機能實驗學：家兔動脈血壓的神經(jīng)、體液調節(jié)及受體機制分析

1、家兔動脈血壓的神經(jīng)、體液調節(jié)及受體機制分析機能學實驗【實驗目的】 學習哺乳類動物動脈血壓的直接測量方法。熟悉外周神經(jīng)復合動作電位的引導方法。以動脈血壓為指標，觀察某些神經(jīng)、體液因素對家兔心血管活動的影響?！緦嶒炘怼?心血管活動的調節(jié)包括神經(jīng)調節(jié)、體液調節(jié)和自身調節(jié)。傳出神經(jīng)和體液因素通過作用于心血管組織的相應受體，調節(jié)其功能狀態(tài)，從而達到調節(jié)動脈血壓的目的。心輸出量、心率外周阻力、回心血量動脈血壓心肌收縮力、心率血管平滑肌舒縮1和M受體和2受體交感神經(jīng)、迷走神經(jīng)交感縮血管神經(jīng)心血管反射（頸動脈竇、主動脈弓壓力感受器）（減壓神經(jīng)）NE、AChNE體液因素(RAAS E NE等)【實驗原理】 本

2、實驗應用插管法直接測定頸動脈血壓（端壓），即將動脈插管一端插入頸總動脈，另一端連接壓力感受器，感受動脈壓力變化并轉換為電信號，輸入計算機采集系統(tǒng)，記錄血壓的變化?！緦嶒瀮热荨?實驗一：觀察刺激神經(jīng)（心血管調節(jié)神經(jīng)）對血壓的調節(jié)實驗二：觀察體液（心血管活性藥物）因素對血壓的影響【實驗材料】實驗對象：家兔實驗器材與藥品：手術器械（見器械盒） 實驗完后沖洗擦干，換能器用后用針筒沖洗BL-420N生物信號采集與分析系統(tǒng)，壓力換能器，神經(jīng)引導電極，神經(jīng)刺激電極，氣管插管，動脈插管，靜脈插管，三通閥25烏拉坦，生理鹽水（NS），0.5%肝素NS，醫(yī)用液狀石蠟(3840), 0.001%乙酰膽堿（ACh），

3、 0.01%阿托品，0.01%去甲腎上腺素（NE）, 0.01%腎上腺素（E）, 1%酚妥拉明【實驗方法】 1. 手術麻醉及固定（耳緣靜脈頭皮針-保留?。┓蛛x一側頸部神經(jīng)：減壓神經(jīng)，迷走神經(jīng)（注意滑向）氣管插管（沿正中線）分離兩側頸總動脈，一側頸總動脈插管（未分離神經(jīng)側）（事先聯(lián)接壓力換能器，內注滿肝素，不應有氣泡）分離一側頸外靜脈/股靜脈，靜脈插管（管內注滿肝素），再推注肝素23ml（why？）迷走神經(jīng)：顏色白，纖維束粗大交感神經(jīng)：顏色灰暗，中等粗細減壓神經(jīng)：顏色白，纖維細，與交感神經(jīng)伴隨聯(lián)接動脈插管與壓力換能器，并充灌肝素股靜脈插管神經(jīng)引導電極連接神經(jīng)刺激電極連接【實驗方法】 2. BL-

4、420N生物信號采集與分析系統(tǒng)壓力換能器：由通道2輸入接口，連接計算機。實驗項目：選擇“實驗項目”菜單中的 “減壓神經(jīng)放電、電壓、心電同步實驗”實驗模塊。實驗一：記錄減壓神經(jīng)放電時，輸入接口通道1連接神經(jīng)放電記錄電極。進行神經(jīng)刺激實驗時，刺激輸出端接神經(jīng)刺激電極。【實驗步驟】 實驗一：神經(jīng)反射對血壓的調節(jié)記錄正常減壓神經(jīng)放電波形（為先大后小的三角形群集放電，節(jié)律與心律同步，幅度隨血壓高低而變化）?！緦嶒灢襟E】 實驗一：神經(jīng)反射對血壓的調節(jié)記錄正常減壓神經(jīng)放電波形。夾閉未插管側頸總動脈15s, 觀察血壓變化。電刺激減壓神經(jīng)：先用刺激電極間斷刺激完整的一側減壓神經(jīng)（3-5V、20Hz、周期 50m

5、s），觀察血壓變化。然后在神經(jīng)游離段（應有1.52cm長）的中部作雙重結扎，在兩結扎線的中間剪斷減壓神經(jīng)，以同樣的刺激參數(shù)分別刺激其中樞端和外周端，觀察血壓變化。電刺激迷走神經(jīng)：雙重結扎一側（非動脈插管側）迷走神經(jīng)并剪斷，間斷電刺激迷走神經(jīng)外周端和中樞端（5-10V、20Hz、周期50ms） ,記錄血壓變化?！緦嶒灢襟E】 實驗二：體液（藥物）因素對血壓的影響記錄正常（對照）血壓曲線；0.001%乙酰膽堿（0.1mL/kg）緩慢 iv.，記錄血壓，在Bp明顯變化時停藥；0.01%阿托品（0.1mL/kg） iv.，待基本恢復后（1-2min）乙酰膽堿（0.1mL/kg） iv.，記錄血壓；0.0

6、1%腎上腺素（0.2mL/kg） iv.，記錄血壓；0.01%去甲腎上腺素（0.2mL/kg） iv.，記錄血壓；1%酚妥拉明（0.2mL/kg）緩慢 iv.，記錄血壓；1min后再先后給予腎上腺素，去甲腎上腺素，記錄血壓。注：每次給藥后立即再推注NS 1ml，將插管內藥液注入體內。待血壓恢復原水平或平穩(wěn)后，再給下一藥物。降壓藥慢推！【注意事項】 麻醉應適量，過淺動物掙扎，過深則反射不靈敏。打開頸動脈鞘之前先確認減壓神經(jīng)并穿線備用；不要過度牽拉神經(jīng)，特別是減壓神經(jīng)，注意滴加石蠟油保護神經(jīng)，防止其干燥。記錄減壓神經(jīng)放電時要把其擱置在懸空的引導電極上，接觸要良好。引導電極不要觸及其它組織。動脈插管要扎緊，與血管平行，防止脫離或戳穿血管。確定無漏血后，放開動脈夾。測壓系統(tǒng)管道內不能有較大的氣泡。每項處理要同時做實驗標記。每次實驗后，應等血壓基本恢復并穩(wěn)定后，再進行下一項實驗?！舅伎碱}】 實驗報告中討論各項實驗結果，分析各實驗因素引起動脈血壓變化的機制。通過實驗，分析討論膽堿能、腎上腺素能神經(jīng)遞質及受體