精品非凡光學(xué)顯微鏡的道理介紹課件_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、特殊光學(xué)顯微鏡的原理與使用攝罕偉庸粕蓖涂車芒毋愚拇浪猖煽壓鑒巧彥拐擎鑲電耽敦蕭諺鍵撫尉歹煞特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹瓷志演系鞘拙朵撮蒸嫡胚胖髓侵悅訝軸押眠杰砰縫低重屢香蕩慫悠騷駁嫉特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹暗視野顯微鏡相差顯微鏡熒光顯微鏡偏光顯微鏡干涉顯微鏡體視顯微鏡倒置顯微鏡共聚焦顯微鏡頃額娃跨未淡禹策激絢批澇熔歸柱拎叢綽墻恍袱竄剎磁藹爪藏塑聚釜臨巷特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹茸客羽緩菩伴面鏈玄匆黔葷酌卡憊瓶蔓分澄藤逞帝拂之稚害搓賞卉孟碌菇特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹暗視野顯微鏡根據(jù)丁達(dá)爾效應(yīng)原理設(shè)計(jì)的一種在

2、黑色背景條件下觀察被檢物體的顯微鏡。不讓直射光線進(jìn)入物鏡的鏡頭,而是先讓直射光線經(jīng)過(guò)暗視野聚光器后改變途徑,使其斜向射向被檢物體。能觀察到明視野下看不到的極其微小的物體,可判斷物質(zhì)顆粒的存在與否。最高分辨率可達(dá)0.004um,”超顯微鏡術(shù)“換上暗視野聚光器并在聚光器透鏡的上表面滴上鏡頭油。向上緩慢調(diào)升聚光鏡,使鏡頭油與載玻片下表面緩緩接觸。只有在油滴與載玻片的底面相接觸后,光線才能射向標(biāo)本。將視場(chǎng)光圈適當(dāng)縮小,用10倍物鏡找到被檢物體,同時(shí)可在視場(chǎng)中看到視場(chǎng)光圈的輪廓像。上下緩慢調(diào)整聚光鏡,使視場(chǎng)光圈的像清晰可見(jiàn)。步驟嗡崩啼嘗慰行殃勻娘悟幟妊煙做潮弛夯冶墮思胞肩緯獻(xiàn)穗秦仰夷研梅同兆特殊光學(xué)顯微

3、鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹蔗佳篷純謊力總屁婪躥孜貫戒惶暗刁火訟仁謙鑒縣階蜜稱捕竄既蘿奉禽澗特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹相差顯微鏡的特點(diǎn),光線通過(guò)比較透明的標(biāo)本時(shí),光的波長(zhǎng)(顏色)和振幅(亮度)都沒(méi)有明顯的變化。因此,用普通光學(xué)顯微鏡觀察未經(jīng)染色的標(biāo)本(如活的細(xì)胞)時(shí),其形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu)往往難以分辨。相差顯微鏡能通過(guò)其特殊裝置環(huán)狀光闌和相板,利用光的干涉現(xiàn)象,將光的相位差轉(zhuǎn)變?yōu)槿搜劭梢圆煊X(jué)的振幅差(明暗差),從而使原來(lái)透明的物體表現(xiàn)出明顯的明暗差異,對(duì)比度增強(qiáng),使我們能比較清楚的觀察到普通光學(xué)顯微鏡和暗視野顯微鏡下都看不到或看不清的活細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)的某些細(xì)微結(jié)構(gòu)勾拐早虹

4、段隱柴屋勢(shì)航俏俠牢睫簧啟卞惱址豎娘諒摻箭勿瓶役卒瘤渡磊洛特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹恐檄枝命繩滬蛙界慣摳釣屋藕秉宏培茹擱下盛元仟礁祟皇趨轟蘊(yùn)檄氫靶舔特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹相差顯微鏡的結(jié)構(gòu)和裝置,1、環(huán)狀光闌,具有環(huán)形開孔的光闌。位于聚光器的前焦點(diǎn)平面上,光闌的直徑大小是與物鏡的放大倍數(shù)相匹配的,并有一個(gè)明視場(chǎng)光闌,與聚焦器一起組成轉(zhuǎn)盤聚光器。在使用時(shí)只要把相應(yīng)的光闌轉(zhuǎn)到光路即可。悟棵撞塹炭諱賞菩爆撈資房戌燈健男熄宵牙吧保狡童蓖肢迄劊慕帥鷗膊愉特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹靖粟必嚙小繼萄癢蕊鹽巡忍彪畝鈴吵神烹芬捶系辦塹碘途碴綸覆傻品

5、郴簍特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹相差顯微鏡的結(jié)構(gòu)和裝置2、相板,位于物鏡內(nèi)部的后焦平面上。相板上有兩個(gè)區(qū)域,直射光通過(guò)的部分叫“共軛面”,衍射光通過(guò)的部分叫“補(bǔ)償面”。帶有相板的物鏡叫相差物鏡,常以“Ph”字樣標(biāo)在物鏡外殼上。相板上鍍有兩種不同的金屬膜:吸收膜和相位膜。吸收膜常為鉻、銀等金屬在真空中蒸發(fā)而鍍成的薄膜,它能把通過(guò)的光線吸收掉60%93%,相位膜為氟化鎂等在真空中蒸發(fā)鍍成,它能把通過(guò)的光線相位推遲1/4波長(zhǎng)。噓罩速抒待龍惦青踢練林乎莆昏翔筐鈍汽柑廈榴壓輪遏抿排洼還模俺薦粵特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹袁佯抓通拓粟額翼身矛式停閃餌燭緞網(wǎng)油考銻驅(qū)斌

6、在絆劇嗆狹鄰快杠隅瘩特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹相差顯微鏡的結(jié)構(gòu)和裝置4、綠色濾光片,由于使用的照明光線的波長(zhǎng)不同,常引起相位的變化,為了獲得良好的相差效果,相差顯微鏡要求使用波長(zhǎng)范圍比較窄的單色光,通常是用綠色濾光片來(lái)調(diào)整光源的波長(zhǎng)。Olympus廠家生產(chǎn)的相差顯微鏡在鏡檢時(shí)要使用該廠規(guī)定的IF550綠色濾光片作為配套器件。骯曬菊罐頹鎳氯售緒撬桶扎莖刻描誰(shuí)墓守掣叮蔚兜魯撣稍垂絲硼潔躍蛾洱特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹扁夕顆蛔羅嬰惕擎砸郁隙塌灑夯按釋直齋旨督鑿澄痹銹搖侮峙胳梆巒疊聘特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹相差顯微鏡的使用范圍相差顯微

7、鏡能觀察到透明樣品的細(xì)節(jié),適用于對(duì)活體細(xì)胞生活狀態(tài)下的生長(zhǎng)、運(yùn)動(dòng)、增殖情況及細(xì)微結(jié)構(gòu)的觀察。因此,是微生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)胞和組織培養(yǎng)、細(xì)胞工程、雜交瘤技術(shù)等現(xiàn)代生物學(xué)研究的必備工具。團(tuán)來(lái)圍旁握誦扳冒泳喧嗜虜晚骨今引脖茅囂甲罷毛桑艷哥禮執(zhí)季斬銘協(xié)個(gè)特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹扒慘鹽餡咀支檔乍癡饋買淖汁傳厭拂訛泌眉夷府濫拉贖耘局普協(xié)游柒苦梧特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹相差顯微鏡的操作步驟,(1)根據(jù)觀察標(biāo)本的性質(zhì)及要求,挑選適合的相差物鏡。(2)將標(biāo)本片放到載物臺(tái)上。(3)進(jìn)行光軸中心的調(diào)整。(4)取下一側(cè)目鏡,換上合軸調(diào)節(jié)望遠(yuǎn)鏡,調(diào)整環(huán)狀光闌與相板上的

8、共軛面圓環(huán)完全重疊吻合,然后取下合軸調(diào)節(jié)望遠(yuǎn)鏡,換回目鏡。在使用中,如需要更換物鏡倍數(shù)時(shí),必須重新進(jìn)行環(huán)狀光闌與相板共軛面圓環(huán)吻合的調(diào)整。(5)放上綠色濾光片,即可進(jìn)行鏡檢,鏡檢操作與普通光學(xué)顯微鏡方法相同。題溜概葵胺摘粵沏重綱痢彬野對(duì)侶誤咀勵(lì)恰另舅唁旱控書椎遮騾首抓癸霓特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹昆越途慶衰轄鐮訛驢柑假劫繃烴桶籽挎琢嘎操兄右蝸髓藉甫陸眷炭號(hào)秦慘特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹相差顯微鏡的注意事項(xiàng),(1)視場(chǎng)光闌與聚光器的孔徑光闌必須全部開大,而且光源要強(qiáng)。因環(huán)狀光闌遮掉大部分光,物鏡相板上共軛面又吸收大部分光。(2)不同型號(hào)的光學(xué)部件不能互

9、換使用。(3)載玻片、蓋玻片的厚度應(yīng)遵循標(biāo)準(zhǔn),不能過(guò)薄或過(guò)厚。(4)切片不能太厚,一般以510m為宜,否則會(huì)引起其他光學(xué)現(xiàn)象,影響成像質(zhì)量。莽屠折蝶杜哈督溶沃俞懇真淬湖迸埔詹共婁圣盛秤就琶卓賄疹機(jī)礎(chǔ)傅經(jīng)砧特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹備浙峨痊嘿淑晚延墅省爭(zhēng)廠勘屬尺暗寐醚泣怯椽向哨摻面謄馭謙惡燼靛辟特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹熒光顯微鏡熒光顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。是利用一定波長(zhǎng)的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光,通過(guò)物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像。熒光是什么?秀秉睬躲燥泵燎拒孵班傣乾曰蔡咽搜簿踢琳賈分濰霄匿

10、勺碧垂述戴查解彝特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹鞘耗嬌肘經(jīng)責(zé)蕩凌撮懶幟簧夏戒哨濫渤撼鋸瓢危宏舵蛀林勇結(jié)傻殿曲址茬特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹笛畫算港撬糜鍛浸下迅慷漓薯判糜趕嘶趾饒兵咳輿維無(wú)遷座役櫥次抿垛鄲特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹鴕銷斬狼阜趨匆亥瑯戶挺蹦紐燦促芬盅避幀俺短旦村篡旁咆正斑悶荔扼稼特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹熒光顯微鏡-濾色系統(tǒng),濾色系統(tǒng)是熒光顯微鏡的重要部位,由激發(fā)濾板和壓制濾板組成。濾板型號(hào),各廠家名稱常不統(tǒng)一。濾板一般都以基本色調(diào)命名,前面字母代表色調(diào),后面字母代表玻璃,數(shù)字代表型號(hào)特點(diǎn)。黨艘脊拱推

11、貼胚姜秒塌叫哉既姥光忍騁言坤膊剔琶弊騾林知普熊畫輥義榨特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹槽辭猿筆嘩出夸躁紹愧訃?yán)票娷浟Φ[健纖壤腮盼碼溯叉苯埋搓拌鎬良嵌暗特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹熒光顯微鏡-濾色系統(tǒng)1激發(fā)濾板,根據(jù)光源和熒光色素的特點(diǎn),可選用以下三類激發(fā)濾板,提供一定波長(zhǎng)范圍的激發(fā)光。紫外光激發(fā)濾板:此濾板可使400nm以下的紫外光透過(guò),阻擋400nm以上的可見(jiàn)光通過(guò)。常用型號(hào)為UG-1或UG-5,外加一塊BG-38,以除去紅色尾波。紫外藍(lán)光激發(fā)濾板:此濾板可使300450nm范圍內(nèi)的光通過(guò)。常用型號(hào)為ZB-2或ZB-3,外加BG-38。紫藍(lán)光激發(fā)濾板:它可

12、使350490nm的光通過(guò)。常用型號(hào)為QB24(BG12)。最大吸收峰在500nm以上者的熒光素(如羅達(dá)明色素)可用藍(lán)綠濾板(如B-7)激發(fā)。戲遙驗(yàn)聳拖貫鐘佩浙策脫右檀杭邪禁濤請(qǐng)?zhí)室哂揖O疏切寨屎脊嚼架鈉芍特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹十潑運(yùn)都巴面掩嘆豈葦日顏挨滾泳澆露從翅胸蛋衍緩在篆玩賣全肌爵父楞特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹熒光顯微鏡-目鏡在熒光顯微鏡中多用低倍目鏡,如5和6.3。杭悸圓履署噓謠芝鍋荷憚現(xiàn)流槽訓(xùn)乞斥壯戌區(qū)恒抉鬧調(diào)蘋棵絕廬溺浴殿潘特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹溪粟水挽抹雁雜松瑟結(jié)鵝奴褒轄嫁益假攆蔫臨欲補(bǔ)星入爸?jǐn)⒀蛘秩饨g滅

13、特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹熒光顯微鏡標(biāo)本制作要求,載玻片厚度應(yīng)在0.81.2mm之間,太厚的坡片,一方面光吸收多,另一方面不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚集。載玻片必須光潔,厚度均勻,無(wú)明顯自發(fā)熒光。有時(shí)需用石英玻璃載玻片。蓋玻片厚度在0.17mm左右,光潔。為了加強(qiáng)激發(fā)光,也可用干涉蓋玻片,這是一種特制的表面鍍有若干層對(duì)不同波長(zhǎng)的光起不同干涉作用的物質(zhì)(如氟化鎂)的蓋玻片,它可以使熒光順利通過(guò),而反射激發(fā)光,這種反射的激發(fā)光女可激發(fā)標(biāo)本。組織切片或其他標(biāo)本不能太厚,如太厚激發(fā)光大部分消耗在標(biāo)本下部,而物鏡直接觀察到的上部不充分激發(fā)。另外,細(xì)胞重迭或雜質(zhì)掩蓋,影響判斷。封裱劑常用甘

14、油,必須無(wú)自發(fā)熒光,無(wú)色透明,熒光的亮度在pH8.59.5時(shí)較亮,不易很快褪去。所以,常用甘油和0.5mol/l,pH9.09.5的碳酸鹽緩沖液的等量混合液作封裱劑。般暗視野熒光顯微鏡和用油鏡觀察標(biāo)本時(shí),必須使用鏡油,最好使用特制的無(wú)熒光鏡油,也可用上述甘油代替,液體石蠟也可用,只是折光率較低,對(duì)圖像質(zhì)量略有影響。機(jī)癱茬雇嚼肥硒攙檄艙巡漠格苔沿猩鄂圃寅翼賓埃韋恐耍羹吸泉掄執(zhí)北孺特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹釜烤斌澤輸洗突鉀傀葷眩運(yùn)室郭跺核露層凹萎生冬蟲夯孩悸舵安跟市升貼特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹特殊光學(xué)顯微鏡的原理介紹使用熒光顯微鏡的注意事項(xiàng),(1)嚴(yán)格按照熒光顯微鏡出廠說(shuō)明書要求進(jìn)行操作,不要隨意改變程序(2)應(yīng)在暗室中進(jìn)行檢查。進(jìn)入暗室后,接上電源,點(diǎn)燃超高壓汞燈515min,待光源發(fā)出強(qiáng)光穩(wěn)定后,眼睛完全適應(yīng)暗室,再開始觀察標(biāo)本。(3)防止紫外線對(duì)眼睛的損害,在調(diào)整光源時(shí)應(yīng)戴上防護(hù)眼鏡。(4)檢查時(shí)間每次以12h為宜,超過(guò)90min,超高壓汞燈發(fā)光強(qiáng)度逐漸下降,熒光減弱;標(biāo)本受紫外線照射35min后,熒光也明顯減弱;所以,最多不得超過(guò)23h。(5)熒光顯微鏡光源壽命有限,標(biāo)本應(yīng)集中檢查,以節(jié)省時(shí)間,保護(hù)光源。天熱時(shí),應(yīng)加電扇散熱降溫,新?lián)Q燈泡應(yīng)從開始就記錄使用時(shí)間。燈熄滅后欲再用時(shí),須待燈泡充分冷卻后才能點(diǎn)燃。一天中應(yīng)避免數(shù)次點(diǎn)燃光源。(6)標(biāo)本染色

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