硒檢測作業(yè)指導(dǎo)書

1、硒檢測作業(yè)指導(dǎo)書1.試劑及其配制1.1硒標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液（0.400mg/ml）:稱取0.1405g二氧化硒（純度99.9%）于50ml燒杯中，用適量水溶解后，移入250ml量瓶中，加鹽酸溶液至標(biāo)線，混勻。1.2硒標(biāo)準(zhǔn)中間溶液（4.00ug/ml）：量取2.50ml硒標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液于250ml量瓶中，加鹽酸溶液至標(biāo)線，混勻。1.3硒標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（0.100ug/ml）：量取2.50ml硒標(biāo)準(zhǔn)中間溶液于100ml量瓶中，加鹽酸溶液至標(biāo)線，混勻。1.4高氯酸-硫酸-鉬酸鈉混合溶液：稱取7.5g鉬酸鈉溶于150ml水中，加入200ml高氯酸（=1.66g/ml）和150ml去硒硫酸，混勻。貯于500ml試

2、劑瓶中。1.5去硒硫酸：量取200ml硫酸（=1.84g/ml），在攪拌下，緩緩加入200ml水中，加30ml氫溴酸（=1.38g/ml），混勻，置沙浴上加熱至冒白煙。1.6鹽酸：=1.19g/ml。1.7 EDTA-鹽酸羥胺混合溶液：量取100mlEDTA溶液，10ml鹽酸羥胺溶液，加水稀釋至1000魔力。1.8 EDTA溶液（0.2mol/l）:稱取37g EDTA于250ml燒杯中，加適量水，加熱溶解，冷卻后稀釋至500ml。1.9鹽酸羥胺（100g/l）：稱取10g鹽酸羥胺于100ml燒杯中，用水溶解后，并稀釋至100ml。1.10甲酚紅指示液（0.4g/l）：稱取40mg甲酚紅于10

3、0ml燒杯中，加少量水及2滴氨水溶液溶解，加水至100ml。1.11氨水溶液（1+1）：取一定體積氨水（=0.90g/ml）與等體積水混勻。1.12鹽酸溶液：0.1mol/l。1.13 2,3-二氨基萘（DAN）溶液（1g/l）：稱取400mgDAN于500ml燒杯中，加400ml鹽酸溶液溶解，然后轉(zhuǎn)入1000ml錐形分液漏斗中，在振蕩器上振蕩15min使其全部溶解，加入80ml環(huán)己烷再振蕩5min，靜置分層后，收集水相，棄去有機(jī)相，如此反復(fù)純化數(shù)次，直至有機(jī)相的熒光強(qiáng)度降到接近環(huán)己烷的熒光強(qiáng)度為止。將純化后的DAN溶液貯于棕色瓶中，加入環(huán)己烷使其覆蓋液面約1cm厚，置于冰箱中保存，有效期一個(gè)

4、月。1.14 環(huán)己烷：若有熒光雜質(zhì)需重蒸餾提純，用過的環(huán)己烷重蒸餾后可再使用。2.繪制工作曲線a）取6個(gè)50ml燒杯，分別加入0ml，0.50ml，1.00ml，2.00ml，3.00ml和4.00ml硒標(biāo)準(zhǔn)使用溶液，加水稀釋至約10ml，混勻；b)加5ml混合酸溶液，在沙浴中加熱消化至冒濃白煙，至溶液變黃。取下冷卻至室溫，溶液回復(fù)為無色，用水稀至約10ml。加5ml鹽酸，將燒杯放在沙浴表面加熱至溶液變黃為止。取下冷卻至室溫；c)將溶液移到50ml比色管中，用少量水洗凈燒杯，洗液并入比色管中。加5mlEDTA混合溶液，45滴甲酚紅指示液。用氨水溶液或鹽酸液調(diào)節(jié)pH為1.52.0（粉橙色），加3

5、.0mlDAN溶液，搖勻，置沸水浴中加熱5分鐘取下冷卻到室溫。將溶液移入60ml分液漏斗中，用少量洗滌比色管，洗液并入分液漏斗中。加3.0ml環(huán)己烷，振搖4min，分層后棄去水相；d)將環(huán)己烷層從分液漏斗移入1cm測定池中，在熒光分光光度計(jì)上，以376nm為激發(fā)波長，520nm為發(fā)射波長，環(huán)己烷為參比。測定硒的熒光強(qiáng)度Ii，將測定數(shù)據(jù)記入表中；e)以熒光強(qiáng)度Ii-Io(標(biāo)準(zhǔn)空白)為縱坐標(biāo)，相應(yīng)硒含量（ug）為橫坐標(biāo)繪制工作曲線，并計(jì)算曲線斜率b和截距a。3.樣品測定量取5.0ml50.0ml過濾的水樣，于50ml燒杯中，一下按繪制工作曲線步驟測定熒光強(qiáng)度Iw,同時(shí)測定分析空白熒光強(qiáng)度Ib。4.記錄與計(jì)算將測得數(shù)據(jù)記入表中，按式（19）或式（20）計(jì)算水樣中硒的濃度： =m/v1000(19) =(Iw-Ib)-a/bV1000(