骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)

1、骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)骨髓液抽取骨髓涂片：0.10.2ml細(xì)菌培養(yǎng)：12ml先后抽取骨髓有核細(xì)胞增生程度分級(jí)增生程度成熟紅細(xì)胞/有核細(xì)胞有核細(xì)胞均數(shù)/高倍鏡視野常見病例增生極度活躍1:1100白血病增生明顯活躍10:150100 白血病增生性貧血增生活躍20:12050正常骨髓象增生性貧血增生減低50:1510慢性再障增生極度減低200:15急性再障四、血細(xì)胞的細(xì)胞化學(xué)染色有助于了解各種血細(xì)胞的化學(xué)組成及病理生理改變；可用作血細(xì)胞類型的鑒別；以及對(duì)某些血液病的診斷和鑒別診斷，療效觀察、發(fā)病機(jī)制探討等均有一定價(jià)值。（一）過氧化物酶染色(POX) 1、原理血細(xì)胞中的POX能分解試劑中的底物H2O2，釋出氧

2、，使無色的聯(lián)苯胺氧化為藍(lán)色聯(lián)苯胺，后者與亞硝基鐵氰化鈉結(jié)合形成藍(lán)黑色的顆粒，沉淀于細(xì)胞漿中。2、結(jié)果無藍(lán)黑色的顆粒陰性顆粒細(xì)小、稀疏弱陽性顆粒粗大、密集強(qiáng)陽性3、臨床意義用于急性白血病的鑒別診斷。對(duì)急粒與急淋的鑒別最有價(jià)值。POX存在于粒系細(xì)胞中，在晚期原粒細(xì)胞至成熟中性粒細(xì)胞以及各階段嗜酸性粒細(xì)胞均呈陽性反應(yīng)，細(xì)胞越成熟，反應(yīng)越強(qiáng)。單核系細(xì)胞自幼單核細(xì)胞起，呈弱陽性反應(yīng)。淋巴細(xì)胞系任何階段均呈陰性反應(yīng)。（二）蘇丹黑B染色（SB）原理：SB為脂溶性染料，可溶于胞漿中的含脂物質(zhì)，使其呈棕黑色或深黑色顆粒。結(jié)果、意義： 同POX（三）氯化醋酸AS-D萘酚酯酶染色（AS-D NCE）（特異性酯酶染色

3、，SE)原理又稱粒細(xì)胞酯酶，它能將基質(zhì)液中的氯化醋酸AS-D萘酚水解萘酚AS-D+重氮鹽偶聯(lián)紅色沉淀，定位于細(xì)胞漿中。主要存在于粒系細(xì)胞中，原粒細(xì)胞呈陰性或弱陽性反應(yīng)，早幼粒呈強(qiáng)陽性反應(yīng)，此后隨細(xì)胞發(fā)育成熟而酶活性逐漸減弱。嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞一般呈陰性反應(yīng)（四）-醋酸萘酚酯染色（-NAE)（非特異性酯酶染色，-NSE)萘酚+重氮鹽偶聯(lián)有色沉淀（因重氮鹽不同呈灰黑色或棕黑色）急單以及急性粒單核細(xì)胞白血病時(shí)，染色呈強(qiáng)陽性急粒時(shí)，呈陰性或弱陽性反應(yīng)。主要用于鑒別急單與急粒，單核細(xì)胞中的酶活性能被NaF抑制。（五)中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色（NAP）堿性磷酸酶主要存在于成熟的中性粒細(xì)胞（分

4、葉及桿狀核）的胞質(zhì)中，其他血細(xì)胞均呈陰性反應(yīng)。偶氮偶聯(lián)法鈣鈷法基質(zhì)液中磷酸萘酚鈉水解萘酚+重氮鹽偶聯(lián)灰黑色沉淀基質(zhì)液中-甘油磷酸鈉水解磷酸鈉+硝酸鈣、硝酸鈷、硫化胺棕黑色沉淀硫化鈷 臨床意義感染性疾?。翰《靖腥窘档?，細(xì)菌感染增強(qiáng)慢性粒細(xì)胞白血病-NAP活性明顯減低； 類白血病反應(yīng)-NAP活性極度增高。對(duì)急粒（活性降低）與急淋（活性增加） 再障-NAP活性增高； PNH-活性減低。 惡性組織細(xì)胞病活性降低； 反應(yīng)性組織細(xì)胞增生病活性增高。（六）糖原染色（過碘酸-Schiff反應(yīng)，PAS反應(yīng)）原理：過碘酸氧化血細(xì)胞內(nèi)糖原醛基+無色品紅（Schiff液中）紫紅色化合物（定位于胞漿）結(jié)果： 紅系、原粒

5、陰性 淋巴陰性或弱陽性 早幼粒分葉核陽性（漸強(qiáng)） 單核弱陽性 巨核細(xì)胞、血小板陽性急性白血病細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果比較急淋急粒急單POX-+-+SB-+-+SE（AS-D NCE）-+-+-NAE-+-NAE+NaF不被NaF抑制能被抑制NAPN或PAS+，粗顆粒或塊狀或+，細(xì)顆粒狀或均勻淡紅色+或，彌漫性淡紅色或細(xì)顆粒狀（七）骨髓鐵染色 （普魯士藍(lán)反應(yīng)）原理：貯存鐵+酸化低鐵氰化鉀溶液亞鐵氰化鐵沉淀（普魯士藍(lán)）（藍(lán)色） 結(jié)果細(xì)胞外鐵：+ +，大多為+細(xì)胞內(nèi)鐵：不同實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)可能不同MDS-RAS鐵染色，圖中所示為環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞細(xì)胞外鐵：?jiǎn)魏司奘杉?xì)胞系統(tǒng)內(nèi)的鐵細(xì)胞內(nèi)鐵：幼紅細(xì)胞內(nèi)的鐵鐵粒幼細(xì)胞：含

6、有鐵顆粒的幼紅細(xì)胞環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞：含粗大深染的鐵粒10個(gè)以上，并環(huán)繞胞核排列超過核周徑2/3缺鐵性貧血 細(xì)胞外鐵消失，細(xì)胞內(nèi)鐵15%或?yàn)?。 經(jīng)鐵劑治療后，細(xì)胞內(nèi)外鐵先后 鐵染色是診斷及指導(dǎo)治療的可靠方法鐵粒幼紅細(xì)胞貧血 細(xì)胞內(nèi)、外鐵均，并可見較多的環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞，大于有核紅細(xì)胞的15%。細(xì)胞外鐵觀察陽性為藍(lán)綠色沉淀第三章 血栓和止血檢測(cè) 血液為什么能在血管內(nèi)保持流動(dòng)性？血管壁 血小板凝血因子抗凝因子纖溶因子抗纖溶因子 PC 15109/L 一天前， PC 130109/L CT 20min APTT 95s 正常對(duì)照：35sPT 21s 正常對(duì)照：13sFg 1.0g/LTT 26s 正常

7、對(duì)照：16sDD 陽性3P (+)檢 驗(yàn) 報(bào) 告一. 血管壁和血小板檢測(cè)二. 凝血因子檢測(cè)三. 纖溶活性檢測(cè)血管壁檢測(cè)-篩檢試驗(yàn)1 出血時(shí)間(bleeding time, BT) 參考值 出血時(shí)間測(cè)定器法: 6.9+2.1min， 超過9min為異常 BT延長(zhǎng) 1.血小板數(shù)量和功能異常 3.血管功能異常：遺傳性出血性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥 4.藥物影響：阿司匹林 肝素 2.嚴(yán)重缺乏血漿某些凝血因子 （vWF血管性血友病、DIC） 2 毛細(xì)血管抵抗力試驗(yàn)（capillary resistance test，CRT） 參考值 男性5個(gè);女性及兒童10個(gè) 影響因素亦稱毛細(xì)血管脆性試驗(yàn)或束臂試驗(yàn) 1.血管壁的

8、結(jié)構(gòu)和功能2.血小板質(zhì)和量3. 血漿vWF 血小板檢測(cè)-篩檢試驗(yàn)1 血小板計(jì)數(shù)（platelet count , PC或plt） 正常值：（100300）109/L危險(xiǎn)PC50109/L出血傾向2 血塊收縮試驗(yàn)(clot retraction test, CRT) 原理血清析出血小板功能纖維蛋白原數(shù)量血漿異常蛋白參考值 血塊收縮率（%）=血清(ml)/全血(ml) （100%-Hct%）100% 參考值： 65.811% 血塊收縮時(shí)間： 2h開始收縮 1824h 完全收縮2 血塊收縮試驗(yàn)(clot retraction test, CRT) 凝血因子檢測(cè)凝血酶原激活物的形成；凝血酶形成；纖維蛋

9、白形成高分子量激肽原（HMWK）激肽釋放酶原（PK） CT APTT（KPTT）檢查內(nèi)源性凝血途徑的實(shí)驗(yàn)CT、APTT延長(zhǎng)常見于參與內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的凝血因子缺乏：血友病、DIC、嚴(yán)重肝病等APTT 是臨床監(jiān)測(cè)肝素治療的常用試驗(yàn)篩檢試驗(yàn)1 凝血時(shí)間（clotting time，CT）參考值：試管法412min 2 活化的部分凝血活酶時(shí)間（activated partial thromboplastin time, APTT） 2 活化的部分凝血活酶時(shí)間（activated partial thromboplastin time, APTT） 正常值：不同試劑檢測(cè)結(jié)果有較大差異3243s，較正常對(duì)

10、照延長(zhǎng)10s以上為異常。為檢測(cè)內(nèi)源凝血系統(tǒng)較靈敏和最常用的篩選試驗(yàn)檢查外源性凝血途徑的實(shí)驗(yàn) PTPT延長(zhǎng)常見于參與外源性凝血系統(tǒng)的凝血因子缺乏：遺傳性因子缺乏、嚴(yán)重肝病、DIC等PT是監(jiān)測(cè)雙香豆素類口服抗凝藥的首選指標(biāo) 3 血漿凝血酶原時(shí)間 （prothrombin time, PT ） 在被檢血漿中加入Ca 2+和組織因子，觀察血漿凝固時(shí)間 正常值不同試劑檢測(cè)結(jié)果有較大差異1113S ，較正常對(duì)照延長(zhǎng)3s以上為異常為檢測(cè)外源凝血系統(tǒng)較靈敏和最常用的篩選實(shí)驗(yàn)診斷試驗(yàn) 1 血漿纖維蛋白原測(cè)定 （fibrinogen, Fg ） 正常值 24g/L增高妊娠、心梗、急性腎炎、惡性腫瘤等。降低DIC、

11、原發(fā)性纖溶癥、重癥肝炎等。1 血漿凝血酶時(shí)間 （thrombin time, TT ） TT延長(zhǎng)可見于 在被檢血漿中加入標(biāo)準(zhǔn)化 凝血酶溶液，測(cè)定開始出 現(xiàn)纖維蛋白絲所需的間。DIC、低或（無）纖維蛋白原等正常值 1618S，較正常對(duì)照延長(zhǎng)3s以上為異?？鼓到y(tǒng)檢測(cè)-篩檢試驗(yàn)1 血漿D-二聚體（D-dimer, DD ） 正常值 陰性(乳膠凝集法) 200g/L（ELISA法） DD是繼發(fā)性纖溶的標(biāo)志，在繼發(fā)性纖溶（如 DIC） 為陽性; 在原發(fā)性纖溶為陰性。？什麼是原發(fā)性纖溶和繼發(fā)性纖溶纖溶活性檢測(cè)-篩檢試驗(yàn) 2 血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物測(cè)定 fibrin(ogen) degradation

12、 products, FDPs 參考值 5mg/L ？ 什麼是FDPFDP陽性或增高見于原發(fā)性纖溶、DIC、血栓形成及溶栓等。 血漿硫酸魚精蛋白副凝試驗(yàn)（plasma protamine paracoagulation test, 3P） 結(jié)果判斷 陰性也是鑒別繼發(fā)性纖溶與原發(fā)性纖溶的試驗(yàn)纖溶活性檢測(cè)-診斷試驗(yàn)原發(fā)性血小板增多癥 血小板數(shù)量增加 vWD 血小板功能異常 凝血因子缺乏 過敏性紫癜 單純血管通透和脆性 增加性所致的血管性紫癜 特發(fā)性血小板 血小板數(shù)量減少 減少性紫癜 ?BT Plt BT PltBT Plt BT Plt DIC肝病血友?。ˋ、B、C) 遺傳性因子缺乏 APTT PTAPTT PT APTT PT PC 15109/L 一天前， PC 130109/L CT 20min APTT 95s 正常對(duì)照：35sPT 21s 正常對(duì)照：13sFg 1.0g/LTT 26s 正常對(duì)照：16sDD 陽性3P (+)檢 驗(yàn) 報(bào) 告血栓與止血檢查血管壁與血小板的檢查 毛細(xì)血管抵抗力試驗(yàn) 出血時(shí)間 血