實驗動物設(shè)施管理與國家標(biāo)準(zhǔn)（培訓(xùn)班講稿）

1、實驗動物設(shè)施管理與國家標(biāo)準(zhǔn)廣東省第19期培訓(xùn)班講稿暨南大學(xué)傅江南本章知識點1掌握實驗動物環(huán)境設(shè)施根本概念、國家標(biāo)準(zhǔn)。 2.掌握實驗動物環(huán)境因素的主要要素要求。3掌握各種環(huán)境因素對實驗動物的影響。4.掌握克服動物實驗過程中環(huán)境因素的影響。 本章思考題1.實驗動物設(shè)施環(huán)境的根本概念2.影響實驗動物的環(huán)境因子3.GB/T 14925、GB50447中常見的指標(biāo)4.什么是實驗動物的應(yīng)激5. 實驗動物質(zhì)量與環(huán)境因素關(guān)系 6.影響動物實驗結(jié)果主要因素之間的關(guān)系1 實驗動物設(shè)施環(huán)境概述1.1概念 1.2研究的范疇 1.3影響實驗動物的環(huán)境因素物理環(huán)境因素、化學(xué)環(huán)境因素、生物環(huán)境因素、設(shè)施環(huán)境因素、管理環(huán)境因

2、素、營養(yǎng)環(huán)境因素2對實驗動物產(chǎn)生影響的環(huán)境因素2.1 物理因素對實驗動物和動物實驗結(jié)果的影響2.2 化學(xué)因素對實驗動物與動物實驗結(jié)果的影響2.3 生物環(huán)境因素對實驗動物與動物實驗結(jié)果的影響2.4 設(shè)施環(huán)境因素對實驗動物與動物實驗結(jié)果的影響2.5 管理環(huán)境因素對實驗動物與動物實驗結(jié)果的影響2.6 營養(yǎng)因素對實驗動物與動物實驗結(jié)果的影響3實驗動物環(huán)境應(yīng)激3.1 應(yīng)激的根本概念3.2 應(yīng)激反響的特點3.3 環(huán)境應(yīng)激對動物實驗的影響3.4 環(huán)境應(yīng)激反響的診斷3.5 實驗動物環(huán)境應(yīng)激的預(yù)防4實驗動物養(yǎng)學(xué)控制4.1實驗動物的營養(yǎng)需要4.2實驗動物飼料的分類及其營養(yǎng)特性4.3 實驗動物飼料中的養(yǎng)分及其營養(yǎng)作

3、用4.4實驗動物飼料的配制4.5實驗動物飼料的加工、消毒、儲存及其質(zhì)量控制4.6營養(yǎng)因素對動物實驗結(jié)果的影響前 言實驗動物質(zhì)量與實驗結(jié)果，在很大程度上受遺傳因素與環(huán)境因素的影響。然而，遺傳因素是先天的，環(huán)境因素卻顯得極為重要。但事實上，盡管我國生命醫(yī)藥科學(xué)研究領(lǐng)域盡管確取得了可喜的成績，至今仍很少有人對動物實驗環(huán)境加以重視和關(guān)心。在描述實驗動物的論文中，記述動物本身，以及飼養(yǎng)對環(huán)境條件，有的甚至是錯誤的。 實驗動物是外源化合物作用的對象，又是外源化合物最終表達(dá)的主體。 不同種屬和個體的動物影響外源化合物在其體內(nèi)的代謝，因而影響外源化合物的作用。 環(huán)境因素不僅影響實驗動物，同時也影響外源化合物。

4、給予途徑影響化合物在動物體內(nèi)的代謝和其最終表達(dá)。動物實驗結(jié)果與環(huán)境因素關(guān)系式R動物實驗結(jié)果可靠性A種的共同反響B(tài)品系特有反響C個體反響(差異)D環(huán)境影響E實驗誤差A(yù)BC屬于遺傳因素，D與結(jié)果呈正相關(guān)R=(A+B+C)D+E基因型（genotype） 發(fā)育環(huán)境（Developnental environment）表現(xiàn)型（Phenotype） 生存環(huán)境（Living environment）演出型（Dramatype） 實驗環(huán)境（Experiment environment）實驗結(jié)果(Result)影響動物實驗結(jié)果主要因素之間關(guān)系 動物的性狀表現(xiàn)決定于遺傳和環(huán)境因素的綜合作用。盡管遺傳因素是決定生

5、物性狀的物質(zhì)根底，但個體發(fā)育過程中，基因作用的表現(xiàn)離不開環(huán)境的影響。 不重視環(huán)境的慘痛教訓(xùn) (內(nèi)部資料) 例1.南方某省藥檢所： 測檢“水解蛋白注射液做過敏試驗中，發(fā)現(xiàn)對照組豚鼠也出現(xiàn)類過敏現(xiàn)象。邀請全國15個單位會檢，并與其它地區(qū)的制品比照，結(jié)果又發(fā)現(xiàn)了類過敏反響；最后又在四個地區(qū)進(jìn)行交叉試驗，其它省區(qū)均為陰性，說明實驗動物有問題。此次事件造成直、間接損失300余萬元。 例2.哈爾濱醫(yī)科大學(xué) 于XX副校長去日本交流“克山病的論文引起了日本醫(yī)學(xué)界的重視。但了解到所用的動物來歷不清，動物實驗條件的不可控性，該學(xué)術(shù)論文被認(rèn)為是：“實驗結(jié)果的科學(xué)性不夠。例3.原第一軍醫(yī)大學(xué) 88年，休克微循環(huán)專家趙

6、克森教授以及博士、碩士論文投寄到國外在犬、羊、兔等品種(系)上屢屢受歧視。 例4.某生物制品所 我國自行生產(chǎn)的雞馬立克氏病弱毒疫苗出口，但因我們的疫苗生產(chǎn)污染有雞白血病病毒，而不被對方接受。例5.中科院XX動物研究所 十多年前是中國最大的恒河猴養(yǎng)殖出口基地，但由于經(jīng)費緊張，環(huán)境條件無法改善，出口恒河猴被查出有eblar、EB等病毒等。而順德實驗動物靈掌類實驗動物中心那么由科委主管的小企業(yè)一躍成為我國最大的恒河猴出口基地之一。例6 XX市口岸藥檢所 92年，送檢樣品合格，抽檢不合格法律上受指控?fù)p失600-800萬/年.例7.化工部新農(nóng)藥研制： 實驗動物不標(biāo)準(zhǔn)、實驗條件不標(biāo)準(zhǔn)，使得可重復(fù)性差，LD

7、50結(jié)果有23倍之差，因而無法進(jìn)行結(jié)構(gòu)與毒性關(guān)系的深入研究。有些藥物如“多菌靈雖然是高效低毒，但不能向外國專利局申請登記。例8.醫(yī)科院腫瘤所 楊XX教授，從事實腫瘤研究30多年來積累、保存了各種可移植腫瘤瘤株20多個品種，由于過去實驗動物環(huán)境較差，冬天溫度不夠，改用硬氣，有一次硬氣閥門失靈、漏氣，全部動物被蒸死，30多年心血毀于一旦。例9.航天醫(yī)學(xué)影響較大的是80年代初，航天醫(yī)學(xué)模擬人在失重和飛行器中的生物學(xué)研究，在北京市郊買的不合格的狗，成果出來后在國際上有名的雜志上發(fā)表文章，結(jié)果被拒。造成極大損失和浪費。舉例的目的是使大家清楚，沒有合格的實驗動物，不在標(biāo)準(zhǔn)化的環(huán)境設(shè)施中從事動物生產(chǎn)和使用，

8、醫(yī)學(xué)生命科學(xué)研究就無從談起。 近年來，國家科技部、衛(wèi)生部、農(nóng)業(yè)部、化工部、解放軍總后衛(wèi)生部、國家中醫(yī)藥管理局等單位重申：申請部級含省級單位科研工程時，在形式審查過程中要求：大小鼠必須使用SPF級以上動物。1.1實驗動物環(huán)境科學(xué)概念 是專門研究實驗動物生存及管理過程與人工環(huán)境之間相互關(guān)系的科學(xué)。即研究實驗動物機體以外的各種人工(非人工)環(huán)境因素與實驗動物健康，繁育、生存水平相互關(guān)系的規(guī)律的科學(xué)。 同時依據(jù)這些規(guī)律制定出各種適應(yīng)環(huán)境的衛(wèi)生要求和工程要求的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，提出有效利用、保護(hù)和改善環(huán)境因素的理論和措施，并通過法律、法規(guī)的實施，到達(dá)穩(wěn)定地提高實驗動物質(zhì)量和動物實驗結(jié)果的可靠性，促進(jìn)科學(xué)的一進(jìn)步

9、開展。實驗動物環(huán)境科學(xué)是現(xiàn)代實驗動物科學(xué)的重要組成局部。1.2實驗動物環(huán)境科學(xué)研究的范疇1999年ICLAS提出 1實驗動物環(huán)境工程學(xué) 實驗動物設(shè)施與經(jīng)濟 實驗動物設(shè)施內(nèi)空氣的控制 實驗動物設(shè)施內(nèi)各建筑要素與環(huán)境相互關(guān)系(2)實驗動物環(huán)境衛(wèi)生學(xué)實驗動物與環(huán)境應(yīng)激的相互關(guān)系環(huán)境因素與實驗動物的應(yīng)激環(huán)境應(yīng)激對實驗動物的影響實驗動物與人類健康設(shè)施、環(huán)境與動物衛(wèi)生健康及生存水平關(guān)系 實驗動物運輸?shù)男l(wèi)生學(xué)良好/不良環(huán)境對實驗動物健康、行為活動影響環(huán)境與實驗動物疾病、病原的關(guān)系(3)實驗動物環(huán)境監(jiān)測與評估各種實驗動物環(huán)境因素的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)(最適標(biāo)準(zhǔn))實驗動物環(huán)境監(jiān)測方法與手段實驗動物環(huán)境因素的綜合評估1.3影

10、響實驗動物的環(huán)境因素綜合現(xiàn)代實驗動物科學(xué)對環(huán)境的認(rèn)識，我們認(rèn)為，構(gòu)成完整的實驗動物環(huán)境科學(xué)應(yīng)圍繞著六個主要子系統(tǒng)。即：.物理環(huán)境系統(tǒng).化學(xué)環(huán)境系統(tǒng).生物環(huán)境系統(tǒng).設(shè)施環(huán)境系統(tǒng).管理環(huán)境系統(tǒng).營養(yǎng)環(huán)境系統(tǒng)各環(huán)境子系統(tǒng)動態(tài)平衡，才得的維持實驗動物的質(zhì)量.物理環(huán)境因素主要包括：環(huán)境設(shè)施內(nèi)溫度(初級+次級)相對濕度(Humidity)氣流(Airflow)氣壓(Atmospheric pressure)光照度(Illumination噪聲(Noise)等。 在實驗動物的環(huán)境系統(tǒng)中，物理環(huán)境子系統(tǒng)穩(wěn)定性最低，處于動態(tài)平衡狀態(tài)，一旦失衡，將導(dǎo)致實驗動物的應(yīng)激反響。嚴(yán)重的可導(dǎo)致死亡。 在物理環(huán)境子系統(tǒng)中，環(huán)

11、境溫度對實驗動物影響最大，作用強度最明顯。 除噪聲和氣壓外，其它因子都和溫度發(fā)生聯(lián)系而產(chǎn)生影響， 因而，應(yīng)將溫度因子放在各因子的首位?；瘜W(xué)環(huán)境因素 實驗動物設(shè)施內(nèi)由于產(chǎn)生各種各樣的化學(xué)物質(zhì)諸如NH3、H2S、SO2、CO2、CO、氮氧化物，粉塵微粒等。 這類因子在實驗動物環(huán)境中占有很重要的地位。生物環(huán)境因素實驗動物生物環(huán)境子系統(tǒng)主要包括兩類： 一是非自身生物因子:病原微生物，體內(nèi)外寄生蟲、人類等。 二是實驗動物自身生物因子：“心理，群體、行為等因子。 前者較相對穩(wěn)定，并與管理方式、水平、條件呈相關(guān)關(guān)系。但也存在個體、差異影響。后者那么個體差異、群體、種(系)差異較大。設(shè)施環(huán)境因素設(shè)施的墻體，地

12、面的隔熱性能；空間及維護(hù)結(jié)構(gòu)的密閉性，人工可控程度，采光能力，排水能力，空調(diào)方式，籠架具結(jié)構(gòu)，材質(zhì)，實用性，平安性導(dǎo)熱性等。這一環(huán)境因素由于所處的地理位置，氣候狀況，實驗動物品種(系)、設(shè)施類型等，用途各異，對實驗動物的影響程度相對較穩(wěn)定。 管理環(huán)境因素是指經(jīng)常性管理實驗動物生產(chǎn)繁育和使用操做方式等SOP形成的環(huán)境措施，這是一個相對穩(wěn)定的系統(tǒng)。主要包括： 居住因素、飼養(yǎng)密度，操作步驟、飼養(yǎng)方式、飼喂頻率、墊料更換方式、時間等，這一系統(tǒng)無固定模式，主要依靠對實驗動物的健康狀況，繁育性能、實驗結(jié)果等指標(biāo)來評價。 近年來對動物實驗中，施加因素、強度對實驗動物的影響已引起人們的高度重視。營養(yǎng)環(huán)境因素

13、營養(yǎng)環(huán)境子系統(tǒng)包括數(shù)量因子和質(zhì)量因子兩局部指標(biāo)。也是一個相對穩(wěn)定的系統(tǒng)。數(shù)量因子主要指飼料的營養(yǎng)成分。如總能量，粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、粗灰分、必需氨基酸、微量元素、維生素等，質(zhì)量因子指標(biāo)主要有：飼料新鮮度、雜質(zhì)率、均勻度硬度、適口性等。這局部環(huán)境因素對實驗動物的影響曲線較平緩，相比照較穩(wěn)定。 實驗動物設(shè)施根本概念實驗動物生產(chǎn)設(shè)施 Breeding Facility For Laboratory Animal指用于實驗動物生產(chǎn)的建筑物和設(shè)備的總和。包括動物生產(chǎn)區(qū)、輔助生產(chǎn)區(qū)、輔助區(qū)。實驗動物實驗設(shè)施 Experiment facility for Laboratory animal指以研究、試

14、驗、教學(xué)、生物制品、藥品及相關(guān)產(chǎn)品生產(chǎn)、質(zhì)控等為目的進(jìn)行實驗動物實驗的建筑物和設(shè)備的總和。包括動物實驗區(qū)、輔助實驗區(qū)、輔助區(qū)。按照微生物控制等級要求普通環(huán)境設(shè)施 Conventional Environment Facility符合普通環(huán)境要求的，用于實驗動物生產(chǎn)或動物實驗的建筑物和設(shè)備的總和。屏障環(huán)境設(shè)施 Barrier Environment Facility符合屏障環(huán)境要求的，用于實驗動物生產(chǎn)或動物實驗的建筑物和設(shè)備的總和。普通環(huán)境Conventional Environment符合動物居住的根本要求，控制人員和物品、動物出入，不能完全控制傳染因子，但能控制野生動物的進(jìn)入，適用于飼育根底

15、級實驗動物。屏障環(huán)境 Barrier Environment符合動物居住的要求，嚴(yán)格控制人員、物品和空氣的進(jìn)出，適用于飼育清潔實驗動物及無特定病原體SPF實驗動物。隔離環(huán)境Isolation Environment采用無菌隔離裝置以保持裝置內(nèi)無菌狀態(tài)或無外來污染物。隔離裝置內(nèi)的空氣、飼料、水、墊料和設(shè)備應(yīng)無菌，動物和物料的動態(tài)傳遞須經(jīng)特殊的傳遞系統(tǒng)，該系統(tǒng)既能保證與環(huán)境的絕對隔離，又能滿足轉(zhuǎn)運動物、物品時保持內(nèi)環(huán)境一致。適用于飼育無特定病原體、悉生Gnotobiotic及無菌(Germ Free)實驗動物。獨立通風(fēng)籠具Individually Ventilated Cage IVC一種以飼養(yǎng)盒

16、為單位的實驗動物飼育設(shè)備，空氣經(jīng)過高效過濾器處理后分別送入各獨立飼養(yǎng)盒使飼養(yǎng)環(huán)境保持一定壓力和潔凈度，用以防止環(huán)境污染動物或動物污染環(huán)境，該設(shè)備用于飼養(yǎng)清潔、無特定病原體或感染動物。隔離器Isolator 一種與外界隔離的實驗動物飼養(yǎng)設(shè)備，空氣經(jīng)過高效過濾后送入，物品經(jīng)過無菌處理前方能進(jìn)出飼養(yǎng)空間，該設(shè)備既能保證動物與外界隔離，又能滿足動物所需要的特定環(huán)境。該設(shè)備用于飼養(yǎng)無特定病原體、悉生、無菌或感染動物。層流柜Laminar Flow Cabinet一種飼養(yǎng)動物的架式多層設(shè)備，潔凈空氣以層流的方式使飼養(yǎng)環(huán)境保持一定壓力和潔凈度，防止環(huán)境污染動物或動物污染環(huán)境，該設(shè)備用于飼養(yǎng)清潔、無特定病原體

17、動物。表1實驗動物環(huán)境設(shè)施的分類環(huán)境設(shè)施分類使用功能適用動物等級普通環(huán)境實驗動物生產(chǎn)，動物實驗、檢疫基礎(chǔ)動物屏障環(huán)境正壓實驗動物生產(chǎn)，動物實驗、檢疫清潔動物、SPF動物負(fù)壓動物實驗、檢疫清潔動物、SPF動物隔離環(huán)境正壓實驗動物生產(chǎn)、動物實驗、檢疫無菌動物、SPF動物、悉生動物負(fù)壓動物實驗、檢疫無菌動物、SPF動物、悉生動物 實驗動物生產(chǎn)設(shè)施的環(huán)境指標(biāo)項 目指 標(biāo)小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠犬、猴、貓、兔、小型豬雞普通環(huán)境屏障環(huán)境隔離環(huán)境普通環(huán)境屏障環(huán)境隔離環(huán)境屏障環(huán)境溫度，18-2920-2616-2820-2616-28最大日溫差，444相對濕度， 4070最小換氣次數(shù)，次/h815815動物籠具

18、周邊處氣流速度，m/s0.20 與相通房間的最小靜壓差，Pa1050105010空氣潔凈度級別75或7*75或7*5或7*沉降菌最大平均濃度，個/0.5h.90mm平皿3無檢出3無檢出3氨濃度指標(biāo)，mg/m314噪聲，dB(A)60照度，lx最低工作照度200動物照度15-20100-2005-10晝夜明暗交替時間，h 12/12或10/14生產(chǎn)設(shè)施的環(huán)境指標(biāo)項 目指 標(biāo)小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠犬、猴、貓、兔、小型豬雞普通環(huán)境屏障環(huán)境隔離環(huán)境普通環(huán)境屏障環(huán)境隔離環(huán)境隔離環(huán)境溫度，19-2620-2516-2620-2616-26最大日溫差，43433相對濕度，4070最小換氣次數(shù)，次/h8158

19、15動物籠具周邊處氣流速度，m/s0.2與相通房間的最小靜壓差，Pa1050105050空氣潔凈度，級757*757*57*沉降菌最大平均濃度3無檢出3無檢出無檢出氨濃度指標(biāo)，mg/m314噪聲，dB(A)60照度，lx最低工作照度200動物照度15-20100-2005-10晝夜明暗交替時間h12/12或10/14表動物實驗設(shè)施的環(huán)境指標(biāo)動物實驗設(shè)施的環(huán)境指標(biāo)表5 屏障環(huán)境設(shè)施的輔助區(qū)的環(huán)境指標(biāo)要求房間名稱潔凈度級別最小換氣次數(shù)（次/h）與室外方向上相通房間的最小壓差（Pa）溫度（）相對濕度（%）噪聲dB(A)最低照度（lx）潔物儲存室7151018-2830-7060150無害化消毒室7或

20、815或101018-2860150潔凈走廊7151018-2830-7060150污物走廊7或815或101018-2830-7060150緩沖間7或815或101018-2860150二更7151018-2860150清洗消毒室418-2860150淋浴室418-2860100一更（脫、穿普通衣、工作服）18-2860100修訂背景GB/T14925?實驗動物環(huán)境及設(shè)施?科技部于1994年1月首次發(fā)布；1999年8月進(jìn)行第一次修訂，2001年發(fā)布修訂版；2007年再次修訂本標(biāo)準(zhǔn)。 實驗動物設(shè)施國家標(biāo)準(zhǔn)簡介GB50447?實驗動物設(shè)施建筑技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)?住房和城鄉(xiāng)建設(shè)部2021年8月13日發(fā)布；2

21、021年12月1日實施。GB50346?生物平安實驗室建筑技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)?建設(shè)部2004年8月3日發(fā)布，自2004年9月1日起開始實施。GB/T14925?實驗動物環(huán)境及設(shè)施?規(guī)定了實驗動物及動物實驗設(shè)施和環(huán)境條件的技術(shù)要求及檢測方法，同時規(guī)定了墊料、飲水、污水、廢棄物及動物尸體處理、籠具、墊料、動物運輸?shù)暮突\具的原那么要求。即對影響實驗動物質(zhì)量的環(huán)境設(shè)施提出全面的技術(shù)要求。GB50447?實驗動物設(shè)施建筑技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)?對實驗動物設(shè)施建筑技術(shù)提出要求：主要是建筑和結(jié)構(gòu)；空調(diào)、通風(fēng)和空氣凈化、給水排水、電氣和自控、消防、施工要求、檢測和驗收等。GB50346?生物平安實驗室建筑技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)?涉及致病性病原生物

22、的實驗動物使用設(shè)施提出建筑技術(shù)要求。規(guī)定了對不同生物平安防護(hù)級別實驗室的設(shè)施、設(shè)備和平安管理的根本要求，適用于涉及生物因子操作的實驗室。 實驗動物設(shè)施的根本要求1建筑和結(jié)構(gòu)要求選址和總平面 、建筑布局 、建筑構(gòu)造 、結(jié)構(gòu)要求 2空調(diào)、通風(fēng)和空氣凈化要求送風(fēng)、排風(fēng) 、凈化、氣流組織 、部件與材料 3給水排水要求4電氣和自控要求5消防要求6施工要求 7檢測和驗收要求實驗動物設(shè)施管理要點核心要點：是對人流、物流、動物流全過程污染控制的管理。2.1 物理因素對實驗動物和動物實驗結(jié)果的影響溫度的影響、濕度的影響、光照的影響、噪聲的影響、氣流與風(fēng)速的影響2.2 化學(xué)因素對實驗動物與動物實驗結(jié)果的影響空氣潔

23、凈度對實驗動物的影響、空氣中化學(xué)有害氣體的影響2.3 生物環(huán)境因素對實驗動物與動物實驗結(jié)果的影響實驗動物的社會因素、種內(nèi)關(guān)系2.3.2 種間關(guān)系2.3.3 與其它動物的關(guān)系2.4 設(shè)施環(huán)境因素對實驗動物與動物實驗結(jié)果的影響2.4.1 籠具的影響2.4.2 墊料的影響2.5 管理環(huán)境因素對實驗動物與動物實驗結(jié)果的影響2.5.1 飼養(yǎng)方式2.5.2 飼養(yǎng)密度的影響2.5.3 操作步驟的影響2.6 營養(yǎng)因素對實驗動物與動物實驗結(jié)果的影響2.6.1 實驗動物飼料的類型2.6.2 營養(yǎng)因素對動物實驗結(jié)果的影響2 環(huán)境因素對實驗動物質(zhì)量和動物實驗結(jié)果的影響涉及環(huán)境因素對實驗動物質(zhì)量和動物實驗結(jié)果的影響因素

24、許多，而專門從事這方面研究的工作確做的很少。在此，我們有重點的為大家介紹一些，以便在今后工作中多觀察，總結(jié)，不斷提高我們實驗結(jié)果的可信性。按國標(biāo)要求介紹幾種。 2.1 物理因素對實驗動物和動物實驗結(jié)果的影響溫度的影響：溫度對實驗動物適應(yīng)反響.哺乳類實驗動物產(chǎn)熱方式與人類相似，在一定溫度范圍內(nèi)可保持體溫的相對穩(wěn)定的生理調(diào)節(jié)能力。但也有進(jìn)行冬眠的動物。如倉鼠類、黃鼠類等。產(chǎn)熱量、根底代謝、體溫和環(huán)境有一定相關(guān)關(guān)系。根底代謝最少時期的環(huán)境溫度稱之為溫度中性區(qū)。 各種實驗動物監(jiān)界溫度與最適溫度中性區(qū)1種別臨界溫度低溫高溫最適溫度小鼠103720-33大鼠-103228-30豚鼠-153230-31家兔

25、-293220-30貓-403624-2818-30犬-8042-5818-2各種實驗動物監(jiān)界溫度與最適溫度中性區(qū)2種別臨界溫度低溫高溫最適溫度恒河猴屬-203827-30綿羊803232山羊-694020-30豬-40300-20鴿-204220-30雞-253219-29 臨界溫度:動物的體溫失去恒常性而開始上升或下降時溫度段為臨界溫度。 不過實驗動物品種(系)、年齡、性別、活動狀態(tài)的不同引起的產(chǎn)熱差異是明顯的。通常實驗動物的攝食量，隨環(huán)境溫度升高而增加，即與溫度存在明顯的負(fù)相關(guān)系。大、小鼠、兔、犬等實驗動物隨著溫度的升高，心跳、呼吸數(shù)也升高，超過35時，那么心跳明顯減少，在1525時顯正

26、相關(guān)。 小鼠在體溫下降至34時，心跳開始增加，其后逐漸減少。體溫上升至40時，心跳開始減少，升至40以上時心跳增加。體熱的散發(fā)： 生物體的散熱(Heat radiation)大局部是通過皮膚傳導(dǎo)(conduction)對流(Convection)輻射(radiation)及蒸發(fā)(evaporation)和通過呼吸道的蒸發(fā)進(jìn)行的，糞尿散熱僅占5%，犬無汗腺靠呼吸道蒸發(fā)為主。 溫度對繁育的影響：低溫時實驗動物性周期延遲，小鼠在21 時繁殖3代，而-3時繁殖2代。高溫時，雄性睪丸副睪萎縮，精子形成能力降低。更嚴(yán)重的是，高溫環(huán)境引起不同實驗動物先天性缺陷：.在整體高溫環(huán)境中：胚胎吸收。大鼠35以上，8

27、-10天，無眼畸形，9天后齒缺陷，10天后：無腦畸形。12天，趾缺陷，13天腭裂，并趾或短趾，腦積水。40時，50%以上胚胎發(fā)生畸變。 小鼠 ：妊娠暴露于43溫度下，10天50%以上后裔嚴(yán)重脊椎畸形；每天暴1小時組，妊娠第7天，無頜，面部發(fā)育不良。假設(shè)每天暴露20h(lecyk,1969)Penny cuk 1965)母體死率高，流產(chǎn)，胚胎吸收率高于50%。家兔：妊娠第6、7天，注射煮沸牛奶引起發(fā)熱后(Brinshade 1957)母體溫度升高12.2，胎兒發(fā)生皮下，腦脊膜出血，腦膨出小頭、肝、肢缺陷。恒河猴：母體溫度升至41持續(xù)1h/天(妊娠2550天)連續(xù)5天，發(fā)生子代骨骼異常，行為異常(

28、Poswillo,1974)妊娠2146天，母體溫度升高3.53.8，1h/天4天，胎兒吸收，流產(chǎn)、死胎、眼、骨骼、腎上腺、腎、心臟畸形。 環(huán)境溫度的改變可引起不同程度的生理、生化系統(tǒng)和機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定系統(tǒng)的改變，從而引起某些生理情況(通氣、循環(huán)、體液、中間代謝、機體防御系統(tǒng)狀態(tài)等)的改變，并影響外源性化合物的吸收、代謝、排泄等。 有人比較了58種化學(xué)物在8、26和36不同溫度下對大鼠LD50的影響，結(jié)果說明，有55種化學(xué)物在36時毒性最大，在26時毒性最小。不同動物，甚至在同種動物的不同品系之間，其最適溫度也是不同的。 動物飼養(yǎng)室的溫度應(yīng)控制在各種動物最適溫度3范圍內(nèi)。常用的幾種實驗動物對20

29、27的溫度范圍都能適應(yīng)。因此：溫度對實驗動物發(fā)育影響的特點：溫度引起實驗動物發(fā)育缺陷，是以非致死性狀態(tài)傷害胎兒的；.溫度引發(fā)缺陷的類型：取決于胎兒發(fā)育階段和受熱的劑量。研究說明：補充甲狀腺素，維生素與蛋白質(zhì)均能降低大鼠胚胎吸收(Macfarlane,1951)。摘除腎上腺方法，能導(dǎo)致早期胚胎吸收率的顯著降低。(FernandesCano 1958) 嚙齒類 中動物普通設(shè)施 18-29 20-26屏障設(shè)施 16-28 20-26禽類 16-28溫度標(biāo)準(zhǔn)(GB/T 14925)2.2 化學(xué)因素對實驗動物與動物實驗結(jié)果的影響.低溫環(huán)境可導(dǎo)致大小鼠心臟、肝、腎臟增大，高溫下減小。 .免疫功能的變化：

30、BALB/c小鼠(從22環(huán)境移至12中 )T淋巴細(xì)胞(3天)；(從22移至32環(huán)境)血T淋巴細(xì)胞(3天)；血B淋巴細(xì)胞(7天)；脾B淋巴細(xì)胞 14天恢復(fù)。.在1216環(huán)境中，大鼠血漿P蛋白質(zhì)，血中尿素氮、堿性磷酸酶、谷草、谷丙轉(zhuǎn)氨酶；腦組織的各氨基酸，肝、血流中的麥角硫因，谷光甘肽；但Beagle犬就要相對穩(wěn)定。 .13，23，33環(huán)境下10天，各溫度間血液細(xì)胞，紅細(xì)胞溶積，血漿蛋白，堿性磷酸酶、谷丙、谷草轉(zhuǎn)氨酶無明顯溫度變化的差異，盡管有呼吸次數(shù)增加。應(yīng)注意：溫度變化和濕度一起對血流量，呼吸量、體溫等各種生理機能產(chǎn)生影響，對藥物的活性、毒性、代謝、分解以及腎臟排泄速度等均產(chǎn)生影響。相對濕度的

31、影響濕度對實驗動物的影響是伴隨溫度的改變而改變的。 小鼠在相對濕度的40%時，易發(fā)生干尾癥和變態(tài)反響性疾病， 仙臺病毒，脊髓灰質(zhì)炎病毒，腺病毒4.7型，均在高溫環(huán)境下發(fā)病率升高。(Ven Der Veen,1972) 濕度過高，實驗環(huán)境中微生物易于生長繁殖，動物易患疾??； 濕度過低(如低于40%)那么易塵灰飛揚，對動物健康不利。 而某毒物如HCl、NO和H2S在高濕條件下的刺激性增加，SO2甚至可轉(zhuǎn)變?yōu)镾O3和H2SO4。 尤其要考慮環(huán)境濕度對揮發(fā)性化合物和通過皮膚、呼吸道途徑染毒的化合物實驗結(jié)果的影響。 一般實驗動物，相對濕度在40%70%之間是完全能適應(yīng)的，以50%60%最好，但貓適于較低

32、的濕度。光照的影響 高等實驗動物的視網(wǎng)膜近表層有感覺明暗的桿狀細(xì)胞和感光顏色的錐狀細(xì)胞，通過神經(jīng)內(nèi)分泌機能或行為的調(diào)節(jié)。桿狀細(xì)胞：嚙齒類動物占優(yōu)(夜行動物)黑暗場所易適應(yīng)，但對光刺激反響明顯。錐狀細(xì)胞：鳥類動物占優(yōu)(夜盲眼)。 綿羊、豬、犬及嚙齒類動物對顏色無分辨能力。 人、猴、貓的錐狀細(xì)胞與桿狀細(xì)胞的比較，辨色、區(qū)別明暗能力方面優(yōu)于其它動物。 嚙齒類 中動物普通設(shè)施 4070 4070屏障設(shè)施 4070 4070 禽類 4070相對濕度標(biāo)準(zhǔn)(GB/T 14925)照明對實驗動物的影響.視網(wǎng)膜損傷：2萬Lux照度白化大鼠幾小時發(fā)生，8天以上即不可逆。60Lux照度下飼養(yǎng)13周導(dǎo)致視視網(wǎng)膜退行性

33、變。.對發(fā)育繁殖影響： 100Lux條件下大鼠陰道開口最早，卵巢，子宮，發(fā)育最快。15Lux以下多數(shù)不發(fā)情。 250Lux照度下，產(chǎn)仔數(shù)最多。 小鼠在20Lux條件下，性周期(4天)非常規(guī)律。 ICR小鼠在藍(lán)色光照明下：垂體，腎上腺、腎、精囊；雌性：腎上腺、甲狀腺、松果體重量相差很大。 照明時間(光照周期)影響 對實驗動物生理節(jié)奏節(jié)律影響最明顯。 金黃倉鼠每天需12.5h照明，低于12.5h，生殖器退化， 綿羊那么以8/16明暗周期睪丸精子發(fā)育最正確， 大小鼠發(fā)情以12/12明暗周期為最穩(wěn)定的4日周期，如果16/8明暗周期，性周期5天，且不穩(wěn)定。700Lux連續(xù)照明，白化大鼠眼球障礙，15Lu

34、x連續(xù)照明，不發(fā)情退發(fā)性率最高。照度標(biāo)準(zhǔn)(GB/T 14925)最低工作照度：200Lux，動物照度：嚙齒類15-20；中動物100-200；禽類： 5-10美國實驗動物設(shè)施標(biāo)準(zhǔn)：10761345Lux。歐洲動物設(shè)施標(biāo)準(zhǔn)：光源垂直下方距地面1m：300450Lux 日本實驗動物設(shè)施標(biāo)準(zhǔn)：光源垂直下方距地面40-85cm：150-300Lux 噪聲與振動對實驗動物的影響 噪聲和振動對實驗動物的生殖生理能產(chǎn)生較大影響，尤其對一些敏感型體質(zhì)的動物。噪聲與振動的控制標(biāo)準(zhǔn)：60 dB 。.對生產(chǎn)繁育的影響： 陰道栓確認(rèn)后18天，給85 dB刺激，產(chǎn)出率為98%，陰道栓確認(rèn)后當(dāng)天，給85 dB刺激，產(chǎn)出率

35、為60%，母鼠咬死仔鼠。咬殺率33%，臨產(chǎn)前給85dB，咬殺率67%。低頻范圍人：2020000HZ，猴與人相似。犬、小鼠、兔、豚鼠、犬等實驗動物都可聽到超聲波，其中蝙蝠、貓、可達(dá)200/100KHZ，大鼠達(dá)70kHz。.對實驗結(jié)果的影響：除正常應(yīng)激反響外，主要對交感神經(jīng)影響最大。電鉆施工：給小鼠采血測血糖：明顯升高。投入鎮(zhèn)靜脈，能降低對聲音的感受性。一般而言：噪音使小鼠發(fā)生的細(xì)胞、免疫機能改變，大鼠發(fā)生高血壓，心臟肥大，腎上腺皮質(zhì)不同上升。振動導(dǎo)致小鼠消化吸收障礙，大鼠消化器官分泌機能的障礙，肝糖原和抗壞血酸水平升高。循環(huán)：血壓/心率內(nèi)分泌：尿中腎上腺素血清中Mg2+膽固醇細(xì)胞中：Na+血管

36、緊張肽原酶活性免疫：功能代謝：早期促能量儲藏；長期：抑制能量代謝。消化：胃腸功能減弱華師生物系劉美蓮教授一項研究說明：豚鼠A組： 105dB 20天(1h/d)B組：105dB 20天(1h/d) 第5天處死，測各臟器鋅銅鈣鎂元素。結(jié)果： 經(jīng)強噪聲、肝、腦元素Zn+急劇減少， Cu腦Ca肝Ca； 第5天元素代謝嚴(yán)重失調(diào)仍持續(xù)。對心肌Ca 、 Cu，Mg+ Zn+ 支持心肌Ca、Mg代謝異常引發(fā)心臟病。氣流與風(fēng)速對實驗動物的影響 氣流與風(fēng)速對實驗動物的影響 氣流：是設(shè)施內(nèi)空氣的流動，是決定動物初級環(huán)境溫度與散熱的主要因素。在溫度恒定的前提下，給動物加大風(fēng)速，其體溫呈下降趨勢，通過對流，輻射或體表

37、蒸發(fā)的體熱擴散，增大風(fēng)速，采食量也增加。風(fēng)速是決定實驗動物設(shè)施內(nèi)次級環(huán)境靜壓大小的重要因素。氣流與風(fēng)速的標(biāo)準(zhǔn)亞屏系統(tǒng) 0.18m/s；屏障系統(tǒng)0.18；隔離系統(tǒng)0.18；壓差：2050Pa。 2.2化學(xué)因素對實驗動物與動物實驗結(jié)果的影響2.2.1 空氣潔凈度對實驗動物的影響粉塵： 空氣中浮游的微粒總稱為空氣氣溶膠(aerosol)。對實驗動物環(huán)境影響最大的就是粉塵顆粒。動物被毛、浮皮屑、飼料渣、墊料渣、排泄物等是主要塵源?？諝庵械募?xì)菌、病毒、立克次氏體等因其粘附在粉塵顆粒上，故在理論上做粉塵對待，一般附著在5m以上的微粒上飄浮在空氣中。粉塵的影響粉塵主要是通過呼吸道引起實驗動物有害作用。一般0

38、.54m顆粒沉積在肺部的比率最高，是呼吸道疾病主要來源和主要致敏源2030微粒很少入肺泡深處。大鼠、豚鼠、兔的毛，皮屑可成為眼鼻病癥的過敏原(具有抗原性)；大小鼠的尿蛋白是致敏原。大鼠墊料和大鼠尿與氣喘癥相關(guān)性極強。日本學(xué)者對動物室粉塵中蛋白質(zhì)進(jìn)行測重，發(fā)現(xiàn)大小鼠次級環(huán)境中0.23.3%的蛋白質(zhì)濃度最高。是飼養(yǎng)人員、動物實驗人員過敏癥(變態(tài)反響)的重要來源。這些粒徑小于10m的粉塵蛋白，僅用口罩是很難防止人體吸入的。 因此告誡實驗者，應(yīng)注意控制氣流換氣次數(shù)和其它防護(hù)措施。研究者認(rèn)為： 空氣中這類過敏原是由分子量12.5萬的低分子蛋白質(zhì)組成。 芝加哥大學(xué)醫(yī)學(xué)研究中心的實驗動物人員339人中59人

39、出現(xiàn)變態(tài)反響的病癥。鼻炎59例，肺病癥30例，氣喘癥28例，接觸動物30min即發(fā)生，可持續(xù)412h，不分人種、性別、年齡吸煙史等。美國NIH的職業(yè)性變態(tài)反響診療門診部130各統(tǒng)計患者有66%有接觸實驗動物而發(fā)生。 2.2.2 空氣中化學(xué)有害氣體的影響 次級環(huán)境中，空氣里有害氣體種類有許多，其中有4000余種是可覺察的。目前研究結(jié)果看，影響最大的是NH3和H2S為主要因素，甲基硫醇，三甲胺，硫化甲基等5種。 NH3的來源主要是與實驗動物初級環(huán)境中飼養(yǎng)密度，墊料更換頻率，飼料蛋白質(zhì)成分直接相關(guān)。飲水量也有關(guān)。 氨對實驗動物的主要影響影響的動物種類：主要是大小鼠、豚鼠。影響的主要方面： 對呼吸道的

40、刺激作用。 誘發(fā)某些呼吸道疾病。肺炎支原體感染(50ppm)，中耳炎等。 毒性機理： 損耗細(xì)胞內(nèi)NADH，影響ATP的合成，導(dǎo)致-酮谷酰胺減少三羧酸循環(huán)障礙；谷胺酰胺合成受影響刺激細(xì)胞膜上的ATP酶神經(jīng)細(xì)胞興奮性和活性增強，ATP減少，導(dǎo)致乙酰膽堿合成減少。硫化氫對實驗動物的主要影響影響的動物種類：主要是犬、貓、兔。實驗動物環(huán)境中H2S主要有飼料中含硫物質(zhì)轉(zhuǎn)化而來。犬、貓、猴等靈長類動物環(huán)境中H2S濃度比大小鼠要高。影響的主要方面：對呼吸道及粘膜的刺激作用。植物神經(jīng)功能紊亂。影響氧代謝，能結(jié)合氧化型細(xì)胞色素氧化酶中的三價鐵。缺氧。嚴(yán)重的可造成呼吸中樞麻痹，窒息死亡。(200500ppm)有害物

41、質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn).潔凈度標(biāo)準(zhǔn)：屏障系統(tǒng)350粒/升；隔離系統(tǒng)3.5粒/升。0.5粒徑為標(biāo)準(zhǔn)，每升空氣所含個數(shù)。 屏障ISO7級 隔離ISO5級 90m血瓊脂培養(yǎng)基；落下菌落數(shù)：12.2個；2.45個；0.49個/皿時；開30，37 48h培養(yǎng);NH314mg/m320ppm空氣經(jīng)初、中、高效過濾器.有害氣體標(biāo)準(zhǔn)：氨濃度，mg/m314動態(tài)指標(biāo) 2.3 生物環(huán)境因素對實驗動物與動物實驗結(jié)果的影響生物環(huán)境因素主要包括兩大類.病原微生物體內(nèi)外寄生蟲等非自身因子。這局部內(nèi)容在微生物控制一章專門個紹。.實驗動物自身“心理，群體，行為等因素。這局部內(nèi)容也是最容量被乎視而影響實驗結(jié)果的內(nèi)容。實驗動物的社會因素2.3

42、.1.1 種內(nèi)關(guān)系 實驗動物一旦有2只以上在一起，就形成了動物社會，就會產(chǎn)生動物個體間的優(yōu)劣關(guān)系。實驗動物的社會地位可簡單地分為：直線型(Liner type)：第一位統(tǒng)治第二位(包括以下)第二位統(tǒng)治第3位(含以下)猴、犬、雞、豬屬于此類。(ABCD式)。專制型(despotic type)：首領(lǐng)處于其它動物優(yōu)先地位，首領(lǐng)以下間很少爭斗。 大、小鼠、貓等屬于此類。同一籠內(nèi)飼養(yǎng)雄性大、小鼠時可觀察到。這種社會關(guān)系決定了實驗動物應(yīng)激刺激域的水平。 2.3.1.2 種間的關(guān)系將小鼠與貓置于同一室內(nèi)靠近飼養(yǎng)，小鼠性周期馬上紊亂。 支氣管敗血桿菌引起豚鼠支氣管炎，但兔子那么隱性帶菌，假設(shè)將二者飼養(yǎng)于一室

43、，兔子就很快會發(fā)病。BALB/c系雌性小鼠與同系或異系雄鼠接近，有50%發(fā)生妊娠中止反響。 2.3.1.3 實驗動物與人的關(guān)系 有經(jīng)驗的從事實驗動物管理的工作人員，能從所飼養(yǎng)的實驗動物行為上分析出飼養(yǎng)管理者的性格。認(rèn)真操做與馬虎應(yīng)付的人飼養(yǎng)的動物質(zhì)量有明顯的區(qū)別。 因此，實驗動物與人之間通過飼養(yǎng)管理操做，實驗處理或施加因素處理過程中，對實驗結(jié)果影響很大。有學(xué)者(chance 1956)指出，卵巢重量的變異系數(shù)因籠箱大小、飼養(yǎng)只數(shù)、動物換籠次數(shù)，實驗者出現(xiàn)的次數(shù)而變化。告誡： 與內(nèi)分泌系統(tǒng)循環(huán)系統(tǒng)代謝有關(guān)的血液檢查時，宜在籠箱接觸100秒內(nèi)進(jìn)行完畢。 在動物實驗過程中： 如果不移動籠箱，測定大鼠

44、應(yīng)激與休克反響的血液指標(biāo)無太大影響；但把籠箱移至實驗臺超過1分鐘后再采血、血糖、丙酮酸、乳酸等值都明顯升高、催乳素、甲狀腺、促激素黃體素，促卵泡素，皮質(zhì)類固醇，三碘甲狀腺胺酸，甲狀腺素等值比不移動者增加1.55倍。 不同種屬的哺乳動物個體都是由相同的根本元素構(gòu)成，不同的細(xì)胞、組織、器官，通過各種生理、生化反響的過程，來實現(xiàn)生物的生命過程。 不同種屬生物具有一些相同或相似的生理生化現(xiàn)象，并且種屬越相近，其生命現(xiàn)象也越接近，這是能將實驗動物結(jié)果推論到人的理論根底。 但不同種屬的動物，其組織解剖結(jié)構(gòu)、生化代謝、生理現(xiàn)象又各有特性，對外界化合物的吸收、分布、代謝轉(zhuǎn)化、排泄等不同，因此，實驗結(jié)果也不相同

45、。 據(jù)報道，在154種化合物的毒性試驗中，小鼠敏感者38種，家兔敏感者28種，狗敏感者44種。 一般認(rèn)為，人對毒物作用的敏感比動物高，在260種化合物的人與動物比較中，90%的毒物對人的致死劑量均低于實驗動物(相差110倍)，有30%竟相差25450倍。 不同動物對毒物反響性出現(xiàn)差異的原因是多方面的，主要是由于在組織解剖、生理、生化和遺傳等方面的差異而導(dǎo)致毒物的吸收、分布、代謝轉(zhuǎn)化的不同，最后引起對毒物反響性的不同。 生理上的差異 各種動物的脈率(次P分)隨體重增加而減低：小鼠600、大鼠352、豚鼠290、貓240、家兔251、狗120、羊43、馬38。小鼠心臟每分鐘輸出量與總血量之比高于人

46、20倍。 因此，毒物從血漿去除的半量期，小鼠較人短，相同劑量的毒物對人體組織的作用時間要比小鼠長。代謝酶的差異 不同種屬動物體內(nèi)酶的種類和活性不同，引起外源化合物在體內(nèi)代謝的途徑、代謝的速度、代謝的性質(zhì)(激活或滅活)等方面也不同。有實驗證明：不同品系雄性小鼠暴露于同一濃度氯仿蒸氣中，其死亡情況不同，DBA2品系死亡率75%，DBA為51%，C3H為32%，BALB/C為10%。 造成不同品系動物間這種差異的一個重要原因是由于它們體內(nèi)代謝酶有較大差異。 另外，不同品系動物的自發(fā)性腫瘤發(fā)生率和自發(fā)性畸胎的發(fā)生率是不同的。 毒物排出速度的差異 主要表現(xiàn)在同一外源化合物在不同動物體內(nèi)的生物半量期不同。

47、因此，化合物對機體的靶器官(組織)的作用時間就不同。例如，保泰松在人體的生物半量期為72h，但狗為6h，兔僅為3h。實驗動物的個體差異 實驗動物對外源性化合物的反響具有明顯的個體差異，這與實驗動物機體的健康狀態(tài)、年齡、性別、營養(yǎng)狀況有關(guān)。 據(jù)對149種毒物對雌雄小鼠、大鼠LD50之比值分析，可見雌性動物較雄性敏感，但差異不大，一般不超過2倍，而對不同年齡段實驗動物毒反響的結(jié)果說明，成年動物與新生動物的LD50比值可介于0.00216之間。 一般認(rèn)為，幼年動物比成年動物敏感，特別是與中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腎功能、血腦屏障作用以及血漿蛋白結(jié)合有關(guān)的外源性化合物，新生動物與成年動物的毒反響差異更明顯。老年動

48、物的代謝功能低，反響不敏感。 2.4 設(shè)施環(huán)境因素對實驗動物與動物實驗結(jié)果的影響設(shè)施環(huán)境因素對非實驗動物專業(yè)人員而言，不太重要，但是其中籠架具和墊料對實驗動物的影響應(yīng)有所了解。 2.4.1 籠具對實驗動物的影響 飼養(yǎng)用籠具的材質(zhì)和構(gòu)造對小鼠和大鼠的實驗結(jié)果發(fā)生影響。CCl4實驗中，鐵絲籠組比玻璃缸組體重大，肝功與組織學(xué)檢查變化小。 用嗎啡、戊巴比妥致大鼠死亡實驗中，鐵絲網(wǎng)底組比木板底組低。 裸鼠的攝食量，鐵絲籠網(wǎng)底組比塑料籠組增加17%。 長期使用創(chuàng)花做墊料的大小鼠 自然發(fā)生組織腫瘤比率比非刨花組高出35倍。 谷上等人把Wistar大鼠雌雄各25只分別用金屬絲籠和塑料籠飼養(yǎng)(4周24月齡)，死

49、亡率以塑料籠組為高，肝和腎腫大，血清膽固醇和磷脂水平均高出許多。目前，墊料的處理已采用高壓滅菌或Co60照射滅菌，減輕了影響。 常用實驗動物籠具簡介隔離器層流架代謝籠不銹鋼籠架具屏障系統(tǒng)隔離器隔離器模式圖負(fù)壓隔離器普通隔離器大規(guī)模生產(chǎn)隔離器群屏障系統(tǒng)雙扇模式給籠具提供高達(dá) 70 到80 ACH 的經(jīng)HEPA 過濾的凈氣，經(jīng)HEPA 過濾的排氣直接排入室內(nèi)或者通過套管排入建筑的排氣系統(tǒng)?；\子安靜快捷地安放到籠架上。一個主機可以帶 3-4 個單面架或者2 個雙面架。IVC連接建筑系統(tǒng)模式籠架排氣經(jīng)由一個套管連接至建筑排氣系統(tǒng)套管連接的作用在于抵消建筑排氣系統(tǒng)不穩(wěn)定的靜態(tài)壓力造成的影響至建筑排氣系統(tǒng)

50、套管房間空氣IVC籠架SLIM主機排氣管供氣管層流架層流架示意圖代謝籠鋼籠架具2.5 管理環(huán)境因素對實驗動物與動物實驗結(jié)果的影響2.5.1 居住因素的影響飼養(yǎng)方式圈養(yǎng)方式 欄圈式 運動場式 合并式 籠架具式 籠架式 托盤式 墊料式吊架式 架掛式 壁掛式 水洗方法 簡易式 自動沖水式人工控制環(huán)境方式 屏障式 隔離式. 2.5.2 飼養(yǎng)密度A=N(0.7W+6W)A=籠箱面積，N=飼養(yǎng)只數(shù)，W=小鼠體重實驗動物的飼養(yǎng)密度影響到內(nèi)分泌系統(tǒng)的功能。(1)有資料說明： 飼養(yǎng)密度越大，飼料回報率就越低，同時腸道內(nèi)需氧菌(葡萄等球菌、鏈球菌、腸桿菌、棒狀桿菌)中有一至兩種增加，厭氧菌(消化球菌、類桿菌的)有

51、所增加。(2)用AK小鼠研究白血病與密度關(guān)系時發(fā)現(xiàn)： 單方飼養(yǎng)組生存時間比群居組短。這是由于群居小鼠使皮質(zhì)酮分泌增加的結(jié)果。由此可知，飼養(yǎng)密度能引起不同的動物反映，但不能下結(jié)論單個飼養(yǎng)優(yōu)/劣于群體飼養(yǎng)。因?qū)嶒災(zāi)康牟煌?，故寫報告時，必須寫清飼養(yǎng)只數(shù)/籠。 2.5.3 操作步驟的影響 實驗動物與人的關(guān)系在前面已經(jīng)介紹過，能夠引起實驗結(jié)果的盡管已成為不爭的事實，因此，建立一個良好的實驗、飼育操做步驟就極為重要。這也是在長期的飼育和實驗過程中積累的經(jīng)驗的總結(jié)。 良好的實驗室操做標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程度：大家熟知GLP(Good laboratory Practice)和SOP(Standard Operati

52、ng Procedure)就都是目前國際上近幾年所暢導(dǎo)的或者說必須執(zhí)行的良好的實驗操作。染毒途徑 染毒途徑不同，毒物的分布和吸收速度也不同。 吸收多、吸收快，作用反響也大和快，染毒途徑的吸收速度依次是：靜脈吸收呼吸道吸收腹腔注射肌內(nèi)注射皮下注射皮內(nèi)注射經(jīng)消化道吸收皮膚涂布吸收。如：敵百蟲小鼠 經(jīng)口LD50為： 400600mg/kg， 經(jīng)皮下注射LD50為：100300mg/kg， 經(jīng)皮涂布LD50為： 17001900mg/kg。 另外，毒物進(jìn)入體內(nèi)途徑不同，經(jīng)過和首先到達(dá)的器官和組織不同，盡管給藥劑量相等，而表現(xiàn)出的毒性反響在性質(zhì)和程度上都差異很大。 如經(jīng)口給予NaNO3在腸道細(xì)菌作用下，

53、復(fù)原為亞硝酸鹽，可引起高鐵血紅蛋白血癥，而靜脈注射那么沒有這種毒效應(yīng)。 染毒時機和方式 給實驗動物空腹染毒比胃內(nèi)充盈時染毒毒物吸收較快，一定劑量的毒物混于飼料中喂飼，要比灌胃毒效反響慢、輕。 相同劑量的毒物在一天內(nèi)屢次給予，比集中在短時間內(nèi)一次給予時血中的濃度低得多，因此毒反響程度也輕。毒物的溶劑、助溶劑 在動物實驗中，需要使用溶劑、助溶劑或賦形劑，將被檢物質(zhì)配成一定劑形后給予實驗動物，某些溶劑、助溶劑可以影響毒物的毒性。 如以乙醇作溶劑，小鼠皮下注射計算毒物的LD50時，乙醇本身對小鼠有毒作用，對照組動物注射0.5ml純乙醇后亦全部死亡。 有些溶劑與被檢物發(fā)生化學(xué)反響，有可能改變被檢物的毒性

54、，或可能加速，減緩或阻礙毒物吸收、排泄而影響毒性反響結(jié)果。 用蒸餾水與花生油二種溶劑浸泡啤酒花顆粒2個小時，用其濾液測定小鼠經(jīng)口給藥的LD50，結(jié)果水溶劑的LD50值為40006000mg/kg，而花生油溶劑的LD50為200500mg/kg，相差10倍以上。給予毒物的濃度與體積 在動物實驗中，最大一次給予量因動物而異，經(jīng)口給予一般為體重的1%2%，靜脈注射鼠類為0.10.5ml，較大動物為2ml，皮下、肌內(nèi)注入體積較大時，應(yīng)把總量分成幾份，注射在幾個部位。 體積過大，會引起胃腸功能紊亂，甚至死亡。相同劑量的毒物，由于稀釋度不同，也可造成毒性的差異，一般認(rèn)為濃溶液較稀溶液吸收快，毒作用強。麻醉

55、深度 動物實驗中要求麻醉深度要適度，而且在整個實驗過程中要保持始終恒定。因此應(yīng)區(qū)分實驗要求和動物品種系而用不同麻醉劑，不能亂用麻醉劑。 麻醉過深：動物處于深度抑制，甚至瀕死狀態(tài)，動物各種正常反響受到抑制，那是不能做出可靠的實驗結(jié)果的。 麻醉過淺：在動物身上進(jìn)行手術(shù)或?qū)嶒灒瑢饛娏业奶弁创碳?，使動物全身，特別是呼吸、循環(huán)功能發(fā)生改變，消化功能也會發(fā)生改變，如疼痛刺激會反射性的長時間中止胰腺的分泌，所以麻醉深度必須適宜。 在整個實驗中保持麻醉深度的始終一致是如何必要了，因為麻醉深度的變動，會使實驗結(jié)果產(chǎn)生前后不一致的變化，給實驗結(jié)果帶來了難以分析的誤差。手術(shù)技巧 動物實驗中除了要注意選擇適宜的

56、實驗動物，所用試劑要純粹，儀器要靈敏，方法要準(zhǔn)確外，還必須注意手術(shù)技巧，即操作技術(shù)的熟練。 手術(shù)熟練可以減少對動物的刺激，動物所受創(chuàng)傷、出血等就少，將會提高實驗成功和實驗結(jié)果的正確性。 要到達(dá)動物手術(shù)操作熟練，必須要了解各種動物的特征，組織、器官的位置，神經(jīng)、血管的走行特點，通過在動物身上反復(fù)實踐，即可到達(dá)熟中生巧、操作自如。實驗藥物給藥的途徑、劑型和劑量 如有的激素在肝臟內(nèi)破壞，經(jīng)口給藥就會影響其效果。 有些中藥用粗制劑靜脈注射，因其成分復(fù)雜，如含有鉀離子，可以有降血壓作用，假設(shè)把這種非特異性降壓作用解釋為特殊性療效就不恰當(dāng)。這類實驗結(jié)果如果用口服或由十二指腸給藥就可鑒別出來。 也有些中藥成

57、分在消化道破壞或不被吸收。如枳實中的升壓有效成分，對羥福林和N 甲基酪胺只是在靜脈注射時才有療效。 有些中藥含有大量鞣質(zhì)，體外試驗in vitrotest有抗菌作用，但在體內(nèi)不被消化道吸收，那么沒有抗菌作用。 給藥的次數(shù)： 如雌三醇與細(xì)胞核內(nèi)物質(zhì)結(jié)合的時間非常短，每天一次給藥的效果就比較弱，如將一天劑量分為八次給藥，那么效果將大大加強。 藥物的濃度和劑量： 太高的濃度，太大的劑量都會得出錯誤的結(jié)果。如有用12LD 50 腹腔注射某藥物后動物活動減少，就認(rèn)為該藥有鎮(zhèn)靜作用，實際上12LD 50 的劑量已近中毒量，這時動物活動減少，不能認(rèn)為是鎮(zhèn)靜的作用。 在動物實驗中常遇到的問題是動物和人的劑量換

58、算。假設(shè)按體重把人的用量換算給動物那么劑量太小，做實驗常得出無效的結(jié)論，或按動物體重?fù)Q算給人那么劑量太大。動物和人用藥劑量換算以體外表積計算比以體重?fù)Q算好一些，但仍需慎重處理。動物和人用藥劑量換算方法可參考第九篇。2.6 營養(yǎng)因素對實驗動物與動物實驗結(jié)果的影響 做為實驗動物的營養(yǎng)因素是指能滿足動物維持正常生長的繁殖所需的各種養(yǎng)分的基因條件。具體地說就是指實驗動物每天所攝入的能量(蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)、維生素等的需要)。 做為研究營養(yǎng)因素對實驗動物的影響角度，學(xué)時數(shù)限制我們對實驗動物飼料的根底知識僅做為了解，各種動物的營養(yǎng)需要，我們也要求大家做為了解。但要求對營養(yǎng)因素對動物實驗結(jié)果的影響必須掌握。2.

59、6.1 目前使用的實驗動物飼料的類型顆粒飼料： 具有一定硬度的營養(yǎng)全價的顆粒狀飼料。大小鼠、兔、地鼠等實驗動物用。膨化飼料： 用膨化法加工的全價飼料，犬、貓、豬、靈長類等實驗動物常用。精制飼料： 具有特殊營養(yǎng)成分的粉狀飼料。有些特殊規(guī)定化學(xué)成分的飼料，我用于營養(yǎng)學(xué)研究。3實驗動物環(huán)境應(yīng)激3.1 應(yīng)激的根本概念 過度的環(huán)境刺激和精神壓力對實驗動物造成生理的行為的緊張狀態(tài)。或者說：當(dāng)實驗動物為克服環(huán)境的不利影響，必須在生理上，行為上作為異常的或極端的調(diào)整時的反響。 凡能引起機體，呈現(xiàn)非特異緊張狀態(tài)的環(huán)境刺激或致緊張因素，稱其為應(yīng)激源(Stressor)。實驗動物的應(yīng)激反響與環(huán)境系統(tǒng)是密不可分而相互

60、依存的關(guān)系、應(yīng)激源主要有六大領(lǐng)域，在此不做重復(fù)。應(yīng)激反響 1、應(yīng)激反響的概念，及定義的根本特點。 2、應(yīng)激反響時機體神經(jīng)、內(nèi)分泌變化、血液、循環(huán)系統(tǒng)的變化。 3、應(yīng)激反響時機能代謝、腎上腺、消化道的變化。應(yīng)激反響概念一、應(yīng)激的概念 應(yīng)激反響應(yīng)激機體在受到各種內(nèi)外環(huán)境因素刺激時所出現(xiàn)的非特異性全身反響。stress 應(yīng)激反響對各種刺激的非特異反響。stress response 應(yīng)激反響是指機體在受到各種內(nèi)外環(huán)境因素刺激時所出現(xiàn)的非特異性全身反響。任何刺激，只要到達(dá)一定程度，除了引起與刺激因素直接相關(guān)的特異性變化外，還可引起一組與刺激因素的性質(zhì)無關(guān)的全身性非特異反響。如溫度、噪音、毒物等 二、類