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文檔簡介
1、同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科血液組儀器操作指導(dǎo)書TJYYJYKXY/YQZ205第2版標(biāo)題:流式細(xì)胞儀第2章 第5節(jié)第 PAGE 3 頁 共 NUMPAGES 3 頁1. 目的:建立BECKMANCOULTER EPICS XL型流式細(xì)胞儀有關(guān)使用、維修和保養(yǎng)的操作規(guī)程,以利于儀器的日常管理和正確使用。2 適用范圍:同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科血液室原理:熒光標(biāo)計(jì)的單克隆與白細(xì)胞共同孵育后,與白細(xì)胞表面抗原形成抗原抗體復(fù)合物,通過流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù),根據(jù)細(xì)胞大小及熒光標(biāo)計(jì)特性,將白細(xì)胞分別計(jì)數(shù),并計(jì)算標(biāo)上熒光的各種細(xì)胞的百分比,由此可測得白細(xì)胞表面抗原。 型號:.BECKMANCOULTER EPIC
2、S XL 產(chǎn)地:美國 技術(shù)特性: 實(shí)驗(yàn)室使用環(huán)境:室溫 責(zé)任人:檢驗(yàn)科血液室組長 鄭偉萍 相關(guān)資料: 程序內(nèi)容:流程圖: 接通電源,開啟電腦,啟動(dòng)流式細(xì)胞儀,預(yù)熱 打開電源箱門檢查 光路與流路檢測 測試標(biāo)本 關(guān)機(jī)前清洗,關(guān)機(jī)10.1 開機(jī)之前,分別將鞘液盒,清潔液盒加滿,費(fèi)液桶倒凈。10.1.1 接通電源,開啟電腦,自動(dòng)啟動(dòng)流式細(xì)胞儀,預(yù)熱30分鐘。10.1.2 打開電源箱門,檢查:10.1.2.1 AIR FILTER,VACUUM FILTER 必須干燥無水 WATER TRAP 液體不能超過1/3 VACUUM TRAP 液體若超過1/4,請進(jìn)行清潔.(參照清洗程序)10.1.2.2 檢
3、查SYSTEM VACUUM 表,在-17-30in.Hg10.1.2.3 檢查SYSTEM PRESURE 表,如果不在2832PSI之間,請完成以下步驟: 將SYSTEM PRESURE 表鈕拉出,調(diào)節(jié)壓力至合適位置,調(diào)節(jié)鈕復(fù)位。 光路和流路的校準(zhǔn)10.2.1 將FLOW CHECK放在室溫10分鐘.10.2.2 選擇檢測FLOWCHECK的PROTOCOL.10.2.3 取0.5ml(15-20滴)FLOWCHECK放入12X75mm試管,將試管放在樣品臺上進(jìn)樣檢測.10.2.4 取數(shù)5000(FS),核對FS及熒光FL1FL4的HPCV值是否20分鐘10.2 5.2按主機(jī)上PRIME鍵
4、,排除氣泡干擾后重測.10.2 5.3選擇CLEANING PANEL 清洗機(jī)器后重測.10.2 5.4若以上處理均未達(dá)標(biāo),進(jìn)行光路調(diào)整.10.3 檢測外周血淋巴細(xì)胞亞群及白血病細(xì)胞免疫分群.10.3.1 選擇檢測PROTOCOL SHUANGBIAO 或選擇檢測PROTOCOL SANBAIO10.3.2 點(diǎn)擊“OKEY” 當(dāng)主屏幕顯示“INSERT SAMPLE TUBE ”可上機(jī)檢測樣本。將樣品管放在樣品臺上,管口插入儀器進(jìn)樣口,關(guān)上門,儀器自動(dòng)進(jìn)行樣品檢測,外周血取數(shù)3000(FS),骨髓液取數(shù)10000(FS),若發(fā)覺進(jìn)樣不良,按主機(jī)上PRIME鍵,排除氣泡干擾,再點(diǎn)擊RESTART
5、重測。10.3.5 檢測過程中,可翻看FS圖,觀察設(shè)門情況。若需調(diào)整,點(diǎn)擊“A”按鼠標(biāo)左鍵,上 下移動(dòng)或縮小,然后按右鍵定格。10.3.6根據(jù)所測單抗內(nèi)容,翻看所對應(yīng)的圖譜。10.3.7儀器自動(dòng)停止計(jì)數(shù)或自行判斷所取數(shù)值已穩(wěn)定的情況下,點(diǎn)擊“STOP”鍵。10.3.8記錄所測樣本的結(jié)果,這時(shí)主屏幕彈出。10.3.9主屏幕提示“INSERT SAMPLE TUBE”檢測下一個(gè)樣品。10.4 樣品測試完畢,進(jìn)行儀器的清洗,操作步驟:10.4.1將漂白水(建議使用花王漂白液)與雙蒸水1:1稀釋,放入12X75的試管內(nèi)。10.4.2準(zhǔn)備3ML雙蒸水放入12X75的試管內(nèi)。10.4.3在ACQUISIT
6、ION 狀態(tài)欄下選擇PANELCLEANING PANEL10.4.4按照提示,分別將裝有稀釋的漂白液和雙蒸水的試管依次放入樣本臺,上機(jī)。10.5 真空管清洗程序10.5.1按CYTOMETER 主機(jī)上的RUN鍵,使其處于閃爍狀態(tài)。10.5.2將真空管洗器內(nèi)加滿雙蒸水,放在樣本臺上,如此反復(fù)3次。10.5.3按下CYTOMETER主機(jī)的CLEANSE 鍵,進(jìn)行清洗循環(huán),結(jié)束后整個(gè)管道內(nèi)充滿清潔液。10.6 XL關(guān)機(jī)程序10.6.1完成日常清洗程序10.6.2完成真空管路清洗。10.6.3先用50%花王漂白液,之后用70%酒精清洗樣本臺周圍,特別要注意樣本臺和樣本針探頭.10.6.4將裝有2ML雙蒸水的試管放在樣本臺上10.6.5退出SYSTEM II軟件。10.6.7依次關(guān)閉計(jì)算機(jī)主機(jī),打印機(jī),電源箱開關(guān)。11.注意:1.即使每天工作24小時(shí),也至少要關(guān)機(jī)一次 2.重新啟動(dòng)激光必須在儀器
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