《工業(yè)微生物學》試題（含答案）

1、 微 生 物 學 學期考試題 1(參考答案附后)一、 填空題 (每題 2.5 分，共 25 分)微生物是指的一群最低等生物。微生物主要包括等五大類,其主要特性是(l)(2)(3)(4)。細菌細胞壁的主要成分是，它是由聚合而成的大分子化合物,其構造是由構成骨架,接在上，相鄰的短肽穿插相聯(lián)而形成。原核生物的細胞核比較原始簡潔， 沒有包住，不具，故稱擬核,它實際上是一條很長的環(huán)狀構造,其功能是。噬菌體是病毒，它是一種大分子微生物,其生長生殖過程可分為五個步驟。微生物的四大養(yǎng)分類型是。微生物的養(yǎng)分五要素是。從自然界中分別篩選菌種一般可分為四個步驟。養(yǎng)分缺陷型的選育過程一般可分為等等六個步驟。稱為根本培

2、育基。稱為完全培育基?；瘜W誘變劑按其作用方式可分為等四大類。紫外線(uv)是誘變劑, 它引起 DNA 構造轉變的形式主要有常用的六種菌種保藏方法是。二、 名詞解釋 (每題分，共 18 分).革蘭氏染色法2.巴斯德消毒法3.養(yǎng)分缺陷型4. 溶源性細菌5.活性污泥6.生物傳感器三、問題解答 (共 57 分)l.何謂大腸菌群? 簡述食品中大腸菌群數(shù)的測定方法。(6 分)現(xiàn)有一培育基配方如下: 可溶性淀粉 5%、 蛋白胨 1.5%、磷酸二氫鉀 0.5%、硫酸鎂 0.1%、瓊脂 2%, pH5.0,試答復以下問題: (l)按養(yǎng)分物質來源分類, 屬何種類型培育基? 為什么?(2)此培育基適于培育哪類微生物

3、?為什么?(3)簡述配制 200ml 該斜面培育基的操作過程。 (7 分)現(xiàn)擬從自然界中分別篩選出-淀粉酶產量較高的枯草芽抱桿菌,試答復以下問題: (l)你認為應當?shù)绞裁吹胤讲杉司臉悠份^為適宜?(2)進展純種分別時,為提高效率,依據(jù)該菌的何種特性可承受哪些相應的措施?(3)可承受哪些純種分別方法?(4)在進展性能測定時, 可承受何種簡化的初篩方法? (7 分)對于分支合成途徑, 怎樣才能積存大量的末端產物?試以簡圖表示并說明之。(4 分)什么是活菌計數(shù)法?現(xiàn)有一細菌菌液,其中的活菌數(shù)約為104105 個/ml,如何計算出其準確活菌數(shù)?試用簡圖表示并說明之。(7 分)在進展誘變育種時,對菌

4、懸液的制備有什么要求?經誘變處理后的菌液為什么要進展中間增殖培育?(6 分)簡述高壓蒸汽滅菌和干熱滅菌的方法及其操作要點或留意事項。(5 分)畫出曲霉和根霉的形態(tài)簡圖并標明各局部的名稱。(5 分)什么是細菌生長曲線？可分為哪幾個階段？各有什么特點？(5 分)什么是基因工程？簡述基因工程的主要操作步驟。(5 分) 微 生 物 學 學期考試題 1參 考 答 案一、填空題 (每題 2.5 分，共 25 分)微生物是指 全部形體微小，單細胞 或 構造簡潔的多細胞，或沒有細胞構造的一群最低等生物。工業(yè)微生物主要包括 細菌、放線菌、酵母菌、霉菌、噬菌體 等五大類, 其主要特性是(l) 種類多 (2) 分布

5、廣(3) 生殖快(4) 代謝強(5) 易變異 。細菌細胞壁的主要成分是 肽聚糖，它是由很多肽聚糖單體聚合而成的大分子化合物,其構造是由N乙酰葡萄糖胺 與N乙酰胞壁酸 重復交替連接 構成骨架,短肽 接在N乙酰胞壁酸 上，相鄰的短肽穿插相聯(lián)而形成致密的多層網(wǎng)狀構造 。原核生物的細胞核比較原始簡潔， 沒有 核膜包住，不具 核仁和典型染色體 ，故稱擬核,它實際上是一條很長的環(huán)狀 雙鏈DNA 與少量類組蛋白及RNA 結合, 經有組織地高度壓縮纏繞而成的一團絲狀 構造, 其功能是起貯存遺傳信息 和 傳遞遺傳性狀的作用。噬菌體是侵染原核生物(細菌、放線菌和藍細菌)的 病毒，它是一種 超顯微的，沒有細胞構造的

6、，專性活細胞寄生的 大分子微生物, 其生長生殖過程可分為 吸附、侵入、增殖、成熟、裂解五個階段。微生物的四大養(yǎng)分類型是 光能自養(yǎng)型、光能異養(yǎng)型、化能自養(yǎng)型、化能異養(yǎng)型。微生物的養(yǎng)分五要素是水、碳源、氮源、無機鹽和生長因子。從自然界中分別篩選菌種一般可分為樣品采集、增殖培育、純種分別、性能測定 等四個步驟。養(yǎng)分缺陷型的選育過程一般可分為誘變、中間培育、淘汰野生型、養(yǎng)分缺陷型檢出、養(yǎng)分缺陷型鑒定、變異株的篩選 等六個步驟。能夠滿足野生型菌株生長要求的最低成分合成培育基 稱為根本培育基。 能夠滿足各種養(yǎng)分缺陷型菌株生長要求的培育基 稱為完全培育基?；瘜W誘變劑按其作用方式可分為 自然堿基類似物、烷基化

7、劑、移碼誘變劑、亞硝酸 等四大類。 紫外線(uv)是 物理 誘變劑,它引起 DNA 構造轉變的形式主要有 氫鍵斷裂、DNA 鏈斷裂、水合作用、T 二聚體形成。常用的六種菌種保藏方法是 斜面冰箱保藏法、石蠟油封藏法、麩曲保藏法、砂土管保藏法、甘油低溫保藏法、凍干法。二、名詞解釋 (每題分，共 18 分).革蘭氏染色法一種重要的細菌鑒別染色法。該染色法的步驟是：1先用結晶紫液初染；2再用碘液媒染與結晶紫形成不溶于水的復合物；3接著用 95%乙醇進展脫色；4最終再用番紅沙黃液復染。經過這種染色方法可以將全部細菌根本上區(qū)分為兩大類：革氏陽性細菌被染上紫色，革氏陰性細菌被染上紅色。巴斯德消毒法一種低溫消

8、毒法，具體的處理溫度和時間各有不同，一般在 6085下處理 15s 至 30min。用于牛奶、啤酒、果酒和醬油等不宜進展高溫滅菌的液體的消毒方法，主要目的是殺死其中無芽孢的病原菌，而又不影響它們的風味。養(yǎng)分缺陷型 是指在某些養(yǎng)分物質(如氨基酸、核苷酸、維生素等)的合成力量上消滅缺陷，必需在培育基中外加這些養(yǎng)分成分才能正常生長的變異菌株。溶源性細菌受到溫存噬菌體侵染而帶有原噬菌體卻又沒有形態(tài)上可見到的噬菌體粒子的宿主菌，稱為溶源性細菌，簡稱溶源菌?；钚晕勰嗍怯晌鬯猩车暮脷庑晕⑸锶后w組成的絮狀污泥，具有很強的吸咐、分散和氧化分解污水中有機物質和其它物質的力量。生物傳感器生物傳感器是一種利用生

9、物活性物質的分子識別力量, 選擇性地識別和測定各種生物化學物質的傳感器。它是分析生物學與傳感器技術穿插的產物。三、問題解答 (共 57 分)l.何謂大腸菌群? 簡述食品中大腸菌群數(shù)的測定方法。(6 分)大腸菌群是指一群在 37、24 小時內能發(fā)酵乳糖、產酸產氣、需氧或兼性需氧, 革蘭氏陰性、無芽孢的桿狀細菌。主要包括大腸桿菌、產氣桿菌和一些中間類型的桿菌。檢測大腸菌群的方法有多管發(fā)酵法與濾膜法兩種:多管發(fā)酵法又稱水的標準分析方法,大多數(shù)衛(wèi)生單位與水廠均普遍承受此法。多管發(fā)酵法檢測食品中大腸菌群數(shù)的操作過程為：(l) 培育基的制備, (2) 食品檢樣稀釋, (3) 乳糖初發(fā)酵試驗, (4) 平板

10、分別培育, (5) 證明試驗, (6) 報告MPN (大腸菌群的最可能數(shù))。濾膜法是一種快速的測定方法 , 其結果重復性較好, 又能測定較大體積的水樣, 目前巳有很多供水公司承受此法。其檢測程序為： 濾膜洗滌滅菌 濾膜過濾器安裝 加水樣抽濾 移濾膜貼于培育基上 培育與計數(shù)?，F(xiàn)有一培育基配方如下:可溶性淀粉 5%、蛋白胨 1.5%、磷酸二氫鉀 0.5%、硫酸鎂 0.1%、瓊脂 2%, pH5.0,試答復以下問題: (l)按養(yǎng)分物質來源分類, 屬何種類型培育基? 為什么?(2)此培育基適于培育哪類微生物?為什么?(3)簡述配制 200ml 該斜面培育基的操作過程。 (7 分)屬半合成培育基。 因培

11、育基中，一局部承受自然材料，另一局部用的化學藥品組成。此培育基適于培育霉菌。因 pH5.0 適于培育霉菌和酵母菌, 但酵母菌不能直接利用可溶性淀粉為碳源。操作過程：準確稱量可溶性淀粉 10g、蛋白胨 3g、 磷酸二氫鉀 1g、硫酸鎂 0.2g、瓊脂 4g 于 500ml 燒杯中 參加 200ml 水溶解 調整 pH5.0 加熱融解 補足水分 分裝試管 滅菌 擺斜面?，F(xiàn)擬從自然界中分別篩選出-淀粉酶產量較高的枯草芽抱桿菌,試答復以下問題: (l)你認為應當?shù)绞裁吹胤讲杉司臉悠份^為適宜?(2)進展純種分別時,為提高效率,依據(jù)該菌的何種特性可承受哪些相應的措施?(3)可承受哪些純種分別方法?(

12、4)在進展性能測定時, 可承受何種簡化的初篩方法? (7 分)(l) 應當?shù)礁缓矸圪|的地方采集含此菌的樣品。依據(jù)該菌的耐熱特性可承受將含菌樣品加熱80 處理10min 后，殺死不耐熱雜菌, 再進展純種分別的相應措施?？沙惺軇澗€分別、稀釋分別、刮棒連續(xù)涂布等純種分別方法。可承受平皿淀粉透亮圈法進展初篩。對于分支合成途徑, 怎樣才能積存大量的末端產物?試以簡圖表示并說明之。(4 分)對于分支合成途徑, 為了獲得大量某末端產物, 可選育抗該末端產物類似物的養(yǎng)分缺陷型突變菌株。如以下圖分支途徑，假設要獲得高產的 G，可選育：缺失酶C 的D 養(yǎng)分缺陷型(匯流)；抗G 的構造類似物G,的突變株(消退反響

13、調控)。什么是活菌計數(shù)法?現(xiàn)有一細菌菌液,其中的活菌數(shù)約為104105 個/ml,如何計算出其準確活菌數(shù)?試用簡圖表示并說明之。(7 分)將待測含菌樣品經適當稀釋 , 使其中的微生物充分分散成單個細胞, 然后取肯定量的稀釋樣品液, 接種到平板上。經過肯定時間培育后, 由每個單細胞生長生殖而形成肉眼可見的單菌落, 即一個單菌落應代表原樣品中的一個活菌。最終統(tǒng)計菌落數(shù), 依據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣量, 換算出單位樣品中所含的活菌數(shù)。要計算出活菌數(shù)約為 104105 個/ml 細菌菌液的準確活菌數(shù), 可參照以下圖自行圖示。在進展誘變育種時, 對菌懸液的制備有什么要求?經誘變處理后的菌液為什么要進展中間增殖

14、培育?(6 分)誘變育種要求所處理的細胞必需是處于對數(shù)生長期同步生長的細胞，并且是均勻分散狀態(tài)的單細胞懸液。首先是細胞的生理狀態(tài)對誘變處理也會產生很大的影響，如細菌在對數(shù)期誘變處理效果較好； 霉菌或放線菌的分生孢子一般都處于休眠狀態(tài)，所以培育時間的長短對孢子影響不大，但稍加萌發(fā)后的孢子則可提高誘變效率。 其次是分散狀態(tài)的細胞可以均勻地接觸誘變劑，又可避開長出不純菌落。由于在很多微生物的細胞內同時含有幾個核，所以即使用單細胞懸浮液處理，還是簡潔消滅不純的菌落。假設誘變劑產生的突變只在DNA 雙鏈中的某一條單鏈，故該突變無法反映在當代的表型上。只經過DNA 的復制和細胞分裂，表型才會發(fā)生變異，消滅

15、不純菌落，這就叫表型延遲。不純菌落的存在，也是誘變育種工作中初分別的菌株經傳代后很快消滅生產性狀“衰退”的主要緣由。因此，經誘變處理后的菌液要經數(shù)小時的中間增殖培育后，再進展分別，可避開長出不純菌落。簡述加壓蒸汽滅菌和干熱滅菌的方法及其操作要點或留意事項。(5 分)加壓蒸汽滅菌法： 將待滅菌的物件放置在盛有適量水的加壓蒸汽滅菌鍋或家用壓力鍋內，把鍋內的水加熱煮沸，并把其中原有的空氣徹底放盡后將鍋密閉，再連續(xù)加熱就會使鍋內的蒸汽壓漸漸上升。為到達良好的滅菌效果，一般要求溫度應到達 121壓力為98kPa，時間維持 1520min。干熱滅菌法： 將金屬制品或清潔玻璃、陶瓷器皿放入電熱烘箱內，在 1

16、50170下維持 12h 后，即可到達徹底滅菌的目的。在這種條件下，可使細胞膜破壞、蛋白質變性、原生質枯燥，以及各種細胞成分發(fā)生氧化。留意滅菌過程勿翻開電熱烘箱門。畫出曲霉和根霉的形態(tài)簡圖并標明各局部的名稱。(5 分)參照其次章第四節(jié)霉菌中圖 246 根霉 和 圖 248 曲霉 繪圖。什么是細菌生長曲線？可分為哪幾個階段？各有什么特點？(5 分)將細菌接入肯定量的液體培育基中，置適溫下培育，每隔肯定時間，取樣測其活菌數(shù)。以培育時間為橫座標，以活菌數(shù)的對數(shù)為縱座標，繪制而成的曲線稱細菌生長曲線。依據(jù)細菌生長速率常數(shù)的不同，一般可把細菌的典型生長曲線粗分為延遲期、對數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期等四個時期。延遲期的微生物 菌體內物質量顯著增長，菌體體積增大；代謝活潑, 細胞生長速度漸漸加快；對外界