ELISA實驗怎么判斷結(jié)果的準確性

1、Word文檔 ELISA實驗怎么判斷結(jié)果的準確性？ ELISA試驗已經(jīng)做完，做出來的數(shù)據(jù)是否精確，有沒有達到自己的預(yù)期，這些都是有許多條件打算的，詳細有哪些條件呢，今日就讓遠慕生物為您介紹！ 首先要選擇優(yōu)質(zhì)的試劑優(yōu)質(zhì)的試劑是良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果精確牢靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗一般均用板式點。 本文將敘述板式ELISA各優(yōu)質(zhì)的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果精確牢靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的留意要點，珠式、

2、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特別儀器協(xié)作應(yīng)用，嚴格遵照規(guī)定操作，必能得出精確的結(jié)果。其次 ，樣本的選擇可用作ELISA測定的標本非常廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清自然凝固、血/塊收縮后即可取得。除特別狀況外，在醫(yī)學(xué)檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標本可按常規(guī)方法

3、采集，應(yīng)留意避開溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。血清標本宜在新奇時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標本可放置于4，超過一周測定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避開氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上劇烈振蕩?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢吮緫?yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測，宜少量分裝

4、冰存。保存血清自采集時就應(yīng)留意無菌操作，也可加入適當防腐劑按試劑盒說明書的要求預(yù)備試驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新奇的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應(yīng)準時放回冰箱保存。最終，留意elisa試劑盒的操作步驟在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部，避開加在孔壁上部，并留意不行濺出，不行產(chǎn)生氣泡。加標本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標本應(yīng)更換吸嘴，以發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定（如間接法ELISA）需用稀的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋