(yàn)驗(yàn)應(yīng)該用用同一種種、同一一批號(hào)受受試物。受試物物成分和和配方必必須固定定。如是是異構(gòu)體體混合物物，異構(gòu)構(gòu)體比例例必須固固定?；罨钚猿煞址值陌俜址趾亢秃涂蓹z測(cè)測(cè)的雜質(zhì)質(zhì)的濃度度也應(yīng)固固定。受受試物在在貯存期期內(nèi)穩(wěn)定定性和在在飼料中中的穩(wěn)定定

55、性必須須進(jìn)行研研究并報(bào)報(bào)告。受受試物應(yīng)應(yīng)一次備備齊全部部實(shí)驗(yàn)的的用量。所需受試試物總量量(AABCD)1.2式中：AA為每組組動(dòng)物數(shù)數(shù)；B為各處處理組的的劑量和和(如0.1+00.3+11.0mgg/kgg1.4mgg/kgg)；C為染毒毒次數(shù)(通常為為天)；D為動(dòng)物物的平均均體重；1.2為安全全因子，防止損損耗。染毒前根根據(jù)染毒毒途徑的的不同，應(yīng)將受受試物制制備成一一定的劑劑型。常常用的是是制備成成水溶液液、油溶溶液或混混懸液。對(duì)溶劑劑和助溶溶劑的要要求是，所用的的溶劑或或助溶劑劑應(yīng)該是是無毒的的，與受受試物不不起反應(yīng)應(yīng)，受試試物在溶溶液中應(yīng)應(yīng)穩(wěn)定。對(duì)水溶溶性受試試物，體體內(nèi)試驗(yàn)驗(yàn)適當(dāng)?shù)牡娜?/p>

56、劑為為水(經(jīng)口染染毒)和等滲滲鹽水(胃腸道道外染毒毒)。水不不溶性受受試物應(yīng)應(yīng)溶于或或懸浮于于適當(dāng)?shù)牡挠袡C(jī)溶溶劑中。天然植植物油(如玉米米油，橄橄欖油)可以用用作為溶溶劑，有有兩個(gè)缺缺點(diǎn)，即即不可能能保證得得到成分分完全一一致的植植物油，植物油油中的抗抗氧化劑劑成分等等可影響響受試物物的毒性性遺傳傳毒性。二甲基基亞礬(DMSSO)不不適用于于體內(nèi)實(shí)實(shí)驗(yàn)，因因其毒性性較高，并且溶溶于DMMSO的的受試物物在染毒毒后出現(xiàn)現(xiàn)沉淀。新藥安全全性評(píng)價(jià)價(jià)推薦混混懸液賦賦形劑為為0.5羧甲甲基纖維維素鈉或或10阿阿拉伯樹樹膠；受受試物溶溶液應(yīng)新新鮮配制制，除非非已證明明貯存穩(wěn)穩(wěn)定。其其他的劑劑型見下下文染毒

57、毒途徑的的介紹。外源化學(xué)學(xué)物用溶溶劑稀釋釋，一般般講濃溶溶液比稀稀溶液毒毒性大，但是也也有的外外源化學(xué)學(xué)物稀釋釋之后毒毒性反而而增加，即存在在所謂“稀釋毒毒性”，其原原因尚不不清楚。在準(zhǔn)備染染毒制劑劑時(shí)的要要點(diǎn)：在準(zhǔn)備備制劑時(shí)時(shí)加熱受受試物不不應(yīng)接近近改變其其化學(xué)性性質(zhì)或物物理性質(zhì)質(zhì)的溫度度。如受試試物為固固體，并并且評(píng)價(jià)價(jià)其對(duì)皮皮膚的毒毒性，應(yīng)應(yīng)保持其其形狀和和顆粒大大小。多成分分的受試試物(混合物物)應(yīng)按配配方配制制，以使使染毒制制劑準(zhǔn)確確地反映映原混合合物(即其成成分不應(yīng)應(yīng)被選擇擇性地懸懸浮或溶溶解)。制劑應(yīng)應(yīng)保持化化學(xué)穩(wěn)定定性和受受試物的的一致性性。制劑應(yīng)應(yīng)減少總總試驗(yàn)容容積，利利用溶

58、劑劑或賦形形劑的量量不應(yīng)過過多。制劑應(yīng)應(yīng)易于準(zhǔn)準(zhǔn)確染毒毒。如可能能，制劑劑pH應(yīng)為為59。不應(yīng)用用酸或堿堿使受試試物解離離(基于保保護(hù)動(dòng)物物的原因因，并避避免改變變腸道或或腎小管管內(nèi)的PPH)。如果應(yīng)應(yīng)用非胃胃腸道途途徑，終終溶液應(yīng)應(yīng)盡可能能接近等等滲。 對(duì)于于各種染染毒途徑徑的最大大容積，以受試試的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物物物種或制制劑來確確定。一一般規(guī)定定，染毒毒最大容容積為：經(jīng)口200ml/kg(對(duì)空腹腹動(dòng)物);經(jīng)皮2mml/kkg(根根據(jù)體表表面積計(jì)計(jì)算，限限于染毒毒的準(zhǔn)確確性)；靜脈1mml/kkg(55分鐘以以上)；肌肉注注射0.5mll/kgg(一個(gè)個(gè)部位)；每眼0.01mml;直腸0.5ml

59、l/kgg；陰道：大鼠00.2m11，兔1mml；吸人2mmg/LL；鼻：猴猴或狗每每鼻孔00.1mml。染毒的的通常容容積(最大容容積)：大鼠鼠灌胃為為1.0(33.0)ml1000g體重重(BWW)，靜靜注為00.5(3.00)mll1000g BBW ;小鼠灌灌胃為00.2(1.00)mll/200g BBW，靜注注為0.2(00.5)ml/20gg Bww；狗灌灌胃為550(1100)ml/10 kg Bw，靜注為為30(50)ml10kgg BWW。各種種規(guī)范可可能有不不同的規(guī)規(guī)定，應(yīng)應(yīng)按規(guī)定定進(jìn)行。三、染毒毒途徑毒理學(xué)試試驗(yàn)中染染毒途徑徑的選擇擇，應(yīng)盡盡可能模模擬人在在接觸該該受試

60、物物的方式式。最常常用的染染毒途徑徑為經(jīng)口口、經(jīng)呼呼吸道、經(jīng)皮及及注射途途徑。不不同途徑徑的吸收收速率，一般是是：靜脈脈注射吸入肌肉注注射腹腹腔注射射皮下下注射經(jīng)口皮內(nèi)注注射其其他途徑徑(如經(jīng)皮皮等)。 1. 經(jīng)口(胃腸道道)染毒常用用有灌胃胃、喂飼飼和吞咽咽膠囊等等方式。 (1) 灌胃胃：將受受試物配配制成溶溶液或混混懸液，以注射射器經(jīng)導(dǎo)導(dǎo)管注入入胃內(nèi)。一般灌灌胃深度度從口至至劍突下下，最好好是利用用等容量量灌胃法法，即受受試物配配制成不不同濃度度，實(shí)驗(yàn)驗(yàn)動(dòng)物單單位體重重的灌胃胃容量相相同。大大鼠隔夜夜禁食，小鼠可可禁食44小時(shí)(因小鼠鼠消化吸吸收和代代謝速度度較快)，均不不停飲水水。灌胃胃