缺氧實驗報告

1、實驗報告一、實驗目的：學習復制動物缺氧病理模型的方法掌握不同缺氧類型主要的發(fā)病原因和機制。觀察不同類型缺氧時呼吸、皮膚粘膜顏色、活動的改變了解機體功能、代謝特點與缺氧對機體影響的關(guān)系。二實驗動物：小鼠三、實驗方法：不同年齡小鼠對缺氧耐受性影響取新生幼鼠一只，放入青霉素小瓶內(nèi)，瓶口塞少量棉花以免成年鼠傷害。 將青霉素小瓶放入廣口瓶內(nèi)，再取一只成年小白鼠一同放入瓶中。密閉瓶塞，計時。觀察小鼠在瓶內(nèi)的活動、呼吸變化低張性缺氧實驗選取兩只體重相近的小鼠，用天平稱重小鼠。分別將兩只小鼠投入鈉石灰瓶和玻璃珠瓶內(nèi)。同時密閉瓶塞并開始計時。密切觀察小鼠在瓶內(nèi)的活動度、呼吸、皮膚粘膜的顏色等變化。小鼠死亡后進行

2、尸檢觀察血液顏色的變化：先在試管中各加入5ml水備用； 將小鼠仰臥位固定于手術(shù)臺上，剪開小鼠胸部皮膚；用鑷子提起劍突，剪斷 兩側(cè)肋骨，打開胸腔，剪破心臟；用滴管滴入2滴7%枸櫞酸鈉溶液；混勻后 取出2滴抗凝血，滴入盛有蒸餾水的試管內(nèi)，立即用封口膜封閉管口；搖勻， 觀察試管內(nèi)溶液的顏色。亞硝酸鈉中毒取一只小白鼠，稱重。小鼠尾剪斷取對照血樣。抽取2%亞硝酸鈉溶液(用量為每10克體重0.35毫升)。給小鼠皮下注射亞硝酸鈉，計時。觀察小鼠的活動度、呼吸、皮膚粘膜的顏色等變化。小鼠死亡后進行尸檢觀察血液顏色的變化：先在試管中各加入5ml水備用； 將小鼠仰臥位固定于手術(shù)臺上，剪開小鼠胸部皮膚；用鑷子提起劍

3、突，剪斷 兩側(cè)肋骨，打開胸腔，剪破心、臟；用滴管滴入2滴7%枸櫞酸鈉溶液；混勻后 取出2滴抗凝血，滴入盛有蒸餾水的試管內(nèi)，立即用封口膜封閉管口；搖勻， 觀察試管內(nèi)溶液的顏色。一氧化碳中毒取一只小白鼠，將其放入三角燒瓶內(nèi)。小鼠尾剪斷取對照血樣。蓋上瓶塞，連接通氣管，打開氣囊閥門，向瓶內(nèi)通入一氧化碳氣體并計時觀察皮膚粘膜顏色改變。小鼠死亡后進行尸檢觀察血液顏色的變化：先在試管中各加入5ml水備用； 將小鼠仰臥位固定于手術(shù)臺上，剪開小鼠胸部皮膚；用鑷子提起劍突，剪斷 兩側(cè)肋骨，打開胸腔，剪破心臟；用滴管滴入2滴7%枸櫞酸鈉溶液；混勻后 取出2滴抗凝血，滴入盛有蒸餾水的試管內(nèi)，立即用封口膜封閉管口；搖

4、勻， 觀察試管內(nèi)溶液的顏色。氰化鉀中毒取一只小白鼠，稱重。小鼠尾剪斷取對照血樣。抽取0.04%氰化鉀溶液（用量為每10克體重0.2毫升），用棉球抵住針頭， 小心排出氣泡和多余藥液。給小鼠腹腔注射氰化鉀，計時。（針頭插入后回抽看是否有血液，若有血液則 拔出針頭再穿刺）觀察小鼠的活動度、呼吸等變化。小鼠死亡后進行尸檢觀察血液顏色的變化：先在試管中各加入5ml水備用； 將小鼠仰臥位固定于手術(shù)臺上，剪開小鼠胸部皮膚；用鑷子提起劍突，剪斷 兩側(cè)肋骨，打開胸腔，剪破心臟；用滴管滴入2滴7%枸櫞酸鈉溶液；混勻后 取出2滴抗凝血，滴入盛有蒸餾水的試管內(nèi)，立即用封口膜封閉管口；搖勻， 觀察試管內(nèi)溶液的顏色。三、

5、實驗結(jié)果記錄：表1不同年齡小鼠對缺氧耐受性影響新生鼠成年鼠活動（行為）呼吸稍有加快無大幅度活動5分35秒出現(xiàn)明顯腹式呼 吸，呼吸加深加快，10分 鐘后開始有掙扎表現(xiàn)，于 11分40秒死亡生存時間1小時26分11分40秒表2低張性缺氧兩小鼠的觀察指標變化實驗條件鈉石灰瓶玻璃珠瓶呼吸變化先加深快后淺慢4分50秒呼吸頻率加快 6分27秒腹式呼吸明顯加 深加快皮膚、粘膜顏色暗紅色皮膚粘膜顏色逐漸加深， 出現(xiàn)紫紺血色暗紅色暗紅色行為改變呼吸頻率增快躁動不安，呼吸急促 趴下安靜不動，急促呼吸出現(xiàn)煩躁不安表現(xiàn) 10分鐘左右開始掙扎 10分41秒呼吸頻率減 慢，出現(xiàn)大口呼吸生存時間18分14秒11分10秒表3

6、一氧化碳中毒時觀察指標的中毒前后比較中毒前中毒后血液顏色淡紅色櫻桃紅色皮膚粘膜顏色耳背灰白櫻桃紅色肝臟顏色淡紅色櫻桃紅色表4亞硝酸鹽中毒時觀察指標的中毒前后比較中毒前中毒后血液顏色淡紅色咖啡色皮膚粘膜顏色耳背灰白棕褐色肝臟顏色淡紅色咖啡色表5氰化物中毒時觀察指標的中毒前后比較中毒前中毒后血液顏色淡紅色鮮紅色皮膚粘膜顏色耳背灰白玫瑰紅色肝臟顏色淡紅色鮮紅色表6不同類型缺氧時觀察指標的結(jié)果比較呼吸變化皮膚黏膜顏色血液顏色生存時間低張性缺氧先變快后變慢青紫色（發(fā)暗紅色18分14秒紺）CO中毒逐漸減慢櫻桃紅色櫻桃紅色1分27秒NaNO2中毒逐漸減慢棕褐色咖啡色11分12秒氰化物中毒先變快后變慢玫瑰紅色

7、鮮紅色50秒左右四、討論：（1）不同年齡小鼠對缺氧耐受性影響1）實驗中可見成年鼠活動程度較大，故耗氧量更大，死亡時間更短。2）乳鼠出生前在母鼠子宮中，子宮為一相對缺氧環(huán)境，在相對缺氧的環(huán)境乳鼠對 氧的利用能力增高：細胞內(nèi)線粒體數(shù)量代償性增加呼吸酶活性代償性增強。此 外乳鼠活動程度小，耗氧量較少，故死亡時間更久。低張性缺氧實驗1）小鼠在放入有玻璃珠的瓶中后，隨著呼吸的進行，瓶中氧分壓降低，小鼠體內(nèi) 血氧含量減少，弓I起小鼠產(chǎn)生代償性反應(yīng)，刺激頸動脈體和主動脈體的外周化學感 受器，引起呼吸加深加快，肺泡通氣量增加。隨著實驗的進行，瓶中的氧分壓繼續(xù) 下降，二氧化碳分壓上升，此時缺氧對呼吸中樞的抑制作

8、用超過氧分壓降低對外周 化學感受器的興奮作用，發(fā)生中樞性呼吸衰竭。表現(xiàn)為呼吸抑制，呼吸節(jié)律和頻率 不規(guī)則，肺通氣量減少。到最后，二氧化碳分壓繼續(xù)升高，對小鼠產(chǎn)生二氧化碳麻 醉，最后小鼠死亡。2）小鼠在放入有鈉石灰的瓶中后（低張性缺氧），小鼠呼出的二氧化碳被鈉石灰 吸收，瓶中的氧分壓比放玻璃珠的瓶中氧分壓更低，二氧化碳的分壓不上升。動脈 血和靜脈血中的氧合血紅蛋白含量降低，而脫氧血紅蛋白增多。所以，小鼠的唇尾 顏色會變?yōu)榍嘧仙òl(fā)紺）。其肝臟血液也因含有較多的脫氧血紅蛋白而呈現(xiàn)暗紅 色。（3）亞硝酸鈉中毒1）血紅素中的二價鐵在氧化劑的催化作用下氧化成三價鐵，形成高鐵血紅蛋白， 失去攜氧能力。從而

9、使血氧容量減少，以致動脈血氧容量減少，高鐵血紅蛋白含量 增多。因為高鐵血紅蛋白呈棕褐色，所以亞硝酸鈉中毒死亡的小鼠血液呈咖啡色。（4）一氧化碳中毒1）一氧化碳與血紅蛋白的親和力遠大于氧與血紅蛋白，故大部分血紅蛋白與一 氧化碳結(jié)合成為碳氧血紅蛋白，碳氧血紅蛋白釋氧能力低。從而使血紅蛋白的攜氧 能力下降，血氧容量減少，以致動脈血氧含量減少。所以一氧化碳中毒的小鼠體內(nèi) 的碳氧血紅蛋白會累積很多，由于碳氧血紅蛋白為鮮紅色，所以小鼠的唇尾顏色和 肝臟顏色也呈櫻桃紅色。2）通入一氧化碳不可過快，過快則使小鼠死亡時間縮短，皮膚粘膜看不到顏色變 化。（5）氰化鉀中毒1）氰化物中毒時，氰化物進入機體后分解出具有毒性的氰離子，抑制細胞內(nèi)酶的活 性，使呼吸鏈酶活力降低，同時氰離子與氧化型細胞色素中的三價鐵結(jié)合，阻止其還原 成二價鐵，使細胞色素氧化還原酶系功能出現(xiàn)障礙，呼吸鏈的電子傳遞出現(xiàn)障礙，細胞 的氧化磷酸化出現(xiàn)障礙，導致組織細胞用氧障礙，出現(xiàn)組織性缺氧。即血氧含量高但無 法被組織細胞利用，所以血液呈鮮紅色，皮膚粘膜為玫瑰紅色。2）腹腔注射時針頭插入后要回抽看是否有血液，若有