大鼠CAG證病結(jié)合模型的宏觀癥征觀察

1、大鼠CAG證病結(jié)合模型的宏觀癥征觀察【摘要】目的:觀察大鼠慢性萎縮性胃炎(AG)證病結(jié)合模型宏觀癥征的改變。方法：istar雌性大鼠，隨機(jī)分為對照組、AG組、脾虛AG組、肝郁AG組和腎虛AG組。AG造模采用脫氧膽酸鈉和阿斯匹林水溶液交替飲用加免疫損傷法，脾虛造模采用耗氣破氣加饑飽失常法，肝郁造模采用鉗夾激怒加腎上腺素注射法，腎虛造模采用TU飲用法?？傇炷r間3551周。結(jié)果：各AG證病結(jié)合模型在病癥、舌象、體重、身長、尾長、Lees指數(shù)、腹膜后脂肪濕重和指數(shù)、體溫、食量和飲水量、口腔pH值、胃液pH值等方面出現(xiàn)與衰老、虛證、肝郁、發(fā)育、代謝、胃粘膜萎縮等相關(guān)的變化。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)重視慢性造模的證

2、病結(jié)合模型宏觀癥征的觀察，具有一定意義?！娟P(guān)鍵詞】大鼠；AG；證病結(jié)合模型；宏觀癥征宏觀癥征是反映人體病理的重要指征，也是中醫(yī)學(xué)的臨床辨證的主要根據(jù)。我們在大鼠AG證病結(jié)合模型的實(shí)驗(yàn)研究中重視宏觀癥征的觀察。1材料和方法1.1動物及分組普通級istar雌性大鼠，320只，體重(198.723.71)g，北京醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物科學(xué)部提供。按體重配對隨機(jī)分為5組,對照組60只，AG組65只，脾虛AG組65只，肝郁AG組65只，腎虛AG組65只。1.2藥品及試劑脫氧膽酸鈉(北京市海淀區(qū)微生物培養(yǎng)基制品廠,批號930901)0.3%水溶液；阿斯匹林(湖南洞庭制藥廠，批號940722)0.6%水溶液；川厚

3、樸:枳實(shí):大黃(購自北京北新中藥店，經(jīng)鑒定生大黃為Rheupalatu，川厚樸為agnliaffiinalis，枳實(shí)為itrusaurantiu)為3:3:2的100%水煎劑；0.1%腎上腺素注射液(北京制藥廠,批號92041710)；甲基硫氧嘧啶(TU，北京化工廠，批號750820)0.08%水溶液。1.3造模方法1.4各組處置動物購回預(yù)養(yǎng)2周后造模。對照組：正常飼養(yǎng)；AG組：AG造模；脾虛AG組:AG造模加脾虛造模；肝郁AG組：AG造模加肝郁造模；腎虛AG組：AG造模加腎虛造模。各組分別于實(shí)驗(yàn)35、45、51周分3批處死動物檢測各指標(biāo)。1.5觀察指標(biāo)實(shí)驗(yàn)前，實(shí)驗(yàn)過程和實(shí)驗(yàn)第35、45、51

4、周分批觀察動物病癥及活體舌象，體重，身長，尾長，計(jì)算Lees指數(shù)，腹膜后脂肪濕重和指數(shù)，體溫，食量，飲水量，拉尾排便陽性率，氧耗量，口腔pH值，胃液pH值。腹膜后脂肪指數(shù)為脂肪重量與體重之比。體溫為腋溫，采用半導(dǎo)體溫度計(jì)檢測。食量和飲水量采用組內(nèi)群測方法，連續(xù)測量1周。氧耗量檢測參考徐敏方法1?？谇籶H值用何慶年法2:精細(xì)試紙(pH6.98.4)從口側(cè)放入口腔，讓動物用舌頭攪拌數(shù)下,取出比色。測量前30in實(shí)驗(yàn)組將藥液換成自來水。胃液pH值按唐旭東法：動物禁食不禁水24h，乙醚吸入麻醉,剖腹后結(jié)扎賁門和幽門，摘出全胃，沿胃大彎剖開胃腔，以1.5l生理鹽水沖洗胃腔并搜集，用精細(xì)試紙測pH值。1.

5、6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理組間比擬采用t檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1病癥實(shí)驗(yàn)前各組動物毛色光潤，耳尾色粉紅，神態(tài)活潑，大便正常，不扎堆。對照組:實(shí)驗(yàn)27周后，毛色稍差，1只見白內(nèi)障，動物性格轉(zhuǎn)為溫順；實(shí)驗(yàn)34周毛色開場變黃。各實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)4周后，均見毛色光澤開場變差，眼稍瞇。AG組:實(shí)驗(yàn)13周后，開場見尾色黃，部分動物見稀便；實(shí)驗(yàn)27周后，見瘦弱，毛色、尾色明顯差。脾虛AG組：實(shí)驗(yàn)8周，見毛臟，稀便，神態(tài)萎靡，耳尾色白，扎堆拱背；實(shí)驗(yàn)13周后，開場見背毛稀，尾色黃；實(shí)驗(yàn)27周后，下門齒相對于對照組、AG組、肝郁AG組較黃,1只動物見白內(nèi)障。肝郁AG組：實(shí)驗(yàn)8周后，開場見易怒，尾巴發(fā)熱；實(shí)驗(yàn)34周后，見激怒明顯，無故撕咬

6、。腎虛AG組：實(shí)驗(yàn)8周見毛枯，嗜睡，眼睜不大，溫順，個別有顫抖，耳尾色白，部分溏便；實(shí)驗(yàn)27周后，開場見全身脫毛，行動緩慢，形態(tài)虛弱,3只動物見白內(nèi)障，下門齒變黃最明顯。實(shí)驗(yàn)34周后，見身上發(fā)冷。死亡率高。2.2舌象實(shí)驗(yàn)8周后，對照組舌淡紅，苔薄白;AG組舌淡紅，苔略少；脾虛AG組舌淡紅，苔少；肝郁AG組舌淡紅，苔薄白；腎虛AG組舌淡紅，暗，苔略少。實(shí)驗(yàn)27周后，對照組舌淡紅，苔薄白;AG組舌偏紅，暗；脾虛AG組舌嫩；肝郁AG組舌有偏紅趨勢；腎虛AG組舌淡嫩。2.3體重對照組動物在實(shí)驗(yàn)過程中體重穩(wěn)步上升；各實(shí)驗(yàn)組體重增長均慢于對照組；其中以脾虛AG組和腎虛AG組體重增長最慢。2.4身長對照組動

7、物在實(shí)驗(yàn)過程中身長穩(wěn)步增長；各實(shí)驗(yàn)組身長增長均慢于對照組,其中仍以脾虛AG組和腎虛AG組最慢。與體重結(jié)果一致。2.5尾長對照組動物在實(shí)驗(yàn)過程中尾長穩(wěn)步增長；各實(shí)驗(yàn)組尾長增長均慢于對照組；其中以脾虛AG組、肝郁AG和腎虛AG組尾長增長最慢。2.6Lees指數(shù)Lees指數(shù)反映肥胖程度，實(shí)驗(yàn)結(jié)果，肝郁AG組和腎虛AG組Lees指數(shù)較大。2.7腹膜后脂肪濕重和指數(shù)見表1。表1實(shí)驗(yàn)過程各組腹膜后脂肪濕重和指數(shù)變化略綜合腹膜后脂肪濕重和指數(shù)的結(jié)果，肝郁AG組和AG組脂肪有所減少，脾虛AG組和腎虛AG組顯著減少，其中又以脾虛AG組最明顯。2.8體溫各實(shí)驗(yàn)組體溫均低于對照組，以腎虛AG組體溫降低最明顯。2.9

8、食量和飲水量食量以g/只d計(jì)算，AG組和肝郁AG組與對照組食量無顯著區(qū)別,腎虛AG組食量總的少于對照組，脾虛AG組由于采用饑飽失常造模方法沒有統(tǒng)計(jì)食量。飲水量以每日每只計(jì)那么各實(shí)驗(yàn)組總體低于對照組，以每克食物計(jì)那么無明顯差異。脾虛AG組由于采用饑飽失常造模方法沒有統(tǒng)計(jì)飲水量。表2實(shí)驗(yàn)過程各組口腔pH值變化略注：P值未注明者均0.1，下同2.10口腔pH值見表2。實(shí)驗(yàn)過程中，各實(shí)驗(yàn)組口腔pH值呈現(xiàn)較穩(wěn)定的上升趨勢。2.11胃液pH值見表3。表3實(shí)驗(yàn)第51周各組胃液pH值變化略各實(shí)驗(yàn)組胃液pH值均高于對照組，說明胃酸分泌減少。3討論3.1宏觀癥征是反映人體病理的重要指征，也是中醫(yī)學(xué)的臨床辨證的主要

9、根據(jù)，本實(shí)驗(yàn)重視宏觀癥征的觀察。包括觀察較全面的宏觀癥征，以及較大樣本長時間動態(tài)觀察。3.2本實(shí)驗(yàn)主要特點(diǎn)之一是慢性造模：AG和脾虛證、肝郁證、腎虛證均為典型的慢性病證?！奥圆⒎莾H為疾病的一個簡單性質(zhì)，由于它為時間維度，而使疾病病理立體化。如：使疾病病理具有內(nèi)在性和穩(wěn)定性。也即疾病成為機(jī)體的一種主動過程，在外來病因撤除后也不易自然恢復(fù)；使疾病病理具有統(tǒng)一性。也即使不同病因形成的同一疾病病理的“個性盡量減少。所以，本實(shí)驗(yàn)證、病和證病結(jié)合模型均選擇較長的造模時間。慢性造模表達(dá)在宏觀癥征上，是出現(xiàn)一些急性模型難以出現(xiàn)的癥征。如毛息脫毛、下門齒變黃、白內(nèi)障、肝郁AG模型情緒的固化、影響身長(尾長)等

10、。3.3由于實(shí)驗(yàn)時間較長，各組動物均出現(xiàn)衰老變化，特別是上門牙變黃和白內(nèi)障。3.4與對照組比擬，動物出現(xiàn)虛象，其程度由輕至重依次為：肝郁AG組AG組脾虛AG組腎虛AG組。腎虛AG組虛象、衰老表現(xiàn)最為嚴(yán)重，特別在牙齒變黃，白內(nèi)障等表現(xiàn)方面，并漸見陽虛表現(xiàn)。能量代謝上，各實(shí)驗(yàn)組體溫均低于對照組，以腎虛AG組體溫降低最明顯。脾虛AG組和腎虛AG組動物舌象以淡嫩為特征。實(shí)驗(yàn)過程中各實(shí)驗(yàn)組體重增長均慢于對照組，又以脾虛AG組和腎虛AG組體重增長最慢。腎虛AG組食量減少。肝郁AG組造模后逐漸出現(xiàn)郁怒病癥，并漸成反射性改變。表如今對敲籠子有縮尾反響(非肝郁組只有探究反響)，或稍加刺激后即表現(xiàn)出強(qiáng)烈反響，超出

11、刺激程度。在身長上，由于造模時間長，可見各實(shí)驗(yàn)組身體發(fā)育受到影響。以脾虛AG組和腎虛AG組身長和尾長(以及肝郁AG組的尾長)增長最慢，類似中醫(yī)以長期虛損為本的“疳證表現(xiàn)。南宋?小兒衛(wèi)生總微論方?言：“脾胃虛弱，津液內(nèi)耗，皆能成疳。與以往耗氣破氣加饑飽失常法造模26周的大鼠脾虛證模型結(jié)果一致3。Lees指數(shù)反映肥胖程度，綜合實(shí)驗(yàn)全過程的結(jié)果，肝郁AG組和腎虛AG組動物L(fēng)ees指數(shù)較大，綜合腹膜后脂肪濕重和指數(shù)的結(jié)果，AG組和肝郁AG組脂肪有所減少，脾虛AG組和腎虛AG組顯著減少，其中又以脾虛AG組最明顯。實(shí)驗(yàn)過程中，各實(shí)驗(yàn)組口腔pH值呈現(xiàn)較穩(wěn)定的上升趨勢，其意義待研究。何慶年等研究發(fā)現(xiàn)，40例脾

12、虛或脾虛兼證病人與60例安康人比擬，口腔液pH值明顯偏酸2。盧紅等檢測3091名60歲以上老年人和703名5059歲老年前期人員唾液的pH值，結(jié)果顯示老年前期的一般仍處于接近中性值，而老年期那么明顯偏酸性4。遲永利等檢測舌面pH值，發(fā)現(xiàn)陽虛、濕熱患兒明顯高于正常兒童，并引述“有人認(rèn)為舌面pH值與中醫(yī)辨證有關(guān)，陰虛多偏酸性，陽虛多偏堿性。5各實(shí)驗(yàn)組胃液pH值均高于對照組，結(jié)合各實(shí)驗(yàn)組胃粘膜萎縮情況68，說明胃酸分泌減少?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1徐敏,陳革新,張曉暉,等.兔氧耗量測定方法的改良及其在陽虛模型研究中的應(yīng)用J.福建中醫(yī)藥,1989,20(6):45-47.2何慶年,周建穗,劉明建,等.安康人與脾虛患者口腔液酸堿度(pH值)之比擬及其意義J.云南醫(yī)藥,1983,4(4):229-231.3陳小野,鄒世潔,張智,等.大鼠長期脾虛造模的實(shí)驗(yàn)研究J.中國中醫(yī)根底醫(yī)學(xué)雜志,1995,1(1):37-41.4盧紅,曹宏康,樂福媛,等.老年人唾液的pH值J.臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志,1989,5(3):134-136.5遲永利,秦吉華,張葆青.小兒舌面pH值及舌菌狀乳頭計(jì)數(shù)與中醫(yī)辨證的關(guān)系J.山東中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),1989,1