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1、第PAGE18頁共NUMPAGES18頁2022年微生物學(xué)重點(diǎn)總結(jié)標(biāo)準(zhǔn)微生物學(xué)第一章緒論1、微生物學(xué)。一般定義為研究肉眼難以看見的稱之為微生物的生命活動的科學(xué)。2、微生物的發(fā)現(xiàn)。第一個看見并描述微生物的人是荷蘭商人安東列文虎克。3、微生物學(xué)發(fā)展的奠基者及其貢獻(xiàn)法國的巴斯德。1徹底否定了“自生說”;2免疫學(xué)預(yù)防接種;3證實(shí)發(fā)酵是由微生物引起;4創(chuàng)立巴斯德消毒法。德國的科赫。1證實(shí)了_病菌是_病的病原菌;2發(fā)現(xiàn)肺炎結(jié)核病的病原菌;3提出證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則科赫原則。4、微生物的特點(diǎn):個體小、結(jié)構(gòu)簡、胃口大、食譜廣、繁殖快、易培養(yǎng)、數(shù)量大、分布廣、種類多、變異易、抗性強(qiáng)。第二
2、章微生物的純培養(yǎng)和顯微技術(shù)1、無菌技術(shù):在分離、轉(zhuǎn)接、及培養(yǎng)純培養(yǎng)物時防止被其他微生物污染,其自身也不污染操作環(huán)境的技術(shù)。2、菌落:分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到一定程度形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體。3、選擇培養(yǎng)。選擇平板培養(yǎng)、富集培養(yǎng)。4、古生菌。是一個在進(jìn)化途徑上很早就與真細(xì)胞和真核生物相互獨(dú)立的生物類群。主要包括一些獨(dú)特的生態(tài)類型的原核生物。5、真菌。霉菌(菌體由分枝或不分枝的菌絲構(gòu)成)、酵母菌(一群單細(xì)胞真核微生物)。6、用固體培養(yǎng)基獲得微生物純培養(yǎng)方法:1涂布平板法:(菌落通常只在平板表面生長)將一定量的某一稀釋度的樣品懸液滴加在已倒好的平板表面,
3、再用無菌涂布棒涂布均勻,經(jīng)培養(yǎng)后挑取單個菌落。特點(diǎn)。使用較多的常規(guī)方法,但有時涂布不均勻。2稀釋倒平板法:(細(xì)菌菌落出現(xiàn)在平板表面及內(nèi)部)取一定稀釋度的樣品與熔化的瓊脂培養(yǎng)基混合,搖勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中保溫培養(yǎng)。缺點(diǎn):操作較麻煩,對好氧菌、熱敏感菌效果不好。3平板劃線法4稀釋搖管法第三章微生物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能1、原核生物與真核生物的異同點(diǎn):原核微生物真核微生物細(xì)胞壁除少數(shù)外都有肽聚糖無肽聚糖細(xì)胞膜一般無固醇常有固醇內(nèi)膜簡單,有間體復(fù)雜,有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器只有核糖體有很多種核糖體70s(50s30s)80s(60s40s)線粒體葉綠體中的70s細(xì)胞核擬核,無核膜、無核仁,無成有核膜、核仁,有多條染
4、色體,dna與形染色體,dna不與rna和組rna和組蛋白結(jié)合,有有絲分裂蛋白結(jié)合,無有絲分裂大小直徑通常小于2微米直徑在2-100微米之間2、革蘭氏陰陽性菌的特點(diǎn)。革蘭氏陽性菌的細(xì)胞壁是一層厚而致密的肽聚糖和磷壁酸。肽聚糖的肽鏈之間通過_個甘氨酸交聯(lián)著。革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁則是多層結(jié)構(gòu),最外一層是薄薄的肽聚糖層,肽鏈?zhǔn)侵苯咏宦?lián)在一起的。細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的不同,決定了兩類細(xì)菌革蘭氏染色結(jié)果(陽性紫色陰性紅色)和對不同類抗生素敏感性的不同。3、缺壁細(xì)菌l型細(xì)菌。專指那些實(shí)驗(yàn)室或宿主體內(nèi)自發(fā)突變形成的遺傳性穩(wěn)定的缺壁菌株。原生質(zhì)體:人為溶菌酶除盡壁或青霉屬抑制新壁合成,一般由革蘭氏陽性菌組成。球狀體:人
5、工去除部分壁而形成的,一般由革蘭氏陰性菌組成。支原體。在自然界長期進(jìn)化中形成的,細(xì)胞膜中含有一般原核生物沒有的甾醇。實(shí)踐意義。原生質(zhì)體或球狀體比正常有細(xì)胞壁的細(xì)菌更易導(dǎo)入外源遺傳物質(zhì),故是研究遺傳規(guī)律和進(jìn)行原生質(zhì)體融合育種的良好實(shí)驗(yàn)材料。4、芽孢:某些細(xì)菌在其生長發(fā)育后期,在細(xì)胞內(nèi)形成一個圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性極強(qiáng)的休眠體。壁厚,折光性強(qiáng)(不易著色);代謝活性低(酶含量少,抗不良環(huán)境);抗熱性強(qiáng)(含吡叮二羧酸鈣);耐干燥和化學(xué)藥物;條件適宜可萌發(fā);5、革蘭氏染色的機(jī)制:革蘭陽性細(xì)菌的肽聚糖層較厚,經(jīng)乙醇處理后使之發(fā)生脫水作用而使孔徑縮小,結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物保留在細(xì)胞內(nèi)而不被脫色
6、;而革蘭陰性細(xì)菌的肽聚糖層很薄,脂肪含量高,經(jīng)乙醇處理后部分細(xì)胞壁可能被溶解并改變其_狀態(tài),細(xì)胞壁孔徑大,不能阻止溶劑透入,因而將結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物洗去而被脫色。方法。涂片干燥熱固定染色(初染、媒染、脫色、復(fù)染四步)水洗干燥。6、滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說是如何解釋芽孢耐熱機(jī)制的。_答。芽孢的耐熱性在于芽孢衣對多價陽離子和水分的滲透性很差和皮層的陽離子很高,從而使皮層產(chǎn)生很高的滲透壓去奪取芽孢中的水分,其結(jié)果造成皮層的充分膨脹,而核心部分的細(xì)胞質(zhì)卻變得高度失水,因此,導(dǎo)致核心具極強(qiáng)的耐熱性。第四章微生物的營養(yǎng)1、營養(yǎng)物質(zhì)。能夠滿足微生物機(jī)體生長、繁殖和完成各項(xiàng)生理活動所需的物質(zhì)。2、營養(yǎng)元素。碳源、
7、氮源、能源、無機(jī)鹽、生長因子、水。3、營養(yǎng)缺陷型:某些菌株發(fā)生突變,失去合成對該菌株生長必不可少的物質(zhì)的能力,必須從外界環(huán)境獲得該物質(zhì)才能生長繁殖,這種突變型菌株稱為營養(yǎng)缺陷型。4、培養(yǎng)基種類、四大微生物的常用培養(yǎng)基第五章微生物的代謝1、發(fā)酵:微生物細(xì)胞將有機(jī)物氧化釋放的電子直接交給底物本身未完全氧化的某種中間產(chǎn)物,同時釋放能量并產(chǎn)生各種不同的代謝產(chǎn)物的過程叫做發(fā)酵。2、呼吸作用與發(fā)酵作用的根本區(qū)別:電子載體不是將電子直接傳遞給底物降解的中間產(chǎn)物,而是交給電子傳遞系統(tǒng),逐步釋放出能量后再交給最終電子受體。第六章微生物的生長繁殖及其控制_1、細(xì)菌生長曲線:以細(xì)菌培養(yǎng)時間為橫坐標(biāo),以細(xì)菌數(shù)目對數(shù)或
8、生長速率為縱坐標(biāo),由此得到的曲線為生長曲線。2、各時期特點(diǎn):遲緩期。又叫調(diào)整期。細(xì)菌接種至培養(yǎng)基后,對新環(huán)境有一個短暫適應(yīng)過程(不適應(yīng)者可因轉(zhuǎn)種而死亡)。此期曲線平坦穩(wěn)定,因?yàn)榧?xì)菌繁殖極少。對數(shù)期。又稱指數(shù)期。此期生長曲線上活菌數(shù)直線上升。細(xì)菌以穩(wěn)定的幾何級數(shù)極快增長。此期細(xì)菌形態(tài)、染色、生物活性都很典型,對外界環(huán)境因素的作用敏感,因此研究細(xì)菌性狀以此期細(xì)菌最好。穩(wěn)定期。該期的生長菌群總數(shù)處于平坦階段,但細(xì)菌群體活力變化較大。此期細(xì)菌增殖數(shù)與死亡數(shù)漸趨平衡。衰亡期。隨著穩(wěn)定期發(fā)展,細(xì)菌繁殖越來越慢,死亡菌數(shù)明顯增多?;罹鷶?shù)與培養(yǎng)時間呈反比關(guān)系,此期細(xì)菌變長腫脹或畸形衰變,甚至菌體自溶,難以辯認(rèn)
9、其形。3、減短遲緩期的措施:1通過遺傳學(xué)的方法改變種的遺傳特性;2用出于對數(shù)生長期的細(xì)胞作種;3盡量使接種前后的培養(yǎng)基組成不要相差太大;4適當(dāng)擴(kuò)大接種量。4、同步培養(yǎng)。使細(xì)胞的分裂周期為同步的培養(yǎng)方法。同步化方法的原理是在使所有細(xì)胞都處于大體相同的分裂周期的時候,才使增殖同時開始進(jìn)行。離心法、過濾分離法、硝酸纖維素濾_、溫控、藥控、培養(yǎng)基成分控制等。5、連續(xù)培養(yǎng):在微生物的整個培養(yǎng)期間,通過一定的方式使微生物能以恒定的生長速率生長并能持續(xù)生長下去的一種培養(yǎng)方法。包括恒濁培養(yǎng)(菌體恒定)、恒化培養(yǎng)(營養(yǎng)恒定)。優(yōu)點(diǎn):1縮短發(fā)酵周期,提高設(shè)備利用率;2便于自動控制,降低動力消耗和體力勞動強(qiáng)度;3產(chǎn)
10、品質(zhì)量較穩(wěn)定。缺點(diǎn):雜菌污染和菌種退化。6、抗生素:由某些生物合成或半合成的一類次級代謝產(chǎn)物或衍生物,能抑制微生物的生長或殺死微生物的化合物。7、代謝產(chǎn)物:8、滅菌。利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所有微生物的措施。9、消毒。利用某種方法殺死或滅活物體中所有病原微生物的一種措施。10、抗生素作用機(jī)制:1抑制細(xì)胞壁合成;2破壞細(xì)胞膜;3作用于呼吸鏈以干擾氧化磷酸化。11、細(xì)菌的耐藥機(jī)制_:1細(xì)胞膜透性改變;2藥物作用靶改變;3合成了修飾抗生素的酶;4抗藥菌株發(fā)生遺傳變異,導(dǎo)致合成新的多聚體。如何避免抗藥性的產(chǎn)生。1第一次使用的藥物劑量要足;2避免長期使用同一種抗生素;3不同的抗生素混合使用;
11、4對現(xiàn)有抗生素進(jìn)行改造;5篩選新的更有效地抗生素。第七章病毒_1、病毒的特點(diǎn):1不具細(xì)胞結(jié)構(gòu),具有一般大分子的特征;2一種病毒只有一種核酸,阮病毒只有蛋白質(zhì);3大部分病毒沒有酶或酶系不完全;4嚴(yán)格的活細(xì)胞內(nèi)寄生;5對大多數(shù)抗生素不敏感;6個體小,電子顯微鏡下才可看到。2、病毒的殼體結(jié)構(gòu)_:螺旋對稱_p170、二十面體對稱、雙對稱.3、病毒的復(fù)制周期_。從一個病毒吸附于細(xì)胞開始到子代病毒從受染細(xì)胞釋放的全過程。分五個階段。吸附侵入_病毒大分子合成裝配與釋放。4、整合感染p188:許多溫和噬菌體和腫瘤病毒感染宿主細(xì)胞后,因病毒和細(xì)胞的性質(zhì),病毒基因組整合于宿主染色體,并隨細(xì)胞分裂傳遞給子代。5、溶
12、源性感染對細(xì)胞的影響p190免疫性。溶源性細(xì)菌對本身所攜帶的原噬菌體的同源噬菌體有特異性免疫力。免疫性由源噬菌體產(chǎn)生的阻遏蛋白的可擴(kuò)散性質(zhì)所決定。溶源轉(zhuǎn)變。原噬菌體引起的溶源細(xì)菌除免疫性以外的表型改變(表面性質(zhì)、致病性)。第八章微生物與基因工程1、基因工程:指對遺傳信息的分子操作或施工,即把分離到的或合成的基因經(jīng)過改造,插入到載體當(dāng)中,然后導(dǎo)入宿主細(xì)胞內(nèi),使其擴(kuò)增和表達(dá),從而獲得大量基因產(chǎn)物或產(chǎn)生生物新的性狀。2、基因工程的基本操作過程:1目的基因的獲得;2目的基因與載體dna的體外重組;3重組dna導(dǎo)入宿主細(xì)胞;4目的克隆的篩選與鑒定;5控制外源基因的表達(dá)。3、微生物與基因工程的關(guān)系:1基因
13、資源:微生物的多樣性,尤其是抗性基因,為基因工程提供了豐富獨(dú)特的資源。2基因工程載體:由質(zhì)粒、噬菌體或其他病毒dna等改造而成。3工具酶:基因工程所用的千余種工具酶大多數(shù)都是從微生物中分離純化而得。4宿主:微生物細(xì)胞是基因克隆的重要宿主。5基因表達(dá)的生化反應(yīng)器6基因工程理論研究?;蚬こ痰靡越⑴c發(fā)展的理論基礎(chǔ)主要來之于微生物研究。4、pcr擴(kuò)增原理:變性退火延伸5、細(xì)菌質(zhì)粒的特點(diǎn):1含有復(fù)制起點(diǎn);2含有多種限制酶的單一識別位點(diǎn);3含有抗抗生素性標(biāo)記基因;4高拷貝;5具有較小的相對分子質(zhì)量;6可通過轉(zhuǎn)化或電穿孔法極易導(dǎo)入宿主細(xì)胞。第九章微生物的生態(tài)_1、空氣中微生物的來源。土壤,水體及人類的生
14、產(chǎn)、生活活動。2、水體的富營養(yǎng)化:指在人類活動的影響下,水體中的氮、磷等營養(yǎng)物質(zhì)超標(biāo),引起藻類及其他浮游生物迅速繁殖,水體溶解氧量下降,水質(zhì)惡化,魚類及其他生物大量死亡的現(xiàn)象。3、水華:藻類(主要是微藻)的大量繁殖使水體出現(xiàn)顏色,并變得渾濁,許多藻類團(tuán)塊漂浮在水面上形成。4、赤潮。在海洋中,某些甲藻類大量繁殖可以形成水花,從而使海水出現(xiàn)紅色或褐色。5、土壤是微生物的大本營:土壤是固體無機(jī)物(巖石和礦物質(zhì))、有機(jī)物、水、空氣和生物組成的復(fù)合物,是微生物的合適生境。因此土壤微生物種類多、數(shù)量多、代謝潛力巨大,是主要的微生物源。6、_環(huán)境下的微生物。嗜熱、嗜冷、嗜酸、嗜堿、嗜鹽、嗜壓微生物。7、防治
15、生物霉腐的方法:1用物理或化學(xué)的方法殺死物品上的一切微生物,再用物理方法防治微生物再生。2保存于微生物不能進(jìn)行代謝活動或代謝水平極低的環(huán)境條件下。3通過加工或加入添加劑來抑制微生物的生長。補(bǔ)充細(xì)菌的生長規(guī)律和各個生長時期的特點(diǎn)水中微生物的來源原核微生物包括(_種)包括古細(xì)菌、真細(xì)菌、放線菌、藍(lán)細(xì)菌、粘細(xì)菌、立克次氏體、支原體、衣原體和螺旋體。2022年微生物學(xué)重點(diǎn)總結(jié)標(biāo)準(zhǔn)(二)古細(xì)菌:無胞壁酸。真細(xì)菌:有胞壁酸。g+g-。真核生物:幾丁質(zhì)細(xì)菌包括不變部分、可變部分細(xì)菌細(xì)胞壁:肽聚糖細(xì)胞壁功能:維持保護(hù)細(xì)胞形狀細(xì)胞壁化學(xué)成分的差異可使不同的細(xì)菌具有抗原性、致病性和對噬菌體的敏感性細(xì)胞壁有通道可以
16、允許水和空氣、小分子化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入,大分子不能進(jìn)入細(xì)胞壁是鞭毛運(yùn)動的力學(xué)支點(diǎn)革蘭氏染色法g+(深紫色)細(xì)胞壁:磷壁酸1234狀態(tài)時開啟操縱子的表達(dá)?;蛲蛔儯河捎赿na鏈上的_對或少數(shù)幾對堿基被另_個或少數(shù)堿基對取代發(fā)生改變的突變類型。突變類型。形態(tài)突變型、生化突變型(營養(yǎng)缺陷型、抗性突變型、抗原突變型)、致死突變型,條件致死突變型?;蛲蛔兊臋C(jī)理:1.自發(fā)突變:不對應(yīng)性、自發(fā)性、稀有性、獨(dú)立性、誘變性、穩(wěn)定性、可逆性;2.誘發(fā)突變。堿基置換、移碼突變、染色體畸變。的生化過程,但影響該過程是否產(chǎn)生及其活性強(qiáng)度。芳香族化合物降解基因的遺傳定位有_種類型:一般微生物位于染色體上的性狀比較穩(wěn)定,而位于
17、質(zhì)粒上的性狀則很容易在不同的菌之間進(jìn)行水平轉(zhuǎn)移,使得降解基因在不同菌株之間擴(kuò)散,有g(shù)-(紅色)內(nèi)壁層、外壁層(脂多糖、脂蛋白)原因:細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)和厚度不同,染色劑通透性和抗脫色能力不同細(xì)胞壁缺陷型細(xì)菌。用溶菌酶處理,在培養(yǎng)基中加入青霉素阻止其細(xì)胞壁形成。原生質(zhì)體:在g+加入溶菌酶、青霉素_其細(xì)胞壁合成原生質(zhì)球:g-加入溶菌酶、青霉素細(xì)菌l-型:基因突變產(chǎn)生的無壁類型周質(zhì)空間:細(xì)胞壁與細(xì)胞膜之間的空間,內(nèi)含質(zhì)外酶中間體:類似于真核生物的線粒體芽孢:度過不良環(huán)境的休眠體伴孢晶體:在形成芽孢的同時,產(chǎn)生一顆菱形雙錐形的堿性蛋白晶體細(xì)菌的繁殖:裂殖酵母菌的繁殖:出芽繁殖放線菌包括。基內(nèi)菌絲、
18、氣生菌絲、孢子絲。放線菌的繁殖主要通過無性菌絲和菌絲片段進(jìn)行繁殖,分生孢子為主藍(lán)細(xì)菌:芽生方式繁殖g-鐵細(xì)菌:鐵質(zhì)水管的腐蝕和堵塞引起的_嗜鹽高細(xì)菌群的條件:g-,t在3550,ph5.58.5_嗜熱高細(xì)菌群的條件:t45110,ph13真菌的繁殖與繁殖體:既有有性繁殖,又有無性繁殖(主要)無性繁殖:1菌絲體的斷裂片段可以產(chǎn)生新個體2裂殖3出芽繁殖4孢子繁殖無性孢子的類型。游動孢子、孢囊孢子、分生孢子、節(jié)孢子、厚垣孢子、芽孢子。擔(dān)子菌綱:主要產(chǎn)生擔(dān)孢子,菌絲可分為初生菌體、次生菌體和三生菌絲原生動物異氧型生活,以吞食細(xì)菌、真菌、藻類等有機(jī)體為食。原生動物有無性繁殖和有性繁殖。無性繁殖一般為二分
19、裂。亞病毒包括擬病毒、類病毒、朊病毒。朊病毒只含有蛋白質(zhì)。烈性噬菌體。凡侵入宿主細(xì)胞進(jìn)行復(fù)制增值,導(dǎo)致宿主細(xì)胞裂解的噬菌體。烈性噬菌體的過程。吸附、侵入、復(fù)制、裝配、釋放。溫和噬菌體。侵入宿主細(xì)胞后隨宿主細(xì)胞的生長繁殖而傳代下去,一般不引起宿主細(xì)胞裂解的噬菌體。微生物菌種保藏的原理。將微生物的菌種保存于不良環(huán)境中,是微生物的代謝速率極為緩慢或處于休眠狀態(tài)。而一旦恢復(fù)所保存菌種生長的正常環(huán)境和營養(yǎng)條件,即可獲得具有高生理活性和保持原種優(yōu)良性狀的菌種培養(yǎng)物。保藏方法。培養(yǎng)物傳代保藏法、干燥保藏法、低溫保藏法。微生物的營養(yǎng)類型:光能自養(yǎng)型(藻類、藍(lán)細(xì)菌)、光能異養(yǎng)型(紫色與綠色非硫細(xì)菌)、化能自養(yǎng)型
20、、化能異養(yǎng)型。emp:糖酵解pp:磷酸戊糖tca:三羧酸循環(huán)能量轉(zhuǎn)換。底物水平磷酸化、氧化磷酸化、光合磷酸化。采用厭氧消化法處理高濃度有機(jī)廢水的原因。進(jìn)行發(fā)酵作用的厭氧微生物,需要大量的基質(zhì)才能滿足其生命活動所需要的能量,因而其對基質(zhì)的轉(zhuǎn)化率較呼吸作用高。微生物合成作用必須的三要素。小分子的前體物質(zhì)、能量、還原力。分批培養(yǎng)的階段。遲緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期(出現(xiàn)芽孢)、衰亡期。穩(wěn)定期特點(diǎn):細(xì)胞增殖率與死亡率平衡、細(xì)胞總數(shù)不再增加、單位體積中細(xì)菌數(shù)目達(dá)到最高。連續(xù)培養(yǎng):如果在細(xì)菌進(jìn)入對數(shù)期以一定得速度不斷補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì),同時以同樣的速度排出培養(yǎng)物,就可以延長對數(shù)期的培養(yǎng)方法。環(huán)境對微生物的影響。好氧微
21、生物生長的適宜的氧化還原電位值為0.3_v,在_v以上即能生長。厭氧微生物只能在_v以下甚至為負(fù)值時才能生長。兼性厭氧微生物在_v以上時有氧呼吸,_v以下時無氧呼吸或發(fā)酵作用。真核微生物含細(xì)胞器。葉綠體、線粒體、中心粒、毛基體。原核微生物含有質(zhì)粒(dna)。質(zhì)粒特性??赊D(zhuǎn)移性、可整合性、可重組性、可消除性。根據(jù)酶量的轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控機(jī)制分為正轉(zhuǎn)錄調(diào)控和負(fù)轉(zhuǎn)錄調(diào)控。負(fù)轉(zhuǎn)錄是當(dāng)調(diào)節(jié)蛋白處于激活狀態(tài)時關(guān)閉操縱子的表達(dá);正轉(zhuǎn)錄是當(dāng)調(diào)節(jié)處于激活細(xì)菌接合:通過供體菌和受體菌完整細(xì)胞間性菌毛的直接接觸而傳遞大段dna的過程。轉(zhuǎn)導(dǎo):通過缺陷型噬菌體的媒介,把供體細(xì)胞的dna片段攜帶帶到受體細(xì)胞中,從而是后者獲得前
22、者部分遺傳性狀的現(xiàn)象。轉(zhuǎn)化:受體菌接受供體菌的dna片段,經(jīng)過交換將它組合到自己的基因組中,從而獲得了供體菌的部分遺傳性狀的現(xiàn)象。準(zhǔn)性生殖(半知菌):是同種生物兩個不同菌株的體細(xì)胞發(fā)生融合,且不經(jīng)過減數(shù)分裂而導(dǎo)致低頻率基因重組并產(chǎn)生重組子?;蚬こ蹋河萌斯し椒ㄈ〉霉w菌dna上的目標(biāo)基因,加以改造,在體外重組于載體dna上,再導(dǎo)入宿主細(xì)胞內(nèi),使其轉(zhuǎn)錄、翻譯表達(dá)和復(fù)制,獲得供體基因的性狀,從而獲得大量的基因產(chǎn)物或使受體生物表現(xiàn)出新的表型。基因工程的步驟:取得目的基因、選擇載體、目的基因與載體dna的體外重組、重組載體引入受體細(xì)胞。根土比:是反映根圈效應(yīng)的重要指標(biāo),一般在520之間。水中細(xì)菌_%為
23、革蘭氏陰性菌。(假單胞菌)嗜熱微生物分為:耐熱菌(4555)、兼性嗜熱菌(5065)、專心嗜熱菌(6570)、_嗜熱菌(70+)、超嗜熱菌(80110)嗜冷微生物分為。專性(不超過20)和兼性兩類。嗜酸微生物(ph33.5)嗜堿微生物(ph9)嗜鹽微生物(大多數(shù)海洋生物類別)互生關(guān)系舉例:分解纖維素的細(xì)菌與固氮菌共生關(guān)系舉例:地衣。寄生關(guān)系舉例:噬菌體的寄生。拮抗關(guān)系舉例:毛霉抑制黑青霉。微生物轉(zhuǎn)化氮素的一般途徑:1、綠色植物和微生物的生命活動過程中,吸收硝態(tài)氮和銨態(tài)氮,組成蛋白質(zhì)、核酸等含氮有機(jī)物質(zhì),使無態(tài)氮同化為有機(jī)態(tài)氮;2、動植物和微生物遺體中的有機(jī)氮化物,經(jīng)微生物的分解作用,使無機(jī)質(zhì)化
24、為氨態(tài)氮(nh4-n);3、氨態(tài)氮在有氧條件下,經(jīng)硝化細(xì)菌的作用氧化成硝態(tài)氮;4、硝酸鹽由于反硝化細(xì)菌的作用,還原為分子態(tài)氮,逸散到大氣中;5、空氣中的分子態(tài)氮,通過固氮微生物的作用,還原為氨,進(jìn)而合成有機(jī)氮化物。1、氨化作用:有機(jī)氮化物在微生物的分解作用中釋放出氨的過程;2、硝化作用:氨經(jīng)過微生物作用氧化成亞硝酸,再進(jìn)一步氧化成硝酸的過程;3、反硝化作用。硝酸鹽在通氣不良情況下經(jīng)微生物作用而還原的過程。參與尿素分解的微生物有脲芽孢八疊球菌。各種固氮微生物,在長期進(jìn)化過程中均形成一種防氧保護(hù)機(jī)制。(根瘤菌在根瘤中被富含豆血紅蛋白的類菌體周膜所包圍,豆血紅蛋白課發(fā)揮氧氣緩沖劑的作用;有的固氮藍(lán)細(xì)
25、菌能形成不能放氧氣的異形胞,固氮作用在其中進(jìn)行。)生物轉(zhuǎn)化。通過微生物代謝導(dǎo)致有機(jī)或無機(jī)化合物的分子結(jié)構(gòu)發(fā)生某種改變、生成新化合物的過程?;|(zhì)的生化呼吸曲線。表示投加基質(zhì)后微生物的耗氧狀況,投加基質(zhì)后的耗氧量或耗氧速度隨時間變化關(guān)系的基質(zhì)呼吸線。內(nèi)源呼吸線。不投加基質(zhì)的條件下,微生物處于內(nèi)源呼吸狀態(tài)是利用自體細(xì)胞物質(zhì)作為呼吸基質(zhì),其耗氧量隨時間變化而變化繪制的曲線。由于在此情況下微生物的耗氧速度恒定不變,所以內(nèi)源呼吸線的耗氧量與時間呈直線關(guān)系。微生物降解實(shí)驗(yàn)。土壤消毒實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)液中降解實(shí)驗(yàn)。礦化作用。指有機(jī)污染物在一種或多種微生物的作用下徹底分解為h2o,co2和簡單無機(jī)化合物如含氮化合物、含
26、磷化合物、含硫化合物和含氯化合物等的過程。共代謝作用。一些難降解的有機(jī)化合物不能直接作為碳源或能源物質(zhì)被微生物利用,當(dāng)環(huán)境中存在其他可利用的碳源或能源時,難降解有機(jī)化合物才能被利用。共代謝作用發(fā)生的情況:微生物對石油的降解能力。烯烴最易分解,烷烴次之,芳烴難,多環(huán)芳烴更難,脂環(huán)烴類對微生物作用最不敏感。共代謝作用及抑減效應(yīng)。有的烴類單獨(dú)存在時不能降解,但在石油混合物中則由于微生物利用其他烴類生長而使該難降解烴在酶作用下降解。相反,也有抑減效應(yīng)存在,如醋酸鹽存在可抑制對十六烷的降解;十六烷存在時可抑減樸日斯烷的降解作用,其機(jī)理未明,此種效應(yīng)并不改變降解利于微生物對不利環(huán)境的適應(yīng)。微生物對農(nóng)藥的降解。有些微生物可以農(nóng)藥作為唯一碳源、能源,直接利用或通過產(chǎn)生誘導(dǎo)酶進(jìn)行降解;許多微生物通過共代謝作用使農(nóng)藥降解,結(jié)構(gòu)復(fù)雜的農(nóng)藥多靠此得以轉(zhuǎn)化消失。有機(jī)磷農(nóng)藥較之有機(jī)氯農(nóng)藥容易降解得多。微生物降解這些殺蟲劑的最常見反應(yīng)機(jī)制是脂酶水解過程。擬除蟲菊酯類農(nóng)藥在環(huán)境中的降解方式有。水降解、光降解、生物降解。塑料可被微生物作用,但分解速度極慢,屬于極難生物
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