地貧基因檢測在臨床診斷中的應(yīng)用課件

1、廣東陽春苦難家庭 四個(gè)孩子三個(gè)地貧第1頁，共35頁。地中海貧血地中海貧血，又稱海洋性貧血。地貧是全球分布最廣、累計(jì)人群最多的一種單基因遺傳病， 全球約有3.5億地貧基因攜帶者，我國常見以南各省為地貧高發(fā)區(qū)。地貧是導(dǎo)致出生缺陷高發(fā)，圍產(chǎn)兒和嬰兒死亡的主要原因之一。第2頁，共35頁。地中海貧血遺傳模式第3頁，共35頁。 地中海貧血地中海貧血的共同特點(diǎn)是由于珠蛋白基因的缺陷使血紅蛋白中的珠蛋白肽鏈有一種或幾種合成減少或不能合成，致使血紅蛋白的組成成分改變。地中海貧血分為-地中海貧血和-地中海貧血。第4頁，共35頁。重型-地貧又稱Hb Barts 水腫胎兒綜合癥 ，胎兒常于30-40周時(shí)流產(chǎn)、死胎或娩

2、出后半小時(shí)內(nèi)死亡。重型-地貧胎兒出生時(shí)與正常胎兒無異，到3-6個(gè)月時(shí)就會(huì)逐漸出現(xiàn)嚴(yán)重貧血，如果不治療，一般5歲左右死亡。中間型地貧患兒需經(jīng)常輸血，生存質(zhì)量明顯下降。目前地貧治療上尚無有效根治辦法，患兒家庭背負(fù)著極大的精神壓力和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。地貧的危害性第5頁，共35頁。廣東為地貧的高發(fā)區(qū) 地區(qū)攜帶率(%) 地貧 地貧 廣東 8.53 2.54 廣西 14.95 6.78 四川 1.92 2.18 臺(tái)灣 4.20 1.10 香港 5.02 3.41Xu, et al. J Clin Pathol 2004, 57:517-22. Cai, et al. Chi J Epidemiol 2002,23

3、:281-5. 第6頁，共35頁。廣東省人群中地貧的攜帶者頻率 基因變異等位基因數(shù)頻率(%) 地貧染色體4788.53 (- SEA) 缺失2324.14 (- 3.7) 缺失1743.10 (- 4.2) 缺失530.95 (- CS) 突變100.18 (-THAI) 缺失20.04 (- QS) 突變20.04 (-11.1) 缺失10.02 1CD118 (+TCA)10.02 -gene 缺失10.02 未知突變20.04第7頁，共35頁。 基因變異等位基因數(shù)頻率(%) 地貧染色體1982.54 CDs 41-42 (-CTTT)720.92 IVS-2-654 (CT)490.63

4、 28 (AG)330.42 CD 26 (GA)100.13 CD 17 (AT)80.10 CDs 71-72 (+A)70.09 CD 43 (GT)70.09 -29 (AG)40.05 CDs 27-28 (+A)40.05 -gene deletion10.01 未知突變30.04廣東省人群中地貧的攜帶者頻率第8頁，共35頁。第一道防線-婚前檢查、孕前檢查、產(chǎn)前篩查 了解自己是否為地貧基因攜帶者。新婚青年要主動(dòng)到當(dāng)?shù)蒯t(yī)療保健機(jī)構(gòu)進(jìn)行婚前、孕前健康檢查；孕婦在懷孕3個(gè)月前要進(jìn)行首次產(chǎn)前檢查。第二道防線-產(chǎn)前診斷 診斷自己是否懷上地貧胎兒?；榍皺z查、孕前檢查，以及產(chǎn)前篩查和診斷是 地貧

5、防控的重要手段！第9頁，共35頁?；榍皺z查、孕前檢查，以及產(chǎn)前篩查和診斷是地貧防控的重要手段！第10頁，共35頁?！皩y帶同型地貧基因夫婦每次懷孕的胎兒進(jìn)行產(chǎn)前診斷，發(fā)現(xiàn)為重度地貧胎兒時(shí)及時(shí)干預(yù)，是目前國際上避免重度地貧患兒出生的最好辦法。” -廣東省婦幼保健院產(chǎn)前診斷中心主任尹愛華 這一措施在地貧高發(fā)的地中海沿岸國家、東南亞的泰國、新加坡，我國香港、澳門、臺(tái)灣地區(qū)和廣西普遍采用，已取得良好效果。例如在中國香港地區(qū)已基本消滅了重度地貧患兒出生。第11頁，共35頁。 地貧篩查的方法主要有血常規(guī)測定、血紅蛋白電泳等傳統(tǒng)方法，這些方法雖操作簡單，但不能對地貧進(jìn)行確診，屬于初步篩查方法，輕型攜帶者易漏

6、檢，可能造成重型地貧兒的出生。地貧基因檢測能明確地貧基因突變或缺失類型，并對地貧患者進(jìn)行基因確診，還可以檢出輕型攜帶者，有助于減少和防止重型地貧兒的出生。常見地貧篩查及診斷方法比較第12頁，共35頁。亞能生物地中海貧血基因檢測整體解決方案第13頁，共35頁。-地貧基因檢測第14頁，共35頁。 -地中海貧血-地中海貧血（簡稱-地貧）是一種由于-珠蛋白基因突變導(dǎo)致肽鏈表達(dá)失衡而產(chǎn)生的單基因遺傳血液病。多由-珠蛋白基因的缺失突變所致。中國地區(qū)常見的3種缺失型 -地貧主要由 -SEA、-3.7、 -4.2缺失引起。第15頁，共35頁。-地貧基因缺失示意圖-a3.7-a4.2-SEA a2 a1a2a1

7、1第16頁，共35頁。-地貧的基因型與表現(xiàn)型Normal (/) 正常 靜止型-單一基因缺失或喪失功能 臨床一般無癥狀，血液學(xué)檢查一般無異樣第17頁，共35頁。-地貧的基因型與表現(xiàn)型o Thal trait( /-SEA)( - / - )血紅蛋白H病-3個(gè)基因缺失或喪失功能 肝脾腫大，中度貧血。小細(xì)胞，低色素，HbH含量較高，易發(fā)生溶血，有些病例需不定期輸血，癥重者甚至需切除脾臟。 標(biāo)準(zhǔn)型-2個(gè)基因缺失或喪失功能 臨床無癥狀，血液學(xué)檢查出現(xiàn)輕微貧血，紅細(xì)胞大小不均一，平均紅細(xì)胞體積(MCV) 及平均血紅蛋白含量(MCH)明顯偏低。Hb H disease(- 3.7/-SEA)(- 4.2/

8、-SEA)第18頁，共35頁。-地貧的基因型與表現(xiàn)型Hb Barts Hydrops(-SEA/-SEA)Hb Barts 水腫胎兒綜合癥 4個(gè)基因缺失或喪失功能胎兒常于30-40周時(shí)流產(chǎn)、死胎或娩出后半小時(shí)內(nèi)死亡，肝脾腫大，腹水，胸水。由于胎兒無法合成亞基，臍血血紅蛋白（ Hb Barts ，4）含量高。第19頁，共35頁。非缺失型-地貧概念： 基因發(fā)生點(diǎn)突變或少數(shù)幾個(gè)堿基的缺失。中國常見的非缺失型突變：Hb CS 2 CD 142 TAACAA (Gln)Hb QS 2 CD 125 CTGCCG (LeuPro)Hb WS 2 CD 122 CACCAG (HisGln特點(diǎn)： 常發(fā)生于2

9、基因，比缺失型導(dǎo)致更嚴(yán)重的珠蛋白鏈合成的減少。第20頁，共35頁。根據(jù)-地貧基因缺失特點(diǎn)，利用多重GAP-PCR技術(shù)可同管檢測3種缺失型及正常共4種基因型。通過電泳條帶大小來判斷缺失情況。亞能生物 -地中海貧血基因檢測試劑盒第21頁，共35頁。 -地中海貧血基因檢測操作流程第22頁，共35頁。亞能生物-地貧基因檢測產(chǎn)品特點(diǎn)同時(shí)檢測3種-地貧缺失型： -3.7、-4.2和-SEA，覆蓋95%以上-地貧操作簡便：PCR+電泳，專用Makers，結(jié)果判讀直觀簡便第23頁，共35頁。-地貧基因檢測臨床意義對-地貧患者進(jìn)行基因確診?？蓮V泛用于-地貧的篩查，對-地貧基因缺陷攜帶者進(jìn)行鑒別，對于減少和防止重

10、癥地貧兒的出生及優(yōu)生優(yōu)育具有重要的臨床意義。第24頁，共35頁。非缺失型-地中海貧血基因突變檢測試劑盒同時(shí)檢測 CS、 QS、 WS點(diǎn)突變Wild typeCSMWSMQSM 臨床意義： 作為 -地中海貧血三種缺失型的補(bǔ)充，對懷疑 -地中海貧血有漏診的患者進(jìn)行 CS、 QS、 WS點(diǎn)突變的診斷，確定具體的基因突變類型第25頁，共35頁。-地中海貧血基因檢測第26頁，共35頁。-地中海貧血-地中海貧血是一種由于-珠蛋白基因突變導(dǎo)致肽鏈合成減少或缺乏而產(chǎn)生的單基因遺傳血液病，多由-珠蛋白基因點(diǎn)突變所致。 在中國人群中常見的突變位點(diǎn)有CD41-42M， -28M， IVS-II-654M，CD71-72M等 第27頁，共35頁。-地貧常見突變位點(diǎn)及表型第28頁，共35頁。-地貧基因型與表型的關(guān)系第29頁，共35頁。-地貧表現(xiàn)型第30頁，共35頁。亞能生物-地中海貧血基因檢測試劑盒利用基因芯片技術(shù)可以同時(shí)檢測中國人群8個(gè)常見位點(diǎn)和9個(gè)少見位點(diǎn)共17個(gè)位點(diǎn)的19種 -地貧基因突變類型第31頁，共35頁。 -地中海貧血基因診斷操作流程第32頁，共35頁。-地中海貧血基因診斷結(jié)果判讀41-42N654N28N71-72N17NEN31N27/28M41-42M654M28M71-72M17MEM31MIVS1-1M43M32M29M30M14-15MCAP