2022年《微生物的實驗室培養(yǎng)》教案

1、微生物的試驗室培育一、課題目標明白有關培育基的基礎學問,進行無菌技術的操作,進行微生物的培育；二、課題重點與難點課題重點：無菌技術的操作；課題難點：無菌技術的操作；三、課題背景分析課題背景通過生產(chǎn)中的實例,第一引導同學熟識在微生物的培育過程中,保持培育物純潔的重要性； 老師不必拘泥于教材中列舉的實例,可以充分發(fā)揮同學的主動性,讓同學搜集列舉更多的生產(chǎn)生活中的實例,從中體會培育物純潔對于微生物培育的重要性；在此基礎上,教材讓同學進一步明確培育微生物的要領,是為所需要的微生物供應良好的生存環(huán)境,同時阻擋或抑制其他微生物的生長；四、基礎學問分析與教學建議（一）培育基學問要點： 1. 培育基的用途和種

2、類,指出培育基可分為液體和固體兩大類；2. 不同的微生物往往需要采納不同的培育基配方；3. 盡管培育基的配方各不相同,但是其基本成分都包括水、碳源、氮源和無機鹽；教學建議：老師在介紹液體和固體培育基時,宜結合教材供應的圖片進行講解,以增進同學的感性熟識；教材以表格的形式供應了一個培育基配方的實例；老師可以采納資料分析的形式, 讓同學通過主動的分析,熟識培育基的基本組成成分,并結合必修模塊“ 分子與細胞” 中的學問, 讓同學從生物體構成的基本元素這一角度懂得培育基中為什么都需要具備這些基本成分；（二）無菌技術學問要點： 1. 無菌技術的含義；消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)分；3. 常用的消毒與滅菌的

3、方法,接種環(huán)灼燒滅菌的方法；教學建議：老師可以第一結合同學的生活體會,讓同學意識到日常的生活環(huán)境中,每時每刻每處都存在著微生物,任何一個不經(jīng)意的動作都可能將某種微生物引入到培育物中,然后再強調無菌操作的重要性；無菌操作泛指在培育微生物的操作中,全部防止雜菌污染的方法； 無論是隨后將要學到的倒平板、平板劃線操作,仍是平板稀釋涂布法,其操作中的每一步都需要做到“ 無菌” ,即防止雜菌污染；地培育微生物；只有嫻熟、 規(guī)范地進行無菌操作,才可能勝利教材中供應了閱讀材料“ 試驗室常用的消毒和滅菌方法” ,老師可以讓同學通過閱讀明白這些常用方法,并回答旁欄中的兩道摸索題,依據(jù)回答的情形, 檢查同學是否真正

4、懂得了上述內容； 在此基礎上, 老師再介紹無菌操作的詳細內容,的規(guī)范操作,以及試驗中將要用到的材料與器具；五、試驗支配及留意事項讓同學進一步熟識培育微生物（一）從菌種保藏中心購買菌種后,老師第一需要用平板劃線法純化培育所得菌種,并依據(jù)同學小組的數(shù)目,預備好數(shù)個平板；（二）第 1 課時完成基礎學問的教學,學習各種操作方法,并制備培育基；高壓蒸汽滅菌所需要的時間較長,因此需要利用課下時間完成；課下完成后, 再于第 2 課時完成大腸桿菌的純化培育；此后支配同學連續(xù)觀看記錄 34 d ；（三）配制培育基時,老師需要提示同學依據(jù)每個培育基消耗 15 20 mL 的量來估算總用量；全班同學的培育基可以集中

5、起來,分批滅菌；（四）滅菌后,培育基冷卻到55 后應準時進行倒平板操作；假如不能準時操作,需要將培育基放到 55 左右的電熱箱中保溫,以防止瓊脂凝固；（五）假如準備做本專題的第2 或第 3 課題,建議此課題不僅要練習平板劃線操作,仍要練習稀釋涂布平板法操作；為此, 老師需要提前1 天用液體培育基培育大腸桿菌,培育一夜后,于第2 天將培育液分發(fā)到各小組；（六）試驗后,全部用過的培育基、培育液等都需要統(tǒng)一進行高壓蒸汽滅菌后再丟棄,否就將會造成環(huán)境污染；六、課題成果評判（一）培育基的制作是否合格假如未接種的培育基在恒溫箱中保溫 的,否就需要重新制備；（二）接種操作是否符合無菌要求12 d 后無菌落生

6、長,說明培育基的制備是勝利假如培育基上生長的菌落的顏色、外形、大小基本一樣,并符合大腸桿菌菌落的特點,就說明接種操作是符合要求的；假如培育基上顯現(xiàn)了其他菌落,就說明接種過程中,無菌操作仍未達到要求,需要分析緣由,再次練習；（三）是否進行了準時細致的觀看與記錄培育 12 h 與 24 h 后的大腸桿菌菌落的大小會有明顯不同,準時觀看記錄的同學會發(fā)現(xiàn)這一點, 并能觀看到其他一些微小的變化；與習慣；七、答案和提示（一）旁欄摸索題這一步的要求主要是培育同學良好的科學態(tài)度1. 無菌技術除了用來防止試驗室的培育物被其他外來微生物污染外,仍有什么目的？答：無菌技術仍能有效防止操作者自身被微生物感染；2. 請

7、你判定以下材料或用具是否需要消毒或滅菌；假如需要,請?zhí)暨x合適的方法；（1） 培育細菌用的培育基與培育皿（2） 玻棒、試管、燒瓶和吸管（3） 試驗操作者的雙手 答：（ 1）、（ 2）需要滅菌；（3）需要消毒；（二）倒平板操作的爭論1. 培育基滅菌后,需要冷卻到 養(yǎng)基的溫度？50 左右時,才能用來倒平板；你用什么方法來估量培提示：可以用手觸摸盛有培育基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時,就可以進行倒平板了；2. 為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？答：通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培育基；3. 平板冷凝后,為什么要將平板倒置？答：平板冷凝后,皿蓋上會凝聚水珠,凝固后的培育基表面的濕度也

8、比較高,將平板倒置, 既可以使培育基表面的水分更好地揮發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培育基,造成污染；4. 在倒平板的過程中,假如不當心將培育基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個平板仍 能用來培育微生物嗎？為什么？答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培育基上滋生,因此最好不要用這個平 板培育微生物；（三）平板劃線操作的爭論 1. 為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作終止時,仍 然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上可能存在的微生物污染培育物；每 次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線終止后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時,接種環(huán)上的

9、菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時菌種的數(shù)目逐步削減, 以便得到菌落； 劃線終止后灼燒接種環(huán),防止細菌污染環(huán)境和感染操作者；能準時殺死接種環(huán)上殘留的菌種,2. 在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種；3. 在作其次次以及其后的劃線操作時,為什么總是從上一次劃線的末端開頭劃線？答：劃線后,線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開頭,能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步削減,最終能得到由單個細菌繁衍而來的菌落；（四）涂布平板操作的爭論涂布平板的全部操作都應在火焰鄰近進行；想一想,第 2 步應如何進行無菌操作？結合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,提示：應從操作的各個細節(jié)保證“ 無菌” ；例如,酒精燈與培育皿的距離要合適、吸 管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰四周；等等；（五）練習1. 提示：可以從微生物生長需要哪些條件的角度來摸索；例如,微生物的生長需要水、空氣、 相宜的溫度, 食品儲存可以通過保持干燥、物的生長；真空的條件,以及冷藏等方法來阻擋微生2. 提示：可以從這三種培育技術的原理、操作步驟等方面分別進行總結歸納；例如,這三種培育技術都需要為培育物供應充分的養(yǎng)分,的條件,而其他兩種技術都要求嚴格的無菌條件