中藥何首烏的化學(xué)成分研究

1、中藥何首烏的化學(xué)成分研究中藥何首烏的化學(xué)成分研究中藥何首烏為為蓼科Plygnaeae何首烏屬多年生草本植物何首烏PlygnuultiflruThunb.的塊根。該植物多生于山坡石縫中、籬邊、林下、山腳或灌木叢中，在我國(guó)大局部地區(qū)都有出產(chǎn)，主產(chǎn)于河南、湖北、貴州、四川、廣東、廣西等地。其根細(xì)長(zhǎng)，先端膨大成肥大不整齊的塊根，外表紅褐色至暗褐。中藥何首烏有生首烏與制首烏之分，是典型生制兩用的藥材，生首烏能潤(rùn)腸通便、解毒消癰，制首烏那么具有補(bǔ)益精血、烏須發(fā)、強(qiáng)筋骨、補(bǔ)肝腎的成效1。目前，已經(jīng)從何首烏中別離得到了近百種化合物，主要為蒽醌類(lèi)成分、二苯乙烯苷類(lèi)和黃酮類(lèi)等成分2-3。藥理研究發(fā)現(xiàn)，何首烏具有神

2、經(jīng)保護(hù)、抗衰老、增強(qiáng)免疫力、調(diào)節(jié)血脂、肝臟保護(hù)等作用4-6。在研究天然藥物活性物質(zhì)與功能的過(guò)程中，作者對(duì)何首烏的化學(xué)成分進(jìn)展了別離，鑒定了6個(gè)化合物，包括1個(gè)新化合物。1材料ERURY-400核磁共振儀美國(guó)Varian公司，BrukerV-600超導(dǎo)核磁共振儀德國(guó)Bruker公司TS為內(nèi)標(biāo)物；Q-TF型質(zhì)譜儀美國(guó)AppliedBisystes公司；傅里葉變換紅外Nilet5700光譜儀美國(guó)Ther公司；L-6AD制備型高效液相色譜儀日本島津公司，YPakDS-A20250，5制備色譜柱；柱色譜硅膠200300目和薄層色譜用硅膠GF254為青島海洋化工廠(chǎng)消費(fèi)；反相柱色譜填料GH-DSB-12S5

3、050為日本Y公司消費(fèi)；反相18高效薄層板為德國(guó)erk公司消費(fèi)；凝膠柱色譜填料SephadexLH-20為瑞典GE公司消費(fèi)；實(shí)驗(yàn)室所用試劑均為分析純北京化工廠(chǎng)。何首烏藥材于2022年10月采購(gòu)于北京同仁堂藥店，產(chǎn)地為湖北，經(jīng)本課題組鑒定為何首烏P.ultiflru生品的塊根。2提取與別離枯燥的何首烏塊根粉末5.0kg以95%乙醇回流提取5次，每次5L，每次提取時(shí)間均為1h。提取液合并，濃縮后得浸約500g。將上述浸膏用水混懸后，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，回收石油醚、乙酸乙酯和正丁醇，分別得到石油醚萃取物17.5g、乙酸乙酯萃取物110g和正丁醇萃取物50g。將剩余溶液回收至無(wú)醇，

4、加水溶解，得水局部300g。乙酸乙酯局部用正相硅膠柱色譜，氯仿-甲醇系統(tǒng)梯度洗脫1000，7030，5050，2575，0100，得到14個(gè)局部Ea114。其中Ea11經(jīng)硅膠柱色譜分為2個(gè)局部Fr1Fr2。Fr2經(jīng)DS反相柱色譜，以甲醇：水1090，3070，4555，6040，8020梯度洗脫，分為7個(gè)局部Fr2-1Fr2-7。Fr2-2經(jīng)硅膠柱色譜，以氯仿-甲醇7030洗脫，再經(jīng)DS反相柱色譜以40%甲醇-水做洗脫液，得到化合物10.6g，23.6g。Fr2-3經(jīng)硅膠柱色譜，以氯仿-甲醇9010，70本文由論文聯(lián)盟.Ll.搜集整理30，5050，3070梯度洗脫，分為4個(gè)局部Fr2-3-1

5、Fr2-3-4。Fr2-3-1經(jīng)DS反相柱色譜，70%甲醇洗脫，得到化合物52.7g。Fr2-3-2經(jīng)DS反相柱色譜，以40%甲醇洗脫，分為3個(gè)局部2A2。2A經(jīng)HPL純化45%甲醇，流速為5Lin-1，別離得到化合物35.8g。2B經(jīng)硅膠柱色譜，以氯仿-甲醇251洗脫后，又經(jīng)SephadexLH-20柱色譜，氯仿-甲醇201純化得到化合物45.6g。Fr2-6經(jīng)硅膠柱色譜，以石油醚-乙酸乙酯21做洗脫液，得到化合物62.3g。3構(gòu)造鑒定化合物1為白色無(wú)定形粉末。HR-ESI-S顯示其準(zhǔn)分子離子峰/z525.1420-H-計(jì)算值為526.1475，結(jié)合NR推測(cè)其分子式為27H2611。其紅外光

6、譜可觀(guān)察到有羥基3373-1、共軛羰基1710-1和苯環(huán)1606，1514，1458，1361，1271，826-1的特征吸收。1H-NRDS-d6，600Hz中，可觀(guān)察到以下構(gòu)造片段的質(zhì)子信號(hào)：2個(gè)對(duì)位取代苯環(huán)：7.272H，d，J=8.4Hz，H-7，6.722H，d，J=8.4Hz，H-8；7.872H，d，J=8.3Hz，6.832H，d，J=8.3Hz；1組四取代苯環(huán)的間位氫信號(hào)：6.441H，d，J=2.4Hz，6.171H，d，J=2.4Hz；1組反式烯鍵氫信號(hào)：7.191H，d，J=16.4Hz，6.821H，d，J=16.4Hz；1個(gè)六碳糖信號(hào)：5.011H，d，J=7.8H

7、z，5.061H，dd，J=7.8，8.4Hz，3.571H，dd，J=8.4，8.4Hz，3.391H，dd，J=8.4，8.4Hz，3.241H，3.511H，dd，J=10.2，4.8Hz，3.641H，brd，J=10.2Hz，根據(jù)糖端基氫的偶合常數(shù)，可判斷該糖構(gòu)型為構(gòu)型；化合物1水解后經(jīng)衍生化反響，氣相分析結(jié)果與D-葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)據(jù)一致，確定該糖為D-葡萄糖。由此可推斷該化合物中含有2個(gè)對(duì)位取代苯環(huán)、1個(gè)四取代苯環(huán)、1個(gè)反式雙鍵和1個(gè)-D-葡萄糖，推測(cè)該化合物可能為有苯環(huán)基團(tuán)取代的二苯乙烯苷類(lèi)化合物。13-NRDS-d6，150Hz及DEPT圖譜進(jìn)一步確定其構(gòu)造中存在3個(gè)苯環(huán)：132

8、.5，-1，134.8，-2，150.9，-3，103.4H，-4，154.5，-5，101.8H，-6；128.8，-9，128.3H，-10，14，116.0H，-11，13，157.6，-12；121.3，-1，132.2，-2，6，115.6，-3，5，162.4，-4，1個(gè)共軛雙鍵120.9H，-7，129.0H，-8，1個(gè)羰基片段165.5，-7，1個(gè)葡萄糖101.8H，-1，74.8H，-2，74.6H，-3，70.3H，-4，77.5H，-5，61.2H2，-6?；衔?與2，3，5，4-四羥基二苯乙烯-2-D-葡萄糖苷的NR數(shù)據(jù)7接近，區(qū)別在于化合物1多了1個(gè)苯環(huán)、1個(gè)羰基和

9、1個(gè)羥基的片段。HB譜圖上，可觀(guān)察到H7.87H-2，6與165.5-7相關(guān)，又與162.4-4的芳香叔碳相關(guān)，因此推測(cè)羰基與苯環(huán)相連，且苯環(huán)的對(duì)位被氧化。1H-1HSY譜圖上，H5.06與5.01H-1、3.57H-3相關(guān)，說(shuō)明H5.06是H-2信號(hào)。又經(jīng)HB發(fā)現(xiàn)，H5.06H-2與165.5-7相關(guān)，據(jù)此確定葡萄的2位與羰基相連。綜上分析，結(jié)合2，3，5，4-四羥基二苯乙烯-2-2-對(duì)香豆?；?D-葡萄糖苷的NR數(shù)據(jù)7，化合物1的構(gòu)造鑒定為2，3，5，4-四羥基二苯乙烯-2-2-對(duì)羥基苯甲?；?D-葡萄糖苷。其構(gòu)造見(jiàn)圖1，數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。化合物2白色無(wú)定形粉末，p161164，ESI-S/z4

10、05-H-。1H-NRDS-d6，400Hz：7.661H，d，J=16.4Hz，H-，7.432H，d，J=8.0Hz，H-2，6，6.871H，d，J=16.4Hz，H-，6.732H，d，J=8.0Hz，H-3，5，6.531H，d，J=2.8Hz，H-6，6.171H，d，J=2.8Hz，H-4，4.391H，d，J=7.6Hz，H-1，3.223.696H，H-26。根據(jù)文獻(xiàn)8鑒定為2，3，5，4-四羥基二苯乙烯-2-D-葡萄糖苷?；衔?白色無(wú)定形粉末，ESI-S/z405-H-。1H-NRDS-d6，400Hz：6.191H，d，J=2.8Hz，H-5，6.251H，d，J=2.

11、8Hz，H-3，6.751H，d，J=12.7Hz，H-，6.541H，d，J=12.7Hz，H-，7.102H，d，J=8.5Hz，H-2，6，6.642H，d，J=8.5Hz，H-3，5，4.591H，d，J=7.7Hz，H-1，3.253.806H，H-26。根據(jù)文獻(xiàn)9鑒定為2，4，6，4-四羥基二苯乙烯-2-D-葡萄糖苷?；衔?黃色無(wú)定形粉末，p186188。1H-NRDS-d6，400Hz：2.403H，s，-H3，3.333.786H，H-26，5.081H，d，J=6.0Hz，H-1，6.701H，d，J=2.0Hz，H-7，7.171H，s，H-2，7.291H，d，J=2.

12、0Hz，H-5，7.471H，s，H-4，13.131H，s，-H。13-NRDS-d6，100Hz：106.5-5，107.3-7，114.4-8，114.5-9，119.4-4，124.3-2，132.1-4，136.4-10，147.2-3，160.7-1，161.7-8，164.7-6，181.9-10，186.5-9，100.6-1，77.5-5，76.6-3，73.3-2，69.8-4，60.8-6，56.16-H3，21.43-H3。根據(jù)文獻(xiàn)2鑒定為大黃素-8-D-葡萄糖苷。化合物5黃色無(wú)定形粉末，p234237。1H-NRDS-d6，400Hz：2.403H，s，3-H3，3.

13、163.756H，H-26，3.953H，s，-H3，5.151H，d，J=7.8Hz，H-1，6.841H，s，H-7，7.161H，s，H-2，7.341H，d，J=2.4Hz，H-5，7.471H，s，H-4，13.081H，s，1-H。13-NRDS-d6，100Hz：106.5-5，107.3-7，114.4-8，114.5-9，119.4-4，124.3-2，132.1-4，136.4-10，147.2-3，160.7-1，161.7-8，164.7-6，181.9-10，186.5-9，100.6-1，77.5-5，76.6-3，73.3-2，69.8-4，60.8-6，56.16-H3，21.43-H3。根據(jù)文獻(xiàn)2鑒定為大黃素甲醚-8-D-葡萄糖苷?；衔?黃色無(wú)定形粉末，p295298。1H-NRDS-d6，400Hz：13.201H，s，1-H，11.091H，s，6-H，7.451H，d，J=2.6Hz，H-4，7.231H，d，J=2.4Hz，H-5，7.131H，d，J=2.6Hz，H-2，6