黃酮類化合物、醌類化合物教案

1、第四章黃酮類化合物目的要求：.掌握黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)類型，了解其生物活性。.掌握黃酮類化合物的理化性質(zhì)及不同類型的化學(xué)鑒別方 法。.掌握黃酮類化合物的提取與分離方法和檢識方法。.掌握各種光譜在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)鑒定中的應(yīng)用。教學(xué)時數(shù)：6學(xué)時。重點與難點：重點：黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)分類及理化性質(zhì)難點：黃酮類化合物的顏色、溶解性、及酸性第一節(jié)概述黃酮類化合物為一類植物色素，分布廣，數(shù)量大，生理活性 多樣。名稱來源：黃酮大多呈黃色，又帶有酮基，所以就叫黃酮。(一)定義泛指兩個具有酚羥基的苯環(huán)通過中央三碳原子相互連接而 成的一系列化合物，母核結(jié)構(gòu)為：生源：三個丙二酰輔酶 A和一個桂皮酰輔酶A生合成而產(chǎn) 生

2、。(二)結(jié)構(gòu)分類及結(jié)構(gòu)類別間的生物合成關(guān)系.分類依據(jù)：中央三碳鏈的氧化程度、B環(huán)連接位置及三碳鏈是否成環(huán)。(2)黃酮醇(3)二氫黃酮(1)黃酮類頁腳類（4）二氫黃酮醇類（5）花色素類（6）黃烷3, 4二醇類（7）雙苯叱酮類（8）黃烷-3-醇類（9）異黃酮 （10）二氫異黃酮類（11）查耳酮類 （12）二氫查耳酮類（13）橙酮類（14）高異黃酮類此外，還有雙黃酮類：由兩分子黃酮或兩分子二氫黃酮或一 分子黃酮及一分子二氫黃酮以 C-C或C-O-C鍵連接而成。黃酮木脂體類：水飛薊素生物堿型黃酮。.各主要類別間的生物合成關(guān)系（三）存在形式天然黃酮類化合物多以昔類形式存在，包括氧昔與碳昔（例如葛根素），

3、糖通常聯(lián)在A環(huán)6, 8位。組成黃酮甘的糖主要有：單糖類：D-葡萄糖，L-鼠李糖，D-半乳糖，D-葡萄糖醛酸雙糖類：槐糖（glca B1-2glc）,蕓香糖（rha a 1-6glc）（四）黃酮類化合物的生理活性.對心血管系統(tǒng)的作用（1獷張冠脈：蘆丁、葛根素黃酮片臨床用于心絞痛、高血壓。（2）Vip樣作用：橙皮昔可降低血管脆性及異常通透性，用作 高血壓輔助治療劑。（3）抑制血小板聚集作用：抑制ADP、膠原或凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集，從而防止血栓形成。（4）降低血膽番醇作用：山楂總黃酮頁腳.抗肝臟毒性作用：水飛薊素為二氫黃酮醇與苯丙素衍生物縮合而成，對肝細胞膜有穩(wěn)定作用，能保護肝臟，改善肝功能，適用

4、于急慢性肝炎、 肝硬化、中毒性肝損傷。.抗炎作用：黃酮類化合物可抑制脂氧化酶，從而抑制前列腺素的生物合 成，達到抗炎目的。.雌性激素樣作用：大豆素己烯雌酚.抗菌及抗病毒作用：黃苓甘：抗菌山奈酚：抗病毒.止咳平喘驅(qū)痰作用.抗癌作用.解痙作用二、黃酮類化合物的性質(zhì)與呈色反應(yīng)（一）性質(zhì)各類黃酮類化合物的顏色、旋光性、溶解性、類別性質(zhì)黃酮、黃酮醇及其昔二氫黃酮、二氫黃酮醇及其昔 異 黃酮查耳酮花色素顏色灰黃黃無色微黃黃橙黃隨PH不同而改變旋光性昔元：無頁腳昔：有 昔元及昔均有 昔元：無昔：有昔元：無昔：有昔元：無甘：有水溶性平面型分子，分子間引力大，溶解性差非平面分子，溶解性較黃酮類好溶解性一般較差溶

5、解性較異黃酮好水溶性（二）溶解度：溶解度因結(jié)構(gòu)及存在狀態(tài)不同而存在較大差異。一般游離昔元難溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙 酯、乙醴等有機溶劑及稀堿溶液中。水溶性大小順序為：花色昔元 非平面型分子 平面型分子。平面型分子堆砌緊密，分子作用力大昔元母核引入羥基后，水溶性增大，脂溶性減小；引入甲氧 基或異戊烯基后，脂溶性增大，水溶性減小。黃酮昔類易溶于熱水、甲醇、乙醇等強極性溶劑，難溶于或 不溶于苯、乙醴、氯仿、石油醴等。糖基數(shù)目和位置對溶解度有 一定影響。（三）酸堿性1.酸性黃酮類化合物母核上有酚羥基取代時化合物具有酸 性，酸性與酚羥基取代的數(shù)目和位置有關(guān)，此性質(zhì)可用于鑒別和分離。黃酮類化

6、合物酸性強弱與結(jié)構(gòu)間的關(guān)系羥基位置酸性溶解性頁腳7, 4 / -二羥基7或4 / -羥基一般酚羥基5-羥基強弱溶于5%NaHCO3溶液溶于5%Na2CO3溶液溶于0.2%NaOH溶液溶于4%NaOH溶液2.堿性：1位氧原子有未共用電子對，表現(xiàn)微弱堿性，可與 濃鹽酸、硫酸成佯鹽，極不穩(wěn)定，遇水分解，佯鹽黃色，可用于 鑒別。（三）顯色反應(yīng).還原試驗：鹽酸-鎂粉反應(yīng)：操作過程：樣品的甲醇（乙醇）溶液 +鎂粉少許振搖十幾滴濃鹽酸（必 要時加熱）12分鐘后若在泡沫處呈紅色，則是陽性。機理：生成陽碳離子黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、二氫黃酮醇：橙紅紫紅色查耳酮、橙酮、兒茶素：陰性異黃酮：個別陽性，大多陰性花色素

7、，某些查耳酮，橙酮在鹽酸作用下即可顯色，為排除 干擾，需做對照試驗。（2）鹽酸-鋅粉反應(yīng)：同鹽酸-鎂粉（3）四氫硼鈉反應(yīng)：二氫黃酮（醇）類陽性，專屬性較高。頁腳操作過程：二氫黃酮類甲醇液+等量2%-氫硼鈉甲醇液一一 一分鐘后加濃鹽酸或濃硫酸生成紫色紫紅色若A環(huán)或B環(huán)上有一個以上羥基或甲氧基取代，則顏色加 深。.金屬鹽類絡(luò)合反應(yīng)結(jié)構(gòu)中具有3-羥基，4-酮基；5-羥基，4-酮基；鄰二酚羥 基時可與金屬離子絡(luò)合產(chǎn)生顏色反應(yīng)。(1)鑄鹽：具有3-羥基和5-羥基的黃酮均可與 2%C氯氧 錯溶液反應(yīng)生成黃色絡(luò)合物，但 3-羥基黃酮產(chǎn)生的絡(luò)合物穩(wěn)定 性大于5-羥基黃酮，加酸后3-羥基黃酮產(chǎn)生的絡(luò)合物黃色不褪

8、， 而5-羥基黃酮產(chǎn)生的絡(luò)合物黃色褪去，據(jù)此可用于區(qū)別兩類黃 酮。(2)鎂鹽：樣品溶液滴于紙上，噴醋酸鎂甲醇溶液，加熱， 紫外檢視。二氫黃酮，二氫黃酮醇：天藍色熒光異黃酮，黃酮：黃橙黃褐色(3)鋁鹽：主要用1%E氯化鋁乙醇溶液，絡(luò)合物顯黃色弁 有熒光。(4)鉛鹽：中性醋酸鉛可沉淀具有鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)的黃酮， 堿式醋酸鉛可沉淀具有酚羥基結(jié)構(gòu)的黃酮，據(jù)此可用于分離。(5)鋸鹽：具有鄰二酚羥基的黃酮可與氯化鋸甲醇溶液反 應(yīng)生成綠棕黑色沉淀，用于鑒別。(6)鐵鹽：具有酚羥基的黃酮即可顯色。.硼酸顯色反應(yīng)在無機酸或有機酸存在條件下，5-羥基黃酮或2 -羥基查耳頁腳 酮可與硼酸反應(yīng)生成亮黃色。.堿性試劑顯色

9、反應(yīng)：NH3,Na2CO3等堿性試劑處理點有樣 品的濾紙，可用于鑒別（1）二氫黃酮查耳酮（2）黃酮醇遇堿呈黃色，通入空氣變棕色（3）具有鄰二酚羥基或 3, 4-二羥基取代時，在堿液中由 黃-深紅-綠棕。第三節(jié).黃酮類化合物的提取與分離一、粗提物的制備音元可選擇乙醴、乙酸乙酯、氯仿等中強極性溶劑，音類可 選擇甲醇、乙醇、丙酮等溶劑提取。處理:有時為了防止水解，提取前要用合適的方法破壞酶的 活性。（一）提取方法1、溶劑：音類及極性較大的昔元，用乙醇、甲醇、甲醇和 水、丙酮、乙酸乙酯、沸水2、花色甘：1溢酸溶液3、昔元：氯仿、乙醴、乙酸乙酯、甲氧基多的甘元可用苯4、處理：有時為防止水解，提取前先破壞

10、水解酶的活性（二）溶劑提取法1、乙醇（甲醇）回流 濃縮成浸膏 乙醴提取游 離黃酮甘元 乙酸乙酯（正丁醇）提取黃酮甘類。萃取溶劑 系統(tǒng)：水 乙酸乙酯；正丁醇 石油醴2、用水煎煮藥材熱水提取液放冷析出黃酮頁腳3、除雜質(zhì)：醇提濃縮液，用石油醴萃取脂溶性雜質(zhì)，如葉綠素、胡蘿卜素；水提濃縮液加醇沉淀水溶性雜質(zhì)，如蛋白質(zhì)、 多糖等（二）對粗提物進行精制1、溶劑萃取法：被分離物質(zhì)與混入的雜質(zhì)性質(zhì)不同，選用 不同極性溶劑萃取達到去雜質(zhì)目的。例如：醇提液用石油醴萃取可除去油脂、蠟、葉綠素；水提液加醇沉淀可去除蛋白、多糖等 水溶性雜質(zhì)。2、堿提取酸沉淀法：由于黃酮類多具有酚羥基， 因此具有酸性，可與堿液生成鹽 后

11、被提取出來，提取液加鹽酸酸化，游離出黃酮甘元，或水溶性 較小的黃酮甘，沉淀析出例如從槐米中提取蕓香甘（蘆?。┗泵?0g （壓碎）10倍量0.4%月砂溶液，煮沸后加入槐米，弁在攪拌下加 入石灰乳至PH8,煮沸后2030分鐘，濾過，共煎煮兩次浸出液6070c下用鹽酸調(diào)至 PH34,靜置，抽濾，水洗至中 性，60 C以下干燥粗蘆丁水或乙醇重結(jié)晶（必要時用活性炭除雜質(zhì)）蘆丁純品（1）蘆丁分子中含鄰二酚羥基易被氧化，堿性條件下更易 分解，加硼砂與鄰二酚羥基結(jié)合，起保護作用；（2）堿性太強，提取過程中易破壞黃酮母核 ；（3）酸性太強，黃酮易生成洋鹽，溶解度增大，降低產(chǎn)品頁腳收率；（4）提取堿液多用石灰水，

12、因為鈣離子能使含多羥基的鞍 質(zhì)果膠，粘液質(zhì)等水溶性雜質(zhì)生成沉淀， 但浸出效果不如氫氧化 鈉溶液，且有些黃酮也可生成不溶物 .3、碳粉吸附法：適于昔類精制甲醇提取液加入活性炭至上清液無黃酮反應(yīng)， 吸附了黃酮音 的碳粉依次用沸甲醇、沸水、7%分-水、15頌-醇洗，7%分-水洗 下的基本為黃酮甘類。（三）分離方法依據(jù)：極性不同一一硅膠、氧化鋁分離（極性吸附），酚羥 基數(shù)目、位置不同一一聚酰胺分離（氫鍵吸附） ,酸性不同一一 PH梯度萃取，分子量不同一一凝膠層析，特殊結(jié)構(gòu)一一化學(xué)分離。1、硅膠色譜法（吸附色譜法）：適用于昔元的分離（1）用途：主要用于分離異黃酮、二氫黃酮、二氫黃酮醇 和高度甲基化，或乙

13、?；狞S酮及黃酮醇（2）處理：濃鹽酸除去影響分離效果的金屬離子（3）移動相：分離昔元（氯仿一一甲醇）分離昔類（氯仿 一一甲醇一一水）或者（乙酸乙酯一一丙酮一一水）2、聚酰胺色譜法：適用于分離酶、酚、黃酮。（1）性質(zhì)：聚酰胺為高聚物，常用的為錦綸 -6 （己內(nèi)酰胺 聚合而成）和錦綸-66 （己二酸與己二胺聚合而成），不溶于水、 甲醇、乙醇、乙醴、氯仿、丙酮等常用溶劑，對堿穩(wěn)定，可溶于 濃鹽酸、冰醋酸、甲酸。（2）分離原理：聚酰胺分子中具有酰胺?；?，可與酚羥基頁腳 形成氫鍵，主要依據(jù)與被分離物質(zhì)成氫鍵能力不同進行分離。（3）洗脫劑：水一一乙醇一一甲醇一一丙酮一一氫氧化鈉 水溶液（或氨水）一一甲酰胺

14、一一二甲基甲酰胺一一尿素水溶液 （洗脫能力依次增強）常用洗脫劑為水一一乙醇，水可洗下非黃酮體水溶性成分及 少數(shù)黃酮體甘；10%-30姍可洗下黃酮甘；50-95%乙醇可洗下黃 酮昔元。（4）洗脫規(guī)律：叁糖昔 雙糖昔 單糖昔 昔元。母核酚羥基數(shù)目越多，洗脫越慢；酚羥基數(shù)目相同，易成分子 內(nèi)氫鍵者吸附弱。異黃酮 二氫黃酮醇 黃酮黃酮醇。芳香核多，共軻程度高，難洗脫。3、葡聚糖凝膠層析常用Sephadex G （適用于水溶性成分分離）和 Sephadex LH-20 （可用于親脂性成分分離）。原理：音類一分子篩；昔元：凝膠非完全惰性，有一定吸附 力，這種吸附力來自分子間的氫鍵。例如：5, 7, 4-羥

15、基黃酮，3, 5, 7, 3 , 4-黃酮，3, 5, 7, 3 4 5-羥基黃酮洗脫順序為5, 7, 4-羥基黃酮3 ,5, 7, 3 ,4-黃酮3, 5, 7, 3 ,4 ,5-羥基黃酮.PH梯度萃取法樣品的乙酸乙酯溶液分別用 5%a酸氫鈉溶液，5%a酸鈉溶 液，0.2%氧化鈉溶液，4%a氧化鈉溶液萃取，依次得到 7, 4- 二羥基黃酮，7或4-羥基黃酮，一般酚羥基黃酮，5-羥基黃酮。頁腳.特定功能團分離(1)鉛鹽法：可分離含鄰二酚羥基和不含鄰二酚羥基的化 合物。(2)硼酸絡(luò)合法：含鄰二酚羥基的化合物可與硼酸絡(luò)合生成可溶于水的產(chǎn)物， 據(jù)此可用于分離。四.黃酮類化合物的鑒定與結(jié)構(gòu)測定(一)層

16、析在黃酮類鑒定中的應(yīng)用.紙層析音元：分配層析。流動相：BAW系統(tǒng)。昔：雙向紙層析。第一向：醇性溶劑展開，例如 BAW系統(tǒng), 化合物極性大，吸附強。第二向：水類溶劑展開，例如2-6%醋酸水，化合物極性大，吸附弱。Rf與結(jié)構(gòu)的關(guān)系：(1)水類溶劑展開時，平面型分子(黃酮、黃酮醇、查耳 酮)幾乎停留原點不動，非平面型分子(二氫黃酮、二氫查耳酮) Rf較大。(2)醇性溶劑展開時，同一類型音元，羥基越多，Rf越小。(3)醇性溶劑展開時，羥基被甲氧基取代，Rf增大。(4)醇性溶劑展開時，羥基糖甘化，極性增大，Rf下降。(2) (3) (4)用酸水展開時，上述順序顛倒。.TLC:主要指吸附薄層，常用硅膠 T

17、LC,聚酰胺TLCo 硅膠TLC:鑒定弱極性化合物。聚酰胺TLC:分離大多數(shù)黃酮及甘類，適用范圍廣，分離效頁腳果好。(二)紫外光譜在黃酮類結(jié)構(gòu)鑒定中的應(yīng)用苯甲酰基桂皮?；饕珹環(huán)的苯甲?；椭饕?B環(huán)的桂皮酰基組成 了黃酮類化合物的交叉共軻體系，使黃酮類主要有兩個紫外吸收 帶，帶I ( 300-400nm )-由桂皮酰基系統(tǒng)引起，主要反應(yīng)B環(huán)取代情況；帶 ( 220-280 nm)-由苯甲?；到y(tǒng)引起，主 要反應(yīng)A環(huán)取代情況。通常測定樣品在甲醇溶液中的紫外光譜后測定加入診斷試 劑后的紫外光譜，以了解樣品的羥基取代情況，常用診斷試劑有： 甲醇鈉、醋酸鈉、醋酸鈉/硼酸、三氯化鋁及三氯化鋁/

18、鹽酸。.甲醇溶液中的紫外光譜(1)黃酮、黃酮醇：在 200-400 nm之間出現(xiàn)兩個主要吸 收峰，二者峰形相似，但帶I位置不同，可據(jù)此進行分類。在黃酮及黃酮醇母核上，如 7-及4 位引入羥基、甲氧基等 供電基，將促進結(jié)構(gòu)重排，引起相應(yīng)吸收帶紅移，通常，整個母 核上氧取代程度越高，帶I越向長波方向位移。帶II的峰位主要受 A-環(huán)氧取代程度的影響，B-環(huán)的取代基 對其峰位影響甚微，但可影響它的形狀。當 B環(huán)有3 ,4-二氧 取代時，帶n將為雙峰。(2)查耳酮及橙酮類：共同特征是帶I很強，為主峰；帶 n較弱，為次強峰。查耳酮中，帶n位于220270 nm,帶I位于340390 nm ; 橙酮中，常顯

19、現(xiàn)34個吸收蜂，但主要吸收峰一般位于 370 430 nm。頁腳(3)異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇 這三類化合物中，除有由A-環(huán)苯甲酰系統(tǒng)引起的帶n吸收外，因 B環(huán)不與叱喃酮環(huán) 上的?；草V(或共軻很弱)，故帶I很弱。.加入診斷試劑后引起的位移及在結(jié)構(gòu)測定中的意義(1)甲醇鈉：是一種強堿，使黃酮母核上的所有羥基產(chǎn)生 某種程度的離子化，對黃酮及黃酮醇紫外光譜的影響用來檢查游 離的3及4 -羥基。如加入甲醇鈉后帶I紅移 4060 nm ,強度 不降，示有4-羥基；紅移5060 nm,強度下降，示有3-羥基， 但無4-羥基；若吸收譜隨時間延長而衰退，示有對堿敏感的取 代圖式。(2)醋酸鈉：市售醋酸鈉

20、因含微量醋酸，堿性較弱，只能 使黃酮母核上酸性較強的 7-羥基離解，弁影響峰帶紅移。如加 入醋酸鈉(未熔融)后帶n紅移 520nm,示有7-羥基。(3)醋酸鈉/硼酸：在醋酸鈉的堿性存在下，硼酸可與分子 中的鄰二酚羥基絡(luò)合，引起相應(yīng)吸收帶紅移。醋酸鈉/硼酸譜帶I紅移1230nm ,示B環(huán)有鄰二酚羥基；帶n紅移510nm , 示A環(huán)有鄰二酚羥基。(4)三氯化鋁/鹽酸：分子中有鄰二酚羥基、3-羥基-4-酮基或5-羥基-4-酮基時，可與三氯化鋁絡(luò)合，引起相應(yīng)吸收帶紅 移；鄰二酚羥基與三氯化鋁形成的絡(luò)合物很不穩(wěn)定，加入少量酸水即可分解。若三氯化鋁/鹽酸譜=三氯化鋁譜，示結(jié)構(gòu)中無鄰二 酚羥基；若三氯化鋁/

21、鹽酸譜中三氯化鋁譜，示結(jié)構(gòu)中可能有鄰 二酚羥基，帶I紫移 3040nm,示B環(huán)有鄰二酚羥基，紫移 5065nm,示A、B環(huán)均可能有鄰二酚羥基； 三氯化鋁/鹽酸譜 =甲醇譜，示無3或5羥基。三氯化鋁/鹽酸譜較甲醇譜帶I紅移頁腳3555nm,示只有5-羥基，紅移I紅移60nm ,示只有3-羥基, 紅移5060nm,示可能同時有3及5羥基。小結(jié)：一、掌握黃酮類化合物的基本結(jié)構(gòu)分類和黃酮類化合物的理 化性質(zhì)。二、掌握黃酮類化合物酸堿性， 酸性強弱與結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系 及在提取分離中的應(yīng)用。三掌握黃酮類化合物梯度 PH分離法、聚酰胺柱層析法、 硅膠柱層析法和凝膠過濾法的原理與應(yīng)用。課后分析（學(xué)生反映、經(jīng)驗教

22、訓(xùn)、改進措施）；本章也是昔類成分的重要內(nèi)容，涉及的知識面廣，尤其是UV、NMR的波譜知識是本章的重點和難點，這也是要求學(xué)生掌 握的內(nèi)容，所以課堂講解要條理清楚，弁且對于黃酮的顏色反應(yīng)、 UV、NMR譜都采取了及時進行小結(jié)的講解方式幫助學(xué)生加強理 解。另一措施是加強習題課的輔導(dǎo)。思考題：1、黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)類型有哪些？分類依據(jù)是什么？2、黃酮類化合物的主要鑒別反應(yīng)有哪些？3、聚酰胺層析法分離黃酮類化合物的原理是什么？常用洗 脫劑、洗脫規(guī)律是什么？45、怎樣應(yīng)用紫外光譜法鑒定黃酮類化合物？56、黃酮類化合物的質(zhì)譜裂解規(guī)律有哪些？第五章釀類化合物目的要求：.掌握酶類化合物的基本結(jié)構(gòu)及分類。頁腳.掌

23、握釀類化合物的理化性質(zhì)及其衍生物的制備。.掌握釀類化合物的提取分離及結(jié)構(gòu)鑒定方法。, 了解2D NMR譜及MS在結(jié)構(gòu)鑒定中的應(yīng)用。教學(xué)時數(shù)：4學(xué)時。重點和難點：重點：苯琨、祭釀、菲釀及慈釀的結(jié)構(gòu)類型難點：意釀的理化性質(zhì)一一 顏色、升華性、溶解度、及與結(jié)構(gòu)的關(guān)系：一、酶類化合物的結(jié)構(gòu)類型（一）苯酶類對苯釀鄰苯釀amphi-（2,6）對菲釀如氧化慈酚、意酚（二）蔡醍類a- （1, 4）蔡釀,（1,2）禁釀禁釀（三）菲釀類鄰菲釀（四）慈釀類包括慈釀衍生物及其不同程度的還原產(chǎn)物, 酚、慈酮及慈酮的二聚體。的二聚體。慈釀氧化慈酚 酮 慈酚1、慈釀衍生物慈釀母核上有羥基、羥甲基、甲氧基和竣基取代。根據(jù)羥基

24、在慈釀母核上的分布情況，可將羥基慈釀衍生物分 為兩類。（1）大黃素型 羥基分布在兩側(cè)的苯環(huán)上， 多數(shù)化合物呈黃頁腳 色。(2)茜草素型 羥基分布在一側(cè)的苯環(huán)上，顏色較深，多為 橙黃至橙紅。2、慈酚或慈酮衍生物存在于新鮮植物中，該類成分可慢慢氧化成慈酶類成分。3、二慈酮類衍生物二、酶類化合物的理化性質(zhì)(一)物理性質(zhì)：1、性狀多數(shù)為有色結(jié)晶，多數(shù)慈釀成昔后難以得到完好結(jié)晶。酶類 化合物母核無酚羥基取代時，無色，引入酚羥基等助色團，表現(xiàn) 一定的顏色，取代越多，顏色越深。2、升華性游離的酶類化合物具升華性。3、溶解度游離酶類極性較小，一般溶于乙醇、乙醴、苯、氯仿。成昔后極性增大，易溶于乙醇、甲醇。(二

25、)化學(xué)性質(zhì)1、酸性酶類化合物具有酸性，因分子中酚羥基的數(shù)目及位置不同，酸性表現(xiàn)顯因結(jié)構(gòu)上多具酚羥基，所以具有一定的酸性，易溶于堿性水 液，但加酸后又可重新析出。酸性強弱與分子中是否存在酚羥基、 酚羥基的數(shù)目及位置有關(guān)。帶有竣基的酶類化合物酸性較強，a -羥基苯酶頁腳或禁釀的釀核上有羥基時， 也會出現(xiàn)類似?；乃嵝?， 這類化合物可溶在NaHCO3水溶液中；蔡釀及慈釀苯環(huán)上B -羥基酸性次之，a-羥基酸性最弱， 因伊羥基受埃基吸電子影響，電子云偏移，質(zhì)子解離度增高，酸 性較強，a-羥基與與相鄰的埃基形成分子內(nèi)氫鍵，故酸性很弱；酚羥基數(shù)目增多則酸性相應(yīng)增強綜上所述，酸性強弱排列順序如下含1個-COO

26、H含2個以上B-OH含1個伊OH含2個a-OH 含 1 個 a-OH根據(jù)慈釀衍生物酸性強弱不同， 可通過用不同的堿性堿化后進行梯度萃取法進行提取分離2、顏色反應(yīng)(1)菲格爾(Feigl)反應(yīng)：酶類衍生物在堿性條件下經(jīng)加熱能迅速與醛類及鄰二硝基苯反應(yīng)生成紫色化合物(2)堿性條件下的呈色反應(yīng)：羥基慈釀類在堿性溶液中發(fā) 生顏色改變，會使顏色加深，多呈橙、紅、紫紅及蘭色。顯色反應(yīng)與形成共軻體系的酚羥基及?；嘘P(guān)，該有色物質(zhì)不溶于有機溶劑。相應(yīng)的慈酚、慈酮、二慈酮類化合物與堿液不 顯紅色液，只能呈黃色。本反法應(yīng)是檢產(chǎn)物中識天然羥基慈酶類成分存在的最常用方法之一，對原有輔助羥基慈釀結(jié)構(gòu)的判定同樣有幫助。(

27、3)無色亞甲藍顯色實驗：用于 PPC和TLC噴霧齊IJ,是檢 出苯釀和禁釀的專用顯色劑。頁腳（4）與活性次甲基試劑的反應(yīng)：苯酶及禁釀類化合物當其 釀環(huán)上有未被取代的位置時，可在氨堿性條件下與一些含有活性 次甲基試劑的醇溶液反應(yīng)，生成藍綠色或藍紫色。（5）與金屬離子的反應(yīng)：在酶類化合物中，如果有a -酚羥 基或鄰位二酚羥基結(jié)構(gòu)時，則可與 Pb2+、Mg2+等金屬離子形 成絡(luò)合物。三、酶類化合物的提取分離（一）游離醍類的提取1、有機溶劑提取法2、堿提取-酸沉淀法：帶游離酚羥基的酶類3、水蒸氣蒸儲法（二）游離羥基慈醍的分離PH梯度萃取法：2、吸附硅膠層析（三）慈釀昔類與慈釀衍生物昔元的分離極性不同，

28、在有機溶劑中的溶解度不同。（四）慈釀昔類的分離主要應(yīng)用層析法，一般用溶劑法或鉛鹽法處理粗提物，除去大部分雜質(zhì)。鉛鹽法：醋酸鉛與慈釀昔成沉淀溶劑法：正丁醇萃取層析法：硅膠、葡聚糖凝膠 LH-20、反相硅膠.四、酶類化合物的結(jié)構(gòu)鑒定（一）酶類化合物的紫外光譜1、苯釀和禁釀的紫外光譜頁腳苯釀有三個主要吸收峰：240 （強），285 （中強），400 （弱）禁釀有四個吸收峰：245, 251, 335 （苯樣結(jié)構(gòu)引起）；257（釀樣結(jié)構(gòu)引起）2、慈釀的紫外光譜羥基慈釀有五個主要吸收帶I : 230左右；II : 240-260 （苯樣結(jié)構(gòu)引起）；田：262-295（釀樣結(jié)構(gòu)引起），受B酚羥基影響；IV: 305-389 （苯樣結(jié)構(gòu)引起）；V: 400（?；穑┦躠