動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)

1、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)第1頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉拿和固定方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的編號方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的去毛方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的取血方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法第2頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉拿和固定方法1. 小鼠 捉拿時(shí)先用右手將鼠尾抓住提起，放在較粗糙的臺面或鼠籠上， 在其向前爬行時(shí)，右手向后拉尾，用左手拇指和食指抓住小鼠的兩耳和頭頸部皮膚，將其固定于左手手心中，拉直四肢并用左手無名指壓緊尾和后肢，右手即可作注射或其他實(shí)驗(yàn)操作。取尾血及尾靜脈注射時(shí)，可將小鼠固定在金屬或木制的固定器上。第3頁

2、，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一第4頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一2. 家兔一手抓住兔頸部的被毛與皮膚，另一手托其臀部或腹部，使其軀干的重量大部分集中在手上。第5頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一第6頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一兔手術(shù)固定臺第7頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一第8頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法1. 注射法給藥：家兔耳緣靜脈注射 大、小鼠尾靜脈注射2. 攝入法給藥： 家兔、大鼠、小鼠灌胃法3. 涂布法

3、給藥第9頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一攝入法給藥自動(dòng)口服給藥強(qiáng)制灌胃給藥：大鼠 小鼠 家兔經(jīng)直腸給藥第10頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一小鼠、大鼠灌胃法器械：灌胃器 由注射器和特殊的灌胃針構(gòu)成。小鼠灌胃針長45cm 直徑1 mm大鼠灌胃針長68cm 直徑1.2mm第11頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一小鼠灌胃法按正確方法用左手抓取和固定動(dòng)物。使腹部朝上，頸部拉直。固定后，右手持持接灌胃針的注射器吸取藥液（或事先將藥液吸好），將針頭從口角插入口腔內(nèi)，然后用灌胃針頭壓其頭部，使口腔與食管成一直線，再將灌胃針頭沿上腭壁

4、輕輕進(jìn)入，轉(zhuǎn)動(dòng)針頭刺激動(dòng)物吞咽，然后沿咽后壁慢慢插入食道。若動(dòng)物掙扎厲害，應(yīng)退出后灌胃針，待動(dòng)物安靜后重新插入。切不可強(qiáng)行插入，以免損傷食道或誤入氣管導(dǎo)致動(dòng)物死亡。當(dāng)感覺有落空感時(shí)表明灌胃針可能進(jìn)入胃內(nèi)，向外抽動(dòng)注射器活塞，感覺有負(fù)壓說明灌胃針未插入氣管，此時(shí)可將藥液灌入。第12頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一成年小鼠插管深度一般是：3cm小鼠灌胃量：0.10.25ml/10g體重第13頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一大鼠灌胃法成年大鼠插管深度一般是：5cm大鼠灌胃量： 12ml/100g體重第14頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)

5、53分，星期一兔灌胃法器械：灌胃管（特制胃管或?qū)蚬埽╅_口器（木質(zhì)紡錘狀）第15頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一兔灌胃法操作方法：1.固定：動(dòng)物取直立或平臥體位，固定動(dòng)物頭部。 直立位需2人合作，一人取坐位，將兔的軀體和下肢夾在兩腿之間，左手緊握雙耳固定頭部，右手抓住前肢，將兔固定于豎立體位。另一人將開口器橫放于兔口中，讓動(dòng)物咬住開口器，即可開始插入灌胃管。第16頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一第17頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一兔灌胃法操作方法：2.插管：將灌胃管由開口器的中央孔插入，沿上顎壁推進(jìn)約15cm。 插

6、管過程中可將灌胃管的另一端放于一杯清水中，若連續(xù)有氣泡，說明插入呼吸道，應(yīng)立即拔出灌胃管，重新操作；若無氣泡，說明沒有插入氣管，即可開始注藥。第18頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一沿上顎壁推進(jìn)約15cm檢查插入部位第19頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一兔灌胃法操作方法：3.給藥：灌注藥后可用少量清水將灌胃管里的藥全部沖入胃內(nèi)，以保證灌入藥的劑量準(zhǔn)確。灌胃完畢后，先退出胃管，后退出開口器。第20頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一兔灌胃法關(guān)鍵詞：固定，插入（沿上顎壁），檢查第21頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)

7、53分，星期一家兔耳緣靜脈注射將動(dòng)物固定于實(shí)驗(yàn)臺上，剪去耳緣部位的被毛，用乙醇輕輕擦拭，耳緣靜脈即清晰可見。用左手食指和中指夾住靜脈近心端，拇指和小指夾住耳緣部分，以左手無名指和小指放在耳下作墊，待靜脈充盈后，右手持注射器使針頭盡量由靜脈遠(yuǎn)心端刺入，順血管方向平行、向心端刺入約1cm。注射完畢抽出針頭，用棉球壓迫注射部位數(shù)分鐘，以免出血。第22頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉方法全身麻醉法：吸入法，注射法局部麻醉法：浸潤麻醉，表面麻醉第23頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一（一）全身麻醉法1、吸入法麻醉藥：乙醚氯仿三氟乙烷第2

8、4頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一2、注射法 麻醉藥： 巴比妥類藥物 氯胺酮 烏拉坦 水合氯醛（一）全身麻醉法第25頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一（二） 局部麻醉法 1% 鹽酸普魯卡因 局部浸潤麻醉 0.022鹽酸可卡因 表面麻醉第26頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一麻醉藥物應(yīng)用原則：依據(jù)動(dòng)物體重計(jì)算麻醉藥物的劑量；依據(jù)動(dòng)物生命體征變化控制給藥速度；掌握寧少勿多、分階段給藥的方式。針對不同的動(dòng)物，選擇不同的麻醉藥物、實(shí)施不同的麻醉方法。第27頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一麻醉具體操作：家

9、兔全身麻醉麻醉劑：1.5%戊巴比妥鈉，2ml/kg前1/2快速推入，使動(dòng)物能順利、快速地渡過興奮期；后1/2速度宜慢，且邊注射邊注意觀察動(dòng)物的生命體征變化，當(dāng)確定已達(dá)到麻醉效果時(shí)，即停止給藥，不必急于將剩余的麻醉藥物全部推入。給藥方法：耳緣靜脈注射第28頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一麻醉成功標(biāo)志角膜反射遲鈍或消失肢體肌肉松弛疼痛反射消失呼吸變深變慢 第29頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一機(jī)能實(shí)驗(yàn)學(xué)常用手術(shù)方法一、常用手術(shù)器械二、常用手術(shù)插管技術(shù) 氣管插管術(shù) 頸動(dòng)脈插管術(shù) 頸靜脈插管術(shù)第30頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，

10、星期一動(dòng)物實(shí)驗(yàn)常用手術(shù)器械第31頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一 粗剪 用于蛙類實(shí)驗(yàn)中的剪骨、肌肉和皮膚等粗硬組織以及家兔等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的剪毛。 剪毛時(shí)，剪毛剪自然落下逆毛方向一次次將毛剪下即可，加力下壓或一手提起被毛，均易剪破皮膚。剪下的毛應(yīng)集中放入加有清水的污物盒內(nèi)，避免到處飛揚(yáng)。第32頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一手術(shù)剪用于剪線和剪開、分離組織。有直、彎、尖頭、圓頭、大、小之分，根據(jù)不同用途選用。手術(shù)操作中用于沿組織間隙進(jìn)行分離和剪斷組織者稱組織剪，一般為彎形，尖端較鈍圓；用于剪斷縫扎線、引流物或敷料等用品者稱剪線剪，為直形。第33頁，共

11、67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一眼科剪 主要用于剪血管或神經(jīng)等柔軟組織，眼科剪也有直頭與彎頭之分，正確的執(zhí)剪姿勢與手術(shù)剪相同，即用拇指與無名指持剪，食指置于手術(shù)剪上方。第34頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一手術(shù)刀由刀片和刀柄組成，可分為大、中、小號不同類型。大號切開皮膚；中號切割臟器組織；小號切割特殊部位。安裝：先用持針器（或直型止血鉗）夾住刀片，左手握住刀柄，按刀片上的空隙對準(zhǔn)刀柄上的槽隙，順勢推入即可。第35頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一手術(shù)刀握持方法第36頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一執(zhí)

12、筆式：即以持筆的手法握住刀柄，適用于小范圍內(nèi)的組織切開，隨意性強(qiáng)，可作垂直或水平切割。持弓式：右手中指、無名指按壓在手術(shù)刀柄的外側(cè)緣，拇指放在刀柄內(nèi)側(cè)緣，食指按壓在刀片后13處。適用于切開皮膚。第37頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一組織鑷組織鑷和眼科鑷。組織鑷鉗夾組織，分離組織和筋膜。眼科鑷分離血管。使用手法：以食指、中指放于器械的外側(cè)緣，拇指放于內(nèi)側(cè)緣，集3指的力量實(shí)施操作動(dòng)作，而且適用于左右手的同時(shí)操作。第38頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一止血鉗止血和分離組織。使用方法：以拇指、中指（或無名指）分別套人止血鉗的套扣內(nèi)，控制止血鉗展開的力

13、度，以食指放在止血鉗的關(guān)節(jié)部位，控制止血鉗的方向和鉗夾組織部位的準(zhǔn)確性。切忌左右手分別抓住止血鉗的套扣部位，用兩手的合力進(jìn)行止血或分離組織。第39頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一縫合針有圓針和角針兩種，圓針用于縫合組織結(jié)構(gòu)；角針邊緣鋒利，除具有穿刺功能外，還具有 切割的作用；縫合針需配合持針器同時(shí)使用。第40頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一探針包括金屬探針和玻璃分針；用于對精細(xì)部位的分離和游離等操作。有時(shí)，在實(shí)施血管插管技術(shù)時(shí)，切開血管壁后往往借助于探針先將切口挑起，然后插入導(dǎo)管。 第41頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星

14、期一支架 用于蛙類及哺乳類手術(shù)中換能器及刺激電極等的固定與位置調(diào)節(jié)。由底座及支架桿構(gòu)成，支架上附有萬向節(jié)，可在各個(gè)方向上調(diào)節(jié)。第42頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一哺乳類手術(shù)器械氣管插管 急性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)插入氣管，以保證呼吸道暢通，一端接氣鼓或呼吸換能器可記錄呼吸運(yùn)動(dòng)。分為金屬插管和玻璃插管。第43頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一哺乳類手術(shù)器械動(dòng)脈夾 動(dòng)脈夾分大、中、小三種型號及直、彎兩種，用于夾持動(dòng)脈，暫時(shí)阻斷動(dòng)脈血流。使用時(shí)動(dòng)脈夾的尖端套有塑料管，以防止夾持動(dòng)脈時(shí)對血管造成損傷。第44頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期

15、一哺乳類手術(shù)器械動(dòng)脈插管 用于在急性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)插入動(dòng)脈?？捎媒饘佟⒉Ａб约八芰系炔煌牧现瞥?，常用細(xì)塑料管自行拉制而成。 在哺乳類動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，插管一端插入動(dòng)脈，另一端接壓力換能器以記錄血壓，插管內(nèi)充滿肝素以防止插管內(nèi)血液凝固，插管腔內(nèi)不可有氣泡，以免影響結(jié)果。第45頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一哺乳類手術(shù)器械三通管 用于改變實(shí)驗(yàn)中液體流動(dòng)方向，以便輸液、給藥或描記血壓?？呻S意將三個(gè)通道中的任何兩個(gè)通道口相通，另一個(gè)不通；也可使三個(gè)通道同時(shí)都通或都不通。第46頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一哺乳動(dòng)物手術(shù)器材清單金屬用品玻璃用品消耗品手術(shù)剪1把

16、氣管插管1個(gè)紗布眼科剪1把動(dòng)脈插管1根棉簽血管鉗4把尿道插管1根絲線手術(shù)鑷1把玻璃分針1根動(dòng)脈夾1個(gè)注射器1 支（1ml/5ml）手術(shù)刀1把三通管一個(gè)第47頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一動(dòng)物實(shí)驗(yàn)常用插管技術(shù) 氣管插管術(shù) 頸動(dòng)脈插管術(shù) 頸靜脈插管術(shù) 導(dǎo)尿管插管術(shù)第48頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一插管技術(shù)的基本步驟1. 動(dòng)物稱重、麻醉、固定。2. 插管部位皮膚去毛、備皮。3. 皮膚切開。4. 皮下組織結(jié)構(gòu)的分離。5. 目標(biāo)器官或組織結(jié)構(gòu)的游離。6. 導(dǎo)管的插入或固定。第49頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一家兔頸部神

17、經(jīng)和血管的解剖位置第50頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一第51頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一迷走神經(jīng) 交感神經(jīng)第52頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一減壓神經(jīng)第53頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一氣管插管術(shù)第54頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一1、麻醉固定、頸部皮膚去毛、備皮2、在頸前區(qū)正中作一約5-7cm的切口第55頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一3、鈍性分離皮下組織、肌肉，游離出氣管，穿線備用。第56頁，共67頁，2022年，5月20日

18、，20點(diǎn)53分，星期一4、在甲狀軟骨下方第3-4個(gè)環(huán)狀軟骨上作一倒“T”形切口，插入“Y”形氣管插管，并用線固定好。第57頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一頸動(dòng)脈插管技術(shù)1、頸正中作一約5-7cm的切口2、鈍性分離皮下筋膜第58頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一3、分離一側(cè)頸總動(dòng)脈，穿雙線備用。第59頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一4、結(jié)扎遠(yuǎn)心端，在距結(jié)扎線約2-3cm處用動(dòng)脈夾夾閉頸總動(dòng)脈近心端。第60頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一5、在靠近結(jié)扎線處用眼科剪剪一“v”形切口，切口大小約為動(dòng)脈口徑的1/31/2。第61頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一6、將壓力換能器與動(dòng)脈插管連接好并充滿肝素，向近心端插入動(dòng)脈插管，用線結(jié)扎牢固。第62頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一三通的使用：第63頁，共67頁，2022年，5月20日，20點(diǎn)53分，星期一進(jìn)入BL410/420系統(tǒng)。選擇“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目” 選擇“循環(huán)實(shí)驗(yàn)” “兔動(dòng)脈血壓調(diào)節(jié)”實(shí)驗(yàn)?zāi)K；7、打開換能器開關(guān)，觀察并記錄動(dòng)脈血壓。或選擇“輸入信號”選擇“通道”“壓力