實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)：微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷

1、微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷一、微生物學(xué)檢驗(yàn)：從樣本到報(bào)告二、主要的致病和條件致病微生物三、各系統(tǒng)感染病例及微生物學(xué)檢驗(yàn)四、藥敏試驗(yàn)五、進(jìn)展和展望2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine2診斷學(xué)問(wèn)診體檢病歷器械實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)思維最好的研究依據(jù)，個(gè)人專業(yè)技能和臨床經(jīng)驗(yàn)，病人的價(jià)值和愿望2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine3微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷血液和體液檢驗(yàn)免疫學(xué)檢驗(yàn)生物化學(xué)檢驗(yàn)微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)診斷2022/8/11Shanghai Jiao

2、 Tong University School of Medicine42022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine5病原微生物感染性疾病的診斷臨床診斷：不同微生物、不同免疫狀態(tài)的宿主以及不同感染部位而不同。器械輔助：物理檢查一般實(shí)驗(yàn)室檢查（如白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù)）可以協(xié)助進(jìn)行感染性疾病診斷。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室診斷是確診感染性疾病最重要的依據(jù)。一、微生物學(xué)檢驗(yàn)：從樣本到報(bào)告一般實(shí)驗(yàn)室檢查樣本采集樣本保存和運(yùn)送增菌分離培養(yǎng)+涂片染色鏡檢涂片染色鏡檢生化反應(yīng)鑒定藥敏試驗(yàn)結(jié)果解釋及報(bào)告2022/8/11Shanghai Jiao To

3、ng University School of Medicine6采集原則：早期、無(wú)菌、方法、適量、安全標(biāo)本處理1. 對(duì)環(huán)境敏感的細(xì)菌保溫立即送檢，其他最好2h內(nèi)2. 適宜環(huán)境保存，一般不應(yīng)超過(guò)24h3. 注意安全防護(hù)4. 標(biāo)本切勿污染，容器必須包裝好5. 烈性傳染病標(biāo)本，必須按規(guī)定包裝，由專人運(yùn)送6.厭氧性標(biāo)本應(yīng)放在專門的運(yùn)送瓶或試管內(nèi)運(yùn)送，有時(shí)可直接用抽取標(biāo)本的注射器運(yùn)送 2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine7形態(tài)學(xué)檢查1.包括不染色標(biāo)本檢查法和染色標(biāo)本檢查法2.了解有無(wú)細(xì)菌及大致菌量3.形態(tài)、結(jié)構(gòu)和染色有助初步

4、識(shí)別和分類4.初步診斷，早期診斷和治療2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine8不染色標(biāo)本1. 直接鏡檢，檢查細(xì)菌的動(dòng)力及運(yùn)動(dòng)狀況2. 壓滴法和懸滴法 有動(dòng)力：自一處移至另一處，有明顯的方向性位移 無(wú)動(dòng)力：布朗運(yùn)動(dòng)，只在原地顫動(dòng)而無(wú)位置的改變3.有些病原菌可作出初步鑒定 疑似霍亂患者，鏡下觀察到來(lái)回穿梭似流星狀運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌，制動(dòng)試驗(yàn)陽(yáng)性，初步推斷為“疑似O1群霍亂弧菌”。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine9染色標(biāo)本1革蘭染色（gram stai

5、n） 革蘭陽(yáng)性球菌 革蘭陰性桿菌2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine102抗酸染色 （acid-fast stain） 將細(xì)菌分為兩大類： 即-抗酸性細(xì)菌 -非抗酸性細(xì)菌3熒光染色 敏感性強(qiáng)，效率高。 用于結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)分枝桿菌、白喉棒狀桿菌及痢疾志賀菌等的檢測(cè)。4.鞭毛染色 有無(wú)鞭毛、鞭毛的位置及數(shù)量5.異染顆粒染色 用于白喉棒狀桿菌染色。6.芽胞染色：7.墨汁染色:2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine11分離培養(yǎng)和鑒定一、培養(yǎng)基的種

6、類和選擇 培養(yǎng)基的組成成分、培養(yǎng)基種類、培養(yǎng)基的選擇二、分離及培養(yǎng) 細(xì)菌的分離、細(xì)菌培養(yǎng)方法三、生化反應(yīng)和鑒定 碳水化合物的代謝試驗(yàn) 蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝試驗(yàn) 碳源和氮源利用試驗(yàn)2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine12培養(yǎng)基（culture medium） 人工方法配制，專供微生物生長(zhǎng)繁殖使用的混合營(yíng)養(yǎng)物制品。 根據(jù)標(biāo)本來(lái)源和可能存在的病原菌，確定選用各種分離培養(yǎng)基。伊紅美藍(lán)/麥康凱用于篩選革蘭陰性桿菌。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine

7、131平板劃線分離法2斜面接種法3液體接種法細(xì)菌的分離4穿刺接種法5傾注平板法6涂布接種法2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine14細(xì)菌培養(yǎng)方法 1需氧培養(yǎng)法 2二氧化碳培養(yǎng)法 3厭氧培養(yǎng)法 2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine15生化反應(yīng)和鑒定（一）碳水化合物的代謝試驗(yàn) 1. 糖（醇、苷）類發(fā)酵試驗(yàn) 2氧化發(fā)酵試驗(yàn)（O/F試驗(yàn)）（二）蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝試驗(yàn)1明膠液化試驗(yàn) 主要用于腸桿菌科細(xì)菌的鑒別。2吲哚(靛基質(zhì))試驗(yàn) 主要用于腸桿菌科細(xì)

8、菌的鑒定。3硫化氫試驗(yàn) 培養(yǎng)基：醋酸鉛培養(yǎng)基 應(yīng)用：腸桿菌科中屬及種鑒別2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine16（三）碳源和氮源利用試驗(yàn)1枸櫞酸鹽利用試驗(yàn) 用于腸桿菌科中菌屬間的鑒定。2丙二酸鹽利用試驗(yàn) 腸桿菌科中屬間及種的鑒別。（四）各種酶類試驗(yàn)1氧化酶試驗(yàn) 主要用于腸桿菌科細(xì)菌與假單胞菌的鑒別。2過(guò)氧化氫酶試驗(yàn)（觸酶試驗(yàn)） 用于革蘭陽(yáng)性球菌的初步分群。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine17非培養(yǎng)檢測(cè)方法一、免疫學(xué)檢測(cè)：抗原檢測(cè)、抗體檢

9、測(cè)二、分子生物學(xué)：核酸雜交、PCR、生物芯片技術(shù)三、毒素：內(nèi)毒素、外毒素四、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)五、蛋白質(zhì)組-質(zhì)譜技術(shù) 2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine18樣本采集診斷疾病，獲得含有病原微生物的樣品。無(wú)菌采集樣品容器標(biāo)有名字，號(hào)碼，日期，時(shí)間，藥物。立即送到實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)。運(yùn)送延遲最佳的環(huán)境條件選擇性培養(yǎng)基2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine19樣本采集接觸血液或其他體液。減少感染風(fēng)險(xiǎn)減少院內(nèi)感染的傳播。戴手套，接觸血液和體液，黏膜膜，破損皮膚和處理的

10、物品或表面。沾了病人的血液或體液。每一個(gè)病人換手套。立即徹底洗手和其他皮膚表面。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine20樣本采集：傷口、膿汁 1。消毒面積，用無(wú)菌棉簽蘸無(wú)菌生理鹽水。2。70乙醇或碘液消毒。3。如果膿腫自發(fā)破裂，用無(wú)菌手術(shù)刀打開(kāi)。4。擦拭膿液。5。無(wú)菌棉簽觸摸的膿液，注意不要污染周圍組織。6。容器正確標(biāo)簽。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine21樣本采集：血、尿血培養(yǎng)1，無(wú)菌操作。2。時(shí)間和部位。3。采血量。尿液細(xì)菌培養(yǎng)1，

11、無(wú)菌容器。2。清洗，中段尿。3。冷藏4-6。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine22樣本采集：糞便糞便培養(yǎng)細(xì)菌學(xué)檢查，少量樣本的。無(wú)菌拭子插入直腸或糞便。無(wú)菌管。寄生蟲，蟲卵鏡檢。成蟲寄生。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine23For bacterial isolation, The trained physician will collect only 3-5 ml into a labeled sterile containerFor

12、 virus isolation, collect 0.5-1.0 ml of CSF in a dry, sterile container樣本采集：腦脊液2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine24Throat/Nasal Swabs SpecimensTaken under direct visualization with good lightingAreas of exudation, membrane formation or inflammation are choice sites, otherwise

13、rub the tonsillar cryptsFor Bordetella pertussis, collect nasopharyngeal or pernasal swab. Inform lab in advance to prepare fresh culture media for this organism2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine25二、主要的致病和條件致病微生物細(xì)菌 病毒 真菌正常存在于宿主體內(nèi)的微生物在免疫功能低下、定居部位改變、宿主菌群失調(diào)等特定情況下引起感染。條件：正常微生物存在；免

14、疫力下降條件。變化：寄生部位改變，原寄生部位微生物數(shù)量變化導(dǎo)致失調(diào)。導(dǎo)致機(jī)體的發(fā)病。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine262022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine27微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室診斷微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室診斷2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine28微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室診斷形態(tài)學(xué)：培養(yǎng)：沙氏瓊脂鑒定：形態(tài)學(xué)；生化；分子生物學(xué)；質(zhì)譜；血清學(xué)；組織病理學(xué)2022/8/11Shangh

15、ai Jiao Tong University School of Medicine29各系統(tǒng)感染病例及微生物學(xué)檢驗(yàn)呼吸道消化道泌尿道皮膚軟組織血液生殖道中樞神經(jīng)系統(tǒng)2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine30病例16歲男童，既往健康。喉嚨痛，發(fā)燒38，頭痛頸部淋巴結(jié)腫大，咽紅，扁桃體炎性滲出。沒(méi)有其他癥狀。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine31鑒別診斷急性咽炎，原因：細(xì)菌和病毒。分枝桿菌、真菌引起急性咽炎不常見(jiàn)。 咽炎患者通常有喉嚨痛，發(fā)熱

16、，吞咽疼痛，以及扁桃腺和頸部淋巴結(jié)。需要實(shí)驗(yàn)室測(cè)試作出診斷。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine32化膿性鏈球菌：最常見(jiàn)的細(xì)菌引起的咽炎病毒：腺病毒引起咽炎，結(jié)膜炎EB病毒，傳染性單核細(xì)胞增多，主要在15-25歲年齡組其他呼吸道病毒：鼻病毒，冠狀病毒，副流感病毒，流感病毒，柯薩奇病毒，巨細(xì)胞病毒病毒測(cè)試實(shí)驗(yàn)室少做。鑒于患者情況，其他常規(guī)檢測(cè)同時(shí)，A群鏈球菌是最有可能的致病因子。應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)。包括：快速鏈球菌測(cè)試。咽拭子培養(yǎng)：雙拭子。扁桃體和咽后壁區(qū)。注意避免接觸口咽，口腔，舌。 2022/8/11Shanghai Ji

17、ao Tong University School of Medicine33結(jié)果快速檢測(cè)A鏈：基于特定碳水化合物的N -乙酰。測(cè)試敏感性差異很大，特異性達(dá)到95-100（與培養(yǎng)法相比）。5-10分鐘，培養(yǎng)需要48小時(shí)，快速抗原測(cè)試廣泛使用。 金標(biāo)準(zhǔn)：咽拭子培養(yǎng)，血平板（GAS）靈敏度達(dá)90-95。18-24小時(shí)，35-37。檢查后，再培養(yǎng)24 h。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine34結(jié)果三種溶血類型：-溶血是對(duì)紅細(xì)胞破壞不完整的綠色溶血環(huán)。 -溶血無(wú)色溶血環(huán)。 -溶血實(shí)際上是沒(méi)有溶血。A組鏈球菌是-溶血，但并非

18、所有的-溶血菌落是A鏈，-溶血菌落必需進(jìn)一步測(cè)試。其他細(xì)菌生長(zhǎng)。 2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine35過(guò)氧化氫酶試驗(yàn)和革蘭染色鏡檢觸酶試驗(yàn)。3過(guò)氧化氫，出現(xiàn)氣泡+。鏈球菌是革蘭陽(yáng)性球菌，觸酶陰性。葡萄球菌（顯示-溶血）是團(tuán)塊或集群和革蘭陽(yáng)性球菌，過(guò)氧化氫酶陽(yáng)性。進(jìn)一步測(cè)試。桿菌肽敏感2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine36致病和相關(guān)疾病鏈球菌咽炎：氣溶膠或污染食物。重要的病原菌，外毒素，造成中毒性休克。激發(fā)免疫系統(tǒng)。與心臟交叉反應(yīng)，導(dǎo)致

19、心臟瓣膜損害。感染性心內(nèi)膜炎病因。類/風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RF）和急性腎小球腎炎多關(guān)節(jié)腫脹疼痛（遷移性關(guān)節(jié)炎）和心臟雜音（損壞的心臟肌肉和心臟瓣膜）。神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，抖動(dòng)或抽搐（舞蹈癥）。腎功能障礙，眼瞼腳踝腫脹，高血壓，血液和尿液中的蛋白，尿量。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine37治療和預(yù)防及時(shí)治療，防止并發(fā)癥，如扁桃體膿腫與急性風(fēng)濕熱用抗生素可縮短癥狀持續(xù)時(shí)間?；撔枣溓蚓恃?，可用青霉素治療。兒童用阿莫西林。完整療程。青霉素過(guò)敏-紅霉素。不進(jìn)行治療，可能出現(xiàn)心臟瓣膜損害、RF或腎臟損害。2022/8/11Shang

20、hai Jiao Tong University School of Medicine38其他學(xué)校，適齡兒童，514歲，最有可能。分子檢測(cè)A鏈：6小時(shí)提供結(jié)果，不進(jìn)行培養(yǎng)確認(rèn)，節(jié)省時(shí)間。急診部門和診所。 EB病毒傳染性單核細(xì)胞增多癥，皮疹，乏力，肝腫大和/或脾腫大伴隨咽炎。異型淋巴細(xì)胞。血清學(xué)確認(rèn)以EB病毒抗體滴度的四倍增長(zhǎng)、EB病毒抗體IgM。青少年和年輕成年人咽炎可能由溶血隱桿菌引起。年輕成年人，可能受感染與C組或G型鏈球菌?？焖俚逆溓蚓?，因抗原每組不同。同樣抗生素治療。白喉很少出現(xiàn)在發(fā)達(dá)國(guó)家，足夠免疫接種。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University S

21、chool of Medicine39病例220歲大學(xué)生，排尿困難，燒灼感，無(wú)骨盆疼痛。沒(méi)有發(fā)燒，有中度恥骨上壓痛。無(wú)側(cè)翼疼痛。鑒別診斷膀胱炎，癥狀感染下泌尿道，涉及尿道膀胱。典型癥狀包括排尿疼痛（困難），尿頻，尿急，尿血。大約有50的女性一生中發(fā)生尿路感染。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine40鑒別診斷淋病奈瑟菌，沙眼衣原體，較普遍性傳播疾病。該患者：急性膀胱炎，尿液培養(yǎng)證實(shí)。無(wú)發(fā)燒或側(cè)翼（背部）疼痛。-簡(jiǎn)單膀胱炎-復(fù)雜泌尿道感染：涉及到上尿路或腎。（腎盂腎炎，感染腎臟及輸尿管上段）。復(fù)雜泌尿感染危險(xiǎn)因素包括妊娠

22、，解剖或功能性尿道異常，糖尿病，免疫抑制。感染原因：糞便菌群。無(wú)并發(fā)癥膀胱炎通常是由于一種微生物，大腸桿菌。復(fù)雜性膀胱炎-多菌。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine41病原體腸道革蘭陰性桿菌：大腸埃希菌，最常見(jiàn)原因?？死撞鷮伲横t(yī)院獲得性尿路感染奇異變形桿菌：尿路感染及結(jié)石形成銅綠假單胞菌：醫(yī)院獲得性尿路感染 革蘭陽(yáng)性球菌：腸球菌，醫(yī)院感染 病毒 ：腺病毒引起兒童出血性膀胱炎真菌：白假絲酵母菌：糖尿病患者，免疫功能低下的病人，留置導(dǎo)管者分枝桿菌 不是尿路感染的主要原因腐生葡萄球菌，無(wú)乳鏈球菌（B組鏈球菌）2022/8

23、/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine42實(shí)驗(yàn)室膿尿（白細(xì)胞尿），血尿（紅細(xì)胞）-復(fù)雜的泌尿道感染。急性膀胱炎患者10 WBC/mm3 非離心標(biāo)本。尿液試紙：非侵入性技術(shù)。篩選測(cè)試預(yù)測(cè)哪些尿樣本含有很高的細(xì)菌菌落總數(shù)。正常尿液無(wú)菌，蛋白質(zhì)，白細(xì)胞，血細(xì)胞，亞硝酸鹽。浸入尿液，立即閱讀。硝酸鹽和白細(xì)胞酯酶+，顯示，細(xì)菌存在；中性粒細(xì)胞存在尿液培養(yǎng)，不論試紙的結(jié)果。 2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine43培養(yǎng)清潔：肥皂和水三次，中段尿，導(dǎo)管進(jìn)入膀胱、穿刺獲

24、得標(biāo)本，感染。尿液是培養(yǎng)基，立即交實(shí)驗(yàn)室，冷藏保存。室溫1小時(shí)可產(chǎn)生篩選假陽(yáng)性結(jié)果，細(xì)菌培養(yǎng)。接種環(huán)0.001或0.01毫升。菌落數(shù)乘以稀釋因子=每毫升尿液菌落總數(shù)。定量結(jié)果，正常無(wú)菌。 105CFU/毫升，確定有感染；藥敏試驗(yàn)。超過(guò)3種菌數(shù)量相當(dāng)，污染的正常菌群。 2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine44結(jié)果尿液培養(yǎng)結(jié)果大于100，選擇性革蘭陰性桿菌落數(shù)乘以1000，總菌落計(jì)數(shù) 105/mL。MacConkey紅色，乳糖發(fā)酵。腸桿菌的大腸桿菌，克雷伯桿菌和腸桿菌。吲哚陽(yáng)性，最有可能是大腸桿菌。完整生化反應(yīng)。藥敏試驗(yàn)

25、結(jié)果：氨芐青霉素，頭孢唑啉，環(huán)丙沙星，呋喃妥因，甲氧芐啶，復(fù)方新諾明。紙片擴(kuò)散。 2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine45發(fā)病除新生兒期，女性常見(jiàn)。隨年齡上升。部分患者沒(méi)有癥狀，尿液篩檢及尿培養(yǎng)是關(guān)鍵?？芍聰⊙Y。各種因素。先天性解剖異常。糖尿病，妊娠，返流，神經(jīng)功能障礙，腎結(jié)石，腫瘤。醫(yī)院療養(yǎng)院，留置導(dǎo)管是主要因素。上行感染或血行感染。最常見(jiàn)上行感染。血源性感染導(dǎo)致腎膿腫。菌毛附著在宿主細(xì)胞內(nèi)特定受體結(jié)合位點(diǎn)感染。 2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of M

26、edicine46病例314歲男性，嘔吐，腹部不適，腹瀉，非血性。 3天前，參加學(xué)校旅行野餐，叉燒雞肉，馬鈴薯沙拉，烤豆，冰激凌。輕度腹部不適，間歇性痙攣性腹痛，水樣大便每天3至5次。沒(méi)有皮疹、尿痛或血尿，沒(méi)有寵物，否認(rèn)服用抗生素。39。下腹輕度壓痛。糞便潛血陰性。至少50個(gè)其他野餐學(xué)生也報(bào)告類似癥狀。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine47鑒別診斷急性腹瀉。腹瀉是指不正常的頻率，量。急性腹瀉14天，持續(xù)腹瀉 14天；慢性腹瀉30天。細(xì)菌或病毒的胃和腸道發(fā)炎（腸胃炎），食物中毒，或者非感染性原因。野餐，傳染性原因如細(xì)

27、菌或病毒性腸胃炎。菌：嗜水氣單胞菌、空腸彎曲桿菌。 艱難梭菌、大腸桿菌、ETEC，EHEC、EPEC，EIEC、 痢疾桿菌?；魜y弧菌、副溶血弧菌、耶爾森菌。病毒：腺病毒（腸道）、星狀病毒真菌和分枝桿菌：不引起急性腹瀉2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine48鑒別診斷炎癥性腸?。号Ｄ?、毒物、潰瘍性結(jié)腸炎風(fēng)險(xiǎn)因素：病史線索。年齡，生活條件，地理位置，旅行史，飲食習(xí)慣，抗生素使用。零星案件/可能爆發(fā)。臨床線索 發(fā)燒/血性腹瀉？細(xì)菌性，沙門，痢疾，彎曲。 惡心嘔吐？病毒性，毒素/出血大腸埃希菌。 抗生素？艱難梭菌。 突然惡心嘔

28、吐腹瀉發(fā)燒？金葡菌腸毒素。 2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine49實(shí)驗(yàn)室糞便常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)識(shí)別彎曲，沙門菌，痢疾桿菌，耶爾森菌，嗜水氣單胞菌。O157：H7和霍亂弧菌。O157：H7-毒素。毒素檢測(cè)例行-艱難梭菌。常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)沙門菌，痢疾桿菌，空腸彎曲菌是最可能原因。無(wú)血便-腸出血性大腸桿菌不太可能，如O157：H7。沒(méi)有特定抗病毒療法。輪狀病毒-嬰幼兒腹瀉，例行。冬季、清潔，干燥容器以緊身或螺紋瓶蓋蓋。標(biāo)本在運(yùn)輸過(guò)程中可在室溫下保持。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University Sc

29、hool of Medicine50結(jié)果選擇性培養(yǎng)基。MacConkey瓊脂-革蘭陰性桿菌。乳糖發(fā)酵能力。硫化氫-沙門菌。O157：H7型接種山梨醇- MacConkey瓊脂。山梨醇陰性隔夜培養(yǎng)， “可疑”菌落，生物化學(xué)?？寡?。藥敏試驗(yàn)。報(bào)告相關(guān)部門，發(fā)起流行病學(xué)調(diào)查。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine51其他住院天數(shù)3。不可能沙門菌，痢疾桿菌或彎曲桿菌。艱難梭菌最有可能。檢查毒素。艱難梭菌相關(guān)性腹瀉（CDAD）可發(fā)展到偽膜結(jié)腸炎，嚴(yán)重的癥狀，可能需要手術(shù)干預(yù)。服用抗生素，是CDAD風(fēng)險(xiǎn)因素。停止濫用抗生素，良好

30、的手部衛(wèi)生和環(huán)境消毒控制和預(yù)防疾病傳染的感染。硫代硫酸鹽-枸櫞酸鹽-膽鹽-蔗糖 (TCBS)瓊脂平板發(fā)酵蔗糖產(chǎn)酸，呈黃色2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine52病例421歲，水樣腹瀉6個(gè)星期，痙攣性腹痛。在過(guò)去2周，腹瀉帶血。在危地馬拉參加一個(gè)社區(qū)服務(wù)項(xiàng)目6個(gè)月。喝了水，吃了在當(dāng)?shù)厣鐓^(qū)的食物，不經(jīng)常飲用煮沸的水。否認(rèn)抗生素+，已采取瘧疾預(yù)防。營(yíng)養(yǎng)良好，8-10磅重的體重?fù)p失。沒(méi)有發(fā)燒。血壓110/80mm汞柱，脈搏84/min和14/min呼吸，肺組織清晰。腹部檢查顯著局部壓痛到右上腹壓痛沒(méi)有反跳痛，但沒(méi)有肝腫大。

31、2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine53鑒別診斷“旅行者腹瀉”是水樣腹瀉，到達(dá)一個(gè)新國(guó)家首周。伴隨著惡心，嘔吐，腹部痙攣和發(fā)燒，自限性，平均長(zhǎng)度3-5天。欠發(fā)達(dá)國(guó)家、污染食物或水。感染的原因 菌：氣單胞菌?？漳c彎曲桿菌。腸毒素性大腸桿菌（ETEC），50的病例類志賀沙門菌。痢疾桿菌。弧菌。 病毒：輪狀病毒 2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine54實(shí)驗(yàn)室病史。旅行史+腹部壓痛，體重減輕。病原：痢疾桿菌，沙門菌，彎曲菌，腸出血性大腸桿菌，EIE

32、C，阿米巴。檢查：培養(yǎng)、寄生蟲，潛血試驗(yàn)。肝功能，腹部超聲或CT。 1。顯微鏡檢查。阿米巴包囊或滋養(yǎng)體2?？贵w檢測(cè)（血清）。陽(yáng)性 90的病人有侵入疾病?？贵w檢測(cè)診斷為阿米巴性肝膿腫。3?？乖瓩z測(cè)（糞便）。商業(yè)化，且測(cè)試可在2小時(shí)完成抗原。4。結(jié)腸鏡檢查。5。聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine55病例516歲男性發(fā)燒，嚴(yán)重頭痛，嘔吐，否認(rèn)服用任何違禁藥物或有任何運(yùn)動(dòng)或外傷頭部受傷?；杌栌?，體溫40，血壓120/80毫米汞柱，脈搏80/min，呼吸14 /分鐘。脖子僵硬，初步檢查皮膚沒(méi)有皮疹。

33、腰椎穿刺，分散的紅點(diǎn)（瘀斑）出現(xiàn)在背部，軀干和腿2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine56鑒別診斷脖子僵硬-腦膜炎。嘔吐是顱內(nèi)壓增高。菌：大腸桿菌和其他腸道革蘭陰性桿菌、流感嗜血桿菌、李斯特菌、腦膜炎奈瑟菌、金黃色葡萄球菌、無(wú)乳鏈球菌（B組鏈球菌）、葡萄球菌屬。病毒：蟲媒/腸/單純皰疹病毒（稀有）真菌和分枝桿菌造成慢性腦膜炎。 2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine57鑒別診斷新生兒（嬰兒 60歲）肺炎鏈球菌，腦膜炎奈瑟菌，大腸桿菌和其他腸道革

34、蘭氏陰性菌; 李斯特菌，金黃色葡萄球菌，鏈球菌，B組相比，其他流感嗜血（稀有）。免疫功能低下患者：任何生物體有可能成為病原體，不應(yīng)被視為污染物。 2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine58實(shí)驗(yàn)室腦脊液標(biāo)本細(xì)胞計(jì)數(shù)，葡萄糖，蛋白質(zhì)分析，腦脊液革蘭染色和細(xì)菌及病毒培養(yǎng)至關(guān)重要。經(jīng)驗(yàn)抗生素已啟動(dòng)。治療腦膜炎不應(yīng)因診斷而延遲，高發(fā)病率和死亡率。細(xì)菌革蘭染色和培養(yǎng)，腦脊液葡萄糖和蛋白質(zhì)分析，病毒培養(yǎng)或保存在-70未來(lái)使用腦脊液應(yīng)迅速運(yùn)到實(shí)驗(yàn)室（15分），盡快測(cè)試。細(xì)菌，真菌或寄生蟲測(cè)試在運(yùn)輸過(guò)程中應(yīng)保持2小時(shí)。病毒性冰或冷藏。離

35、心用于革蘭染色和培養(yǎng)。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine59結(jié)果發(fā)現(xiàn)腦脊液白細(xì)胞；細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外革蘭陰性雙球菌。腦膜炎奈瑟菌， C組，最常見(jiàn)的血清型年齡較大的兒童，青少年和成年人?？股孛舾行詼y(cè)試沒(méi)有進(jìn)行。應(yīng)定期檢測(cè)-內(nèi)酰胺酶。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine60標(biāo)本采集腰椎穿刺2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine61標(biāo)本采集62腦脊液壓力臥位0.781.7

36、6 kpa，兒童0.41.0 kpa 。腦組織體積或腦脊液量增加，腦脊液壓力升高。壓力測(cè)定后收集于3個(gè)無(wú)菌試管中，第一管細(xì)菌培養(yǎng)第二管免疫學(xué)化學(xué)分析第三管一般性狀及鏡檢。必須立即送驗(yàn)及時(shí)檢查，2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine6263一般實(shí)驗(yàn)室檢查外觀、有形成分、細(xì)菌直接圖片、蛋白定性定量、葡萄糖定量、氯化物測(cè)定。影像學(xué)技術(shù)2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine63一般實(shí)驗(yàn)室檢查642022/8/11Shanghai Jiao Tong U

37、niversity School of Medicine64病例6：性病與性傳播疾病性行為傳染，具有明顯的生殖器官損害癥狀。1975年WHO決定，將各種可通過(guò)性行為或類似性行為傳播的疾病，統(tǒng)稱為“性傳播疾病”（Sexually transmitted diseases STD）中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部頒布的性病防治管理辦法規(guī)定： 法定性病：淋病、梅毒、艾滋病 監(jiān)測(cè)性?。悍橇芫阅虻姥?、軟下疳、性病性淋巴肉芽腫、尖銳濕疣、生殖器皰疹廣為流傳，社會(huì)病。傳播方式：性行為 非性行為 接觸 血源 胎盤 產(chǎn)道 醫(yī)源性 其他途徑2022/8/11Shanghai Jiao Tong University Sch

38、ool of Medicine65患者，男，38歲，因頭痛三月，加重伴右側(cè)肢體乏力三天入院。 患者于三個(gè)月前在外地開(kāi)會(huì)時(shí)感頭痛，似于前額部明顯，不劇能忍，無(wú)惡心、嘔吐，無(wú)發(fā)熱咳嗽，無(wú)胸悶胸痛，未予重視，也未求診，當(dāng)晚未參加會(huì)議活動(dòng)，休息后第二天感覺(jué)頭痛緩解。此后近三月內(nèi)間歇發(fā)作五六次，每次持續(xù)約一天到二天自行緩解，只有一次較劇伴輕微惡心自服散利痛一顆后緩解，仍一直無(wú)發(fā)熱咳嗽等表現(xiàn)。三天前與朋友們玩牌時(shí)，感頭痛復(fù)發(fā)，經(jīng)休息后不能緩解，同時(shí)出現(xiàn)右側(cè)肢體乏力，右手明顯感到握力減弱。至今未見(jiàn)明顯緩解，來(lái)院就診。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School

39、of Medicine66患者平時(shí)體健，否認(rèn)高血壓、糖尿病、無(wú)肝炎結(jié)核史，煙一天20支左右，酒少量。平時(shí)常有熬夜史，平時(shí)也常有頭痛史數(shù)年。 入院檢查：體檢神志清，僅右上下肢肌力四級(jí)，病理征未引出，頸抵抗可疑，其他心肝肺腎檢查均無(wú)陽(yáng)性體征。血尿糞三大常規(guī)、肝腎功能、血脂血糖正常，心電圖、胸片、心超、腹部B超正常，腦CT示左頂葉低密度病灶，注入造影劑后有環(huán)形增強(qiáng)，腦MRI示同部位占位，但提示炎癥。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine67該病人入院三天后病情未見(jiàn)明顯緩解,作為疑難病全院討論,主要考慮如下:1、腦膿腫：但膿腫

40、從何而來(lái)，沒(méi)有炎癥表現(xiàn)，僅CT提示，依據(jù)不足。2、腦腫瘤：結(jié)合患者年齡，目前不能排除，但影象學(xué)沒(méi)有明確支持。3、腦囊蟲?。耗壳皼](méi)有依據(jù)，但同樣也不能排除。4、結(jié)核?。夯颊呓Y(jié)核毒血癥狀不明顯，其他部位也未發(fā)現(xiàn)。5、其他未明病因的感染性疾病。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine68臨床表現(xiàn)異常太少，診斷不能明確，在與家屬溝通時(shí)，家屬表示：不管他了，誰(shuí)叫他這么花心。提示是不是該查STD方面的問(wèn)題，如梅毒和艾滋病，第二天梅毒血清試驗(yàn)陽(yáng)性，但這與顱內(nèi)病變有沒(méi)有關(guān)系呢，當(dāng)天下午做了腰穿，確定腦脊液VDRL陽(yáng)性，至此，神經(jīng)型梅毒診

41、斷成立，即與大劑量青霉素 丙磺舒治療，第三天下午，頭痛明顯緩解，第四天開(kāi)始肢體肌力有所恢復(fù)，一周后感覺(jué)右側(cè)肢體乏力明顯好轉(zhuǎn)，不再頭痛，復(fù)查CT，左頂葉低密度灶明顯縮小。繼予上述治療二十天后腦CT未見(jiàn)病灶，頭痛及肢體癥狀消失，痊愈出院。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine69蒼白密螺旋體蒼白亞種（梅毒螺旋體） T.pallidum subsp.pallidum梵高，尼采，叔本華，貝多芬、莫扎特、舒伯特、福樓拜、莫泊桑、林肯、載淳法國(guó)人叫它“那不勒斯病”，德國(guó)人和波蘭人叫它“法國(guó)病”，俄羅斯人叫它“波蘭病”，土耳其人和阿

42、拉伯人叫它“基督徒病”，印度人叫他“葡萄牙病”，嶺南以北的中國(guó)人叫他“廣東瘡”，日本人則叫它“中國(guó)瘡”。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine70梅毒螺旋體梅毒是一種幾乎可以侵犯全身所有器官，而產(chǎn)生多種癥狀和體征的慢性傳染性疾病。在STD中雖發(fā)病率不高，但危險(xiǎn)性較大。蒼白螺旋體：是一種小而纖細(xì)，呈螺旋狀的微生物。煮沸，干燥，肥皂及一般消毒劑勻可將其殺滅。根據(jù)傳染途徑，可將梅毒分為獲得性梅毒（后天梅毒）和胎傳梅毒（失天梅毒）；根據(jù)病情發(fā)展，可分為早期梅毒和晚期梅毒。 一般認(rèn)為梅毒感染后1y內(nèi)，包括梅毒潛伏、一期梅毒、二期

43、梅毒統(tǒng)稱為早期梅毒。 2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine71臨床表現(xiàn)一期梅毒主要癥狀為硬下疳。通常在螺旋體侵入人體后10一90天，平均3周。二期梅毒系一期梅毒未治療或治療不規(guī)范，梅毒螺旋體由淋巴系統(tǒng)進(jìn)入血液循環(huán)大量繁殖播散而出現(xiàn)的癥狀。梅毒疹可自行消退。三期梅毒：2一4年后，約13患者發(fā)生三期梅毒?？汕址竷?nèi)臟，特別是心血管及中樞系統(tǒng)等重要器官，危及生命。主動(dòng)脈瘤破裂常是患者猝死的主要原因2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine72實(shí)驗(yàn)室1、暗

44、視野顯微鏡檢查/ DFA-TP /銀染色2、非梅毒螺旋體血清試驗(yàn) （1）VDRL(性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn))：需滅活 （2）USR(不加熱的血清反應(yīng)素試驗(yàn)) （3）RPR(加速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn))3、梅毒螺旋體血清試驗(yàn) （1）TPHA(梅毒螺旋體血凝試驗(yàn)) 1966年 （2）FT-ABS(熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)) 1963年4、腦脊液檢查：對(duì)神經(jīng)梅毒的診斷，治療及預(yù)后有幫助。5PCR檢測(cè)梅毒螺旋體2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine73病例7患者,女性,30歲, 因”乏力,納差,腹脹,尿黃1個(gè)多月”入院.患者于1個(gè)多月

45、前無(wú)明顯誘因下開(kāi)始反復(fù)乏力,納差,腹脹,尿黃,當(dāng)時(shí)無(wú)畏寒,發(fā)熱,無(wú)腹痛腹瀉,無(wú)惡心嘔吐,無(wú)反酸噯氣. 既往史:3年前因上消化道出血曾入住本院,輸血及血漿1000ML，入院查體:T36.8C,P76次/分,R20 /分,BP110/80MMHG.神志清楚,精神差,臉色黃,鞏膜輕度黃染,蜘蛛痣(+), 心肺未見(jiàn)異常,肝肋下2厘米,有觸及痛,脾肋下未觸及.輔助檢查:RBC4.56x1012/L,HB110g/L,WBC8x109/L.尿常規(guī):BIL(+),URO(+),余正常.大便常規(guī)正常. 肝功能:血ALT182U/L,AST102U/L, 2022/8/11Shanghai Jiao Tong

46、University School of Medicine74診斷思路1、主訴癥狀：近期出現(xiàn)的無(wú)其他原因可解釋的乏力,納差,腹脹,尿黃1月余。-懷疑尿黃是黃疸引起。做尿常規(guī)確診。無(wú)畏寒，發(fā)熱，無(wú)腹痛腹瀉，無(wú)惡心嘔吐，無(wú)反酸噯氣-排除消化道疾病。2、體格檢查。異常體征：A.肝腫大，伴有觸痛或叩痛。 B.臉色黃，鞏膜黃染。-有黃疸癥狀，懷疑肝炎。3、流行病學(xué)：是否曾接受過(guò)血及血制品或曾有其他醫(yī)源性感染，生活中的密切接觸，尤其是性接觸。 -3年前曾接受輸血，懷疑從輸血途徑感染乙肝病毒或丙肝病毒。4、懷疑患者病毒性肝炎，進(jìn)行微生物學(xué)檢查：尿常規(guī):BIL(+),URO(+)；-確診黃疸。 肝功能:ALT

47、182U/L,AST102U/L-升高2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine75病毒學(xué)檢查：HBsAg(+),HBeAg(+),抗HBs(-),抗HBe(-),HBV DNA(+).抗HCV(+), RNA定量為310 7綜上推斷患者感染類型為： 慢性乙型病毒性肝炎合并丙型病毒性肝炎抗原抗體系統(tǒng)： HBsAg與抗-HBs；HBeAg與抗-HBeHBc（HBcAg）與抗HBcAgELISA核酸檢測(cè)2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine76viru

48、s load NA amplification2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine78不同臨床樣本的檢驗(yàn)程序血液樣本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)、真菌學(xué)檢驗(yàn)、病毒學(xué)檢驗(yàn)?zāi)X脊液細(xì)菌真菌學(xué)檢驗(yàn)體液樣本檢驗(yàn)?zāi)蛞簶颖緳z驗(yàn)呼吸道樣本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)、真菌學(xué)檢驗(yàn)胃腸道樣本檢驗(yàn)生殖道樣本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)、病毒學(xué)檢驗(yàn)皮膚軟組織樣本檢驗(yàn)2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine79血液樣本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of

49、 Medicine80血液樣本真菌學(xué)檢驗(yàn)2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine81血液樣本病毒學(xué)檢驗(yàn)2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine82腦脊液細(xì)菌真菌檢驗(yàn)2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine83體液檢驗(yàn)2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine84尿液檢驗(yàn)2022/8/11Shanghai

50、Jiao Tong University School of Medicine85呼吸道細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine86呼吸道真菌學(xué)檢驗(yàn)2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine87胃腸道樣本檢驗(yàn)2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine88生殖道樣本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of

51、Medicine89生殖道樣本病毒學(xué)檢驗(yàn)2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine90皮膚軟組織樣本檢驗(yàn)2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine91四、藥敏試驗(yàn)1、指導(dǎo)醫(yī)生及有關(guān)專業(yè)人員合理用藥2、指導(dǎo)藥物學(xué)家研究開(kāi)發(fā)新藥類型 抗菌模式 作用靶位 作用機(jī)制 抑菌（bacteriostatic） 細(xì)胞質(zhì) 可逆性抑制：1) 轉(zhuǎn)錄2) 翻譯3)細(xì)胞代謝 殺菌（bactericidal） 染色體 不可逆地阻遏基因復(fù)制 溶菌（bacteriolytic） 細(xì)胞

52、壁 使細(xì)胞溶解 2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine92可預(yù)測(cè)抗菌治療的效果， “敏感”治療可能有效； “耐藥” 肯定失?。恢笇?dǎo)醫(yī)生選擇使用抗生素，AST的結(jié)果為“耐藥”，即應(yīng)更換藥物；提供所選擇藥物的依據(jù)；監(jiān)測(cè)耐藥性，分析耐藥菌變遷，掌握耐藥菌感染 病流行病學(xué)，控制和預(yù)防耐藥菌感染發(fā)生和流行。藥敏試驗(yàn)意義2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine93抗菌藥物選擇 A、B、C、U四組, A組為常規(guī)首選藥敏試驗(yàn)藥物,B組為臨床使用主要抗菌藥 ：對(duì)A

53、組同類抗生素耐藥；標(biāo)本來(lái)源不同，如三代頭孢菌素使用于腦脊液中的腸桿菌；多種細(xì)菌感染；多部位感染；感染流行的控制；對(duì)A組抗生素過(guò)敏、耐受或無(wú)反應(yīng)。C組藥物用于對(duì)A組藥物耐藥的流行菌株或?qū)組藥物過(guò)敏的病人和某些不常見(jiàn)細(xì)菌（如腸外分離的沙門菌屬或耐萬(wàn)古霉素腸球菌）。U組僅用于尿道中分離的細(xì)菌。 2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine94藥敏試驗(yàn)方法：稀釋法瓊脂選擇法是將藥物混勻于瓊脂培養(yǎng)基中，配制含不同濃度藥物平板，使用多頭接種器接種細(xì)菌，經(jīng)孵育后觀察細(xì)菌生長(zhǎng)情況，以抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的瓊脂平板所含藥物濃度測(cè)得MIC。結(jié)果判斷將

54、平板置于暗色、無(wú)反光表面上判斷試驗(yàn)終點(diǎn)，以抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的藥物稀釋度為終點(diǎn)濃度（磺胺可見(jiàn)少許散在細(xì)菌生長(zhǎng)）。試驗(yàn)菌的結(jié)果報(bào)告可用MIC（g/ml ）或用敏感（S）、中介（I）和耐藥（R）報(bào)告。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine95宏量稀釋法Minimal inhibitory concentration (MIC)Reference method. Add standard inoculum to dilutions of antibiotic. Incubate overnight. MIC is lowest c

55、oncentration that inhibits growth (can also be performed by agar dilution). Interpretation (S or R) is based on achievable drug levels 104 cfu4210.50.250.120mg/ml2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine96微量稀釋法2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine97藥敏試驗(yàn)方法：擴(kuò)散法將含有定量

56、抗菌藥物的紙片貼在已接種測(cè)試菌的瓊脂平板上，紙片中所含的藥物吸收瓊脂中水分溶解后不斷向紙片周圍擴(kuò)散形成遞減的梯度濃度在紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)測(cè)試菌的生長(zhǎng)被抑制，從而形成無(wú)菌生長(zhǎng)的透明圈即為抑菌圈。抑菌圈的大小反映測(cè)試菌對(duì)測(cè)定藥物的敏感程度，并與該藥對(duì)測(cè)試菌的MIC呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。 1抗菌藥物紙片 選擇直徑為635mm，吸水量為20l的專用藥敏紙片用逐片加樣或浸泡方法使每片含藥量達(dá)規(guī)定所示。含藥紙片密封貯存28 且不超過(guò)1周。2培養(yǎng)基 水解酪蛋白（MH）培養(yǎng)基是兼性厭氧菌和需氧菌藥敏試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基，4保存。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School

57、of Medicine98（三）細(xì)菌接種 用05麥?zhǔn)媳葷針?biāo)準(zhǔn)的菌液濃度，在瓊脂表面均勻涂片,在15min內(nèi)接種完畢。將含藥紙片緊貼于瓊脂表面, 35孵育18h后閱讀結(jié)果。（四）結(jié)果判斷和報(bào)告 用精確度為1mm的游標(biāo)卡尺量取抑菌圈直徑。根據(jù)CLSI標(biāo)準(zhǔn)，作出“敏感”,“耐藥”和“中介”的判斷。2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine992022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine1002022/8/11Shanghai Jiao Tong Univers

58、ity School of Medicine101藥敏試驗(yàn)方法： E試驗(yàn)E試條是一條 5mm50mm的無(wú)孔試劑載體，一面固定有預(yù)先制備的，濃度呈連續(xù)指數(shù)增長(zhǎng)稀釋抗菌藥，另一面有讀數(shù)和判別的刻度。將E試條放在細(xì)菌接種過(guò)的瓊脂平板上孵育過(guò)夜，圍繞試條明顯可見(jiàn)橢圓形抑菌圈，圈的邊緣與試條交點(diǎn)的刻度濃度即為抗菌藥抑制細(xì)菌的特定濃度，又稱抑制濃度（IC），它與MIC呈高度相關(guān)。 2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine102藥敏試驗(yàn)結(jié)果解釋 “敏感”即表示測(cè)試菌可被測(cè)定藥物常規(guī)劑量給藥后在體內(nèi)達(dá)到的血藥濃度所抑制；“耐藥”即表示測(cè)試菌不能被在體內(nèi)感染部位可能達(dá)到的抗菌藥物濃度所抑制，臨床治療無(wú)效?！爸薪椤闭咛崾驹摷?xì)菌對(duì)常規(guī)用藥體液或組織中的藥物濃度的反應(yīng)率低于敏感株，使用高于正常給藥量有療效。 2022/8/11Shanghai Jiao Tong University School of Medicine103聯(lián)合藥物敏感試驗(yàn)?zāi)康脑谟冢褐委熁旌闲愿腥荆?預(yù)防或推遲細(xì)菌抗生素耐藥性的發(fā)生； 聯(lián)合用藥可以減少劑量以避免達(dá)到毒性劑量； 聯(lián)合用藥比出現(xiàn)4種結(jié)果：無(wú)關(guān)作用小，兩種藥物聯(lián)合作用的活性等