細(xì)胞工程提綱

1、專題二 細(xì)胞工程 2.1.1植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)1.理論基礎(chǔ)（原理）：_ ，即具有某種生物全部_的任何一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成_的潛能。全能性表達(dá)的難易程度：受精卵 _ 生殖細(xì)胞 _ 體細(xì)胞；植物細(xì)胞 _ 動(dòng)物細(xì)胞2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)過程離體的植物器官、組織或細(xì)胞，可以_形成_，之后誘導(dǎo)其_生成_或_，進(jìn)而發(fā)育成完整的小植株。3.植物細(xì)胞表現(xiàn)全能性，需要的條件是_、_。4.脫分化就是讓_的細(xì)胞，經(jīng)過誘導(dǎo)后，失去其特有的_而轉(zhuǎn)變成_細(xì)胞的過程。植物組織培養(yǎng)選取_，這些組織最容易誘導(dǎo)脫分化。5.愈傷組織是指一種高度_的呈_狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。培養(yǎng)愈傷組織最初應(yīng)該_培養(yǎng)。6. 再分化過程中細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)

2、素比例不同結(jié)果也不同：細(xì)胞分裂素比例低側(cè)重_，細(xì)胞分裂素比例高側(cè)重于_，一樣多就只生長(zhǎng)不分化。7. 植物體細(xì)胞雜交就是將_的植物細(xì)胞，在一定條件下融合成_，并將其培育成新的植物體的技術(shù)。8. 植物細(xì)胞融合首先要去除細(xì)胞壁，常采用的方式是_，需要_酶。植物體細(xì)胞融合實(shí)質(zhì)上是不同植物體細(xì)胞的_融合的過程。一般用物理法和化學(xué)法來促使其融合，物理方法有_、振動(dòng)、_等，化學(xué)方法用_作為誘導(dǎo)劑。9. 植物細(xì)胞融合成功的標(biāo)志為_。10. 植物體細(xì)胞雜交的意義：克服不同種生物_的障礙。2.1.2 植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用1.微型繁殖技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：保持優(yōu)良品種的_，高效快速實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖。2.作物脫毒應(yīng)該選取植

3、物_進(jìn)行組織培養(yǎng)。3.人工種子就是以_得到的_、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)人工薄膜包裝得到的種子。4. 單倍體育種過程：對(duì)植物花粉進(jìn)行_，對(duì)其幼苗時(shí)期進(jìn)行_，得到了正常的純合二倍體植株。5.在植物組織培養(yǎng)中，培養(yǎng)細(xì)胞容易受到_和_的影響而產(chǎn)生突變體，可以從有用的突變體中選育出新品種。6.細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，對(duì)植物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，只培育到_階段，生產(chǎn)對(duì)人們有利的產(chǎn)物。2.2.1 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)1. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的_，將它分散成_，然后放在適宜的_中，讓這些細(xì)胞_。（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）剪碎用

4、_處理分散成_制成_轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行_培養(yǎng)懸液中分散的細(xì)胞很快就_當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為_重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分瓶繼續(xù)_培養(yǎng)。（3）傳代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至_代后就不易傳下去了，_代至_代細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化。當(dāng)繼續(xù)傳代培養(yǎng)時(shí)，少部分細(xì)胞獲得_性，朝著等同于_方向發(fā)展。所以目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為_代以內(nèi)。（4）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件:_：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌處理，通常還要，添加一定量的_，以防培養(yǎng)過程中的污染。應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止_對(duì)細(xì)胞自身造成危害。營(yíng)養(yǎng)：培養(yǎng)基成分有糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、_、微量元素等。通常需加入

5、_等天然成分。溫度：_和pH：_ 。氣體環(huán)境：95%空氣5%CO2 。O2是_所必需的，CO2的主要作用_。（5）動(dòng)物組織培養(yǎng)可以用在有重要價(jià)值的蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)，如燒傷病人的_、有毒物質(zhì)的檢測(cè)等。2.動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物（1）哺乳動(dòng)物核移植可以分為_核移植（比較容易）和_核移植（比較難）。應(yīng)用的原理為_。（2）體細(xì)胞核移植的大致過程是： 卵巢卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)至_吸出_和第一極體將供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞通過_使兩細(xì)胞融合激活重組細(xì)胞使其發(fā)育為_用_技術(shù)將胚胎移入代孕母牛體內(nèi)生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)_的犢牛。（3）以上過程屬于生殖性克隆，若取病人的體細(xì)胞核進(jìn)行核移植，從重組的早期

6、胚胎中獲得_，體外誘導(dǎo)分化形成_，用于自體移植，則稱為_。（4）選用去核卵(母)細(xì)胞的原因：卵(母)細(xì)胞比較_，容易操作；卵(母)細(xì)胞_多，營(yíng)養(yǎng)豐富。卵母細(xì)胞必須選用_細(xì)胞，原因是該時(shí)期_ _。2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體1.動(dòng)物細(xì)胞融合（1）動(dòng)物細(xì)胞融合也稱_，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。融合后形成的具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的_細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。（2）動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同，誘導(dǎo)方法類似，常用的誘導(dǎo)因素有_ 、_、_等。（3）動(dòng)物細(xì)胞融合突破了_的局限，使_成為可能。2.單克隆抗體（1）制備過程：將_注入小鼠體內(nèi)，分離_細(xì)胞，與小鼠_細(xì)

7、胞融合，在選擇培養(yǎng)基上篩選出_，進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和_，篩選出能分泌所需_的細(xì)胞，將其在體外培養(yǎng)或注射到_內(nèi)增值，就可以提取出大量單克隆抗體。（2）雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能_，又能產(chǎn)生專一的抗體。（3）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：_、_，并可能大量制備。（5）應(yīng)用： 作為_：準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異，并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合。 用于治療疾病和運(yùn)載藥物：主要用于癌癥治療，可制成“_”，借助_的導(dǎo)向作用，將藥物_癌細(xì)胞所在位置。答案：2.1.11.細(xì)胞的全能性 遺傳信息 完整生物體 2.脫分化 愈傷組織 再分化 胚狀體 從芽 3.植物體的器官或組織處于離體狀態(tài) 有一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件4.已經(jīng)

8、分化 結(jié)構(gòu)和功能 未分化 根尖、莖尖、形成層部位等分生組織5.液泡化無定形 避光6.生根 生芽7. 不同種 雜種細(xì)胞8. 酶解法纖維素酶和果膠 原生質(zhì)體 離心 電激 聚乙二醇9.產(chǎn)生新的細(xì)胞壁10. 遠(yuǎn)緣雜交不親和2.1.21.遺傳特性 2.分生區(qū)附近如莖尖3.植物組織培養(yǎng) 胚狀體4. 花藥離體培養(yǎng) 秋水仙素處理5.培養(yǎng)條件 外界壓力6.愈傷組織2.2.11.（1）組織 單個(gè)細(xì)胞 培養(yǎng)基 生長(zhǎng)和增殖 （2）胰蛋白酶或膠原蛋白酶 單個(gè)細(xì)胞 細(xì)胞懸液 原代 貼壁生長(zhǎng) 接觸抑制 傳代（3）10 10 50 不死 癌細(xì)胞 10（4）無菌、無毒的環(huán)境 抗生素 細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累 無機(jī)鹽 血清、血漿 36.50.5 7.2-7.4 細(xì)胞代謝 維持培養(yǎng)液的pH （5）皮膚移植2.（1）胚胎細(xì)胞 體細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞核的全能性（2）大 細(xì)胞質(zhì)（2）減數(shù)第二次分裂中期 顯微操作 細(xì)胞核 電刺激 重組胚胎 胚胎移植 基本相同（3）胚胎干細(xì)胞 相應(yīng)的組織、器官 治療性克?。?）大，易操作 細(xì)胞質(zhì) 減數(shù)第二次分裂中期 含有促使細(xì)