實(shí)驗(yàn)淀粉酶固定化以及淀粉水解作用檢測(cè)

1、關(guān)于實(shí)驗(yàn)淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(cè)第一張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1.制備固定化a-淀粉酶2.進(jìn)行淀粉水解的測(cè)定第二張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月知識(shí)回顧：1、在果汁生產(chǎn)中利用_，可以提高果汁的產(chǎn)量和質(zhì)量，其原理是_。2、洗衣粉中添加_，可以更有效地清除頑漬。常用的酶制劑有_四類。第三張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月1、酶制劑的概念和種類（一）酶制劑含有酶的制品定義：多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶和脂肪酶種類：A、液體酶制劑治療某些胃病的胃蛋白酶液B、固體酶制劑第四張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2、酶的生產(chǎn)提取法定義：采用一定的技

2、術(shù)直接從動(dòng)植物或微生物的組織、細(xì)胞中將酶提取出來優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)單易行，在動(dòng)植物或微生物資源豐富的地區(qū)具有應(yīng)用價(jià)值實(shí)例：在屠宰廠，可以從家畜胰臟中提取出胰酶；在水果加工廠，可以從菠蘿皮中提取出菠蘿蛋白酶缺點(diǎn)：要有充足的原材料，廣泛應(yīng)用受到限制第五張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月發(fā)酵法常用方法定義：通過微生物發(fā)酵獲得所需要的酶。如果是胞外酶，可以從發(fā)酵液中直接提取；如果是細(xì)胞內(nèi)酶，則可將細(xì)胞弄碎再經(jīng)過提取純化而得到。易培養(yǎng)、繁殖速度快、便于大規(guī)模生產(chǎn)。優(yōu)點(diǎn)：提取方式：第六張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月在食品、化工、輕紡、醫(yī)藥等領(lǐng)域大規(guī)模使用酶制劑，說明酶制劑使用有很多優(yōu)點(diǎn)，你能思考

3、后舉出一些嗎？催化效率高、低能耗、低污染等。酶制劑的使用有缺點(diǎn)嗎？3、酶制劑的優(yōu)點(diǎn)第七張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月4.酶在應(yīng)用過程中存在的問題天然酶通常對(duì)強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫和有機(jī)溶劑等條件非常敏感，容易失活溶液中酶很難回收，不能再次利用，提高了生產(chǎn)成本反應(yīng)后，酶會(huì)混在產(chǎn)物中，影響產(chǎn)品質(zhì)量，難以在工業(yè)生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用針對(duì)酶的特點(diǎn)，如何在生產(chǎn)實(shí)踐中加以應(yīng)用？固定化酶：將水溶性的酶用物理或化學(xué)的方法固定在某種介質(zhì)上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。第八張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 1、通常對(duì)強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫和有機(jī)溶劑等條件非常敏感，容易失活； 2、溶液中的酶很難回收，不能

4、被再次利用，提高了生產(chǎn)成本； 3、反應(yīng)后會(huì)混在產(chǎn)物中，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量。(難分離）4、酶制劑的缺點(diǎn)第九張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月1、固定化酶技術(shù)。即將酶固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)（如固定在不溶于水的載體上）。2、固定化酶技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：（1）使酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離；（2）固定在載體上的沒可以被反復(fù)利用。（二）固定化酶第十張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月類型優(yōu)點(diǎn)不足直接使用酶催化效率高，低耗能、低污染等對(duì)環(huán)境條件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很難回收，不能被再次利用，提高了生產(chǎn)成本；反應(yīng)后酶會(huì)混在產(chǎn)物中，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量固定化酶酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離，

5、同時(shí)，固定在載體上的酶還可以被反復(fù)利用一種酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng)，而在生產(chǎn)實(shí)踐中，很多產(chǎn)物的形成都通過一系列的酶促反應(yīng)才能得到的 直接使用酶和固定化酶的優(yōu)缺點(diǎn)第十一張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月三、 酶的固定化方法1、物理吸附法：將酶吸附到固體吸附劑表面的方法，固體吸附劑多為活性碳、多孔玻璃等2、包埋法：將酶包裹在多孔的載體中，包埋成格子型或包埋成微膠囊型3、化學(xué)結(jié)合法：將酶分子相互結(jié)合，或?qū)⑵浣Y(jié)合到纖維素、瓊脂糖，離子交換樹脂等載體上的固定方式交聯(lián)法和共價(jià)偶聯(lián)法第十二張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 酶物理吸附法交聯(lián)法包埋法酶的固定化方法共價(jià)偶聯(lián)法第十三張，PPT共二十

6、三頁，創(chuàng)作于2022年6月實(shí)驗(yàn)原理：本實(shí)驗(yàn)是用吸附法將a-淀粉酶固定在石英砂上，一定濃度的淀粉溶液經(jīng)過固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示劑溶液測(cè)試，流出物呈紅色表明水解產(chǎn)物糊精生成淀粉-淀粉酶糊精B淀粉酶葡萄糖糖化淀粉酶麥芽糖這里使用的是枯草桿菌的a-淀粉酶，其作用的最適溫度為5075；最適PH為5.57.5遇碘顯藍(lán)色遇碘顯紅色遇碘不顯色四、“-淀粉酶固定化”實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、制備固定化的-淀粉酶 2、檢測(cè)固定化-淀粉酶的效果第十四張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月設(shè)備及用品：5ml塑料注射器 50ml燒杯 滴管 自行車用氣門心及夾子 注射器架 試管及微量離心管3支實(shí)驗(yàn)材料:

7、1、a-淀粉酶的固定化：在燒杯中將5mg a-淀粉酶溶于4ml蒸餾水中。由于酶不純，可能有些不溶物。再加入5g石英砂，不時(shí)攪拌，30min后裝入1支下端接有氣門心并用夾子封住的注射器中(石英砂體積約4ml)。用10倍體積的蒸餾水洗滌此注射器，流速為1ml/min。2、可溶性淀粉溶液：取50ml可溶性淀粉溶于100ml熱水中，攪拌均勻。3、5mmol/L KI-I2溶液：稱取0.127g碘和0.83g碘化鉀。加蒸餾水100ml完全溶解后裝入滴瓶中。除去未吸附的游離淀粉酶第十五張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月反應(yīng)柱固定化酶氣門心夾子5ml注射器第十六張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年

8、6月步驟:1.將灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴管滴加淀粉溶液,使淀粉溶液以0.3ml/min的流速過柱.在流出5ml后接收0.5ml流出液,加入12滴KI-I2溶液,觀察顏色.用水稀釋1倍后再觀察顏色.反應(yīng)柱固定化酶氣門心夾子5ml注射器淀粉第十七張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2.實(shí)驗(yàn)后,用10倍柱體積的蒸餾水洗滌此柱,放置在4冰箱中,幾天后再重復(fù)上述實(shí)驗(yàn),看是否有相同的結(jié)果.第十八張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月課后練習(xí) 1.如何證明洗滌固定化酶柱的流出液中沒有淀粉酶?2.耐高溫的淀粉酶有哪些可能的用途?可在試管中加入1ml可溶性淀粉，再加幾滴淀粉酶柱流出液

9、，保溫幾分鐘后用碘液檢驗(yàn)。如仍顯藍(lán)色，則流出液中沒有淀粉酶了?？梢栽诟邷叵率沟矸鬯饪欤颐覆粫?huì)因高溫上而失活，所以可在一些需要高溫加熱同時(shí)又要水解淀粉的反應(yīng)中使用。第十九張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月1、研究認(rèn)為，用固定化酶技術(shù)處理污染物是很有前途的。如將從大腸桿菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龍膜上制成制劑，可以用來降解殘留在土壤中的有機(jī)磷農(nóng)藥，與用微生物降解相比，其作用不需要適宜的（ ）A、溫度 B、PHC、水分 D、營(yíng)養(yǎng)D第二十張，PPT共二十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2、目前，日用化工廠大量生產(chǎn)的酶制劑，其中的酶大都來自A、化學(xué)合成 B、動(dòng)物體內(nèi) C、植物體內(nèi) D、微生物體內(nèi) D第二十一張，PPT共