玉竹多糖的提取與測(cè)定

1、玉竹多糖的提取與測(cè)定實(shí)訓(xùn)目的與要求（1）掌握玉竹多糖的提取與測(cè)定。（2）掌握從藥典資料得到某一天然藥物的含量測(cè)定方法。實(shí)訓(xùn)原理 利用多糖在硫酸的作用下先水解成單糖，并迅速脫水生成糖醛或羥甲基糖醛，然后與苯酚生成橙黃色化合物。再以比色法測(cè)定。其顏色深度與粗多糖中葡聚糖的含量成正比，用分光光度法測(cè)定其含量，計(jì)算試樣中粗多糖含量。儀器與材料儀器：紫外分光光度計(jì)試樣與試劑：玉竹、5苯酚溶液、硫酸實(shí)驗(yàn)步驟對(duì)照品溶液的制備： 精密稱取105干燥至恒重的無水葡萄糖對(duì)照品25mg，置250ml量瓶中，加適量水溶解，稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml中含無水葡萄糖0.1mg）。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備： 精密量取對(duì)照品溶液

2、0.2ml，0.4ml，0.6ml，0.8ml，1.0ml，分別置具塞試管中，分別加水至2.0ml。 各精密加入5苯酚溶液1ml，搖勻，迅速精密加入硫酸5ml，搖勻，放置10分鐘，置40水浴中保濕15分鐘，取出后迅速冷卻至室溫，以相應(yīng)的試劑為空白。 照紫外-可見分光光度法（附錄V-A），在490nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣品測(cè)定： 取本品粗粉1g，精密稱定。 置圓底燒瓶中，加水100ml,加熱回流1 小時(shí)，用脫脂棉濾過，如上重復(fù)提取1次，兩次濾液合并，濃縮，移至100ml 量瓶中，加水至刻度，搖勻。 精密量取2ml,加乙醇10ml，攪拌，離心，取沉淀

3、加水溶解，置50ml量瓶中，并稀釋至刻度，精密量取2ml,加入5苯酚溶液1ml，搖勻，迅速精密加入硫酸5ml，搖勻，放置10分鐘，置40水浴中保濕15分鐘，取出后迅速冷卻至室溫，以相應(yīng)的試劑為空白。 照紫外-可見分光光度法（附錄V-A），在490nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。紫外-可見分光光度計(jì) 它是利用物質(zhì)的分子或離子對(duì)某一波長(zhǎng)范圍的光的吸收作用，對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性分析、定量分析、及結(jié)構(gòu)分析，所依據(jù)的光譜是分子或離子吸收入射光中特定波長(zhǎng)的光而產(chǎn)生的吸收光譜。 按所吸收光的波長(zhǎng)區(qū)域不同，分為紫外分光光度計(jì)和可見分光光度法，合稱為紫外-可見分光光度法。紫外-可

4、見分光光度計(jì)使用開機(jī)（預(yù)熱30min）開始測(cè)量時(shí)要先調(diào)節(jié)儀器的零點(diǎn)使用時(shí)手拿比色皿的毛玻璃面，將比色皿用蒸餾水沖洗幾遍，然后用待測(cè)溶液沖洗兩次，然后將待測(cè)溶液加入比色皿中，加入溶液體積約為比色皿的2/3或3/4，比色皿外壁用擦鏡紙擦干。選擇波長(zhǎng)。測(cè)定物質(zhì)吸光度，記錄吸光度值。測(cè)定結(jié)束，清理。紫外可見分光光度計(jì)注意事項(xiàng)開機(jī)前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出，儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。比色皿內(nèi)溶液以皿高的2/34/5為宜，不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測(cè)定時(shí)應(yīng)保持比色皿清潔，池壁上液滴應(yīng)用擦鏡紙擦干，切勿用手捏透光面。測(cè)定紫外波長(zhǎng)時(shí)，需選用石英比色皿。測(cè)定時(shí)，禁止將試劑或液體物質(zhì)放在儀器的表面上，如有溶液溢出或其